Search

The aim of this research was to produce a lyophilised water and ethanol extract from Fuscoporia torulosa mushroom, to determine the antimicrobial and antioxidant potential of the extracts and in industrial conditions to produce a new, functional product – Bio Soups, enriched with lyophilised extracts derived from fruiting body of F. torulosa mushroom, at the same time without use of synthetic additives. The application of the lyophilised extracts in the industrial production of dehydrated soups showed positive results. Such soups are characterised with higher (P < 0.05) antimicrobial and antioxidant activity, compared to conventional soups, while it has been proven constant biological potential and stability up to the 90th day of production. This is the first dehydrated soup enriched with lyophilised extract of medicinal mushroom, since its production does not require special conditions, and it possesses exceptional functional properties, this product could have a many times greater market potential compared to conventional soups. © 2023 Institute of Food, Science and Technology (IFSTTF).

The need to provide novel, nutritious plant-based products requires seeking high-value, sustainable protein sources, like quinoa and lentils, having an increased digestibility and lacking antinutrients. Fungal fermentation has evidenced enhanced nutritional value of flours obtained from these grains. However, research into techno-functional properties, essential to the new product development, is lacking. This study investigated the techno-functional properties of flours made from lentil and quinoa after fermenting them with Pleurotus ostreatus and subjecting them to two drying techniques (lyophilisation and hot air drying). In both cases, the fermentation led to noteworthy improvements in swelling and water holding capacity, especially in those lyophilised than those dried. In contrast, the emulsifying, foaming, thickening, and gelling capacities decreased significantly. The loss of abilities was more severe for dried grains than for lyophilized ones. The thermomechanical analysis of the fermented flours showed lower thickening and gelling potential compared to untreated flours. Microscopy images revealed that the state and structure of starch granules were affected by both fermentation and drying processes. Starch granules in lentils were partly pre-gelatinised and trapped in the cotyledon cell, resulting in limited thickening and gelling abilities. In contrast, in quinoa, starch underwent pre-gelatinisation and retrogradation during the fermentation process, promoting the production of resistant starch and increasing fibre content. This study presents the potential of treated flours as ingredients possessing unique attributes compared to protein and fibre-rich conventional products.

This work shows the synthesis of a polyvinylpyrrolidone (PVP) hydrogel by heat-activated polymerization and explores the production of hydrogels with an open porous network by lyophilisation to allow the three-dimensional culture of human oral mucosa stem cells (hOMSCs). The swollen hydrogel showed a storage modulus similar to oral mucosa and elastic solid rheological behaviour without sol transition. A comprehensive characterization of porosity by scanning electron microscopy, mercury intrusion porosimetry and nano-computed tomography (with spatial resolution below 1 mu m) showed that lyophilisation resulted in the heterogeneous incorporation of closed oval-like pores in the hydrogel with broad size distribution (5 to 180 mu m, d(50) = 65 mu m). Human oral mucosa biopsies were used to isolate hOMSCs, expressing typical markers of mesenchymal stem cells in more than 95% of the cell population. Direct contact cytotoxicity assay demonstrated that PVP hydrogel have no negative effect on cell metabolic activity, allowing the culture of hOMSCs with normal fusiform morphology. Pore connectivity should be improved in future to allow cell growth in the bulk of the PVP hydrogel.

[ES] Helicobacter pylori es una bacteria patógena que causa graves problemas gástricos a gran parte de la población mundial, especialmente en países menos desarrollados. Los tratamientos tradicionales a base de antibióticos tienen efectos secundarios y no son efectivos al 100%. Estudios recientes demuestran que algunas cepas del género Lactobacillus son efectivas en el tratamiento contra Helicobacter pylori, reduciendo la colonización de este patógeno, lo que ha promovido su incorporación en la formulación de determinados alimentos. Sin embargo, la supervivencia de este microorganismo en alimentos es bastante limitada, especialmente si no son de origen lácteo. Este Trabajo de Final de Grado se plantea con el objeto de desarrollar un snack probiótico mediante impregnación a vacío con zumo de clementina inoculado con Lactobacillus salivarius spp. salivarius y posterior liofilización. Para aumentar la viabilidad del probiótico durante el procesado y almacenamiento del citado snack se propone la incorporación de trehalosa al líquido de impregnación antes de su inoculación con el probiótico y/o la homogenización a presión moderada tras su incubación. De acuerdo con los resultados obtenidos, la liofilización es una técnica adecuada para la estabilización de láminas de manzana impregnadas con el microorganismo probiótico ya que, a pesar de los daños estructurales ocasionados por la congelación y posterior sublimación del agua, tanto el recuento de viables como el contenido en compuestos con actividad antioxidante se vio incrementado tras esta operación de deshidratación. Sin embargo, pese a la baja actividad del agua alcanzada por las muestras al final del proceso, tanto la viabilidad del probiótico como el contenido en flavonoides disminuyeron tras 30 días de almacenamiento. En cuanto a la composición del líquido de impregnación, la adición de un 10% de trehalosa en peso y/o la homogeneización a 100 MPa aceleraron la pérdida de viabilidad del probiótico pero retardaron la, [EN] Helicobacter pylori is a pathogenic bacterium that causes severe gastric problems to a large part of the world's population, especially in less developed countries. Traditional treatments based on antibiotics have side effects and are not 100% effective. Recent studies show that some strains of the Lactobacillus genus are effective in the treatment against Helicobacter pylori, reducing the colonization of this pathogen, which has promoted the incorporation of Lactobacillus in the formulation of certain foods. However, the survival of this microorganism in food is rather limited, especially in not dairy products. The aim of this Final Degree Project is to develop a probiotic apple snack by vacuum impregnation with different clementine juices inoculated with Lactobacillus salivarius spp. salivarius and subsequent freeze drying. In order to increase the viability of the probiotic during the snack manufacture and storage, it is suggested to add trehalose to the juice formulation before its inoculation with the probiotic and-/-or to homogenizate the juice under moderate pressure after its incubation. According to the results obtained, freeze drying is a suitable technique for the stabilization of impregnated apple slices with the probiotic microorganism because, in spite of the structural damages caused by the freezing and following sublimation of the frozen water, both the count of viable cells and the content of compounds with antioxidant activity increased after this dehydration operation. However, despite the low water activity reached by the samples at the end of the process, both the viability of the probiotic and the flavonoid content decreased after 30 days of storage. As for the composition of the impregnation liquid, the addition of 10% of trehalose by weight and/or the homogenization at 100 MPa accelerated the loss of probiotic viability but delayed flavonoids degradation and promoted an increase in the amount of both phenols and total antioxidants. Final

This work shows the synthesis of a polyvinylpyrrolidone (PVP) hydrogel by heat-activated polymerization and explores the production of hydrogels with an open porous network by lyophilisation to allow the three-dimensional culture of human oral mucosa stem cells (hOMSCs). The swollen hydrogel showed a storage modulus similar to oral mucosa and elastic solid rheological behaviour without sol transition. A comprehensive characterization of porosity by scanning electron microscopy, mercury intrusion porosimetry and nano-computed tomography (with spatial resolution below 1 mu m) showed that lyophilisation resulted in the heterogeneous incorporation of closed oval-like pores in the hydrogel with broad size distribution (5 to 180 mu m, d(50) = 65 mu m). Human oral mucosa biopsies were used to isolate hOMSCs, expressing typical markers of mesenchymal stem cells in more than 95% of the cell population. Direct contact cytotoxicity assay demonstrated that PVP hydrogel have no negative effect on cell metabolic activity, allowing the culture of hOMSCs with normal fusiform morphology. Pore connectivity should be improved in future to allow cell growth in the bulk of the PVP hydrogel.

This work shows the synthesis of a polyvinylpyrrolidone (PVP) hydrogel by heat-activated polymerization and explores the production of hydrogels with an open porous network by lyophilisation to allow the three-dimensional culture of human oral mucosa stem cells (hOMSCs). The swollen hydrogel showed a storage modulus similar to oral mucosa and elastic solid rheological behaviour without sol transition. A comprehensive characterization of porosity by scanning electron microscopy, mercury intrusion porosimetry and nano-computed tomography (with spatial resolution below 1 mu m) showed that lyophilisation resulted in the heterogeneous incorporation of closed oval-like pores in the hydrogel with broad size distribution (5 to 180 mu m, d(50) = 65 mu m). Human oral mucosa biopsies were used to isolate hOMSCs, expressing typical markers of mesenchymal stem cells in more than 95% of the cell population. Direct contact cytotoxicity assay demonstrated that PVP hydrogel have no negative effect on cell metabolic activity, allowing the culture of hOMSCs with normal fusiform morphology. Pore connectivity should be improved in future to allow cell growth in the bulk of the PVP hydrogel.

The demand to achieve improved drug product quality has been accelerated with the advent of quality by design (QbD) guidance launched by regulatory agencies around the world. This extends to freeze-drying processes, where bio-pharmaceutical products are dried under an extremely controlled environment. Freeze-drying, or lyophilization, is a low-temperature dehydration process that involves multistep transformations making use of the principles of heat & mass transfer. This often renders the process complicated and time-consuming, resulting in large operating costs. Multiple process analytical technology (PAT) tools have been introduced to monitor product quality attributes in batch dried vials, as these tools help in keeping an eye on the product/process to achieve acceptable product quality attributes. Despite significant advances, many topics remain to be addressed. One of them being the impact of spatial variations in the product attributes, thus rendering the accuracy of in-process results obtained from a single point on the vial surface questionable. Another being the aesthetic appearance of the product, specifically collapse inside the products, which is usually assessed by visual inspection. However, relying completely on human input can be fallible and unrealistic in the production environment as thousands of product vials roll out from the freeze-dryers. Failure to detect an aesthetic defect in the finished freeze-dried product cake may put a patient’s life at risk as any defect might be a result of product collapse or meltback affecting the drug safety and efficacy. This project consisted of two main areas of work. 1) Using NIR Chemical Imaging (NIR-CI) and NIR spectroscopy (NIRS) to investigate the spatial variability of moisture on the surface of the vials undergoing drying. Furthermore, it demonstrates the necessity of using multiple measurement points on the vial surface to quantify moisture inside the freeze-drying products. 2) Using NIRS to, La demande d'amélioration de la qualité des produits pharmaceutiques a été accélérée avec l'avènement des directives de qualité par la conception (QbD) lancées par les agences de réglementation du monde entier. Cela s'étend aux procédés de lyophilisation, où les produits biopharmaceutiques sont séchés dans un environnement extrêmement contrôlé. La lyophilisation est un de déshydratation à basse température qui implique des transformations en plusieurs étapes utilisant les principe de transfert de chaleur et de masse. Cela rend souvent le procédé compliqué et long, ce qui entraîne des coûts d'exploitation importants. Plusieurs outils de technologie d'analyse de processus (PAT) ont été introduits pour surveiller les attributs de qualité du produit dans des flacons séchés par lots, car ces outils aident à garder un œil sur le produit / procédé pour obtenir des attributs de qualité de produit acceptables. Malgré des avancées significatives, de nombreux sujets restent à traiter. L'un d'eux est l'impact des variations spatiales dans les attributs du produit, rendant ainsi la précision des résultats en cours de procédé obtenus à partir d'un seul point sur la surface du flacon discutable. Un autre est l'aspect esthétique du produit, qui est généralement évalué par une inspection visuelle. Cependant, se fier entièrement à l'apport humain peut être problématique et irréaliste dans l'environnement de production, car des milliers de flacons de produit sortent des lyophilisateurs. Le fait de ne pas détecter un défaut esthétique dans le gâteau de produit lyophilisé fini peut mettre la vie d'un patient en danger, car tout défaut peut être le résultat de l'effondrement du produit (meltback) affectant l'innocuité et l'efficacité du médicament. Ce projet comprenait deux thèmes principaux. 1) Utilisation de l'imagerie chimique NIR (NIR-CI) et de la spectroscopie NIR (NIRS) pour étudier la variabilité spatiale de l'humidité à la surface des flacons en cours de séchage. 2) Utilisation d

Soy phosphatidylcholine liposomes encapsulating increasing concentrations of two sea fennel extracts (aqueous and ethanolic) prepared by ultrasonication were freeze-dried, using glycerol as lyoprotectant. Particle properties, water dispersibility, colour, thermal properties and antioxidant capacity (radical scavenging capacity, ferric ion reducing power, Folin-reactive substances) of the liposomal preparations were determined. The freeze-drying process caused an overall increase in particle size and polydispersity index, while the zeta-potential became more electronegative. Both sea fennel extracts were rich in chlorogenic acid (42.61 and 58.48 mg/g for the aqueous and ethanolic extracts, respectively) and showed great antioxidant activity. Vitamin C was identified in the aqueous extract, whereas rutin and rosmarinic acid in the ethanolic one. The entrapment efficiency, determined in the liposomes prepared at the highest extract concentration, was 65.6% and 49.1% for the aqueous extract and the ethanolic extract, respectively. The liposomal antioxidant activity and total phenolic content followed a linear increasing tendency as a result of increasing the extract concentration, irrespective of the type of extract. Higher antioxidant activity was found in the liposomes loaded with the ethanolic extract, in a clear relationship to the greater amount of highly antioxidant phenolic compounds extracted, and also to their lower entrapment efficiency, which caused a greater amount of extract to remain outside the liposome. Both extracts were suitable for producing liposomes with antioxidant properties which could be dried and used to design functional foods.

Several freeze-drying and spray-drying methods were investigated in relation to the retention of immunoglobulins (Ig) A, IgG, and IgM. Spray drying produced human milk powders with 2% humidity and a good retention of IgG (>88%) and IgM (∼70%). However, only 38% of IgA remained after spray drying. For freeze drying, only the highest heating plate temperature used in this study (40°C) brought IgA content down to 55% in powder with 1.75% residual humidity, whereas milk samples undergoing lower temperatures had higher preservation rates (75% for IgA and 80% for IgG and IgM) and higher residual moisture contents. From these results, it can be concluded that IgA is the most sensitive Ig lost during drying processing of human milk. The best method to generate human milk powders without a significant loss of Ig was thus freeze drying at 30°C heating plate temperature, which accelerated the process compared to lower processing temperatures, but still had good overall Ig retention.

Several freeze-drying and spray-drying methods were investigated in relation to the retention of immunoglobulins (Ig) A, IgG, and IgM. Spray drying produced human milk powders with 2% humidity and a good retention of IgG (>88%) and IgM (∼70%). However, only 38% of IgA remained after spray drying. For freeze drying, only the highest heating plate temperature used in this study (40°C) brought IgA content down to 55% in powder with 1.75% residual humidity, whereas milk samples undergoing lower temperatures had higher preservation rates (75% for IgA and 80% for IgG and IgM) and higher residual moisture contents. From these results, it can be concluded that IgA is the most sensitive Ig lost during drying processing of human milk. The best method to generate human milk powders without a significant loss of Ig was thus freeze drying at 30°C heating plate temperature, which accelerated the process compared to lower processing temperatures, but still had good overall Ig retention.

79 p. ; ill. ; 30 cm, La récupération du lactosérum doux par lyophilisation a abouti à l'obtention d'une poudre caractérisée par : - Une humidité résiduelle satisfaisante (4% ) lui permettant sa conservation à long terme et son utilisation ultérieure. - Un indice de solubilité trés élevées (97.67% ) lui permettant une réhydratation instantanée. - Une conservation des constituants biochimiques du lactosérum concentré. - La poudre de lactosérum peut être utilisée comme substitut de poudre de lait écrémé dans la recette d'un yaourt, ce qui permettra à l'état de réduire ses iùmportations en poudre de lait écrémé

The large physical impact of marine oil-spills, coupled with the toxic effect of some of the crude oil components, has increased the use of innovative bioremediation methods in combination with traditional ones. The gel beads developed in this project aim to provide a method to immobilise and optimise the environmental conditions of hydrocarbon-degrading microorganisms to increase their effectiveness, in order to offer a rapid response in case of emergency. Lab scale tests on n-dodecane and crude oil revealed the potential of these microorganisms for further application in oil-spills. However, the main drawback seems to lie in the lyophilisation process, where the vitality of the cells is severely diminished.

BACKGROUND. Faeces are increasingly used as sources of DNA for genetic and ecological studies. Although multiple methods to preserve faecal samples prior to DNA extraction have been used (e.g. 70 % or absolute ethanol, freezing at -20ºC or in liquid nitrogen) no information is at present available in the literature on the use of lyophilized faeces. Accordingly, the yield and quality of the community DNA obtained by using four different commercial DNA extraction kits (QIAamp DNA Stool Mini Kit, REALPURE Spin Kit, SPEEDTOOLS Tissue DNA Extraction Kit, and JETQUICK Tissue DNA Spin Kit) from fresh and lyophilized samples of faeces were here studied. RESULTS. The use of lyophilized faeces resulted in a 1.5 to 2-fold increase in DNA recovery relative to the use of fresh faeces regardless of the kit used. Among the four kits tested, the best results were obtained with the QIAamp DNA Stool Mini Kit. Community DNA obtained from lyophilized faeces also provided the best restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) profiles, which should guarantee a better representation of the microbial diversity present in faecal samples. CONCLUSION. As compared with using fresh faecal samples for pig faecal microbiota studies, lyophilization improved both DNA yield and quality of the information arising from the PCR- RFLP method of analysis.

Basidiomycetes present specific problems with regard to their preservation, because most of them do not form resistant propagules in culture but exist only as mycelium. Usually these fungi can only be preserved by serial transfer on agar (labour-intensive procedures that can increase the danger of variation or loss of physiological or morphological features), or cryopreserved in liquid nitrogen (expensive). Cryopreservation at -80 degrees C and lyophilisation could be good alternatives. In this work we set up and tested six protocols of cryopreservation at -80 degrees C, and 12 protocols of lyophilisation on 15 isolates of white-rot fungi (WRF) belonging to 10 species. The tested protocols were mainly characterized by the use of different growth media, protectants, time and number of perfusion with protectants and finally by the typology and origin of the samples to be cryopreserved (mycelium/agar plug, whole colony) or to lyophilise (mycelium/agar plug, mycelium fragment, whole colony). Cryopreservation and lyophilisation outcomes were checked, at morphological (macro- and microscopic features), physiological (growth rate and laccase, Mn-independent and Mn-dependent peroxidases activities) and genetic level (Amplified Fragment Length Polymorphisms analysis - AFLP). Vitality of all fungi was successfully preserved by all cryopreservation protocols at -80 degrees C, and by two lyophilisation methods. Our results showed that cryopreservation at -80 degrees C did not produce morphological changes in any isolate, while two isolates were affected by lyophilisation. None of the physiological features were lost, even though growth rate and enzyme activities were somehow influenced by all preservation methods. AFLP analysis showed that only the two isolates that varied in their morphology after lyophilisation produced a different DNA fingerprint pattern in comparison with that obtained before lyophilisation. These findings provide evidence that cryopreservation at -80 degre

Un elemento esencial en la investigación con microorganismos fitopatógenos es su conservación y uso seguro. Desde este punto de vista, en este estudio se evaluaron métodos de conservación de hongos que atacan el ñame, empleando como factores de respuesta el potencial de viabilidad, y la estabilidad y presencia o ausencia de cambios en las características macro y microscópicas. Como resultado del trabajo se proponen los métodos más adecuados para los géneros Colletotrichum y Fusarium, hongos causantes de las mayores pérdidas en las plantaciones de ñame en la Costa Caribe colombiana. Las cepas utilizadas en este estudio provienen de las colecciones de la Universidad de Sucre, del Instituto de Biotecnología de la Universidad Nacional de Colombia (IBUN) y de una donación de la doctora Lucía Afanador de la Universidad Nacional, Sede Medellín. Estas fueron sometidas a diferentes métodos de conservación, entre ellos criopreservación, liofilización y cultivo periódico con y sin aceite mineral. Los resultados obtenidos permitieron elegir la criopreservación como el método más eficiente para la conservación de la colección, y el cultivo periódico con aceite mineral como método alternativo y complementario. Estos minimizan el riesgo de pérdida del material biológico y brindan condiciones de manejo que conservan las características biológicas bajo estudio desde campos como la microbiología, la bioquímica y la biología molecular, entre otros. Palabras clave: criopreservación; liofilización; cultivo periódico; Colletotrichum sp.; Fusarium sp. Abstract: An essential element in phytopathogenic microorganism research is their preservation and safe use. The purpose of this study was to evaluate methods for preserving fungi producing diseases in yam, using potential viability, stability and the presence or absence of macro- and microscopic characteristic changes as response factors. More suitable methods for Colletotrichum and Fusarium genera were proposed as a result of the work; the

RNA isolation is a prerequisite to studying gene expression in banana and to understanding changes occurring in response to the environment. Standard extraction methods do not efficiently extract RNA from plants such as banana, with high levels of phenolics, carbohydrates, or other compounds that bind to and/or coprecipitate with RNA. Materials and methods. Five to seven RNA extraction methods were compared. Four crown-tissue storage methods were also compared. cDNA-AFLP was used to ensure that the obtained RNA was of sufficient quality for molecular applications and that RNA expression was unaltered by in situ storage. Results and discussion. The modified hot-borate method proved to be the best RNA extraction method, allowing high yields of good quality, undegraded RNA from the crown, fruit peel and pulp at all stages of ripening. The RNA obtained by this method was of sufficient quality for molecular applications such as cDNA-AFLP that give highly reproducible results. Freeze-drying of fresh tissues and tissue conservation in hot-borate buffer, two original storage methods, appear appropriate for preserving RNA in situ without ultra-low temperature. The RNA obtained was of high quality, undegraded, and useful for all downstream applications. The genome expression profile obtained by cDNA-AFLP analysis was unaltered by these methods for storing collected tissues. Conclusion. By applying all the suggested procedures in this work, it is possible to store and study gene expression in any banana fruit tissue, whatever the maturity stage, without affecting the RNA expression level.

[no abstract]

Experiments were performed to optimise the extraction conditions of 'Starking' apple fruit polyphenoloxidase (PPO), to evaluate the affinity and specificity towards several substrates and to study the stability of enzyme extracts from apple samples stored under different conditions. Sodium phosphate buffer (0.2 M, pH 6.5) plus 0.25% Triton X100 and 1% or 2% PVPP was found to be the most efficient extraction medium. Chlorogenic acid, dopamine and 4-methylcatechol showed similar specificity towards PPO, and chlorogenic acid was found to be the best substrate for the enzyme. Enzyme extracts from frozen cut apple stored at -4°C, and extracts from lyophilised apple samples stored at 4°C were more stable than extracts obtained from fresh-cut or acetone powder samples.

Un vaccin lyophilisé contre la maladie de Newcastle a été fabriqué à partir d'un dérivé thermotolérant V4/276 de la souche de virus V4 (UPM). Le titre moyen de chaque flacon est de 10 puissance 10,4 DIO50 après 14 jours de conservation à + 4¼C et de 10 puissance 10 DIO50 après 126 jours. Lors d'une incubation à 45¼C pendant 7 et 14 jours, il s'est abaissé respectivement à 10 puissance 8,5 DIO50 et 10 puissance 8,2 DIO50. Ce vaccin a été aussi exposé à la température ambiante à Ouagadougou (Burkina Faso) durant la première quinzaine du mois de juillet 1991, période au cours de laquelle la température oscille le plus souvent entre 25 et 32¼C sans jamais dépasser 35¼C : après des séjours de 7 et 14 jours à l'extérieur, ce vaccin a gardé un titre moyen de 10 puissance 9,3 DIO50/flacon. Il est destiné à l'enrobage de grains servant de nourriture aux volailles des villages africains

Des essais de lyophilisation des spores de Bacillus anthracis (souche Sterne) ont montré que le pourcentage de spores revivifiables dépend des milieux de lyophilisation utilisés: le lait écrémé et le milieu de Weybridge sont d'excellents protecteurs contrairement au milieu à la néopeptone. En outre, les spores lyophilisées sont "fragilisées" et le pourcentage de spores après reconstitution dépend du diluant: le sérum physiologique n'a aucune action nocive à l'inverse de la solution molaire de sulfate de magnésium qui détruit 50 p. 100 des spores

Une expérience de conservation d'un vaccin antipéripneumonique lyophilisé, souche KH3J Sr+, aux températures usuelles, a été menée avec, au total, le titrage de quelque 700 flacons, à raison d'une mesure par flacon. Un si grand nombre de données est nécessaire pour pouvoir effectuer une analyse statistique des résultats car le problème essentiel de ce genre d'étude réside dans l'importance des écarts entre les résultats des différentes numérations

Des expériences ont été effectuées visant à définir les meilleures méthodes de conservation de la microflore du rumen, dans le but de la réutiliser ensuite pour améliorer la digestibilité lors de changement de régime alimentaire. Les tests concernaient la conservation: à -196¼, à -70¼ avec 10 p. 100 de glycérol, par lyophilisation, par réfrigération, par dessiccation à 37¼, par congélation à -20¼. D'après le nombre de bactéries survivantes et leur capacité de production d'acides gras volatils, seule la dernière méthode semble à la fois la plus efficace et la plus pratique

Synthèse sur le 14 ème Congrès International du Froid, Moscou, 20 au 29 sept. 1975. Elle met en évidence l'intérêt porte mondialement à l'industrie du froid dans le domaine des industries alimentaires

Au cours des années 1968 et 1969, une série d'épreuves tendant à apprécier la valeur de l'immunité conférée par un vaccin lyophilisé préparé à raide de la souche T 1 (44(' passage) a été effectuée au Laboratoire de Dakar. La méthode dite de contact, mise au point par les chercheurs australiens, a été retenue. Trois mois et sept nto1s et demi après la vaccination, l'immunité est totale; quatorze mois après l'immunisation, elle est encore de 90 p. 100. Dans ces conditions, une période de protection minimale de un an peut être garantie.

La conservation du pollen de cocotier est indispensable à la bonne exécution des programmes d'améliorations génétiques. Elle rend possible les autofécondations (1) et permet par ailleurs de croiser des arbres qui ne fleurissent pas au même moment ou qui sont éloignés les uns des autres. Après avoir passé en revue les techniques actuelles de conservation du pollen, une méthode nouvelle est étudiée : la lyophilisation.

Těkavé organické látky lze izolovat a zakoncentrovat z vodného roztoku metodami, které jsou založeny na analýze rovnovážné plynné fáze, právě díky jejich těkavosti. Cílem této bakalářské práce je stanovení množství reziduálního terc-butanolu patřícího mezi těkavé organické látky, ve vzorcích po lyofilizaci. Vzorky byly připraveny smísením hydrofobní sondy a hydrofilního hyaluronanu. Aby ke smísení došlo, je třeba přidat organické rozpouštědlo terc-butanol, který zajišťuje stabilní prostředí. Právě díky němu dojde k homogennímu smísení sondy a hyaluronanu. Následnou lyofilizací vzorku dojde k narušení vodného obalu hyaluronanu a nepolární vodíky, které jsou v něm ukryté, mohou interagovat s hydrofobní sondou. Navázání sondy je důležité v oblasti onkologie, kdy tento fakt může být využit v oblasti cílené distribuce léčiv. Ve výsledném produktu je však terc-butanol nežádoucí, zejména v oblastech medicínských aplikací. Předmětem této práce je minimalizace reziduálního množství terc-butanolu ve výsledném lyofilizačním koláči. Ke stanovení jeho obsahu byla použita metoda analýzy rovnovážné plynné fáze (statický Head-Space) pomocí plynové chromatografie s plamenovou ionizační detekcí (GC/FID)., Volatile organic compounds could be isolated and concentrated from liquid solution using methods, which are based on analysis of equilibrium gas phase, because of their volatility. The aim of this bachelor´s thesis is determination the amount of residual tert-butanol, belonging to volatile organic compounds, in the samples after lyophilisation. Samples were prepared by mixing hydrofobic sonde and hydrofilic hyaluronan. For mixing these components it is necessary to add organic solvent tert-butanol, which ensures stable environment. Thanks to its presence mixing of probe and hyaluronan occurs. Consecutive lyopfilisation of the sample leads to the disruption of a water cover of hyaluronan and nonpolar hydrogen atoms, which are hidden in it, can interact with hydrofobic probe. Bonding the probe is important in oncology, where this fact could be used in targeted distribution of pharmaceuticals. However presence of tert-butanol is unacceptable in the final product, mainly in medical applications. The object this study is the minimization of residual tert-butanol amount in final lyophilised cake. The method of equilibrium gas phase analysis (static Head-Space) by gas chromatography with flame ionization detection (GC/FID) was used for the determination of its content.

Cílem této diplomové práce bylo připravit nosičové systémy na bázi nativního hyaluronan s využitím lyofilizace coby vhodné metody pro zajištění interakce mezi konkrétním léčivem a polymerní strukturou. K přípravě systémů byl využit terc-butylalkohol coby ko-rozpouštědlo podporující hydrofobní efekt mezi léčivem a hydrofobními doménami hyaluronanu. Vzhledem k tomu, že všechny polární skupiny zaujímají ekvatoriální polohu, připadají na axiální polohu pouze vodíky, čímž získává molekula amfifilní charakter. Předchozí studie potvrdily, že sušení mrazem je užitečnou metodou pro přípravu nosičových systémů. Nicméně, tato studie se zaměřuje na přípravu zmíněných systémů ze vzorků reálných léčiv, které dříve byly nahrazeny fluorescenčními sondami. Díky dobrým fluorescenčním vlastnostem všech vzorků byla coby hlavní metoda vyhodnocující úspěšnost přípravy zvolena fluorescenční spektrometrie. Dalšími metodami byly termogravimetrická analýza a infračervená spektrometrie s Fourierovou transformací. Všechny tyto metody potvrdily, že lyofilizace je účinnou metodou pro přípravu nosičových systémů reálných léčiv. Výborných výsledků bylo dosaženo ve smyslu rozpustnosti lyofilizovaných systémů. Na závěr byla pomocí head-space mikroextraakce na pevné vrstvě stanovena koncentrace residuálního ko-rozpouštědla. Tato metoda taktéž přinesla cenné informace a potvrdila, že terc-butylalkohol se v lyofilizovaných systémech nachází pouze ve stopovém množství., The aim of this thesis was to prepare native hyaluronan-based carrier systems using the lyophilisation as a suitable method to ensure an interaction between certain drugs and the polymeric structure which would lead to an increased solubility of hydrophobic drugs. For the preparation of such a system the tert-butyl alcohol was used as a co-solvent with the ability to support hydrophobic effect between the drug and a hydrophobic domain of hyaluronan. Since all polar domains of hyaluronan are located in the equatorial position, the axial position is occupied by hydrogens and therefore the molecule gains the amphiphilic character. Previous studies have confirmed that freeze-drying is a useful method for a carrier system preparation. However, this study focuses on the preparation of such systems with samples of real drugs, which were previously replaced by fluorescence sondes. Since all drug samples have good fluorescence characteristics, the fluorescence spectroscopy was used as the main method to determine the success of the preparation. Other methods included a thermogravimetric analysis and the infrared spectroscopy with Fourier transformation. All the mentioned methods have confirmed that lyophilisation is a useful method for the preparation of the carrier systems with real drugs. Great results have been achieved in the terms of the solubility of freeze-dried systems. In the last step, the co-solvent residues were determined by head-space solid phase microextraction. This method also provided some valuable information and confirmed that tert-butyl alcohol could be found in the lyophilised systems only on very low levels.

Těkavé organické látky lze izolovat a zakoncentrovat z vodného roztoku metodami, které jsou založeny na analýze rovnovážné plynné fáze, právě díky jejich těkavosti. Cílem této bakalářské práce je stanovení množství reziduálního terc-butanolu patřícího mezi těkavé organické látky, ve vzorcích po lyofilizaci. Vzorky byly připraveny smísením hydrofobní sondy a hydrofilního hyaluronanu. Aby ke smísení došlo, je třeba přidat organické rozpouštědlo terc-butanol, který zajišťuje stabilní prostředí. Právě díky němu dojde k homogennímu smísení sondy a hyaluronanu. Následnou lyofilizací vzorku dojde k narušení vodného obalu hyaluronanu a nepolární vodíky, které jsou v něm ukryté, mohou interagovat s hydrofobní sondou. Navázání sondy je důležité v oblasti onkologie, kdy tento fakt může být využit v oblasti cílené distribuce léčiv. Ve výsledném produktu je však terc-butanol nežádoucí, zejména v oblastech medicínských aplikací. Předmětem této práce je minimalizace reziduálního množství terc-butanolu ve výsledném lyofilizačním koláči. Ke stanovení jeho obsahu byla použita metoda analýzy rovnovážné plynné fáze (statický Head-Space) pomocí plynové chromatografie s plamenovou ionizační detekcí (GC/FID)., Volatile organic compounds could be isolated and concentrated from liquid solution using methods, which are based on analysis of equilibrium gas phase, because of their volatility. The aim of this bachelor´s thesis is determination the amount of residual tert-butanol, belonging to volatile organic compounds, in the samples after lyophilisation. Samples were prepared by mixing hydrofobic sonde and hydrofilic hyaluronan. For mixing these components it is necessary to add organic solvent tert-butanol, which ensures stable environment. Thanks to its presence mixing of probe and hyaluronan occurs. Consecutive lyopfilisation of the sample leads to the disruption of a water cover of hyaluronan and nonpolar hydrogen atoms, which are hidden in it, can interact with hydrofobic probe. Bonding the probe is important in oncology, where this fact could be used in targeted distribution of pharmaceuticals. However presence of tert-butanol is unacceptable in the final product, mainly in medical applications. The object this study is the minimization of residual tert-butanol amount in final lyophilised cake. The method of equilibrium gas phase analysis (static Head-Space) by gas chromatography with flame ionization detection (GC/FID) was used for the determination of its content.

Předkládaná práce se zabývá technologickým procesem lyofilizace. Práce je zaměřena na optimalizaci řízení teploty a tlaku během procesu., The present work deals with the technological process lyophilization. The work is aimed at optimizing the management of temperature and pressure during the process.

Cílem této diplomové práce bylo připravit nosičové systémy na bázi nativního hyaluronan s využitím lyofilizace coby vhodné metody pro zajištění interakce mezi konkrétním léčivem a polymerní strukturou. K přípravě systémů byl využit terc-butylalkohol coby ko-rozpouštědlo podporující hydrofobní efekt mezi léčivem a hydrofobními doménami hyaluronanu. Vzhledem k tomu, že všechny polární skupiny zaujímají ekvatoriální polohu, připadají na axiální polohu pouze vodíky, čímž získává molekula amfifilní charakter. Předchozí studie potvrdily, že sušení mrazem je užitečnou metodou pro přípravu nosičových systémů. Nicméně, tato studie se zaměřuje na přípravu zmíněných systémů ze vzorků reálných léčiv, které dříve byly nahrazeny fluorescenčními sondami. Díky dobrým fluorescenčním vlastnostem všech vzorků byla coby hlavní metoda vyhodnocující úspěšnost přípravy zvolena fluorescenční spektrometrie. Dalšími metodami byly termogravimetrická analýza a infračervená spektrometrie s Fourierovou transformací. Všechny tyto metody potvrdily, že lyofilizace je účinnou metodou pro přípravu nosičových systémů reálných léčiv. Výborných výsledků bylo dosaženo ve smyslu rozpustnosti lyofilizovaných systémů. Na závěr byla pomocí head-space mikroextraakce na pevné vrstvě stanovena koncentrace residuálního ko-rozpouštědla. Tato metoda taktéž přinesla cenné informace a potvrdila, že terc-butylalkohol se v lyofilizovaných systémech nachází pouze ve stopovém množství., The aim of this thesis was to prepare native hyaluronan-based carrier systems using the lyophilisation as a suitable method to ensure an interaction between certain drugs and the polymeric structure which would lead to an increased solubility of hydrophobic drugs. For the preparation of such a system the tert-butyl alcohol was used as a co-solvent with the ability to support hydrophobic effect between the drug and a hydrophobic domain of hyaluronan. Since all polar domains of hyaluronan are located in the equatorial position, the axial position is occupied by hydrogens and therefore the molecule gains the amphiphilic character. Previous studies have confirmed that freeze-drying is a useful method for a carrier system preparation. However, this study focuses on the preparation of such systems with samples of real drugs, which were previously replaced by fluorescence sondes. Since all drug samples have good fluorescence characteristics, the fluorescence spectroscopy was used as the main method to determine the success of the preparation. Other methods included a thermogravimetric analysis and the infrared spectroscopy with Fourier transformation. All the mentioned methods have confirmed that lyophilisation is a useful method for the preparation of the carrier systems with real drugs. Great results have been achieved in the terms of the solubility of freeze-dried systems. In the last step, the co-solvent residues were determined by head-space solid phase microextraction. This method also provided some valuable information and confirmed that tert-butyl alcohol could be found in the lyophilised systems only on very low levels.

Cílem této diplomové práce bylo připravit nosičové systémy na bázi nativního hyaluronan s využitím lyofilizace coby vhodné metody pro zajištění interakce mezi konkrétním léčivem a polymerní strukturou. K přípravě systémů byl využit terc-butylalkohol coby ko-rozpouštědlo podporující hydrofobní efekt mezi léčivem a hydrofobními doménami hyaluronanu. Vzhledem k tomu, že všechny polární skupiny zaujímají ekvatoriální polohu, připadají na axiální polohu pouze vodíky, čímž získává molekula amfifilní charakter. Předchozí studie potvrdily, že sušení mrazem je užitečnou metodou pro přípravu nosičových systémů. Nicméně, tato studie se zaměřuje na přípravu zmíněných systémů ze vzorků reálných léčiv, které dříve byly nahrazeny fluorescenčními sondami. Díky dobrým fluorescenčním vlastnostem všech vzorků byla coby hlavní metoda vyhodnocující úspěšnost přípravy zvolena fluorescenční spektrometrie. Dalšími metodami byly termogravimetrická analýza a infračervená spektrometrie s Fourierovou transformací. Všechny tyto metody potvrdily, že lyofilizace je účinnou metodou pro přípravu nosičových systémů reálných léčiv. Výborných výsledků bylo dosaženo ve smyslu rozpustnosti lyofilizovaných systémů. Na závěr byla pomocí head-space mikroextraakce na pevné vrstvě stanovena koncentrace residuálního ko-rozpouštědla. Tato metoda taktéž přinesla cenné informace a potvrdila, že terc-butylalkohol se v lyofilizovaných systémech nachází pouze ve stopovém množství., The aim of this thesis was to prepare native hyaluronan-based carrier systems using the lyophilisation as a suitable method to ensure an interaction between certain drugs and the polymeric structure which would lead to an increased solubility of hydrophobic drugs. For the preparation of such a system the tert-butyl alcohol was used as a co-solvent with the ability to support hydrophobic effect between the drug and a hydrophobic domain of hyaluronan. Since all polar domains of hyaluronan are located in the equatorial position, the axial position is occupied by hydrogens and therefore the molecule gains the amphiphilic character. Previous studies have confirmed that freeze-drying is a useful method for a carrier system preparation. However, this study focuses on the preparation of such systems with samples of real drugs, which were previously replaced by fluorescence sondes. Since all drug samples have good fluorescence characteristics, the fluorescence spectroscopy was used as the main method to determine the success of the preparation. Other methods included a thermogravimetric analysis and the infrared spectroscopy with Fourier transformation. All the mentioned methods have confirmed that lyophilisation is a useful method for the preparation of the carrier systems with real drugs. Great results have been achieved in the terms of the solubility of freeze-dried systems. In the last step, the co-solvent residues were determined by head-space solid phase microextraction. This method also provided some valuable information and confirmed that tert-butyl alcohol could be found in the lyophilised systems only on very low levels.

Předkládaná práce se zabývá technologickým procesem lyofilizace. Práce je zaměřena na optimalizaci řízení teploty a tlaku během procesu., The present work deals with the technological process lyophilization. The work is aimed at optimizing the management of temperature and pressure during the process.

Předkládaná práce se zabývá technologickým procesem lyofilizace. Práce je zaměřena na optimalizaci řízení teploty a tlaku během procesu., The present work deals with the technological process lyophilization. The work is aimed at optimizing the management of temperature and pressure during the process.

Těkavé organické látky lze izolovat a zakoncentrovat z vodného roztoku metodami, které jsou založeny na analýze rovnovážné plynné fáze, právě díky jejich těkavosti. Cílem této bakalářské práce je stanovení množství reziduálního terc-butanolu patřícího mezi těkavé organické látky, ve vzorcích po lyofilizaci. Vzorky byly připraveny smísením hydrofobní sondy a hydrofilního hyaluronanu. Aby ke smísení došlo, je třeba přidat organické rozpouštědlo terc-butanol, který zajišťuje stabilní prostředí. Právě díky němu dojde k homogennímu smísení sondy a hyaluronanu. Následnou lyofilizací vzorku dojde k narušení vodného obalu hyaluronanu a nepolární vodíky, které jsou v něm ukryté, mohou interagovat s hydrofobní sondou. Navázání sondy je důležité v oblasti onkologie, kdy tento fakt může být využit v oblasti cílené distribuce léčiv. Ve výsledném produktu je však terc-butanol nežádoucí, zejména v oblastech medicínských aplikací. Předmětem této práce je minimalizace reziduálního množství terc-butanolu ve výsledném lyofilizačním koláči. Ke stanovení jeho obsahu byla použita metoda analýzy rovnovážné plynné fáze (statický Head-Space) pomocí plynové chromatografie s plamenovou ionizační detekcí (GC/FID)., Volatile organic compounds could be isolated and concentrated from liquid solution using methods, which are based on analysis of equilibrium gas phase, because of their volatility. The aim of this bachelor´s thesis is determination the amount of residual tert-butanol, belonging to volatile organic compounds, in the samples after lyophilisation. Samples were prepared by mixing hydrofobic sonde and hydrofilic hyaluronan. For mixing these components it is necessary to add organic solvent tert-butanol, which ensures stable environment. Thanks to its presence mixing of probe and hyaluronan occurs. Consecutive lyopfilisation of the sample leads to the disruption of a water cover of hyaluronan and nonpolar hydrogen atoms, which are hidden in it, can interact with hydrofobic probe. Bonding the probe is important in oncology, where this fact could be used in targeted distribution of pharmaceuticals. However presence of tert-butanol is unacceptable in the final product, mainly in medical applications. The object this study is the minimization of residual tert-butanol amount in final lyophilised cake. The method of equilibrium gas phase analysis (static Head-Space) by gas chromatography with flame ionization detection (GC/FID) was used for the determination of its content.

Těkavé organické látky lze izolovat a zakoncentrovat z vodného roztoku metodami, které jsou založeny na analýze rovnovážné plynné fáze, právě díky jejich těkavosti. Cílem této bakalářské práce je stanovení množství reziduálního terc-butanolu patřícího mezi těkavé organické látky, ve vzorcích po lyofilizaci. Vzorky byly připraveny smísením hydrofobní sondy a hydrofilního hyaluronanu. Aby ke smísení došlo, je třeba přidat organické rozpouštědlo terc-butanol, který zajišťuje stabilní prostředí. Právě díky němu dojde k homogennímu smísení sondy a hyaluronanu. Následnou lyofilizací vzorku dojde k narušení vodného obalu hyaluronanu a nepolární vodíky, které jsou v něm ukryté, mohou interagovat s hydrofobní sondou. Navázání sondy je důležité v oblasti onkologie, kdy tento fakt může být využit v oblasti cílené distribuce léčiv. Ve výsledném produktu je však terc-butanol nežádoucí, zejména v oblastech medicínských aplikací. Předmětem této práce je minimalizace reziduálního množství terc-butanolu ve výsledném lyofilizačním koláči. Ke stanovení jeho obsahu byla použita metoda analýzy rovnovážné plynné fáze (statický Head-Space) pomocí plynové chromatografie s plamenovou ionizační detekcí (GC/FID)., Volatile organic compounds could be isolated and concentrated from liquid solution using methods, which are based on analysis of equilibrium gas phase, because of their volatility. The aim of this bachelor´s thesis is determination the amount of residual tert-butanol, belonging to volatile organic compounds, in the samples after lyophilisation. Samples were prepared by mixing hydrofobic sonde and hydrofilic hyaluronan. For mixing these components it is necessary to add organic solvent tert-butanol, which ensures stable environment. Thanks to its presence mixing of probe and hyaluronan occurs. Consecutive lyopfilisation of the sample leads to the disruption of a water cover of hyaluronan and nonpolar hydrogen atoms, which are hidden in it, can interact with hydrofobic probe. Bonding the probe is important in oncology, where this fact could be used in targeted distribution of pharmaceuticals. However presence of tert-butanol is unacceptable in the final product, mainly in medical applications. The object this study is the minimization of residual tert-butanol amount in final lyophilised cake. The method of equilibrium gas phase analysis (static Head-Space) by gas chromatography with flame ionization detection (GC/FID) was used for the determination of its content.

Cílem této diplomové práce bylo připravit nosičové systémy na bázi nativního hyaluronan s využitím lyofilizace coby vhodné metody pro zajištění interakce mezi konkrétním léčivem a polymerní strukturou. K přípravě systémů byl využit terc-butylalkohol coby ko-rozpouštědlo podporující hydrofobní efekt mezi léčivem a hydrofobními doménami hyaluronanu. Vzhledem k tomu, že všechny polární skupiny zaujímají ekvatoriální polohu, připadají na axiální polohu pouze vodíky, čímž získává molekula amfifilní charakter. Předchozí studie potvrdily, že sušení mrazem je užitečnou metodou pro přípravu nosičových systémů. Nicméně, tato studie se zaměřuje na přípravu zmíněných systémů ze vzorků reálných léčiv, které dříve byly nahrazeny fluorescenčními sondami. Díky dobrým fluorescenčním vlastnostem všech vzorků byla coby hlavní metoda vyhodnocující úspěšnost přípravy zvolena fluorescenční spektrometrie. Dalšími metodami byly termogravimetrická analýza a infračervená spektrometrie s Fourierovou transformací. Všechny tyto metody potvrdily, že lyofilizace je účinnou metodou pro přípravu nosičových systémů reálných léčiv. Výborných výsledků bylo dosaženo ve smyslu rozpustnosti lyofilizovaných systémů. Na závěr byla pomocí head-space mikroextraakce na pevné vrstvě stanovena koncentrace residuálního ko-rozpouštědla. Tato metoda taktéž přinesla cenné informace a potvrdila, že terc-butylalkohol se v lyofilizovaných systémech nachází pouze ve stopovém množství., The aim of this thesis was to prepare native hyaluronan-based carrier systems using the lyophilisation as a suitable method to ensure an interaction between certain drugs and the polymeric structure which would lead to an increased solubility of hydrophobic drugs. For the preparation of such a system the tert-butyl alcohol was used as a co-solvent with the ability to support hydrophobic effect between the drug and a hydrophobic domain of hyaluronan. Since all polar domains of hyaluronan are located in the equatorial position, the axial position is occupied by hydrogens and therefore the molecule gains the amphiphilic character. Previous studies have confirmed that freeze-drying is a useful method for a carrier system preparation. However, this study focuses on the preparation of such systems with samples of real drugs, which were previously replaced by fluorescence sondes. Since all drug samples have good fluorescence characteristics, the fluorescence spectroscopy was used as the main method to determine the success of the preparation. Other methods included a thermogravimetric analysis and the infrared spectroscopy with Fourier transformation. All the mentioned methods have confirmed that lyophilisation is a useful method for the preparation of the carrier systems with real drugs. Great results have been achieved in the terms of the solubility of freeze-dried systems. In the last step, the co-solvent residues were determined by head-space solid phase microextraction. This method also provided some valuable information and confirmed that tert-butyl alcohol could be found in the lyophilised systems only on very low levels.

Cílem této diplomové práce bylo připravit nosičové systémy na bázi nativního hyaluronan s využitím lyofilizace coby vhodné metody pro zajištění interakce mezi konkrétním léčivem a polymerní strukturou. K přípravě systémů byl využit terc-butylalkohol coby ko-rozpouštědlo podporující hydrofobní efekt mezi léčivem a hydrofobními doménami hyaluronanu. Vzhledem k tomu, že všechny polární skupiny zaujímají ekvatoriální polohu, připadají na axiální polohu pouze vodíky, čímž získává molekula amfifilní charakter. Předchozí studie potvrdily, že sušení mrazem je užitečnou metodou pro přípravu nosičových systémů. Nicméně, tato studie se zaměřuje na přípravu zmíněných systémů ze vzorků reálných léčiv, které dříve byly nahrazeny fluorescenčními sondami. Díky dobrým fluorescenčním vlastnostem všech vzorků byla coby hlavní metoda vyhodnocující úspěšnost přípravy zvolena fluorescenční spektrometrie. Dalšími metodami byly termogravimetrická analýza a infračervená spektrometrie s Fourierovou transformací. Všechny tyto metody potvrdily, že lyofilizace je účinnou metodou pro přípravu nosičových systémů reálných léčiv. Výborných výsledků bylo dosaženo ve smyslu rozpustnosti lyofilizovaných systémů. Na závěr byla pomocí head-space mikroextraakce na pevné vrstvě stanovena koncentrace residuálního ko-rozpouštědla. Tato metoda taktéž přinesla cenné informace a potvrdila, že terc-butylalkohol se v lyofilizovaných systémech nachází pouze ve stopovém množství., The aim of this thesis was to prepare native hyaluronan-based carrier systems using the lyophilisation as a suitable method to ensure an interaction between certain drugs and the polymeric structure which would lead to an increased solubility of hydrophobic drugs. For the preparation of such a system the tert-butyl alcohol was used as a co-solvent with the ability to support hydrophobic effect between the drug and a hydrophobic domain of hyaluronan. Since all polar domains of hyaluronan are located in the equatorial position, the axial position is occupied by hydrogens and therefore the molecule gains the amphiphilic character. Previous studies have confirmed that freeze-drying is a useful method for a carrier system preparation. However, this study focuses on the preparation of such systems with samples of real drugs, which were previously replaced by fluorescence sondes. Since all drug samples have good fluorescence characteristics, the fluorescence spectroscopy was used as the main method to determine the success of the preparation. Other methods included a thermogravimetric analysis and the infrared spectroscopy with Fourier transformation. All the mentioned methods have confirmed that lyophilisation is a useful method for the preparation of the carrier systems with real drugs. Great results have been achieved in the terms of the solubility of freeze-dried systems. In the last step, the co-solvent residues were determined by head-space solid phase microextraction. This method also provided some valuable information and confirmed that tert-butyl alcohol could be found in the lyophilised systems only on very low levels.

Cílem této diplomové práce bylo připravit nosičové systémy na bázi nativního hyaluronan s využitím lyofilizace coby vhodné metody pro zajištění interakce mezi konkrétním léčivem a polymerní strukturou. K přípravě systémů byl využit terc-butylalkohol coby ko-rozpouštědlo podporující hydrofobní efekt mezi léčivem a hydrofobními doménami hyaluronanu. Vzhledem k tomu, že všechny polární skupiny zaujímají ekvatoriální polohu, připadají na axiální polohu pouze vodíky, čímž získává molekula amfifilní charakter. Předchozí studie potvrdily, že sušení mrazem je užitečnou metodou pro přípravu nosičových systémů. Nicméně, tato studie se zaměřuje na přípravu zmíněných systémů ze vzorků reálných léčiv, které dříve byly nahrazeny fluorescenčními sondami. Díky dobrým fluorescenčním vlastnostem všech vzorků byla coby hlavní metoda vyhodnocující úspěšnost přípravy zvolena fluorescenční spektrometrie. Dalšími metodami byly termogravimetrická analýza a infračervená spektrometrie s Fourierovou transformací. Všechny tyto metody potvrdily, že lyofilizace je účinnou metodou pro přípravu nosičových systémů reálných léčiv. Výborných výsledků bylo dosaženo ve smyslu rozpustnosti lyofilizovaných systémů. Na závěr byla pomocí head-space mikroextraakce na pevné vrstvě stanovena koncentrace residuálního ko-rozpouštědla. Tato metoda taktéž přinesla cenné informace a potvrdila, že terc-butylalkohol se v lyofilizovaných systémech nachází pouze ve stopovém množství., The aim of this thesis was to prepare native hyaluronan-based carrier systems using the lyophilisation as a suitable method to ensure an interaction between certain drugs and the polymeric structure which would lead to an increased solubility of hydrophobic drugs. For the preparation of such a system the tert-butyl alcohol was used as a co-solvent with the ability to support hydrophobic effect between the drug and a hydrophobic domain of hyaluronan. Since all polar domains of hyaluronan are located in the equatorial position, the axial position is occupied by hydrogens and therefore the molecule gains the amphiphilic character. Previous studies have confirmed that freeze-drying is a useful method for a carrier system preparation. However, this study focuses on the preparation of such systems with samples of real drugs, which were previously replaced by fluorescence sondes. Since all drug samples have good fluorescence characteristics, the fluorescence spectroscopy was used as the main method to determine the success of the preparation. Other methods included a thermogravimetric analysis and the infrared spectroscopy with Fourier transformation. All the mentioned methods have confirmed that lyophilisation is a useful method for the preparation of the carrier systems with real drugs. Great results have been achieved in the terms of the solubility of freeze-dried systems. In the last step, the co-solvent residues were determined by head-space solid phase microextraction. This method also provided some valuable information and confirmed that tert-butyl alcohol could be found in the lyophilised systems only on very low levels.

Těkavé organické látky lze izolovat a zakoncentrovat z vodného roztoku metodami, které jsou založeny na analýze rovnovážné plynné fáze, právě díky jejich těkavosti. Cílem této bakalářské práce je stanovení množství reziduálního terc-butanolu patřícího mezi těkavé organické látky, ve vzorcích po lyofilizaci. Vzorky byly připraveny smísením hydrofobní sondy a hydrofilního hyaluronanu. Aby ke smísení došlo, je třeba přidat organické rozpouštědlo terc-butanol, který zajišťuje stabilní prostředí. Právě díky němu dojde k homogennímu smísení sondy a hyaluronanu. Následnou lyofilizací vzorku dojde k narušení vodného obalu hyaluronanu a nepolární vodíky, které jsou v něm ukryté, mohou interagovat s hydrofobní sondou. Navázání sondy je důležité v oblasti onkologie, kdy tento fakt může být využit v oblasti cílené distribuce léčiv. Ve výsledném produktu je však terc-butanol nežádoucí, zejména v oblastech medicínských aplikací. Předmětem této práce je minimalizace reziduálního množství terc-butanolu ve výsledném lyofilizačním koláči. Ke stanovení jeho obsahu byla použita metoda analýzy rovnovážné plynné fáze (statický Head-Space) pomocí plynové chromatografie s plamenovou ionizační detekcí (GC/FID)., Volatile organic compounds could be isolated and concentrated from liquid solution using methods, which are based on analysis of equilibrium gas phase, because of their volatility. The aim of this bachelor´s thesis is determination the amount of residual tert-butanol, belonging to volatile organic compounds, in the samples after lyophilisation. Samples were prepared by mixing hydrofobic sonde and hydrofilic hyaluronan. For mixing these components it is necessary to add organic solvent tert-butanol, which ensures stable environment. Thanks to its presence mixing of probe and hyaluronan occurs. Consecutive lyopfilisation of the sample leads to the disruption of a water cover of hyaluronan and nonpolar hydrogen atoms, which are hidden in it, can interact with hydrofobic probe. Bonding the probe is important in oncology, where this fact could be used in targeted distribution of pharmaceuticals. However presence of tert-butanol is unacceptable in the final product, mainly in medical applications. The object this study is the minimization of residual tert-butanol amount in final lyophilised cake. The method of equilibrium gas phase analysis (static Head-Space) by gas chromatography with flame ionization detection (GC/FID) was used for the determination of its content.

Předkládaná práce se zabývá technologickým procesem lyofilizace. Práce je zaměřena na optimalizaci řízení teploty a tlaku během procesu., The present work deals with the technological process lyophilization. The work is aimed at optimizing the management of temperature and pressure during the process.

Těkavé organické látky lze izolovat a zakoncentrovat z vodného roztoku metodami, které jsou založeny na analýze rovnovážné plynné fáze, právě díky jejich těkavosti. Cílem této bakalářské práce je stanovení množství reziduálního terc-butanolu patřícího mezi těkavé organické látky, ve vzorcích po lyofilizaci. Vzorky byly připraveny smísením hydrofobní sondy a hydrofilního hyaluronanu. Aby ke smísení došlo, je třeba přidat organické rozpouštědlo terc-butanol, který zajišťuje stabilní prostředí. Právě díky němu dojde k homogennímu smísení sondy a hyaluronanu. Následnou lyofilizací vzorku dojde k narušení vodného obalu hyaluronanu a nepolární vodíky, které jsou v něm ukryté, mohou interagovat s hydrofobní sondou. Navázání sondy je důležité v oblasti onkologie, kdy tento fakt může být využit v oblasti cílené distribuce léčiv. Ve výsledném produktu je však terc-butanol nežádoucí, zejména v oblastech medicínských aplikací. Předmětem této práce je minimalizace reziduálního množství terc-butanolu ve výsledném lyofilizačním koláči. Ke stanovení jeho obsahu byla použita metoda analýzy rovnovážné plynné fáze (statický Head-Space) pomocí plynové chromatografie s plamenovou ionizační detekcí (GC/FID)., Volatile organic compounds could be isolated and concentrated from liquid solution using methods, which are based on analysis of equilibrium gas phase, because of their volatility. The aim of this bachelor´s thesis is determination the amount of residual tert-butanol, belonging to volatile organic compounds, in the samples after lyophilisation. Samples were prepared by mixing hydrofobic sonde and hydrofilic hyaluronan. For mixing these components it is necessary to add organic solvent tert-butanol, which ensures stable environment. Thanks to its presence mixing of probe and hyaluronan occurs. Consecutive lyopfilisation of the sample leads to the disruption of a water cover of hyaluronan and nonpolar hydrogen atoms, which are hidden in it, can interact with hydrofobic probe. Bonding the probe is important in oncology, where this fact could be used in targeted distribution of pharmaceuticals. However presence of tert-butanol is unacceptable in the final product, mainly in medical applications. The object this study is the minimization of residual tert-butanol amount in final lyophilised cake. The method of equilibrium gas phase analysis (static Head-Space) by gas chromatography with flame ionization detection (GC/FID) was used for the determination of its content.

Předkládaná práce se zabývá technologickým procesem lyofilizace. Práce je zaměřena na optimalizaci řízení teploty a tlaku během procesu., The present work deals with the technological process lyophilization. The work is aimed at optimizing the management of temperature and pressure during the process.

Předkládaná práce se zabývá technologickým procesem lyofilizace. Práce je zaměřena na optimalizaci řízení teploty a tlaku během procesu., The present work deals with the technological process lyophilization. The work is aimed at optimizing the management of temperature and pressure during the process.

The work described within this thesis had the primary aim to investigate a protein dehydration technique named Critical Concentration Precipitation (CCP) and to assess the potential of this technique for industrial use an alternative to lyophilisation. The physical mechanism underlying this technique was studied using a dual micropipette method capable of generating individual aqueous droplets within a solvent reservoir. It was demonstrated that protein concentration within the droplet can be calculated at any time point within the experiment and that through further experimentation the particle size and process time could be modelled as a function of initial droplet size and concentration. Bulk CCP microparticle samples were later prepared, rehydrated and analysed spectroscopically to assess any degradation to the protein molecules caused by the CCP process. Analysis of protein structure and aggregation showed that the CCP process and subsequent reconstitution did not induce significant structural changes or increase aggregation of the protein. Scale up of the process was then demonstrated using laboratory-scale representations of industrial processes. To further assess the applicability of the CCP process for use as an alternative to lyophilisation, a year-long stability study was conducted. Bovine serum albumin (BSA) and human serum albumin (HSA) formulations were dehydrated and stored at 5°C, 25°C and 40°C for up to one year with characterisation carried out at defined timepoints throughout the study. Spectroscopic analysis of the samples throughout the year demonstrated that all protein formulations tested, across all temperatures, experienced no significant disruptions to their tertiary structure. Aggregation measurements showed that the CCP formulations experienced greater overall increases in aggregation than their lyophilised counterparts. However, it was also shown that the lyophilised samples experienced a greater increase in larger, non-soluble aggregate