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Die vorliegende Arbeit beschäftigt sich mit der Thematik des städtischen Mikroklimas im Zusammenhang mit der Stadtentwicklung in Wien. Dies wird anhand des Stadtentwicklungsprojekts AM LANGEN FELDE (22. Wiener Gemeindebezirk, Donaustadt) untersucht. Im Rahmen des Stadtentwicklungsprojekts soll ein ehemaliges Industrieareal in ein Wohnbauareal umgestaltet werden. Ziel ist es herauszufinden, welche Rolle mikroklimatische Überlegungen im Planungsprozess spielten und über welche mikroklimatische Güte das geplante Stadtentwicklungsprojekt verfügt. Für die Einordnung des Planungsprozesses wird zunächst das Wiener Planungs-instrumentarium analysiert und daraus ein mikroklimatischer Maßnahmenkatalog abgeleitet. Dieser steht in der Folge für zukünftige Stadtentwicklungsprojekte zur Verfügung. Die mikroklimatische Güte des Masterplans wird mit Hilfe des numerischen Stadtklimamodells ENVI_MET modelliert. Um die Wirkung der grünen Infrastruktur zu überprüfen, werden mehrere Varianten mit unterschiedlichen Grünraumausstattungen simuliert. Dabei zeigt sich, dass mikroklimatische Überlegungen im Planungsprozess eine eher geringe Rolle spielten. Gleichwohl stellt das Stadtentwicklungsprojekt aber durch eine moderate Grünraumausstattung eine mikroklimatische Verbesserung im Vergleich zum Status quo dar. Als Gründe für die geringe Relevanz des Mikroklimas werden die teilweise diesbezüglich nicht ausreichenden informellen Planungsinstrumente und die unzureichenden mikroklimatischen Vorgaben im städtebaulichen Wettbewerb identifiziert., This thesis deals with the topic of urban microclimate in connection with urban development in Vienna. This is being examined based on the urban development project AM LANGEN FELDE (22nd district of Vienna, Donaustadt). As part of the urban development project, a former industrial area is to be converted into a residential area. The aim is to find out what role microclimatic considerations played in the planning process and what microclimatic quality the planned urban development project possesses. To classify the planning process, the Viennese planning instruments are analysed and subsequently a microclimatic catalogue of measures is derived from them. It is now available for future urban development projects. The microclimatic quality of the master plan is modelled using the numerical urban climate model ENVI_MET. To check the effect of the green infrastructure, several variants with different green space features are simulated. It is shown that microclimatic considerations played a rather minor role in the planning process. Nevertheless, the urban development project represents a microclimatic improvement compared to the status quo due to a moderate green space provision. The lack of attention to the microclimate during the planning process can be attributed to the partially inadequate informal planning instruments available to planners and the insufficient microclimatic specifications in the urban planning competition.

International audience; Phosphorylation of the neuronal microtubule-associated Tau protein plays a critical role in the aggregation process leading to the formation of insoluble intraneuronal fibrils within Alzheimer’s disease (AD) brains. In recent years, other posttranslational modifications (PTMs) have been highlighted in the regulation of Tau (dys)functions. Among these PTMs, the O -β-linked N-acetylglucosaminylation ( O -GlcNAcylation) modulates Tau phosphorylation and aggregation. We here focus on the role of the PHF-1 phospho-epitope of Tau C-terminal domain that is hyperphosphorylated in AD (at pS396/pS404) and encompasses S400 as the major O -GlcNAc site of Tau while two additional O -GlcNAc sites were found in the extreme C-terminus at S412 and S413. Using high resolution NMR spectroscopy, we showed that the O -GlcNAc glycosylation reduces phosphorylation of PHF-1 epitope by GSK3β alone or after priming by CDK2/cyclin A. Furthermore, investigations of the impact of PTMs on local conformation performed in small peptides highlight the role of S404 phosphorylation in inducing helical propensity in the region downstream pS404 that is exacerbated by other phosphorylations of PHF-1 epitope at S396 and S400, or O -GlcNAcylation of S400. Finally, the role of phosphorylation and O -GlcNAcylation of PHF-1 epitope was probed in in-vitro fibrillization assays in which O -GlcNAcylation slows down the rate of fibrillar assembly while GSK3β phosphorylation stimulates aggregation counteracting the effect of glycosylation.

The work of this Ph.D. puts the focus on tau, a key protein in Alzheimer’s Disease (AD). During progression of AD, tau becomes abnormally phosphorylated. This high degree of phosphorylation is associated to key events in the disease, such as protein aggregation and destabilization of the neuronal integrity. A natural regulator of tau phosphorylation is O-GlcNAcylation, a post-translational modification, placed on the same residues as phosphate. Here, new synthetic pathways to generate homogeneously phosphorylated or O-GlcNAcylated tau proteins are presented, which are accomplished by combined approaches of native chemical ligation (NCL) and expressed protein ligation (EPL). A new method was established, in which purification was achieved after ligation and desulfurization by means of a traceless photocleavable biotin tag that was installed during solid phase peptide synthesis (SPPS) in synthetic tau fragments. This protocol allowed access to tag-free tau peptides and proteins, which were conveniently desulfurized post-ligation during peptide immobilization, if required. The molecular targets were either phosphorylated or O-GlcNAcylated tau proteins, carrying these post-translational modifications in the AD relevant paired helical filament 1 (PHF-1) epitope (Ser396/400/404). To get more insights into the impact of tau phosphorylation in PHF-1 in cellulo and in vivo, monoclonal antibodies against tau were generated, tri-phosphorylated in this particular epitope. The antibodies were characterized by several experimental settings and enabled the generation of new insights into cellular tau localization. Moreover, the exploration of the diagnostic potential of these new antibody clones was started., Der Fokus dieser Dissertation liegt auf Tau, einem Schlüsselprotein in der Alzheimer Erkrankung. Im Fortlauf von Alzheimer wird Tau hyperphosphoryliert, wobei der hohe Grad der Phosphorylierung mit Schlüsselereignissen der Krankheit wie der Aggregation von Tau oder dem Verlust der neuronalen Integrität in Verbindung gebracht wird. Die post-translationale Modifizierung der O-GlcNAcylierung wird ebenfalls an Tau beobachtet und gilt als natürlicher Regulator der Phosphorylierung. Hier werden neue Syntheserouten präsentiert, die den Zugang zu homogen-phosphorylierten und O-GlcNAcylierten Tau Derivaten durch kombinatorische Ansätze aus nativer chemischer Ligation (NCL) und exprimierter Protein Ligation (EPL) ermöglichen. Es wurde eine neue Methode entwickelt, die eine Reinigung von Ligationsprodukten durch einen spurlos photospaltbaren Biotin-Tag ermöglichten, der während der Festphasen Peptid Synthese in die synthetischen Peptid-Fragmente eingeführt werden kann. Dieses neuartige Protokoll ermöglichte den synthetischen Zugang zu Tag-freien Tau Proteinen, die ohne großen experimentellen Aufwand während ihrer Immobilisierung entschwefelt werden konnten. Die molekularen Ziele dieser Arbeit waren phosphorylierte oder O-GlcNAcylierte Tau Proteine, die diese post-translationalen Modifikationen im sog. „paired helical filament“ 1 (PHF-1) Epitop (Ser396/400/404) enthalten. Um weiteres Wissen über den Einfluss starker Tau Phosphorylierung in PHF-1 in cellulo und in vivo zu erhalten wurden monoklonale Antikörper gegen dreifach phosphoryliertes Tau entwickelt und diese dann in unterschiedlichen Experimenten charakterisiert. So konnten neue Einsichten über die zelluläre Lokalisation von Tau in Abhängigkeit von der PHF-1 Phosphorylierung gesammelt werden. Darüber hinaus wurde begonnen, das diagnostische Potential der neuen Antikörper Klone zu erforschen.

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