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Este estudo trata-se de uma revisão bibliográfica, que busca aprofundar o conhecimento sobre a hepatite C e a atuação do sistema imunológico frente a infecção viral. O organismo em condições normais possui um conjunto de moléculas e células que agem harmoniosamente em prol a sua proteção. Esta condição é oferecida por meio de uma série de eventos desencadeados por estruturas próprias e não próprias, as quais podem ser protegidas ou eliminadas respectivamente. O sistema imune se diferencia em componentes da imunidade inata, que está presente desde o nascimento e componentes da imunidade adaptativa, que se desenvolvem ao longo dos anos. Os linfócitos B e T são de origem adaptativa, sendo os linfócitos B agem a nível humoral e os linfócitos T celular. Desta forma, os linfócitos T são ativados pelos agentes causadores das hepatites virais. A hepatite C é uma doença transmissível, causada pelo vírus HCV e se torna um grave problema quando evolui para uma forma crônica, podendo levar a complicações como cirrose, câncer de fígado, transplantes e óbito. Com o controle das bolsas de sangue, levamos a uma redução na transmissão das hepatites. A responsabilidade de não compartilhar materiais contaminados é um grande benefício para a população. Como não á vacinação ou qualquer outro tipo de medida preventiva após a exposição ao HCV uma avaliação epidemiológica eficaz é essencial para implantação do programa. A ampliação de pesquisas com métodos adequados é de grande importância para a redução de casos da hepatite C e seus fatores de risco.&nbsp

A Terapia Nutricional auxilia no tratamento e na recuperação do paciente acometidos com a COVID-19, sendo esta, determinante à cura. Recomenda-se o consumo maior de certos tipos de alimentos, pois estes são importantes para a reposição de fontes de vitaminas e minerais, que são micronutrientes extremamente necessários para as células do sistema imunológico. O estudo tem como objetivo geral compreender as contribuições dos nutrientes no combate pandemia da COVID-19. A nutrição adequada se baseia em umequilíbrio de alimentos, em que se faz necessário a ingestão de todos os grupos alimentares, de procedência segura, fornecendo água, carboidratos, proteínas, lipídios, vitaminas, fibras e minerais, os quais são indispensáveis e insubstituíveis ao bom funcionamento doorganismo. O estudo trata-se de um estudo de revisão bibliográfica, de caráter descritivoe de abordagem qualitativa. Foram realizadas buscas na base de dados na BVS, LILACS, BDENF e SciELO e 13 estudos preencheram os critérios necessários à realização desta revisão. Visando ampliar o número de estudos, realizou-se a busca no Google Acadêmico e foram selecionados 8 artigos. Posterior à leitura reflexiva e repetição das temáticas desenvolvidas nos artigos encontrados, emergiram duas categorias: Benefícios da alimentação adequada para prevenção da COVID-19; Impactos e complicações da carência nutricional para o indivíduo acometido com a COVID-19; Estratégias de enfrentamento frente aos desdobramentos nutricionais.Por fim, a literatura destaca importância alimentação como forte aliada para o fortalecimentodo sistema imunológico e para manutenção do peso e estado nutricional adequado, o consumo diáriode alimentos mais saudáveis e a prática de atividades regulares evitam a obesidade e uma série dedoenças crônicas que podem ser causadas pela mesma, dessa forma a adoção de práticas alimentaresmais saudáveis representa um aspecto fundamental na prevenção e enfrentamento da COVID-19.

Objetivo: Identificar as diferenças na resposta imunológica e inflamatória em homens e mulheres diante de uma infeção. Métodos: Trata-se de um estudo de revisão sistemática da literatura que utilizou como critério de inclusão artigos científicos publicados nas bases de dados eletrônicas Cientific Eletronic Libray Online (SciELO), PubMed/Medline e Bireme. Os descritores escolhidos foram “resposta inflamatória”, “dimorfismo sexual”, “infecção”. Assim, 23 artigos entre 2017 a 2020 foram escolhidos. Para alcançar o objetivo proposto, foi elaborada a seguinte questão de pesquisa: “Quais os riscos e benefícios diante das diferenças nas respostas inflamatórias entre os sexos feminino e masculino?”. Resultados: Observou-se relação do sexo com a via imunológica, então é possível que os hormônios sexuais, principalmente o estrogênio, progesterona e testosterona, possam agir na proteção ou exacerbação de uma resposta inflamatória. Além disso, percebe-se influência dos cromossomos sexuais X e Y sobre a via inflamatória, uma vez que o cromossomo X está relacionado com a proteção contra infecções e o Y como fator de exacerbação. Considerações finais: Cabe enfatizar a atividade dos hormônios sexuais e cromossomos sexuais, de modo que cada um deles possui ação específica sobre o sistema imunológico humano.

A psoríase é uma doença com padrão imunológico misto, em que envolve um conjunto de interações complexas entre o sistema imunológico, fatores ambientais e genéticos, sendo o estresse psicológico o fator precipitante mais expressivo no desencadeamento de crises da doença. Ela manifesta-se através de processos inflamatórios na forma de dermatose crônica, contudo, não se limita a pele, pois estes passam a ser responsáveis pelo surgimento de comorbidades. Com o intuito de fomentar a discussão, foi realizada uma revisão sistemática da literatura a partir da coleta de artigos científicos nas bases de dados do PubMed, Scielo e LILACS. Assim, o estudo tem como objetivo correlacionar os aspectos imunológicos e ambientais envolvidos na crise psoriática.

Pesquisa sem auxílio de agências de fomento Introdução: indivíduos com síndrome de Down (SD) apresentam maior frequência de infecções, sugerindo que pode haver alterações imunológicas nessa população. Objetivo: avaliar o perfil da resposta imune em crianças com SD a fim de reconhecer possíveis disfunções imunes associadas à infecção recorrente. Material e métodos: análise retrospectiva de 54 pacientes com SD atendidos no Hospital de Clínicas da Universidade Federal de Uberlândia no período de 2016 a 2019. Foram estudadas variáveis epidemiológicas, clínicas, citogenéticas e laboratoriais. Resultados: a amostra foi composta por pacientes na faixa etária de 2 a 20 anos, com predominância do sexo masculino. No estudo cromossômico, a trissomia simples foi a mais encontrada. Dentre as patologias associadas à SD, observaram-se principalmente alterações cardíacas e endócrinas. Os níveis de imunoglobulina (Ig) M e G foram considerados normais, enquanto os níveis de IgA embora normais, foram significativamente menores em pacientes com SD e infecção recorrente. Os números de linfócitos T CD3+, CD4+, CD8+ foram adequados para as idades, enquanto os níveis de linfócitos B CD19+ estavam ligeiramente reduzidos. Na análise da produção de anticorpos para antígenos polissacarídeos pneumocócicos após a imunização, encontramos que pacientes com SD e infecções recorrentes apresentaram soroconversão significativamente menor do que o grupo sem infecção. Conclusão: pacientes com SD apresentam uma variabilidade de comorbidades e a deficiência de anticorpos antipolissacarídeos pode ser um importante fator de comprometimento imunológico predispondo a infecções sinopulmonares e deve ser avaliado rotineiramente nos pacientes com SD e infecções recorrentes. Introduction: individuals with Down syndrome (DS) have a higher frequency of infections, suggesting that there may be immunological changes in this population. Objective: to evaluate the immune response profile in children with DS in order to recognize possible immune dysfunctions associated with recurrent infection. Material and methods: retrospective analysis of 54 patients with DS treated at the Hospital de Clínicas of the Federal University of Uberlândia from 2016 to 2019. Epidemiological, clinical, cytogenetic and laboratory variables were studied. Results: the sample consisted of patients aged between 2 and 20 years, with a predominance of males. In the chromosomal study, simple trisomy was the most common. Among the pathologies associated with DS, cardiac and endocrine alterations were mainly observed. Immunoglobulin (Ig) M and G levels were considered normal, while IgA levels, although normal, were significantly lower in patients with DS and recurrent infection. CD3+, CD4+, CD8+ T lymphocyte numbers were age appropriate, while CD19+ B lymphocyte levels were slightly reduced. In the analysis of the production of antibodies to pneumococcal polysaccharide antigens after immunization, we found that patients with DS and recurrent infections seroconverted significantly less than the group without infection. Conclusion: patients with DS present a variability of comorbidities and the deficiency of antipolysaccharide antibodies can be an important factor of immunological compromise predisposing to sinopulmonary infections and should be routinely evaluated in patients with DS and recurrent infections. Tese (Doutorado)

Immunogenic cell death (ICD) is a modality of regulated cell death that is sufficient to promote an adaptive immune response against antigens of the dying cell in an immunocompetent host. An important characteristic of ICD is the release and exposure of damage-associated molecular patterns, which are potent endogenous immune adjuvants. As the induction of ICD can be achieved with conventional cytotoxic agents, it represents a potential approach for the immunotherapy of cancer. Here, different aspects of ICD in cancer biology and treatment are reviewed.

Introduction: As part of the Special Edition 2020 I, the Revista de Educação Física / Journal of Physical Education (REF/JPE) brings scientific aspects of the practice of physical activity related to the CoViD-19 pandemic. Objective: To present and refer to REF / JPE readers, the reading of Butler and Barrientos' commentary, published in an international journal, on the effects of inadequate dietary intake over the immune system and implications for CoViD-19. Conclusion: The adoption of healthier dietary intake is of fundamental importance to favor the immune response. In obese people, the adoption of an adequate diet presents rapid anti-inflammatory effect. Thus, the relevance of the nutritional aspect is emphasized, especially in individuals at increased risk for more severe CoViD-19. Reading of the article is recommended. Introdução: Como parte da Edição Especial de 2020 I, a Revista de Educação Física / Journal of Physical Education (REF/JPE) está trazendo aspectos científicos da prática de atividade física relacionados à pandemia de CoViD-19. Objetivo: Apresentar e indicar aos leitores da REF/JPE, a leitura do comentário de Butler e Barrientos, publicado em um periódico internacional sobre os efeitos de uma dieta inadequada sobre o sistema imunológico e implicações em relação à CoViD-19. Conclusão: A adoção de dietas mais saudáveis é de fundamental importância para favorecer a resposta imunológica. Em obesos, a adoção de dietas adequadas apresenta um rápido efeito anti-inflamatório. Assim, ressalta-se a relevância dos aspectos nutricionais sobretudo em indivíduos com risco aumentado para quadros mais graves de CoViD-19. Recomenda-se a leitura do artigo.

A melatonina, comumente conhecida como “hormônio do sono” ou “hormônio da escuridão”, é uma indolamina, sintetizada predominantemente pela glândula pineal e desempenha importante ação sobre o controle do sincronismo cronobiológico, processo coordenado pelo núcleo supraquiasmático, que concomitantemente com sinais ambientais (Zeitgebers) e captação de luz pela retina, torna a regulação possível.A síntese hormonal apresenta uma sequência de reações com início na conversão do triptofano em serotonina e a posterior conversão da serotonina em melatonina, para que isso ocorra de maneira correta, é necessária a atuação de algumas enzimas importantes, mas a que efetivamente torna a conversão em melatonina possível é N-acetiltransferase (NAT), além disso, outros hormônios e neurotransmissores como noradrenalina, dopamina e GABA tem papel fundamental na regulação deste processo.A periodicidade dos ritmos circadianos regula diversos processos fisiológicos, portanto a redução na síntese de melatonina, seja pelo avanço da idade ou por outros motivos, pode levar a deterioração desses processos fundamentais na homeostase, como por exemplo o sono que é de extrema importância para a conservação da vida saudável, e que de maneira geral, está associado ao aumento da perfusão cerebral, consolidação da memória e liberação de mediadores pró-inflamatórios que promovem estimulação, proliferação, diferenciação e síntese de células imunes.A melatonina ainda apresenta capacidade de atuação direta em leucócitos, influenciando-os a um comportamento pró ou anti-inflamatório, assim como protege-os da apoptose após uma resposta imune, pelo poder antioxidante que exerce sobre as EROs liberadas no meio.De maneira menos conhecida, porém tão importante quanto, esse mesmo hormônio também desempenha sistematicamente múltiplas regulações no organismo, com atuações em diferentes sistemas onde sua ação pode ser vista contra células tumorais e como potencial tratamento suplementar para doenças como câncer, úlcera gástrica, asma, e até mesmo COVID-19.

A Leishmaniose Visceral Canina (LVC) é uma doença infecciosa de caráter crônico e zoonótico, causada por um protozoário pleomórfico da ordem Kinetoplastida, sendo o cão o principal reservatório doméstico de L. chagasi, tanto em ambiente urbano quanto rural, desse modo, o controle adequado e o tratamento eficaz para a manutenção do paciente com leishmaniose visceral canina faz-se importante. Assim, o objetivoneste estudo foi relatar a abordagem diagnóstica e terapêutica em canino com LVC, utilizando a ozonioterapia como suporte ao tratamento convencional. Foi atendido em uma clínica veterinária, na cidade de Santarém, Pará, um canino, macho, da raça dachshund, com quatro anos de idade, pesando 7 kg. O animal apresentava no dia da avaliação diminuição do apetite, apatia, êmese, emagrecimento, onicogrifose, alopecia, dermatite esfoliativa não pruriginosa e pelos quebradiços. O animal foi positivo no teste rápido (DPP®) para leishmaniose com resultado reagente. Como tratamento terapêutico de forma assíncrona, institui-se inicialmente a aplicação de miltefosina, alopurinol e domperidona, posteriormente administrou-se cinco sessões de ozonioterapia com intervalo de 7 dias para cada sessão. Como resultados observou-se que o paciente apresentou melhora clínica e sintomatológica, principalmente no tecido cutâneo após a administração do ozônio, sendo evidenciados resultados satisfatórios durante o tratamento, tornando-se uma opção viável para reestabilização e/ou fortalecimento do sistema leucocitário. Ademais, neste estudo, a ozonioterapia melhorou os achados clínicos e laboratoriais do paciente, porém, não reduziu a carga parasitária tal como demonstrado pela Reação em cadeia da polimerase(PCR) quantitativo.

Spodoptera frugiperda (Lepidoptera: Noctuidae) is the key pest in maize crops and has a major impact on world agriculture. Several studies on the biological control of this species have been carried out, and these demonstrate resistance to biological control and pesticides. However, the humoral immune system of S. frugiperda is not yet completely known in relation to the innate immune response to biological control agents. The aim of this study was to evaluate the expression of Gloverin, Sf-gallerimycin, and Attacin genes in the fat body of larvae at the 6th instar of development. Our work confirmed the expression of Sf-gallerimycin in response to the bacterial challenge, 24 h post-inoculation, and revealed the expression of Gloverin and Attacin for the first time for both bacterial challenge and entomopathogenic fungus Beauveria bassiana challenge. Gloverin and Attacin genes were upregulated under the conditions analyzed. In addition, we revealed the presence of two probable antimicrobial peptides in the hemolymph, induced 24 h post challenge with the microorganisms. The 4.7 kDa band b is probably a defensin-like peptide, and the 6.1 kDa band a is a peptide not yet reported in S. frugiperda. Spodoptera frugiperda (Lepidoptera: Noctuidae) es la principal plaga del maíz y tiene un gran impacto en la agricultura mundial. Se han realizado varios estudios sobre el control biológico de esta especie, y estos demuestran resistencia al control biológico y plaguicidas. Sin embargo, el sistema inmune humoral de S. frugiperda aún no se comprende completamente en relación con la respuesta inmune innata a los agentes de control biológico. El objetivo de este trabajo fue evaluar la expresión de los genes Gloverina, Sf-galerimicina y Attacina en el cuerpo graso de larvas en el sexto estadio de desarrollo. Nuestro trabajo confirmó la expresión de Sf-galerimicina en respuesta al desafío bacteriano, 24 h después de la inoculación, y reveló por primera vez la expresión de Gloverina y Attacina, tanto con el desafío bacteriano como con el hongo entomopatógeno Beauveria bassiana. Los genes de Gloverina y Attacina aumentaron en las condiciones analizadas. Además, revelamos la presencia de dos probables péptidos antimicrobianos en hemolinfa, inducidos 24 h después del desafío con microorganismos. La banda b de 4,7 kDa es probablemente un péptido similar a la defensina, y la banda a de 6,1 kDa es un péptido aún no informado en S. frugiperda. Spodoptera frugiperda (Lepidoptera: Noctuidae) é a principal praga da cultura do milho e tem grande impacto na agricultura mundial. Vários estudos sobre o controle biológico desta espécie têm sido realizados, e estes demonstram resistência ao controle biológico e agrotóxicos. No entanto, o sistema imune humoral de S. frugiperda ainda não é completamente conhecido em relação à resposta imune inata para agentes de controle biológico. O objetivo deste estudo foi avaliar a expressão dos genes Gloverin, Sf-galerimycin e Attacin no corpo gorduroso de larvas no 6º instar de desenvolvimento. Nosso trabalho confirmou a expressão de Sf-galerimicina em resposta ao desafio bacteriano, 24 h após a inoculação, e revelou pela primeira vez a expressão de Gloverina e Attacina, tanto com o desafio bacteriano quanto com o fungo entomopatogênico Beauveria bassiana. Os genes Gloverina e Attacina foram regulados positivamente nas condições analisadas. Além disso, revelamos a presença de dois prováveis ​​peptídeos antimicrobianos na hemolinfa, induzidos 24 h após o desafio com os microrganismos. A banda b de 4,7 kDa é provavelmente um peptídeo do tipo defensina, e a banda a de 6,1 kDa é um peptídeo ainda não relatado em S. frugiperda.

Orientador: Mary Luci de Souza Queiroz Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas Resumo: Neste trabalho tivemos como objetivo a investigação dos efeitos do extrato hidroalcoólico da Acanthospermum hispidum (ERAA.hispidum) sobre o crescimento e diferenciação das células progenitoras hematopoiéticas para a série granulócitos-macrófagos (CFU-GM) da medula óssea e do baço, em animais infectados comListeria monocytogenes. Para a realização dos experimentos camundongos Balb/c foram tratados oralmente por cinco dias com ERA A.hispidum nas doses de 100, 500 ou 1000mg/kg/dia. Ao final do tratamento, os animais foram infectados intraperitonealmente com uma dose subletal de Listeria monocytogenes (lx105/animal) e sacrificados 48 e 72 horas após a infecção. Os animais somente infectados apresentaram uma diminuição no número de colônias de precursores hematopoiéticos (CFU-GM) na medula nas 48 (I-48h) e 72 (I-72h) horas após a infecção. A administração das 3 diferentes doses de ERA A.hispidum aos animais normais conduziu a uma diminuição dosedependente do CFU-GM da medula em relação ao grupo controle. Os animais tratados/infectados com as três diferentes doses de ERA A.mspidum nas 48 (TI-48h) e 72 (TI-72h) horas após a infecção, mantiveram a diminuição provocada pela infecção no número de CFU-GM da medula óssea da infecção, sendo que esta diminuição foi mais acentuada no período de 72 horas após a infecção. Com relação à hematopoiese esplênica, a inoculação de uma dose subletal de Listeria monocytogenes levou a um aumento no número de CFU-GM no baço nas 48 e 72 horas após a infecção. Os animais normais tratados com as 3 diferentes doses de ERAA.hispidum tiveram um aumento no número de CFU-GM do baço em relação ao grupo controle. Os animais tratados/infectados (TI-48h) com as três diferentes doses de ERA A.hispidum mantiveram o número de CFU-GM do baço quando comparado ao grupo infectado (I-48h). Após 72 horas, os grupos tratados/infectados (TI-72h) com as doses de 100 e 50Orng/kg de ERA A.hispidum apresentaram uma diminuição no número de CFU-GM em relação ao infectado (I-72h), enquanto que o grupo tratado com a dose de 1000 mg!kg de EHA A.hispidum, neste mesmo período de, infecção apresentou aumento significativo no número de CFU-GM em relação a todos os demais grupos. o peso do baço dos animais tratados com as doses de 500 e 1000mg!kg de EHA A.hispidum aumentou em relação ao grupo controle. A infecção produziu aumento no peso do baço nas 48 e 72 horas em relação ao controle, sendo que os animais infectados (I-48h) tiveram aumento superior aos dos infectados (I-72h). Valores normais foram observados nos animais tratados/infectados (TI-48h) com 100,500 e 1000mglkg de EHAA.hispidum. Porém, nos animais tratados/infectados (TI-72h) com as 3 doses o peso do baço não variou em relação ao grupo infectado (I-72h). Com o objetivo de verificar a resistência à infecção dos animais previamente tratados com as 3 diferentes doses do extrato hidroalcoólico de Acanthospermum hispidum realizamos uma curva de sobrevida com camundongos Balb/c infectados com uma dose letal de L .monocytogenes. Após 30 dias de observação, 30% dos animais tratados com a dose de 100mglkg, e 60% dos animais tratados com 500 e 1000 mg!kg sobreviveram a dose letal da L .monocytogenes, enquanto que 100% dos animais do grupo controle infectado morreram em seis dias. Nossos resultados sugerem que o EHA A.hispidum aumenta a resistência dos camundongos Balb/c infectados com a L. monocytogenes através de mobilização dos precursores hematopoiéticos medulares que se alojam no baço Abstract: The objective of this work was to investigate the effects of A.hispidum hidroalcoholic extract (A. hispidum HAE) on the growth and differentiation of granulocyte-macrophage hematopoietic progenitor cells (CFU-GM) ITomthe bone marrow and spleen of mice infected with L. monocytogenes. In this study, groups of Balb/c mice were treated orally for 5 days with 100, 500 or 1000mg/kgl day of A. hispidum HAE. At the end of the treatment, mice were infected intraperitoneaIly with a subletal dose of L. monocytogenes (lxl05 bacteria/animaI) and sacrificed 48 or 72 hours after infection. The administration of the 3 different doses of A. hispidum HAE to normal mice led to a dose-dependent decrease in the number ofCFU-GM in the bone marrow in relation to controI. A decrease in the number of CFU-GM in the bone marrow of infected mice at 48 (I-48h) and 72 (I-72h) hours after infection was observed, when compared with controI. The effect observed in bone marrow CFU-GM number of infected mice was mantainned when mice were pre-treated with the 3 different doses of A. hispidum HAE, however the decrease was more accentuated at 72 hours after infection. Treatment with these 3 doses of A. hispidum HAE enhanced the number of CFU-GM in the spleen of normal mice, in relations to controls. A significant increase of splenic CFU-GM was also observed in infected mice. At 48 hours after the infection, the animais previously treated with the 3 different doses of A. hispidum HAE kept the number of CFU-GM at the infected (I-48h) leveI. At 72 hours, the groups treated/infected mice with the doses of 100 and 500mg/kg after infection had a decrease in the number of CFU-GM in relation to infected group (I-72h), while, infected mice pre-treated with 1000mg/kg showed an increase in the number of splenic CFU-Gmover the leves of infection. Spleen weight also increased in the groups of 500 and 1000mglkg of A. hispidum HAE in relation to controI. The infection also increased the spleen weight at both periods after infection. A decrease was observed in groups with the 3 doses of A. hispidum HAE at 48 hours after infection, whereas at 72 hours, no changes were produced in the spleen weight of infected mice when mice were pre-treated with the 3 doses. We ana1yzed the mice resistance previously treated with the 3 different doses of A. hispidum HAE and infected with a lethal dose of L. monocytogenes (3xl05 bacteriaJanimal) and observed during 30 days after infection. Thirty percent of the 1O0mglkgtreated mice and 60% of 500mglkg and 1000 mglkg treated mice survived , while 100% of control mice died into 6 days. Based on these findings, we suggest that A. hispidum HAE may induce mobilization of hematopoietic precursors .ITomthe bon~ marrow to the spleen, thus increasing the resistance of L. monocytogenes infected mice Mestrado Mestre em Farmacologia

Orientadores: Fernando Jose Von Zuben, Leandro Nunes de Castro Silva Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Eletrica e Computação Resumo: Este trabalho propõe uma classificação circunstancial para sistemas complexos, incluindo uma estrutura unificada de descrição a ser empregada na análise e síntese de sistemas computacionais bio-inspirados. Como um ramo dos sistemas complexos organizados, os sistemas computacionais bio-inspirados admitem uma sub-divisão em sistemas de inteligência computacional e sistemas homeostáticos artificiais. Com base neste formalismo, duas abordagens híbridas são concebidas e aplicadas em problemas de navegação autônoma de robôs. A primeira abordagem envolve sistemas classificadores com aprendizado e sistemas imunológicos artificiais, visando explorar conjuntamente conceitos intrínsecos a sistemas complexos, como auto-organização, evolução e cognição dinâmica. Fundamentada nas interações neuro-imuno-endócrinas do corpo humano, a segunda abordagem propõe um novo modelo de sistema homeostático artificial, explorando mudanças de contexto e efeitos do meio sobre o comportamento autônomo de um robô móvel. Embora preliminares, os resultados obtidos envolvem simulação computacional em ambientes virtuais e alguns experimentos com robôs reais, permitindo extrair conclusões relevantes acerca do potencial das abordagens propostas e abrindo perspectivas para a síntese de sistemas complexos adaptativos de interesse prático Abstract: This work proposes a circumstantial classification for complex systems, including a unified description structure to be employed in the analysis and synthesis of biologically inspired computing metaphors. Considered as a branch of organized complex systems, these bio-inspired computing frameworks may be subdivided into computation intelligence systems and artificial homeostatic systems. Developed under this formalism, two novel hybrid systems are conceived and applied to robot autonomous navigation problems. The first approach involves learning classifier systems and artificial immune systems, in an attempt to investigate intrinsic concepts of complex systems as self-organization, evolution, and dynamic cognition. Drawn on the principles of the human nervous, immune and endocrine systems, the second approach envisages a new model of an artificial homeostatic system to explore context changes and environmental effects on the behaviour of an autonomous robotic agent. Though preliminary, the obtained results encompass computer simulation on virtual environments in addition to a number of real robot¿s experiments. Relevant conclusions can be invoked, mainly related to the potentiality of the proposed frameworks, thus opening attractive prospects for the synthesis of complex adaptive systems of practical interest Doutorado Engenharia de Computação Doutor em Engenharia Elétrica

Orientador: Mary Luci de Souza Queiroz Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas Resumo: Neste estudo verificamos a resposta imune celular e humoral, em trabalhadores expostos ao mercúrio. Estes indivíduos são assintomáticos ou oligossintomáticos, e possuem níveis de mercúrio urinário dentro dos limites aceitáveis no campo profissional que é de 50ug Hg/g creatinina. Iniciamos este trabalho com a dosagem de imunoglobulinas séricas IgA, IgG, IgM e 19E no soro dos trabalhadores expostos ao mercúrio. Um aumento policional destas imunoglobulinas,foi observado quando comparado com a população não exposta. Por outro lado uma redução no número de linfócitos B foi observada nestes indivíduos, sugerindo uma toxicidade do mercúrio nos estágios de crescimento e diferenciação das células B, por conseguinte os linfócitos B maduros estariam super estimulados na sua função de produzir imunoglobulinas. A proporção normal de células CD4/ CD8 é em torno de 2.0 +- 1.0. A quantificação destas sub-populações linfocitárias no grupo exposto demonstrou que a proporção de CD4/ CD8 estava abaixo de 1.0, em 25 trabalhadores. A incubação de linfócitos normais com o soro do indivíduo exposto não produziu efeito significativo na resposta linfoblástica à fitohemaglutinina. Auto-anticorpos anti-DNA e anti-núcleo, não foram encontrados no soro destes indivíduo sem estudo. Efeitos adversos que ocorrem com níveis relativamente baixos de exposição ao mercúrio, são de particular interesse em relação a uma ação preventiva, já que estes efeitos são considerados como um instrumento de informação quando se discute por exemplo, limites de exposição. Nossos resultados reforçam a importância da eliminação do mercúrio em locais de trabalho. Este estudo indicou que o sistema imune pode ser estabelecido como um indicador funcional sensível a metais pesados outros contaminantes químicos presentes no meio ambiente. Abstract: ln this work the cellular and humoral immune response in mercury exposed workers has been studied. These individuals were assymptomatic and the mercury urinary concentration were below the currently accepted limit of 50ug Hg/ g creatinine. We began our investigations by determining the levels of immunoglobulins( IgA, IgG, IgM and IgE ) in the serum of exposed population. A policlonal increase of these immunoglobulins was observed when compared to the non-exposed population. On the other hand, a reduction in the numbers of B lyrnphocytes was observed in the exposed workers, thus suggesting the mercury may be toxic in the early stages of B cell growth and differentiation. However, mature B lyrnphocytes are overstimulated in their function of immunoglobulins production. A normal range for CD4/ CDS ratio is around 2.0 :t 1.0. Quantitation of these lymphocytes sub-populations in the exposed group demonstrated that the CD4 : CDS cell ratio was lower than 1.Oin 25 individuals. lncubation of lymphocytes with the serum from the exposed workers produced no significant effect on thr lymphoblastic response to phytohaemagglutinin. Auto antibodies anti-DNA and anti-nuclear were not found in the serum of the workers studied. Adverse effects that may occur at relatively low levels of exposed to mercury are of particular interest in relation to preventive action, since these effects can be regarded as a critical piece of information when discussing, for example, exposure lirnits. Our results strengthen further the argument for the elimination of mercury hazard in working places. Furthermore, our studies also indicated that the immune system may provide a sensitive functional indicator of heavy metal and other hernical contarninants present in the environment. Mestrado Mestre em Farmacologia

Orientador: Fernando Jose Von Zuben Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Eletrica e de Computação Resumo: Essa dissertação apresenta um algoritmo de detecção de falhas composto de múltiplos módulos interconectados e operando de acordo com o paradigma suportado pela Teoria do Perigo em imunologia. Esse algoritmo busca atingir características significativas que um sistema de detecção de falhas deve expressar ao monitorar um sistema telefônico. Essas características seriam basicamente a adaptabilidade, devido à forte variação que esse sistema pode ter em seus parâmetros ao longo do tempo, e a diminuição no número de falsos positivos que podem ser gerados ao se classificar como falha toda anormalidade encontrada. Cenários simulados foram concebidos para validar a proposta, sendo que os resultados obtidos foram analisados e comparados com propostas alternativas Abstract: Abstract This thesis presents a fault detection algorithm composed of multiple interconnected modules, and operating according to the paradigm supported by the Danger Theory in immunology. This algorithm attempts to achieve significant features that a fault detection system is supposed to express when monitoring a telephone system. These features would basically be adaptability, due to the strong variation that operational conditions may exhibit over time, and the decrease in the number of false positives, which can be generated when any abnormal behavior is erroneously classified as being a fault. Simulated scenarios have been conceived to validate the proposal, and the obtained results are then analyzed and compared with alternative proposals Mestrado Engenharia de Computação Mestre em Engenharia Elétrica

Orientador : Mary Luci de Souza Queiroz Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas Resumo: Neste trabalho investigamos alguns efeitos do mercúrio sobre o sistema imunológico. Foram estudados 51 trabalhadores expostos ao metal, assim como 51 indivíduos não-expostos (grupo controle). Os níveis urinários de mercúrio, determinados pelo método de absorção atômica, foram utilizados como índices biológicos de exposição. Foram estudadas a capacidade fagocitária e lítica de neutrófilos frente à Candida albicans e Candida pseudotropicalis, atividade quimiotática de neutrófilos e a capacidade proliferativa de linfócitos em resposta ao mitógeno fitohemaglutinina (PHA). O estudo da função esplênica foi efetuado através da contagem de hemácias com irregularidades de superfície (pits). Foi realizada uma 2ª avaliação destes parâmetros (intervalo de 6 meses). nos trabalhadores remanescentes, após uma melhoria efetuada nas condições de higiene da firma. Inicialmente, noventa e dois porcento dos trabalhadores estudados apresentavam níveis urinários de mercúrio abaixo dos limites de tolerância biológica (até 50 ug/g de creatinina). Após o intervalo de 6 meses, observamos, nos mesmos trabalhadores, uma redução significativa nestes níveis (p

Orientador: Fernando Jose Von Zuben Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Eletrica e Computação Resumo: O uso da abordagem ensembles tem sido bastante explorado na última década, por se tratar de uma técnica simples e capaz de aumentar a capacidade de generalização de soluções baseadas em aprendizado de máquina. No entanto, para que um ensemble seja capaz de promover melhorias de desempenho, os seus componentes devem apresentar bons desempenhos individuais e, ao mesmo tempo, devem ter comportamentos diversos entre si. Neste trabalho, é proposta uma metodologia de criação de ensembles para problemas de classificação, onde os componentes são redes neurais artificiais do tipo perceptron multicamadas. Para que fossem gerados bons candidatos a comporem o ensemble, atendendo a critérios de desempenho e de diversidade, foi aplicada uma meta-heurística populacional imuno-inspirada, denominada opt-aiNet, a qual é caracterizada por definir automaticamente o número de indivíduos na população a cada iteração, promover diversidade e preservar ótimos locais ao longo da busca. Na etapa de seleção dos componentes que efetivamente irão compor o ensemble, foram utilizadas seis técnicas distintas e, para combinação dos componentes selecionados, foram adotadas cinco estratégias. A abordagem proposta foi aplicada a quatro problemas de classificação de padrões e os resultados obtidos indicam a validade da metodologia de criação de ensembles. Além disso, foi verificada uma dependência entre o melhor par de técnicas de seleção e combinação e a população de indivíduos candidatos a comporem o ensemble, assim como foi feita uma análise de confiabilidade dos resultados de classificação Abstract: In the last decade, the ensemble approach has been widely explored, once it is a simple technique capable of increasing the generalization capability of machine learning based solutions. However, an ensemble can only promote performance enhancement if its components present good individual performance and, at the same time, diverse behavior among each other. This work proposes a methodology to synthesize ensembles for classification problems, where the components of the ensembles are multi-layer perceptrons. To generate good candidates to compose the ensemble, meeting the performance and diversity requirements, it was applied a populational and immune-inspired metaheuristic, named opt-aiNet, which is characterized as being capable of automatically determining the number of individuals in the population at each iteration, promoting diversity and preserving local optima through the search. In the component selection phase, six distinct techniques were applied and, to combine these selected components, five strategies were adopted. The proposed approach was applied to four pattern classification problems and the obtained results indicated the validity of the methodology to synthesize ensembles. It was also verified a dependence of the best pair of selection and combination techniques on the population of candidates to compose the ensemble, and it was made an analysis of the confidence of the classification results Mestrado Engenharia de Computação Mestre em Engenharia Elétrica

Orientador: Antonio Condino Neto Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas Resumo: As imunodeficiências do sistema complemento são condições raras, correspondendo a 2%-5% das imunodeficiências primárias. Quanto às deficiências do fator I, existem aproximadamente 27 indivíduos diagnosticados. O fator I é uma enzima que regula a atividade da via clássica e alternativa. Na deficiência do fator I ocorre redução da atividade de ambas as vias, mas principalmente da via alternativa, e diminuição nos níveis de C3, fator B, properdina e fator H, por consumo. A redução dos níveis de C3 prejudica a opsonização de microorganismos, predispondo a infecções de repetição nas vias aéreas superiores, meningites, septicemia, por bactérias do tipo Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae e Neisseria meningitidis. Neste trabalho foram diagnosticados 3 indivíduos (B4, B6, B7) de uma mesma família com deficiência do fator I (homozigotos). Os pais, que são primos de segundo grau, e três dos irmãos (B2, B3, B8) apresentam redução de 50% nos níveis de fator I (heterozigotos). O padrão de transmissão foi autossômico recessivo. A imunoeletroforese do fator H está alterada. Em todos os pacientes foi realizado hemograma, dosagem de ímunoglobulinas, contagem de linfócitos T, teste de hipersensibilidade retardada, com resultados normais. Também foi feito estudo dos fagócitos (estudo da migração, fagocitose, atividade do sistema NADPH oxidase). Nos deficientes do fator I, verificou-se comprometimento da migração espontânea de mononucleares e quimiotaxia de polimorfonucleares (sem reversão do defeito após adição de soro com níveis normais de C3). A fagocitose está diminuída nestes pacientes, entretanto há recuperação da função após adição de soro normal. A atividade da NADPH oxidase foi normal. O defeito de migração celular pode ser decorrente de um defeito intrínseco da célula, ou por comprometimento de receptores de membrana para o complemento Abstract: Factor I deficiency causes a permanent, uncontrolled activation of the alternative pathway resulting in an increased turnover of C3 and consumption of factor B, factor H and properdin. Factor I deficiency is clinically associated with recurrent bacterial infections already in early infancy, mainly affecting the upper and lower respiratory tract, or presenting as meningitis or septicemia. We here report on a Brazilian family (n=9) with known consanguinity, where in 3/7 children, suffering from chronic otitis, meningitis, and respiratory infections, a complete factor I deficiency was recognized. One of the pacients died after fulminant sepsis. Hemolytic activity of the alternative pathway was not detectable in the patients' sera due to decreased plasma concentrations of C3, factor B and properdin. As a consequence of factor I deficiency, C3b could not be metabolized with Che result that no C3-derived split products (C3dg/C3d) were detectable in the patients' sera. In vitro reconstitution with purified factor I restored the regulatory function in the patients' sera with the subsequent cleavage of C3b to C3c and C3dg. Factor H levels were decreased in all patients' sera and found to be tightly complexed with C3b resulting in a modified electrophoretic mobility. Upon factor I reconstitution, factor H was released from C3b regaining its pi electrophoretic mobility. Complement-mediated biological functions like opsonization of bacteria, chemotactic activity and phagocytosis in these patients were impaired. The parents (cousins, 2nd degree) and 3A siblings had significantly reduced factor I plasma levels without further alteration in their complement profile. 3 of these obviously heterozygously deficient family members suffered from recurrent bacterial infections of different frequency and severity Mestrado Farmacologia Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Carmino Antonio de Souza Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas Resumo: Estudou-se 77 pacientes adultos portadores de linfoma não Hodgkin (LNH) ao diagnóstico, atendidos no Hospital das Clínicas da Universidade Estadual de Campinas. Classificou-se os LNH histologicamente segundo Kiel. Clinicamente avaliou-se os pacientes através da história e do exame fisico e laboratorialmente pela análise do sangue periférico (hemo grama e contagem de reticulócitos), dosagem de bilirrubinas, urobilinogênio urinário e demais exames necessários ao estadiamento clínico. Estadiou-se os linfomas de acordo com os critérios propostos em Ann Arbor e as leucemias linfocíticas crônicas segundo Rai. Estudou-se os perfis imunohematológicos dos pacientes através dos seguintes testes: determinação de grupo sanguíneo ABO/Rh, teste direto da antiglobulina com soros poliespecífico (anti-IgG, anti-C3b e allti-C3d) e monoespecíficos (anti-IgG, anti-IgM, anti-C3, anti-C3d e anti-C4), pesquisa e identificação de anticorpos séricos pelas técnicas em tubo com polietilenoglicol, meio de baixa força iônica (LISS) e hemácias pré tratadas com enzimas e pela técnica de gel-centrifugação. Os resultados da avaliação imunohematológica dos pacientes portadores de LNH foram: 1. A freqüência de autoanticorpos anti-eritrocitários foi de 29,9% (provável auto anti-I e auto-IgG sem especificidade definida); 2. O quadro de hemólise clínica e laboratorial ocorreu em 1,3% dos pacientes; 3. Houve uma tendência dos linfomas de baixo grau de malignidade serem assocíados à presença de autoanticorpos anti-eritrocitários; 4. Não houve associação entre o tipo imunológico dos LNH (B e T) e do estadiamento clínico dos linfomas com a presença dos autoanticorpos. Conclui-se que a alta incidência de autoanticorpos anti-eritrocitários encontrada em nossa casuística provavelmente esteja relacionada com as alterações imunes próprias dos LNH Abstract: Seventy-seven adult patients with non Hodgkin's lymphoma (NHL) were studied at the time of diagnosis at University Hospital of State University of Campinas from March 1992 to November 1993. Histological subgrouping of NHL was performed according to the Kiel criteria. All patients were characterized by clinical and laboratorial examination, which included cytology of peripheral blood, reticulocyte count, bilirubin, urinary urobilinogen, haptoglobin, exams for staging of lymphoma and immunohematologic evaluation. The patients were staged according to the principIes of the Ann Arbor classification and the cases of chronic lymphocytic leukemia according to Ray clinical staging system. Immunohematology investigation screenings were: determination of blood groups ABO/Rh, direct antiglobulin reaction with polyspecific antiglobulin reagents (anti-IgG, anti-Cb anti-C3d) and monospecific reagents (anti-IgG, anti-IgM, anti-C3, anti-C3d, anti-C4), detection ofblood groups antibodies in serum by indirect antiglobulin test (polyethylene glycol, low ionic strength solution and enzyme-treated ceUs). Whenever an antibody was found on screening, its specificity was determined using a suitable panel of red cells. 1. Our results of the immunohematological evaluation of the patients with NHL showed that: 1-There were 29.87% of the patients 'with autoantibodies against erythrocytes (IgM with probable specificity of auto anti-I and IgG with specificity serologically indlstinguishable), without clinical disorders; 2. The hemolytic anemia occurred in 1.29% of the patients. This value is compatible with the literature; 3. A weak correlation existed between the low grade lymphomas and erythrocyte autoantibodies; 4. No correlation existed between the type immunologic of lymphoma (B e T) and staging of NHL with erythrocyte auto antibodies. We have concluded that probably the high incidence of autoantibodies against erythrocytes would be related to the autoimmune derangements caused by non Hodgkin's lymphoma Mestrado Mestre em Clínica Médica

Orientador : Fernando Jose Von Zuben Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Eletrica e de Computação Doutorado

Orientador: Licio Augusto Velloso Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas Resumo: Muitos dos efeitos da leptina no sistema imune dependem de sua capacidade de modular a expressão de citocinas e a apoptose no timo. Surpreendentemente, alguns desses efeitos são dependentes de transdução de sinal através do IRS1/PI3-quinase, mas independentes da ativação da JAK2. Uma vez que todos os efeitos conhecidos da leptina em diferentes tipos celulares e tecidos parecem ser dependentes da ativação da JAK2, nós aventamos a hipótese de que, pelo menos para o controle da função tímica, outra quinase, até então desconhecida, poderia mediar a transdução do sinal da leptina através do ObR e pela cascata de sinalização do IRS1/PI3-quinase. Neste trabalho, mostramos que a tirosina quinase Fyn está constitutivamente associada ao ObR em células tímicas. Após um estímulo agudo por leptina, a Fyn é rapidamente fosforilada em tirosina, ativando-se e associando-se ao IRS1 de forma transiente. Todos estes efeitos são independentes da ativação da JAK2, e com a inibição da Fyn a transdução de sinal através do IRS1/PI3-quinase é abolida. Além disso, a inibição da Fyn modifica significativamente os efeitos da leptina sobra a expressão de citocinas no timo. Sendo assim, no timo, a Fyn atua como uma tirosina quinase que transduz o sinal da leptina independentemente da ativação da JAK2, e medeia alguns dos efeitos imunomodulatórios da leptina neste tecido Abstract: Several effects of leptin in the immune system rely on its capacity to modulate cytokine expression and apoptosis in the thymus. Surprisingly, some of these effects are dependent on signal transduction through the IRS1/PI3-kinase, but not on the activation of JAK2. Since all the well known effects of leptin in different cell types and tissues seem to be dependent on JAK2 activation, we hypothesized that, at least for the control of thymic function, another, unknown kinase could mediate the transduction of the leptin signal from the ObR towards the IRS1/PI3-kinase signaling cascade. Here, we show that the tyrosine kinase Fyn is constitutively associated with the ObR in thymic cells. Following a leptin stimulus, Fyn undergoes an activating tyrosine phosphorylation and a transient association with IRS1. All these effects are independent on JAK2 activation and upon Fyn inhibition the signal transduction towards IRS1/PI3-kinase is abolished. In addition, the inhibition of Fyn significantly modifies the effects of leptin on thymic cytokine expression. Therefore, in the thymus, Fyn acts as a tyrosine kinase that transduces the leptin signal independently of JAK2 activation, and mediates some of the immunomodulatory effects of leptin in this tissue Doutorado Biologia Estrutural, Celular, Molecular e do Desenvolvimento Doutor em Fisiopatologia Médica

Orientador: Renata de Oliveira Mattos-Graner Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba Resumo: Streptococcus mutans (SM) são os principais patógenos da cárie dental. Neste estudo exploramos a influência do sistema imune de mucosa na infecção inicial pelo SM em crianças altamente expostas a este microrganismo. Cento e dezenove crianças, com idade inicial entre 5 a 13 meses de idade foram analisadas no início do estudo (T0) e após 6 (T6), 12 (T12) e 18 (T18) meses, amostras bucais foram coletadas para determinação dos níveis de infecção por SM, através do cultivo em mitis salivarius ágar com bacitracina. Os níveis de IgA, IgA1 e IgM foram também determinados em amostras de saliva, através de ensaios de ELISA. Um subgrupo de 21 crianças infectadas por SM (entre T0 e T6) foram pareadas a outras 21 crianças da amostra sem níveis detectáveis de SM. As reações entre anticorpos IgA da saliva com antígenos (Ags) de SM foram comparadas entre estes subgrupos, através de ensaios de western blot. A intensidade das bandas reativas foi determinada através da densitometria e expressas como unidades arbitrárias (ua). A reatividade de IgA salivar com peptídeos derivados da seqüência da GbpB, preditos como regiões ligantes à MHC de classe II, foram também avaliados através de multiplex com o Luminex. Os níveis salivares de IgA aumentaram com a idade (de 82,4 a 823,4µg/ml), enquanto que os níveis de IgM mantiveram-se baixos durante todo o estudo (média:4,2-2,8 µg/ml). Os níveis de infecção por SM foram maiores em T6 (média:45 ufc/área) e uma forte resposta de IgA aos Ags de SM pôde ser detectada logo aos 6 meses de idade. A resposta de IgA anti-GbpB foi observada em 38% das 21 crianças infectadas por SM, enquanto que 73% dos pares não infectados apresentavam estes anticorpos (Qui-quadrado, p

Orientador: Margareth Castro Ozelo Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas Resumo: Uma complicação decorrente do tratamento da hemofilia é a formação de anticorpos neutralizadores da atividade coagulante do fator VIII ou IX (inibidores). Diversos fatores estão relacionados com o desenvolvimento desses inibidores em indivíduos com hemofilia, incluindo fatores genéticos e ambientais. Entre os fatores genéticos, a mutação associada ao diagnóstico da hemofilia é um fator de risco bem documentado. Recentemente foi observada a maior ocorrência de inibidores em indivíduos da etnia negra. O objetivo deste trabalho foi analisar os aspectos genéticos e não genéticos envolvidos no desenvolvimento de inibidores. Foram incluídos nesse estudo 411 pacientes hemofílicos, sendo 321 com hemofilia A (HA) (238 famílias) e 99 com hemofilia B (HB) (59 famílias). A presença de inibidores foi constatada apenas entre os pacientes HA graves. Do total de 220 HA graves desse estudo, 46 (20,9%) apresentaram inibidor detectado em pelo menos uma ocasião após sua inclusão no estudo. Mutações consideradas de alto-risco para o desenvolvimento de inibidores foram identificadas em 125/220 pacientes HA graves (58,8%), e 33 deles desenvolveram inibidores (26,4%). Considerando o grupo étnico de acordo com traços físicos e ancestralidade, 38% dos pacientes HA graves foram classificados como negros. A incidência de inibidores foi maior nesse grupo de pacientes (31% do total de pacientes HA graves classificados como negros) quando comparada aos pacientes caucasóides (20% do total de pacientes HA graves classificados como caucasóides). Recentemente, foi observado que a maior incidência de inibidores em uma população norte-americana de pacientes com HA, estava relacionada com a presença de determinados haplótipos no gene do fator VIII. Esta observação poderia ser explicada pelo fato dos as proteínas expressas pelos haplótipos que aparecem exclusivamente entre a população negra (denominados H3 e H4), estarem ausentes nos concentrados de fator VIII recombinantes utilizados rotineiramente no tratamento desses pacientes. Em nossa análise a presença desses haplótipos não está relacionada com a maior freqüência de inibidor na população negra desse estudo. Além disso, a distribuição dos diferentes haplótipos do gene do fator VIII, classificados de H1 a H6, foi distinta entre todos os grupos étnicos brasileiros e norte-americanos. Essa observação pode ser explicada pela origem distinta entre os negros que imigraram da África para o Brasil e para a América do Norte, assim como o alto índice de miscigenação de nossa população. Em outra fase desse estudo, foi realizada a análise comparativa da expressão gênica a partir de amostras de RNA mensageiro (RNAm) extraídas em pool leucocitário de pacientes com HA grave, com ou sem a presença de inibidores. Na avaliação que incluiu numa primeira análise pacientes de uma mesma família discordante para a presença de inibidor e, em uma segunda fase, indivíduos não relacionados, foram observados 50 genes mais expressos e 16 genes menos expressos em pacientes com inibidor em comparação aos sem inibidor. Dentre esses genes foram selecionados dez, levando-se em conta sua participação na resposta imune ou sua correlação prévia com o desenvolvimento de inibidores em outros estudos. Pela técnica de PCR em tempo real, observou-se que os genes da interleucina 8 (IL-8) e da cistatina F (CST7) demonstraram ser mais expressos em pacientes com inibidor, enquanto que o gene da interleucina 10 (IL-10) foi menos expresso nesse grupo de pacientes. Dessa forma, nossos resultados fortalecem a idéia de que o mecanismo de desenvolvimento de inibidores em hemofilia é complexo e ainda não totalmente esclarecido e que existe um grande envolvimento de diversos genes relacionados com sistema imune na formação desses inibidores. O estudo em diferentes populações é uma importante etapa para o entendimento dos fatores de risco para o desenvolvimento de inibidores. Esse foi o primeiro trabalho realizado no Brasil incluindo pacientes de diversas regiões e analisando simultaneamente diferentes fatores e seu envolvimento com o desenvolvimento de inibidores. A determinação desses fatores de risco ajudará no futuro a determinar um tratamento diferenciado para o controle e sobretudo prevenção do desenvolvimento de inibidores Abstract: The most serious complication of the treatment of hemophilia is the development of neutralizing antibodies to coagulation activity of factor VIII or IX (inhibitors). Several risk factors are related to the development of these inhibitors in patients with hemophilia, including genetic and environmental factors. Among genetic factors, the mutation associated with the diagnosis of hemophilia is a risk factor well documented. Recently, it was observed a higher incidence of inhibitors in African ancestry patients. The aim of this study was to analyze the genetic and non-genetic factors involved in the development of inhibitors. The study included 411 hemophilia patients, of which 321 with hemophilia A (HA) and 99 with hemophilia B (HB), belonging to a total of 238 and 59 families, respectively. The inhibitors were observed only in severe HA patients. From the 220 severe HA, 46 (20.9%) had inhibitor. The high risk mutation for the development of inhibitors were identified in 125 / 220 (58.8 %) severe HA patients, and 33 (26.4 %) of them developed inhibitors. Considering the ethnic group according to physical traits and ancestry, 38 % of severe HA patients were classified as black. The incidence of inhibitors is higher in this group of patients (31%) when compared to Caucasian patients (20%). The higher risk of inhibitor among African-Brazilians, could not be explained by the presence of the distinct factor VIII haplotypes, such as H3 and H4, as suggested in previous study. In fact, the prevalence rates of these haplotypes were distinct between Brazilians and North Americans, probably due to the fact that migrations of blacks to Brazil and to North America were originated from different geographic areas of Africa. In another phase of this study, we performed a comparative analysis of gene expression in samples of messenger RNA (mRNA) extracted from leukocytes of inhibitor and non-inhibitor patients with severe HA was performed. The evaluation consisted of an initial analysis of severe HA patients siblings, or from the same family, discordant for inhibitor development and in a second phase a group of unrelated individuals. Using the bioarrays technology 50 genes were upregulated and 16 were downregulated in inhibitor patients compared with non-inhibitor patients. Ten genes were selected among them, which are involved in immune response and were related to inhibitors development in other studies. It was observed by real time PCR that the genes for interleukin 8 (IL-8) and cystatin F (CST7) were upregulated and for interleukin 10 (IL-10) was downregulated in inhibitor patients. In conclusion, our results strengthen the idea that the mechanism of inhibitor development in hemophilia is complex, not clear and there is a large involvement of several genes related to the immune system in the development of these inhibitors. The study in different populations is important to understand the risk factors for the development of inhibitors. This is the first work in Brazil, to study patients from various regions and to performe analysis of different factors and their involvement in the development of inhibitors. The determination of these risk factors will help in the future to determine differential treatment for the control and in particular, for preventing the development of inhibitors Doutorado Clínica Médica Doutor em Clínica Médica

Orientador: Gláucia Maria Pastore Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos Resumo: O yacon (Smallanthus sonchifolius), raiz andina, tem se destacado pelo seu potencial prebiótico devido aos elevados teores de frutooligossacarídeos (FOS) e inulina em sua composição. O objetivo deste trabalho foi verificar se a alimentação com yacon alteraria o sistema imune de camundongas BALB/c e se sua ingestão regular seria capaz de modular a resposta intestinal induzida pela instilação retal de ácido trinitrobenzeno sulfônico (TNBS). Para avaliar os efeitos do consumo regular de yacon sobre o sistema imune murino, camundongas BALB/c com oito semanas de idade foram divididas em quatro grupos experimentais alimentados por trinta dias com dieta: controle AIN-93M; 5% de FOS comercial; 3% e 5% FOS de yacon. O peso corporal e consumo da ração foram acompanhados semanalmente. Os níveis de anticorpos IgA, IgM, IgG séricos e IgA fecal, a produção de óxido nítrico (NO) por macrófagos, a frequência de linfócitos T e B sanguíneos e a proliferação de células esplênicas in vitro foram avaliados. Para avaliar o efeito do consumo regular de yacon sobre a colite experimental, metade dos animais que ingeriram as dietas teste foi instilada por via retal durante sete dias consecutivos com solução contendo TNBS, enquanto que o restante recebeu veículo (etanol). Foram analisados o peso corpóreo, histopatologia dos intestinos, bem como a proliferação de células esplênicas e dosagem de citocinas. Os animais alimentados com yacon apresentaram respostas semelhantes aos camundongos que ingeriram as demais dietas em relação ao ganho de peso, consumo de ração, níveis de anticorpos séricos, frequência de linfócitos T e B sanguíneos e produção de NO por macrófagos. Entretanto, observou-se um aumento significativo tanto na secreção de IgA fecal quanto na proliferação de células esplênicas de animais alimentados com yacon. Os camundongos alimentados com yacon sofreram menor perda de peso após instilação com TNBS do que os animais alimentados com AIN93M e FOS. Os animais que consumiram yacon apresentaram intestinos íntegros e funcionais, oposto ao observado nos animais dos demais grupos. Não foram encontradas diferenças significativas na proliferação de células esplênicas e produção de citocinas entre os diferentes grupos, salvo a maior produção de IL-17 e menor secreção de IL-10 nas culturas de células de animais alimentados com FOS. Nossos dados indicam que o consumo regular de yacon não acarreta efeitos adversos à fisiologia e sistema imune murino, levando à melhora no quadro de colite induzida por instilação com TNBS Abstract: Yacon (Smallanthus sonchifolius), Andean root, has been recognized for its prebiotic potential due to its high levels of fructooligosaccharides (FOS) and inulin. The objective of this study was to verify if the regular consumption of yacon alters the immune system of BALB/c mice and if it may modulate intestinal inflammation induced by the rectal instillation of trinitrobenzene sulfonic acid (TNBS). To evaluate the effects of regular yacon consumption on the murine immune system, eight-week-old BALB/c mice were divided into four experimental groups fed for thirty days with diet: control AIN-93M, 5% commercial FOS, or 3% or 5% yacon FOS. Body weight and food consumption were monitored weekly. The serum levels of IgA, IgM and IgG and fecal IgA, the nitric oxide (NO) production by macrophages, the frequency of T and B lymphocytes in the blood and the proliferation of spleen cells (in vitro) were evaluated. To evaluate the effects of regular yacon consumption on experimental colitis, half of the animals was instilled rectally with a solution containing TNBS for seven consecutive days while the rest received vehicle (ethanol). We analyzed the body weight, histopathology of the intestines, spleen cell proliferation and cytokine production. The animals fed yacon showed responses similar to mice that consumed the other diets in relation to weight gain, food intake, serum antibody levels, frequencies of T and B lymphocytes in the blood and NO production by macrophages. There was a significant increase in both fecal IgA secretion and the proliferation of spleen cells from animals fed yacon. The mice fed yacon suffered less TNBS-induced weight loss than animals fed the FOS and AIN93M diets. The animals that consumed yacon also showed intact and functional intestines, as opposed to the other groups of animals. There were no significant differences in spleen cell proliferation or cytokine production among groups, except for the increased production of IL-17 and lower IL-10 secretion in the cultures of cells from animals fed FOS. Our data indicate that the regular consumption of yacon does not cause adverse effects on the physiology or the murine immune system and that yacon consumption ameliorates colitis induced by TNBS instillation Doutorado Ciência de Alimentos Doutor em Ciência de Alimentos

Orientadores: Patrícia Maria Bergamo Favaro, Sara Teresinha Olalla Saad Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas Resumo: As síndromes mielodisplásicas (SMD) são um grupo heterogêneo de doenças caracterizadas por hematopoese ineficaz e risco de progressão para leucemia mieloide aguda (LMA). SMD de baixo de risco é caracterizada por um aumento de apoptose na medula óssea e alterações clínicas com perfil autoimune, enquanto que na SMD de alto risco há uma evasão imune, baixa apoptose e danos secundários ao DNA, contribuindo para a progressão para LMA. Essas evidências, junto com os dados de terapia imunossupressora em pacientes com SMD, sugerem o papel do sistema imune na progressão desta doença. Entretanto, o papel do sistema imune não é claro, e estudos que abordem o perfil das células T são importantes para o melhor entendimento da patogênese da SMD. Formin-like 1 (FMNL1) pertence à família de proteínas formina, indispensáveis para muitos processos fundamentais actina-dependentes. FMNL1 é restritamente expressa em células derivadas de linhagem hematopoética e superexpressa em células neoplásicas hematopoéticas malignas. Recentemente, foi descrito que FMNL1 está envolvida no processo de citotoxicidade de células CD8+. Desse modo, estudar a expressão de FMNL1 tanto nos linfócitos como nas células da MO dos pacientes com SMD, poderia contribuir para o melhor entendimento do papel dessa nova proteína neste modelo de neoplasia hematológica. No presente estudo, foi observada uma diminuição significativa na contagem absoluta de linfócitos periféricos no grupo SMD, após ajuste para idade, quando comparada com o grupo de doadores saudáveis (controle). Entretanto, houve um aumento da frequência de células CD3+, resultante do aumento significativo das subpopulações de células CD3+CD4+ no grupo de alto risco e CD3+CD8+ no grupo de baixo risco, de acordo com as classificações FAB e WHO. A razão CD4:CD8 encontrou-se aumentada no grupo de alto risco comparado com o de baixo risco. Dependência transfusional foi correlacionada positivamente com a porcentagem de CD3+CD4+, enquanto que a idade dos pacientes correlacionou-se de forma negativa com a porcentagem de CD3+ e CD3+CD8+. Os níveis de expressão de FOXP3, nas células CD3+ de sangue periférico, foram significativamente menores no grupo de baixo risco quando comparado com o grupo controle, e esse padrão se repetiu para a expressão de IL10. A quantificação dos transcritos de IL10 correlacionou-se negativamente com a porcentagem de células CD3+CD8+. Em conclusão, evidenciamos que pacientes com SMD apresentaram um menor número de linfócitos, porém com a frequências das células T CD3+, CD3+CD4+ e CD3+CD8+ aumentadas. Os pacientes de baixo risco apresentaram uma diminuição da expressão de FOXP3 e de IL10, quadro característico de um microambiente apoptótico e inflamatório. Já no grupo de alto risco, a expressão de FOXP3 e de IL10 aumenta em relação ao grupo de baixo risco. É interessante ressaltar que nos pacientes com SMD houve uma correlação entre o aumento da expressão de IL10 e a diminuição das células T CD3+CD8+, sugerindo a contribuição das Tregs na progressão da doença através da produção de IL10. A análise da expressão de FMNL1 em células CD3+ de sangue periférico não denotou diferenças significativas entre os pacientes com SMD e o grupo controle. Entretanto observou-se uma correlação positiva entre a expressão de FMNL1 e o número de células CD3+CD4+ e ambos com a dependência transfusional. Quanto à expressão de FMNL1 em amostras de MO, houve uma expressão significativamente menor nos pacientes com SMD quando comparado com as células de doadores normais, além de uma correlação negativa entre FMNL1 e número de citopenias. Usando modelos de linhagens celulares hematopoéticas para a diferenciação, observou-se um aumento significativo na expressão gênica e protéica de FMNL1 durante a diferenciação megacariocítica. Esses resultados sugerem a participação de FMNL1 na ativação de linfócitos CD4+ no sangue periférico e na diferenciação hematopoética na medula óssea Abstract: Myelodysplastic syndromes (MDS) are a heterogeneous group of disorders characterized by ineffective hematopoiesis and risk of progression towards acute myeloid leukemia. Low-risk MDS is characterized by increased apoptosis in the bone marrow (BM), with a clinical autoimmune profile, whereas in high-risk MDS an immune evasion, low apoptosis and secondary DNA damage occurs, contributing to the progression of AML. This evidence, together with the data of immunosuppressive therapy in patients with MDS, suggests a role of the immune system in the progression of this disease. However, this role of the immune system is remains unclear, and studies that address the profile of T cells are important for a better understanding of the pathogenesis of MDS. Formin-like 1 (FMNL1) belongs to the family of proteins formina indispensable for many fundamental processes in actin-dependent. FMNL1 is strictly expressed in hematopoietic lineage derived cells, and overexpressed in malignant hematopoietic neoplastic cells. FMNL1 has recently been reported to be involved in the cytotoxicity of CD8+ cells. Thus, studies on the expression of FMNL1, both in lymphocytes and BM cells of MDS patients, could contribute to a better understanding of the role of this protein in this new model of hematologic malignancy. In the present study, we observed a significant decrease in absolute peripheral lymphocyte counts in the MDS group, after adjusting for age, compared with the healthy donor group (control). However, there was an increased frequency of CD3+, resulting in a significant increase of the CD3+CD4+ subpopulation in high risk and CD3+CD8+ in MDS low risk, according to FAB and WHO classifications. CD4:CD8 ratio was increased in the high risk when compared to the low risk group. Transfusion dependence was positively correlated with the percentage of CD3+CD4+, whereas the age of patients correlated negatively with the percentage of CD3+ and CD3+CD8+. The expression levels of FOXP3, in peripheral blood CD3+ cells, was significantly lower in the low risk group compared to controls and this pattern was repeated for the expression of IL10. Interestingly, IL10 transcripts correlated negatively with the percentage of CD3+CD8+. In conclusion, we found that patients with MDS had a lower lymphocyte number, however presented an increased frequency of CD3+ and CD3+CD8+ T cells. Our low risk patients showed a decreased expression of FOXP3 and IL10, characteristic of apoptotic and inflammatory microenvironment. In the high risk group, the expression of FOXP3 and IL10 was normal. Interestingly, there was a correlation between increasing expression of IL10 and reduction of CD3+CD8+ T cells in patients, suggesting the contribution of Treg in disease progression due to IL10 production. Analysis of FMNL1expression in CD3+ cells of peripheral blood showed no significant differences between patients with MDS and the control group. However, there was a positive correlation between FMNL1 expression and the number of CD3+CD4+, and both were transfusion dependence. FMNL1 expression in BM samples was significantly lower in MDS patients when compared with cells from normal donors, and there was a negative correlation between FMNL1 and number of cytopenias. Using models of hematopoietic cell lineages for differentiation, we observed an increase in gene and protein expression of FMNL1 during megakaryocytic and granulocytic differentiation. These results suggest the participation of FMNL1 in the activation of CD4+ lymphocytes in peripheral blood and bone marrow hematopoietic differentiation Mestrado Fisiopatologia Médica Mestre em Ciências

Orientadores: Levy Boccato, Romis Ribeiro de Faissol Attux Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Elétrica e de Computação Resumo: O problema quadrático de alocação (QAP, do inglês quadratic assignment problem) é um dos problemas de otimização combinatória mais estudados devido à sua dificuldade inerente e a uma grande gama de aplicações. Instâncias de tamanho médio e grande do QAP já apresentam custos proibitivos para algoritmos exatos, motivando assim o uso de heurísticas. Em particular, sistemas imunológicos artificiais vêm ganhando espaço na última década, especialmente devido a sua capacidade de identificar e manter ótimos locais na população. Neste trabalho, é proposto um algoritmo imuno-inspirado para a solução do QAP. O método, chamado de copt-aiNet[QAP], combina elementos de outros dois algoritmos para otimização combinatória ¿ copt-aiNet e cop-aiNet[C] ¿ e explora novos operadores de busca local e inserção de novos indivíduos. A performance do algoritmo foi analisada em detalhes para diversas instâncias do QAP, e os resultados obtidos mostram que o algoritmo proposto é competitivo em relação à qualidade da melhor solução encontrada, quando comparado com o estado da arte para o QAP, e também do ponto de vista de preservação da diversidade da população Abstract: The quadratic assignment problem (QAP) is one of the most studied in the combinatorial optimization literature due to its inherent difficulty and wide scope of applications. Medium and large-sized QAP instances are not yet practically solvable to optimality, which motivates the use of heuristic methods. In particular, artificial immune systems have gained space in the last decade, especially in view of their intrinsic capability of simultaneously identifying and maintaining local optima in the population. In this work, we propose an immune-inspired algorithm especially tailored for solving the QAP. The method, named copt-aiNet[QAP], combines elements of two other immune algorithms for combinatorial optimization ¿ copt-aiNet and cob-aiNet[C] ¿ and explores new local search and insertion operators. A detailed performance analysis is carried out considering several instances of the QAP, and the obtained results show that the proposed method is competitive with respect to the best solution found, when compared with state-of-the-art QAP algorithms, and also in preserving the population diversity Mestrado Engenharia de Computação Mestre em Engenharia Elétrica

Orientador: Margareth Castro Ozelo Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas Resumo: Os principais problemas relacionados ao tratamento de pacientes portadores de hemofilia A estão relacionados ao uso terapêutico de fator VIII (FVIII), sendo estes o desenvolvimento de anticorpos neutralizantes anti-FVIII (inibidores), e o desenvolvimento de reações anafiláticas, que são eventos raros, no entanto potencialmente graves. As informações quanto aos isotipos de imunoglobulinas associados a estas duas situações clínicas ainda é limitado. O objetivo deste projeto foi avaliar as características da resposta imune humoral em pacientes com hemofilia A que apresentam inibidor e/ou em condição de reação alérgica ao FVIII. Para estas análises três metodologias foram aplicadas, (1) determinação de anticorpos inibitórios por método de Bethesda-Nijmegen, (2) determinação do isotipo de imunoglobulinas envolvidas subclasses da IgG, IgM e IgE anti-FVIII, por método de ELISA e (3) determinação de citocinas por método multiplex BDTM CBA® (cytometric bead array). Esse projeto foi dividido em três estudos. No primeiro estudo, foram analisadas amostras de 25 pacientes brasileiros com hemofilia A, sendo 44% destes afrodescendentes. Todos os pacientes receberam exclusivamente terapia de reposição com concentrado de FVIII derivado de plasma (pdFVIII) e produtos bypass após o desenvolvimento de inibidor. Cinco pacientes deste grupo foram acompanhados por uma análise longitudinal no período de até três anos. No segundo estudo, 4 pacientes com hemofilia A com inibidor foram avaliados no período em que foram tratados através do protocolo de indução de imunotolerância (ITI) para erradicação do inibidor, também em análise longitudinal. O terceiro consistiu da avaliação de incidência de reação alérgica em pacientes com hemofilia A. Três de 322 pacientes (0,9%) apresentaram reação alérgica após a exposição exclusivamente para pdFVIII durante os últimos quinze anos em nosso centro. Os resultados evidenciaram que a subclasse IgG4 é a principal na modulação em presença de anticorpos inibitórios, enquanto a IgG1 na maior parte das análises estava presente junto a baixos títulos de inibidor.Durante o tratamento de ITI os níveis das interleucinas anti-inflamatórias IL-4 e IL-6 acompanharam o decaimento dos títulos de inibidor e IgG4 nos pacientes que obtiveram sucesso ao tratamento. Além disso, no decorrer do protocolo observou-se uma resposta polarizada para o tipo Th1 como padrão de resposta na conquista da tolerância completa ao FVIII. No contexto da reação alérgica, apenas um dos três pacientes apresentou reatividade da IgE que foi exclusiva ao pdFVIII, sendo negativa no ensaio do IgE anti-rFVIII (anti-fator VIII recombinante), demonstrando que a reatividade não foi específica ao FVIII. O entendimento resposta imune humoral em pacientes com hemofilia A, incluindo a participação da IgG4 e IgG1 no mecanismos envolvendo a presença e erradicação dos inibidores e da IgE na reação alérgica, possibilita ampliar conceitos estabelecidos dos mecanismos envolvidos nessas duas situações. Isso poderá auxiliar no desenvolvimento de novos produtos menos imunogênicos e de novas estratégias para a indução de tolerância ao FVIII, que tenham maior eficiência e melhor custo benefício Abstract: The main problems related to the treatment of hemophilia A patients are linked to the use of therapeutic factor VIII (FVIII). First, the development of neutralizing antibodies against FVIII (inhibitors), and second development of anaphylactic reactions, which are rare, however potencialy severe. The knowledge about the immunoglobulin isotypes associated with these two clinical situations is still limited.The aim of this project was to evaluate the characteristics of the humoral immune response in patients with hemophilia A who have inhibitors and/or allergic reaction to FVIII. For these analyzes three methods were used (1) inhibitory anti-FVIII antibodies assay by Bethesda-Nijmegen (2) immunoglobulins isotype ELISA assay for anti-FVIII IgG subclasses, IgM and IgE and (3) cytokines assay by BDTM Cytometric bead array (BD CBA®) multiplex method. This project was divided in three studies. In the first study, we analyzed samples from 25 Brazilian hemophilia A patients with 44% African-descents. All patients received exclusively replacement therapy with plasma-derived (pdFVIII) concentrates, and bypassing agents after the development of inhibitors. Five patients from this group were followed for a longitudinal analysis in a period up to three years. In the second study, 4 hemophilia A patients with inhibitor were evaluated also in longitudinal analyses, during the induction of immunotolerance (ITI) treatment for the eradication of the inhibitor. The third study included the evaluation of the incidence of allergic reaction among hemophilia A patients. Three out of 322 patients (0.9%) had allergic reaction after exclusively exposure to pdFVIII during the last fifteen years in our center. The results of these studies demonstrated that IgG4 subclass is the main immunoglobulin involved in the modulation of the inhibitory antibodies, while IgG1 is associated with low-titer inhibitors. During the ITI protocol, the anti- inflammatory interleukins, IL-4 and IL-6 decreased following the IgG4 reduction among the patients that achieved success in the ITI treatment. In addition, during the ITI protocol it was observed a polarized Th1 immune response after the complete success achievement. In the context of allergic reaction, only one out of three patients presented IgE reactivity that was exclusively to pdFVIII, and the assay IgE anti-rFVIII (anti-recombinant FVIII) was negative, confirming that the reativity was not specific to FVIII. The understanding of the humoral immune response in hemophilia A patients, including the role of IgG4 and IgG1 in the mechanisms involving the presence and eradication of inhibitors, and the participation of IgE in allergic reaction, allows to better understand the established concepts of the mechanisms involved in these two situations. This may help the development of less immunogenic new products and new strategies for induction of tolerance to FVIII, with higher efficiency and best value Mestrado Clínica Médica Mestra em Clínica Médica

Orientadores: Adriana Gut Lopes Riccetto, Clarice Weis Arns Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas Resumo: A Bronquiolite viral aguda (BVA) é uma das mais frequentes infecções respiratórias na faixa etária pediátrica. Seu principal agente etiológico é o Vírus Sincicial Respiratório (VSR). A cada ano são reportados milhões de casos em todo mundo; cerca de 10% destes casos são considerados graves, justificando hospitalização e gerando significativos ônus físicos, sociais e econômicos. Fatores epidemiológicos e relacionados a etiologia viral tem sido frequentemente associados ao risco de infecção e à evolução clínica da BVA por VSR e outros vírus. No presente estudo realizou-se a análise comparativa de duas coortes de lactentes com BVA, em dois períodos diferentes (2004 e 2014). Variáveis epidemiológicas, clínicas e relacionadas a etiologia viral comuns as duas coortes foram comparadas e analisadas. Da primeira coorte foram incluídos 142 pacientes e da segunda coorte 172; todos tinham idade entre 0 e 12 meses, quadro clínico de BVA, foram internados em hospitais da região metropolitana de Campinas, São Paulo, Brasil e foram submetidos à pesquisa de vírus respiratórios em secreção nasofaríngea pelo método Reação de Polimerase em Cadeia em Tempo Real (Polimerase Chain Reaction/ PCR -Real Time). A análise comparativa a princípio mostrou que houve diferença significativa quanto a porcentagem de pacientes identificados com infecção pelo VSR. Em 2004 esta porcentagem foi de 33,1% e em 2014 de 70,3% dos pacientes avaliados. Tais diferenças se devem à abrangência e acurácia dos diferentes Kits utilizados; em cada coorte. Quanto as características epidemiológicas das duas coortes, não houve diferença quanto ao sexo, tempo de aleitamento materno, tabagismo passivo, número de pessoas na residência e escolaridade materna. Houve diferença quanto ao mês de incidência da BVA, peso ao nascer e idade gestacional. Tais diferenças podem estar relacionadas a fatores socioeconômicos e culturais. Quanto as características clínicas das duas coortes não houve diferença para tempo de internação, necessidade de ventilação mecânica e óbitos, com diferença para a variável presença de doenças prévias à internação, com maior proporção destas últimas na coorte 2004. Entretanto, tal achado não impactou nos critérios de gravidade (ventilação pulmonar mecânica e óbito). O mesmo pode se dizer dos resultados obtidos na análise virológica - independente do resultado obtido, não se observou impacto na comparação das variáveis ligadas à gravidade. Perspectivas futuras indicam que virologia e Imunologia devem caminhar juntas na abordagem deste problema, estudando o papel de polimorfismos genéticos relacionados ao sistema imune e a importância da imaturidade fisiológica dos pacientes com BVA na resposta ao VSR e outros agentes virais Abstract: Acute Viral Bronchiolitis (AVB) is one of the most common respiratory infections in pediatric patients. It is main etiologic agent Respiratory Syntytial Virus (RSV). Each year millions of cases occur worldwide with significant physical, social and economic burdens. Epidemiologic factors and viral etiology have been related to risk of infection and clinical evolution of AVB by RSV or other viruses. In this present study, a comparative analysis has been carried out between two cohorts of infants with AVB, one in 2004 and the other in 2014. Epidemiologic, clinical and virologic features were compared. In the first cohort 142 infants were analyzed while in the second cohort 172. All patients were between 0-12 months, had a clinical diagnosis of AVB, received medical care in hospitals in the region of Campinas, Sao Paulo, Brazil and submitted to PCR - real time analysis of nasopharyngeal secretion for respiratory viruses. The comparative analysis showed a difference in the percentage of RSV positive patients. In 2004 there were 33.1% and in 2014 70.3%; this was attributed to the different efficacy of laboratorial kits. Regarding epidemiological features, no differences were noted concerning gender, duration of breastfeeding, smoke exposure, crowding and maternal education. There was a difference as to the month of high incidence of AVB as also weight to birth and gestational age to birth. These differences could be attributed to social, economic and cultural factors. Regarding clinical features, there were no differences in hospitalization time, need of mechanical ventilation and number of deaths. There was a difference regarding previous chronic diseases (higher in 2004). However, this fact had no impact on severity features (mechanical ventilation and death); the same can be said regarding virologic analysis ¿ virologic results were not associated with severity. It can be seen that virology and immunology must be considered in this kind of situation, studying genetic polymorphisms and the maturation of the immune system in patients with AVB by RSV or other viruses Mestrado Saúde da Criança e do Adolescente Mestra em Ciências CAPES 01-P-4346/2015

Orientador: Glaucia Maria Pastore Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos Resumo: Os prebióticos são alimentos indigeríveis, porém fermentáveis, que afetam o hospedeiro por estimulação seletiva do crescimento e atividade de uma espécie de bactérias ou um número limitado de bactérias no cólon. De todos os prebióticos disponíveis, os únicos que possuem estudos para serem classificados como componentes ativos de alimentos funcionais são os frutooligossacarídeos (FOS), inulina e o galactooligossacarídeos (GOS). Devido à sua estrutura química são fermentados no cólon por bactérias endógenas para substratos metabólicos e energéticos e promove melhoria das funções intestinais por meio do estímulo ao crescimento de bactérias benéficas, resultando em efeitos específicos sobre a fisiologia gastrointestinal, biodisponibilidade de minerais, sistema imune, gênese de tumores e regulação do colesterol sérico. No momento pouco é conhecido sobre o efeito do FOS no desenvolvimento de órgãos linfóides ou os mecanismos moleculares de sua ação na resposta imunológica. O objetivo do presente estudo é investigar o efeito da suplementação de FOS sobre o sistema imunológico em ratos. Para o desenvolvimento deste trabalho, foram utilizados 32 ratos machos, adultos jovens, da linhagem Wistar. Os animais foram alimentados com ração balanceada padrão para roedores (Purina) e água ¿ad libidum¿, mantidos em gaiolas à temperatura ambiente de 25ºC e foto período de 12 horas de claro e 12 de escuro. Durante o ensaio biológico os animais foram divididos em 4 grupos (n=8), o suplemento foi administrado diariamente por 21 e 42 dias por gavagem, nas diferentes concentrações (0, 50, 100 e 150 mg/kg). Ao final do período experimental os animais foram anestesiados e as amostras de sangue (5ml) coletadas por punção cardíaca, centrifugadas por 15 minutos, sendo o soro sanguíneo separado. Os órgãos linfóides (timo, baço) foram removidos e pesados. Todos os procedimentos experimentais foram previamente aprovados pelo Comitê de Ética em Pesquisa Animal da Universidade Estadual de Campinas. O soro coletado foi mantido a temperatura de 5°C e encaminhado ao laboratório de Bioquímica da Universidade do Sagrado Coração (Bauru) para a quantificação das imunoglobulinas IgA, IgG e IgM através da técnica de nefelometria. Os dados foram expressos como média ± erro padrão da média (EPM) e submetidos a analise de variância (ANOVA) As comparações entre grupos foram realizadas empregando-se o teste Tukey. As diferenças foram consideradas estatisticamente significativas para p0,05) as concentrações no soro de imunoglobulinas. A suplementação dietética com 100 mg/Kg e 150 mg/kg promoveu um aumento (p 0,05) no desenvolvimento dos órgãos linfóides. Os animais que foram suplementados com 100 e 150 mg/kg apresentaram um ganho de peso estatisticamente significativo (p0,05) serum concentrations of imunoglobulins, Dietary supplementation with 100 mg/Kg e 150 mg/kg resulted in higher (p 0,05) lymphoid organ development. The animals that were suplementation with 100 and 150 mg/kg presented an weight gain statistically significant (p

Damage-associated molecular patterns (DAMPs) are intracellular molecules released into the extracellular environment after injury. These are recognized by pattern recognition receptors (PRRs) and activate the innate immune system, triggering an inflammatory response. The most commonly studied DAMPs are S100 proteins, Thermal Shock Proteins (HSPs) and High Mobility Box Group 1 (HMGB1). Among the PRRs are the Toll-like Receptor (TLRs), the Receptor for Advanced Glycation End Products (RAGEs), Nod-like Receptor (NLRs) and the Absent Receptor in Melanoma 2 (AIM-2). DAMPs are intimately involved in the etiopathogenesis of chronic diseases such as cancer, diabetes, liver disease, heart disease and neurodegenerative diseases. It is very important to select molecular markers that enable the assembly of biological assays, with a view to elucidating the evaluation of the immune response. The present study evaluated different human DAMPs and their receptors in order to find molecular markers associated with diseases using bioinformatics tools. The screening of messenger RNA (mRNA) amino acid sequences was performed on the NCBI database using the nucleotide tool. Secondary mRNA prediction using RNAStructure and RNA foldWebServer software, epitope antigenicity prediction using the Immune Epitope Database Analysis Resource software and primer design using the Primer-BLAST Platform were evaluated. Considering the best predictions of secondary mRNA from receptors and DAMPs, 104 epitopes and 83 molecular marker candidates were predicted. The results presented are promising and could be used as immunomodulators or as diagnostic and prognostic platforms in various diseases. Los patrones moleculares asociados al daño (DAMP) son moléculas intracelulares liberadas en el entorno extracelular después de una lesión. Estos son reconocidos por los receptores de reconocimiento de patrones (PRR) y activan el sistema inmunitario innato, desencadenando una respuesta inflamatoria. Los DAMP más estudiados son las proteínas S100, las proteínas de choque térmico (HSP) y el grupo 1 de caja de alta movilidad (HMGB1). Entre los PRR se encuentran el Receptor tipo Toll (TLR), el Receptor para productos finales de glicación avanzada (RAGE), el Receptor tipo Nod (NLR) y el Receptor ausente en melanoma 2 (AIM-2). Los DAMP están íntimamente involucrados en la etiopatogenia de enfermedades crónicas como el cáncer, la diabetes, las enfermedades hepáticas, cardíacas y las enfermedades neurodegenerativas. Es muy importante seleccionar marcadores moleculares que permitan el montaje de ensayos biológicos, con miras a dilucidar la evaluación de la respuesta inmune. El presente estudio evaluó diferentes DAMP humanos y sus receptores para encontrar marcadores moleculares asociados con enfermedades utilizando herramientas bioinformáticas. La selección de secuencias de aminoácidos de ARN mensajero (ARNm) se realizó en la base NCBI utilizando la herramienta de nucleótidos. Se evaluó la predicción del ARNm secundario con el software RNAStructure y RNA foldWebServer, la predicción de la antigenicidad del epítopo con el software Immune Epitope Database Analysis Resource y el diseño de cebadores con la plataforma Primer-BLAST. Teniendo en cuenta las mejores predicciones de ARNm secundario de receptores y DAMP, se predijeron 104 epítopos y 83 candidatos a marcadores moleculares. Los resultados presentados son prometedores y podrían utilizarse como inmunomoduladores o como plataformas de diagnóstico y pronóstico en diversas enfermedades. Os padrões moleculares associados ao dano (DAMPs) são moléculas intracelulares lançadas para o meio extracelular após lesão. Estes são reconhecidos por receptores de reconhecimento de padrão (PRRs) e ativam o sistema imune inato, desencadeando uma resposta inflamatória. Os DAMPs mais comumente estudados são as proteínas S100, as Proteínas de Choque Térmico (HSPs) e o Grupo Box de Alta Mobilidade 1 (HMGB1). Dentre os PRRs, estão o Receptor Toll-like (TLRs), o Receptor para Produtos Finais de Glicação Avançada (RAGEs), Receptor Nod-like (NLRs) e o Receptor Ausente no Melanoma 2 (AIM-2). Os DAMPs encontram-se intimamente envolvidos na etiopatogenia de doenças crônicas como câncer, diabetes, hepatopatias, cardiopatias e doenças neurodegenerativas. É de grande relevância a seleção de marcadores moleculares que viabilizem a montagem de ensaios biológicos, com vistas à elucidação da avaliação da resposta imunológica. O presente estudo avaliou diferentes DAMPs humanos e seus receptores no intuito de encontrar marcadores moleculares associados a enfermidades utilizando ferramentas de bioinformática. A triagem de sequências de aminoácidos de RNA mensageiro (mRNA) foi realizada na base NCBI por meio da ferramenta nucleotide. Foram avaliados a predição de mRNA secundário através dos softwares RNAStructure e RNA foldWebServer, predição de antigenicidade de epítopos pelo software do Immune Epitope Database Analysis Resource e o desenho de primers foi feito na Plataforma Primer- BLAST. Considerando as melhores predições de mRNA secundário de receptores e DAMPs, foram preditos 104 epítopos e 83 candidatos a marcadores moleculares. Os resultados apresentados são promissores e poderão ser utilizados como imunomoduladores ou como plataformas de diagnóstico e prognóstico em várias enfermidades.

Agradecimentos: We would like to thank the social and health care centers of the Central region of Coimbra that accepted to participate in this study. Thanks to the master students (Mateus Ulba, Rafael Carvalho, Nelba Sousa, Filipa Pedrosa, and Taís Rieping) for volunteering to help with exercise implementation and data collection Abstract: Regular exercise has long been shown to positively impact the immune system responsiveness and improve mental well-being (MWB). However, the putative links between biomarkers of mental health and immune efficiency in exercising subjects have been scarcely investigated. The aim of this study was to verify the effect of a 14-week combined chair-based exercise program (CEP) on salivary steroid hormones and anti-microbial proteins, functional fitness, and MWB indexes in pre-frail older women. The participant women (82.8 4.6 years old; n = 32) were randomly divided into the exercising group (CEP, n = 17) and the non-exercising control group (CG, n = 15). The pre/post assessment included: (1) salivary anti-microbial proteins lysozyme; (Lys) and immunoglobulin-A (IgA); (2) salivary steroid hormones of testosterone (TT) and cortisol (COR); (3) functional fitness (gait speed, hand grip strength, and static balance); (4) MWB questionnaires (happiness, depression state, satisfaction with life, and stress). Significant differences with large Cohen’s (d) effect sizes were found on increased salivary TT (p < 0.05; d = 0.60) after exercise intervention. The results revealed a decrease in IgA levels after CEP (p < 0.01, d = 0.30). The increase in subjective happiness levels (p < 0.05, d = 0.30) and decrease of stress perception (p < 0.01, d = 2.60) and depressive state (p < 0.05, d = 0.30) were found after intervention in the CEP group. Robust statistical differences in gait speed (p < 0.05; d = 0.60) and balance tests (p < 0.05; d = 0.80) were also found in the CEP group. In control, COR increased moderately (p < 0.05; d = 0.65) while no changes were found for the other indicators. Correlation analyses showed inter-dependence between pre–post variations of MWB, biochemical indexes, and fitness function (e.g., COR inverse correlation with hand grip strength and balance tests). The CEP program was able to improve functional-fitness performance, decrease feelings of stress, and increase happiness. The CEP also induced clinically relevant hormonal and immune responses, which suggests that chair exercises that combine muscular strength, balance, and gait speed training are promising interventions to improve physical and mental health of older pre-frail adults CONSELHO NACIONAL DE DESENVOLVIMENTO CIENTÍFICO E TECNOLÓGICO - CNPQ Fechado

Tese (Doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Nanociência e Nanobiotecnologia, 2020. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES). A quimioterapia contra o câncer continua sendo um desafio devido aos mecanismos de resistência das células tumorais e à toxicidade dos fármacos anticâncer. Estudos clínicos sugerem que as respostas imunitárias específicas para células cancerosas podem ser responsáveis, pelo menos em parte, para o sucesso clínico dos esquemas terapêuticos que dependem de indutores de morte celular imunogênica. Neste contexto, a eficiência de agentes anticâncer que são indutores de morte celular imunogênica dependem da capacidade do sistema imunitário do hospedeiro em reconhecer os sinais desta morte e gerar uma robusta resposta imunitária contra as células cancerosas. Morte celular imunogênica é uma via proeminente para a ativação do sistema imunitário contra o câncer, podendo resultar no sucesso de terapias anticâncer em longo prazo, devido às respostas imunitárias específicas, aumentando assim a eficácia da terapia em comparação com os agentes anticâncer convencionais utilizados. Cancer chemotherapy remains a challenge due to the resistance mechanisms of tumor cells and the toxicity of anticancer drugs. Clinical studies suggest that specific immune responses to cancer cells may be responsible, at least in part, for the clinical success of therapeutic regimens that depend on inducers of immunogenic cell death. In this context, the efficiency of anti-cancer agents that are immunogenic cell death inducers depends on the ability of the host's immune system to recognize the signs of this death and generate a robust immune response against cancer cells. Immunogenic cell death is a prominent pathway for the activation of the immune system against cancer and may result in the success of anti-cancer therapies in the long term due to specific immune responses, thus, increasing the effectiveness of therapy compared to conventional anti- cancer agents.

The study of the human microbiome-and, more recently, that of the respiratory system-by means of sophisticated molecular biology techniques, has revealed the immense diversity of microbial colonization in humans, in human health, and in various diseases. Apparently, contrary to what has been believed, there can be nonpathogenic colonization of the lungs by microorganisms such as bacteria, fungi, and viruses. Although this physiological lung microbiome presents low colony density, it presents high diversity. However, some pathological conditions lead to a loss of that diversity, with increasing concentrations of some bacterial genera, to the detriment of others. Although we possess qualitative knowledge of the bacteria present in the lungs in different states of health or disease, that knowledge has advanced to an understanding of the interaction of this microbiota with the local and systemic immune systems, through which it modulates the immune response. Given this intrinsic relationship between the microbiota and the lungs, studies have put forth new concepts about the pathophysiological mechanisms of homeostasis in the respiratory system and the potential dysbiosis in some diseases, such as cystic fibrosis, COPD, asthma, and interstitial lung disease. This departure from the paradigm regarding knowledge of the lung microbiota has made it imperative to improve understanding of the role of the microbiome, in order to identify possible therapeutic targets and to develop innovative clinical approaches. Through this new leap of knowledge, the results of preliminary studies could translate to benefits for our patients. RESUMO O estudo do microbioma humano - e, mais recentemente, o do sistema respiratório - através de sofisticadas técnicas de biologia molecular, desvendou a imensa diversidade de colonização microbiana nos seres humanos, sejam saudáveis, sejam portadores de diferentes doenças. Aparentemente, ao contrário do que se acreditava, existe uma colonização não patogênica dos pulmões por microrganismos, como bactérias, fungos e vírus. Esse microbioma pulmonar fisiológico apresenta uma densidade baixa de colônias, porém uma elevada diversidade; por outro lado, alguns estados patológicos levam a uma perda dessa diversidade, com aumento da concentração de alguns gêneros bacterianos em detrimento de outros. Ainda, além do conhecimento qualitativo das bactérias presentes no pulmão em diversos estados de saúde ou de doença, o conhecimento avança para o entendimento da interação que essa microbiota tem com o sistema imune local e sistêmico, modulando a resposta imunológica. Compreendendo essa intrínseca relação entre a microbiota e os pulmões, estudos apresentam novos conceitos sobre os mecanismos fisiopatogênicos da homeostase do sistema respiratório e a possível disbiose em estado de algumas doenças, como fibrose cística, DPOC, asma e doenças intersticiais. Essa quebra de paradigma do conhecimento da microbiota presente nos pulmões fez com que se torne premente entender melhor o papel do microbioma para identificar possíveis alvos terapêuticos e abordagens clínicas inovadoras. Através desse novo salto de conhecimento é que os resultados dos estudos preliminares poderão ser traduzidos em benefícios aos nossos pacientes.

As fotodermatoses autoimunes constituem um grupo heterogéneo de dermatoses idiopáticas que têm na sua génese alterações imunológicas atualmente não completamente esclarecidas. Este grupo inclui cinco entidades clinicamente distintas - erupção polimorfa à luz, prurigo actínico, hydroa vacciniforme, dermite actínica crónica, urticária solar -, algumas potencialmente graves e com grande impacto na qualidade de vida dos doentes. A fisiopatologia das fotodermatoses autoimunes parece estar relacionada com a formação de fotoalergénios em respota à exposição solar. O mecanismo de reação de hipersensibilidade é variável entre as diferentes patologias. O diagnóstico das fotodermatoses autoimunes depende do reconhecimento das caraterísticas clínicas. A realização de fototestes permite a confirmação do diagnóstico e a determinação da radiação e dose limiar indutora. Numa altura em que a área da fotodermatologia tem vindo a perder gradualmente o seu impacto, propomos rever a fisiopatologia e abordagem diagnóstica atual das fotodermatoses autoimunes.

O presente trabalho é uma revisão bibliográfica cujo objetivo é analisar o efeito da Vitamina D como uma possível estratégia terapêutica adjuvante e preventiva contra a COVID-19, buscando avaliar sua real eficácia nesta circunstância. Foram revisados cerca de 40 artigos científicos, envolvendo a ação da Vitamina D nos sistemas imunológico e renina-angiotensina-aldosterona, e sua possível relação com a COVID-19 e sua severidade. A ação imunomoduladora da Vitamina D sofre mediação pela expressão da enzima CYP27B1 e do Receptor de Vitamina D, presentes na maioria das células do sistema imunológico, fato este que lhes dá a capacidade produzir e utilizar Calcitriol, que, por sua vez, exerce influência sobre a transcrição de diversos genes. Muito além de suas funções na homeostase do cálcio e metabolismo ósseo, a Vitamina D atua sobre os sistemas imunológico e renina-angiotensina-aldosterona. Tais fatos levantam o questionamento com relação à potencial eficácia de seu uso terapêutico na COVID-19. Para esta revisão, foram utilizados 9 ensaios clínicos revisados por pares e 1 meta-análise acerca do tema, sendo que todos obtiveram resultados que evidenciam a eficácia da adoção da Vitamina D na terapêutica para a COVID-19. Contudo, para tanto, altas doses, de 10.000 UI diárias, tiveram de ser utilizadas, o que levanta a discussão acerca da segurança de tais estratégias. Novas pesquisas são, portanto, necessárias para estabelecer cientificamente a eficácia e a segurança do emprego da Vitamina D na prevenção e no tratamento da COVID-19, e desenvolver protocolos.

Orientador: Mariana Freitas Nery Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: O sistema imunológico é essencial para a defesa do organismo contra as ameaças patogênicas, contando com uma diversidade de receptores para a detecção da ameaça e desencadeamento de uma resposta eficiente. Os patógenos presentes no ambiente estão em constante embate com o sistema imunológico e exercem pressões seletivas sobre ele, favorecendo um repertório extenso de receptores para lidar com a diversidade patogênica no ambiente. Ao longo do gradiente latitudinal, em ambientes terrestres, a diversidade tanto de espécies quanto de patógenos se concentra em regiões tropicais e diminui com o aumento da latitude, hábitos migratórios podem fazer com que um indivíduo se exponha a patógenos presentes tanto em regiões temperadas quanto tropicais. Ambientes aquáticos não são tão bem explorados em relação a sua diversidade patogênica, mas há a possibilidade de panoramas diferentes entre ambientes fluviais e ambientes marinhos. Nesse contexto, cetáceos e sirênios oferecem uma plataforma de estudo para a evolução de genes de imunidade, uma vez que são amplamente distribuídos ao redor do globo, realizam migrações de grandes proporções e possuem representantes tanto em ambientes fluviais quanto em ambientes marinhos. A história evolutiva desses animais traz a oportunidade de analisar a evolução de genes de imunidade na conquista de novos ambientes e a sua distribuição permite a análise da sua diversidade em diferentes latitudes. Aqui, reunimos sequências de genes de imunidade a partir de bases de dados já existentes e caracteriza genes de imunidade em quatro espécies (Sotalia fluviatilis, Sotalia guianensis, Trichechus manatus and Trichechus inunguis) sequenciadas pelo projeto Jovem Pesquisador (2015/18269-1) onde ele se insere, comparando ambientes marinhos e fluviais bem como gradientes latitudinais em cetáceos marinhos. Encontramos que, em relação a cetáceos marinhos, a diversidade de genes de MHC mostrou um padrão inesperado, uma vez que este se encontra invertido em comparação com o gradiente latitudinal comumente observado para animais terrestres, além disso, cetáceos marinhos migratórios exibem menor diversidade do que residentes de áreas tropicais ou temperadas. Também, em uma das primeiras análises realizadas comparando genes de imunidade em mamíferos de ambiente fluvial e marinho, encontramos diferenças entre pressões seletivas sofridas nesses dois ambientes em relação a genes da resposta imune inata e aparentes processos de pseudogenização e perda de genes Abstract: The immune system is essential to defense against pathogenic threats, in order to respond properly, it has a wide diversity of receptors. Pathogens present in the environment are in constant competition with the immune system and are a source of selective pressure on it, favoring the diversity of receptors according to the diversity of the environment. Alongside the latitudinal gradient, for terrestrial species, both diversity of species and pathogens concentrate in low latitudes and diminish as it rises, moreover, migratory habits may expose the individuals to pathogens present in both tropical and temperate environments. Aquatic environments are not well explored regarding their pathogenic diversity, but marine and freshwater environments are potentially different. In this context, cetaceans and sirenians offer a platform to study evolution of immunity genes, once they are distributed around the world, make long distance migration and are present in both marine and freshwater habitats. The evolutionary history of these animals allows to analyze immunity genes in the context of conquering new habitats and their distribution allows the analysis of their diversity in different latitudes. Here, we gather sequences from public databases and characterize immunity genes in four species (Sotalia fluviatilis, Sotalia guianensis, Trichechus manatus and Trichechus inunguis) sequenced by a Young Reseearcher Project (2015/18269-1) where this work is included, comparing marine and freshwater habitats as well as latitudinal gradients in marine cetaceans. We find that, regarding marine cetaceans, MHC genes exhibited an unexpected pattern, being inversed in relation to the one found in terrestrial animals. In addition, migratory cetaceans exhibited lower diversity than tropical and temperate residents. Also, in one of the first analyses comparing immunity genes on marine mammals from freshwater and marine environments, we found differences on selective pressures on those habitats on genes from innate immune response and possible pseudogenization and gene loss processes Mestrado Genética Animal e Evolução Mestra em Genética e Biologia Molecular CAPES

Objective: The aim of this study was to verify the influence of 6 weeks of whole-body vibration training on the pro- and anti-inflammatory cytokines (IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IFN-ɣ e TNF-α) in young, eutrophic and sedentary women. Methods: Twenty-six participants were randomly divided into two groups: Vibratory Platform Group (GV, n = 13) and Ergometry Group (GE, n = 13). The training program of both groups was of 20 minutes / session, 3 times per week, in non-consecutive days for 6 weeks. The load of the training was adjusted with the adapted Borg scale. GE was submitted to aerobic activity sessions in a cycle ergometer. GV was submitted to vibration platform stimulation sessions. After training program both groups were submitted to 6 weeks of detraining. Results: GV increased levels of IL-4, IL-6, IL-10 and TNF-α after training, and it decreased all of them after detraining phase. GE increased IL2, IL-4, IL-6 and IL-10 only after the detraining period. Conclusion: 6 weeks of whole-body vibration training can promote an increase in pro- and anti-inflammatory cytokines in young, eutrophic and sedentary women, however these effects seem to be transitory as the exercise is discontinued. Objetivo: El objetivo de este estudio fue verificar la influencia de 6 semanas de entrenamiento vibratorio de cuerpo completo sobre citocinas pro y antiinflamatorias (IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IFN-ɣ y TNF). -α) en mujeres jóvenes, eutróficas y sedentarias. Métodos: Veintiséis participantes fueron divididos aleatoriamente en dos grupos: Grupo de Plataforma Vibratoria (GV, n = 13) y Grupo de Ergometría (GE, n = 13). El programa de entrenamiento para ambos grupos fue de 20 minutos / sesión, 3 veces por semana, en días no consecutivos durante 6 semanas. La carga de entrenamiento se ajustó utilizando la escala de Borg adaptada. GE se sometió a sesiones de actividad aeróbica en un cicloergómetro. El GV se sometió a sesiones de estimulación en una plataforma vibratoria. Después del programa de entrenamiento, ambos grupos se sometieron a 6 semanas de desentrenamiento. Resultados: GV aumentó los niveles de IL-4, IL-6, IL-10 y TNF-α después del entrenamiento y disminuyó todos después de la fase de desentrenamiento. GE aumentó IL2, IL-4, IL-6 e IL-10 solo después del período de desentrenamiento. Conclusión: 6 semanas de entrenamiento vibratorio de cuerpo completo pueden promover un aumento de citocinas pro y antiinflamatorias en mujeres jóvenes, eutróficas y sedentarias, pero estos efectos parecen ser transitorios cuando se detiene el ejercicio. Objetivo: O objetivo deste estudo foi verificar a influência de 6 semanas de treinamento vibratório de corpo inteiro nas citocinas pró e antiinflamatórias (IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IFN-ɣ e TNF-α) em mulheres jovens, eutróficas e sedentárias. Métodos: Vinte e seis participantes foram divididos aleatoriamente em dois grupos: Grupo Plataforma Vibratória (GV, n = 13) e Grupo Ergometria (GE, n = 13). O programa de treinamento de ambos os grupos foi de 20 minutos / sessão, 3 vezes por semana, em dias não consecutivos durante 6 semanas. A carga de treinamento foi ajustada com a escala de Borg adaptada. GE foi submetido a sessões de atividade aeróbia em cicloergômetro. O GV foi submetido a sessões de estimulação em plataforma vibratória. Após o programa de treinamento, ambos os grupos foram submetidos a 6 semanas de destreinamento. Resultados: o GV aumentou os níveis de IL-4, IL-6, IL-10 e TNF-α após o treinamento e diminuiu todos após a fase de destreinamento. GE aumentou IL2, IL-4, IL-6 e IL-10 somente após o período de destreinamento. Conclusão: 6 semanas de treinamento vibratório de corpo inteiro podem promover aumento de citocinas pró e antiinflamatórias em mulheres jovens, eutróficas e sedentárias, porém esses efeitos parecem ser transitórios à medida que o exercício é interrompido.

Background COVID-19, caused by the virus SARS-CoV-2, has brought extensive challenges to the scientific community in recent months. Several studies have been undertaken in an attempt to minimize the impact of the disease worldwide. Although new knowledge has been quickly disseminated, including viral mechanisms, pathophysiology, and clinical findings, there is a lack of information on the effective pharmacological management of this disease. In vitro studies have shown some benefits related to the use of antimalarials (chloroquine and hydroxychloroquine) for inhibiting SARS-CoV-2. However, the data from open clinical trials on COVID-19 patients are controversial. Objective We present the protocol for a research project that compares the potential protective effect of antimalarials in preventing moderate-to-severe forms of COVID-19 in two groups: (1) patients treated chronically with antimalarials for rheumatic diseases and (2) other members of the patients’ household who have not been diagnosed with rheumatic diseases and are not taking antimalarials. Methods This is a 24-week, prospective, observational cohort study comprising patients from public and private health services across Brazil, who chronically use antimalarials for the treatment of immune-mediated rheumatic diseases, osteoarthritis, or chikungunya-related arthropathy. A total of six sequential phone interviews were scheduled during the COVID-19 outbreak in five different regions of Brazil. Information regarding social, epidemiological, and demographic data, as well as details about rheumatic diseases, antimalarials, comorbidities, and concomitant medication, is being recorded using a specific online form in the REDCap database. Symptoms suggestive of COVID-19, including fever, cough, dyspnea, anosmia, and dysgeusia, are being self-reported and collected via phone interviews. Our main outcomes are hospitalization, need of intensive care unit, and death. Results Recruitment began at the end of March 2020, and the inclusion was done during an 8-week period (from March 29 to May 17) with a total of 10,443 individuals enrolled at baseline, 5166 of whom have rheumatic diseases, from 23 tertiary rheumatology centers across 97 Brazilian cities. Data analysis is scheduled to begin after all inclusion data have been collected. Conclusions This study, which includes a large sample of chronic antimalarial users, will allow us to explore whether SARS-CoV-2 infection may be associated with immune-mediated rheumatic diseases and long-term antimalarial usage. Trial Registration Brazilian Registry of Clinical Trials RBR–9KTWX6; http://www.ensaiosclinicos.gov.br/rg/RBR-9ktwx6/ International Registered Report Identifier (IRRID) DERR1-10.2196/23532

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Departamento de Nutrição, Programa de Pós-Graduação em Nutrição Humana, 2015. Introdução: Há evidências de que pacientes com câncer de mama apresentam alteração da função imune, o que pode favorecer a progressão do câncer. A inflamação crônica está envolvida em todos os estágios de carcinogênese. Estudos tem demonstrado que ácidos graxos poliinsaturados n-3 eicosapentaenóico (EPA) e docosahexaenóico (DHA) apresentam propriedades imunomoduladoras e antiinflamatórias, sendo utilizados na prevenção e tratamento de diferentes patologias, incluindo o câncer. Neste contexto, este estudo teve como objetivo investigar o efeito da suplementação com óleo de peixe, em pacientes recém diagnosticadas com câncer de mama, nas subpopulações de linfócitos, citocinas pró-inflamatórias, proteína C-reativa e Prostaglandina E2. Metodologia: Estudo de intervenção, randomizado, placebo controlado, duplo-cego, conduzido em pacientes com diagnóstico de câncer de mama, distribuídas em dois grupos (grupo óleo de peixe – GO e grupo placebo – GP). As pacientes do GO receberam diariamente 2 g de concentrado de óleo de peixe contendo 1,8g de ácidos graxos n-3. O grupo placebo recebeu 2 g/dia de óleo mineral com igual aparência do óleo de peixe. Todas as pacientes foram suplementadas por 4 semanas durante o período anterior ao tratamento cirúrgico. Antes e ao final da suplementação, foram coletados dados de antropometria, composição corporal, consumo dietético e amostras sanguíneas para fenotipagem de linfócitos, exames laboratoriais (glicemia de jejum, albumina sérica, perfil lipídico), análise do perfil de ácidos graxos séricos e marcadores inflamatórios (IL-1β, IL-6, TNF-α, proteína C-reativa e prostaglandina E2). A análise estatística foi realizada utilizando testes paramétricos e não paramétricos para comparar os resultados dos dois grupos. Resultados: O GO foi constituído de 18 pacientes e o GP 19. No início do estudo não foram observadas diferenças significativas entre os grupos quanto aos parâmetros socioeconômicos, antropométricos e clinicopatológicos. A maioria das pacientes apresentou carcinoma ductal infiltrante e 55,6% e 57,9% do GO e GP, respectivamente, apresentaram tumor HER2 negativo. Após a intervenção, no grupo óleo de peixe houve aumento significativo da quantidade de EPA (p=0,004), DHA (p=0,007) e total de ácidos graxos n3 (p=0,004) no fosfolipídio plasmático. Observou-se redução da razão n6/n3 (p=0,002). No GO observou-se manutenção tanto da percentagem de linfócitos T CD4+ no sangue periférico como dos níveis séricos da proteína C-reativa, enquanto no GP houve redução da percentagem de linfócitos T CD4+ no sangue periférico e aumento da proteína C-reativa. Não houve mudanças significativas nos níveis séricos das citocinas pró-inflamatórias e da prostaglandina E2. Conclusão: A suplementação de 1,8g de ácidos graxos n-3 em pacientes recém diagnosticadas com câncer de mama, durante 4 semanas promoveu mudança significativa na composição dos ácidos graxos plasmáticos, manteve a percentagem das células T CD4+ e os níveis séricos de PCR, sugestivo da sua ação benéfica no sistema imunológico. Introduction: There is evidence that breast cancer patients have impaired immune function, which can promote cancer progression. Chronic inflammation is involved in all stages of carcinogenesis. Studies have shown that n-3 polyunsaturated fatty acids eicosapentaenoic (EPA) and docosahexaenoic (DHA) acids have immunomodulatory and anti-inflammatory properties and are useful in the prevention and treatment of various diseases, including cancer. In this context, this study aimed to investigate in patients with newly diagnosed breast cancer the effects of fish oil supplementation in lymphocytes subpopulation, proinflammatory cytokines, C-reactive protein (CRP) and prostaglandin E2. Methodology: A randomized, placebo controlled, double-blind clinical trial was conducted in patients diagnosed with breast cancer, divided into two groups (fish oil group - GO and placebo group - GP). The GO patients received 2 g/ day of fish oil concentrate containing 1.8g of n-3 fatty acids. The placebo group received 2 g/ day of mineral oil with similar appearance to fish oil. All patients were supplemented for four weeks during the period prior to surgical treatment. Before and at the end of supplementation, we collected anthropometric, body composition and dietary intake data and blood samples for lymphocyte phenotyping, laboratory tests (fasting glucose, serum albumin, lipid profile), serum fatty acids analysis and inflammatory markers (IL-1β, IL-6, TNF-α, CRP and prostaglandin E2). Statistical analysis was performed using parametric and non-parametric tests to compare the results of both groups. Results: GO consisted of 18 patients and the GP 19. At baseline no significant differences were observed between the groups in terms of socioeconomic, anthropometric and clinicopathological parameters. Most of the patients had infiltrating ductal carcinoma and 55.6% and 57.9% of GO and GP, respectively, had negative HER2 tumor. After the intervention there was a significant increase in the amount of EPA (p=0.004), DHA (p=0.007) and the total of n3 fatty acids (p=0.004) in plasma phospholipid of the GO patients. There was a reduction in the n6/ n3 ratio (p=0.002). In GP patients there was a reduction in the percentage of peripheral blood CD4+ T lymphocytes counts and increased plasma C-reactive protein concentration. In GO patients the proportion of peripheral blood CD4 + T lymphocytes and serum of CRP levels were maintained. There were no significant changes in serum levels of proinflammatory cytokines and prostaglandin E2. Conclusion: Supplementation of treatment naïve breast cancer patients with 1.8 g/ day of n-3 fatty acids for 4 weeks caused a significant change in the composition of plasma fatty acids, kept the frequency of CD4+ T cells and serum CRP, suggestive of a beneficial effect of the supplement on patient’s immune system.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Programa de Pós-Graduação em Patologia Molecular, 2015. Nos últimos 20 anos, a utilização de anticorpos monoclonais para fins terapêuticos tem sido um grande aliado para o tratamento de diversas enfermidades. Anticorpos anti-CD3 são utilizados na prevenção de órgãos transplantados e apresenta potencial para tratar enfermidades autoimunes. Entretanto, a utilização desses anticorpos, apesar de eficientes geram uma resposta imunogênica, pois a maioria deles possui origem murina, quando administrado impossibilitando o uso frequente, como o OKT3. A humanização de anticorpos, que é realizada por meio de manipulações genicas, tem sido uma solução pratica para esse problema, atenuando a resposta imunogênica desencadeada pelo uso de anticorpos murinos. A partir de uma biblioteca de anticorpos humanos construída a partir da técnica de Phage Display é possível a construção de novos anticorpos humanos com maior eficiência de ligação resultando menos efeitos adversos, auxiliando na clínica dessas doenças e melhorando a qualidade de vida dos pacientes. No presente estudo, a partir de uma construção sintética scFvRVL_gen3 contendo VH e VL humanizado e a sequência genica codificadora da proteína 3 (gene 3) foi possível construir um plasmídeo utilizando o vetor pCIgRM (plasmídeo anti- CD3 contendo VH e VL murino), resultando em 4 clones positivos para a construção pCIgRVL_G3. Para a amplificação dos genes VL da biblioteca de anticorpos humanos no vetor pCOMB 3X após o teste de 23 sistemas de reações distintas de PCR, foi estabelecido a otimização assim como as condições para que o mesmo acontecesse. O produto então foi clonado no vetor pGEM®T para o estudo da eficiência da reação de amplificação e diversidade da biblioteca. Os dados obtidos nesse estudo são ferramentas uteis para a clonagem das várias sequencias de VL amplificadas no vetor pCIgRVL_G3 substituindo o VL sintético pela biblioteca de VL humanos, e assim possibilitando passo à frente para a construção de um anticorpo monoclonal humano anti-CD3. T Over the past 20 years, the use of monoclonal antibodies for therapeutic purposes has been a great ally for the treatment of various diseases. Anti-CD3 antibodies are used in the prevention of transplant organs and have the potential to treat autoimmune diseases. However, the use of these antibodies, although efficient generate an immune response because most of them have murine origin, when administered preventing the frequent use, such as OKT3. The humanization of antibodies, which is performed by means of gene manipulation, it has been a practical solution to this problem, reducing the immunogenic response elicited by the use of murine antibodies. From a human antibody library constructed from a phage display technique it is possible to build new human antibodies with the highest binding efficiency resulting in less adverse effects in helping these clinical diseases and improving the quality of life of patients. In this study, from a synthetic construct scFvRVL_gen3 containing humanized VH and VL gene and the coding sequence of the protein 3 (gene 3) was constructed using a plasmid vector pCIgRM (plasmid containing anti-CD3 murine VH and VL), resulting 4 positive clones for pCIgRVL_G3 construction. For amplification of VL of the human antibody gene library in vector pComb 3X after the 23 different test systems PCR reactions, thereby optimizing the conditions has been established for it to happen. The product was then cloned into the vector pGEM®T to study the efficiency of the amplification reaction and library diversity. The data obtained in this study are useful tools for cloning of various sequences of the amplified VL pCIgRVL_G3 VL vector by replacing the synthetic human VL library, thus allowing step forward for the construction of a human monoclonal anti-CD3 antibody.

O Lupus Eritematoso Sistemico (LES) e uma doenca autoimune, inflamatoria, que atinge orgaos e tecidos, sendo dez vezes mais comum em mulheres. Desta forma, este estudo teve como objetivo descrever os fatores de risco que atuam na genese do LES. Realizou-se um estudo de revisao entre os dias 18 e 23 de fevereiro de 2013 na base de dados do Scientific Electronic Library Online (SciELO) e pelo buscador Google Academico. Foram utilizados os descritores ‘’Lupus’’ and ‘’fator’’ and “risco’’. Os resultados mostram os principais fatores de risco para o desenvolvimento do LES, como: predisposicao genetica, presenca de autoanticorpos, desregulacao dos linfocitos T e deficiencia de vitamina D. De forma geral, o conhecimento sobre os fatores envolvidos na autoimunidade tem evoluido muito nos ultimos anos, inumeros marcadores geneticos tem sido descobertos e outros tantos foram revistos. Pode-se afirmar que e conhecida uma serie de fatores que estao envolvidos na genese do LES, embora ainda, nao se possa apontar para uma causa especifica.

Orientador: Margareth Castro Ozelo Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas Resumo: Introdução: Hemofilia A (HA) é uma doença causada pela deficiência do fator VIII (FVIII) da coagulação, resultante de herança genética ligada ao cromossomo X. Uma das principais complicações associadas ao tratamento da HA consiste no desenvolvimento de inibidores, que são anticorpos direcionados contra o FVIII infundido. Fatores de risco genéticos e ambientais estão relacionados à susceptibilidade dos pacientes a desenvolver inibidores, porém, a razão pela qual apenas alguns pacientes o desenvolvem ainda não está clara e sugere que a formação de inibidores esteja relacionada a um complexo processo multifatorial. Objetivo: Avaliar a influência de fatores genéticos no desenvolvimento de inibidores ao FVIII em pacientes com HA grave de diferentes regiões do Brasil. Métodos: Os anticorpos inibitórios de FVIII foram detectados pelo método de Bethesda modificado; as inversões do íntron 22 (INV22) e 1 (INV1) no gene F8 pela técnica de PCR inversa (IS-PCR); mutações de ponto no gene F8 por sequenciamento automático e a genotipagem de polimorfismos em genes imunoregulatórios foi realizada pelo método de discriminação alélica por PCR em tempo real (RT-PCR) com a utilização de ensaios do tipo TaqMan®. Resultados: O diagnóstico de HA grave (FVIII:C 0,6UB em no mínimo duas ocasiões) foi detectada em 97 dos 422 pacientes (22,9%), sendo que 82 (19,4%) foram classificados como inibidores de alta resposta (?5UB). Ao considerarmos o risco de desenvolvimento de inibidor de acordo com o grupo étnico, pacientes negros com HA grave apresentaram 2,18 vezes maior risco para o desenvolvimento de inibidores ao FVIII quando comparados com caucasoides (OR=2,18; 95% IC 1,36-3,50). Enquanto que, descendentes de índios brasileiros se mostraram menos propensos em desenvolver inibidor (OR=0,12; 95% IC 0,01-0,90). Adicionalmente, a análise dos diferentes tipos de mutações no gene F8 mostrou, que o risco de inibidor foi maior entre pacientes com mutações do tipo nonsense e frameshift (OR=2,54; 95% IC 1,17-5,52 e OR=3,08; 95% IC 1,03-9,22, respectivamente) quando comparados com indivíduos com INV22, a causa mais frequente de HA grave. Em relação aos SNPs nos genes imunoregulatórios, a presença do genótipo -857CT no gene TNFA indicou aumento da susceptibilidade ao desenvolvimento de inibidores (OR=1,89; 95% IC 1,11-3,21). Enquanto que portadores dos genótipos -819TT e -592AA no gene IL10 e do haplótipo "CG/CG" no gene TNFA foram menos propensos em desenvolver inibidores (OR=0,34; 95% IC 0,13-0,88 e OR=0,52; 95% IC 0,33-0,83, respectivamente). Conclusão: O estudo em diferentes populações é uma importante etapa para o entendimento dos fatores de risco para o desenvolvimento de inibidores. Esse foi um dos primeiros trabalhos realizados no Brasil incluindo pacientes de diversas regiões e analisando simultaneamente diferentes fatores e seu envolvimento com o desenvolvimento de inibidores. A caracterização desses fatores de risco poderá ajudar no futuro a determinar um tratamento diferenciado para o controle e, sobretudo para a prevenção do desenvolvimento de inibidores Abstract: Introduction: Hemophilia A is a disease caused by deficiency of coagulation factor VIII (FVIII) resulting from genetic inheritance linked to chromosome X. Inhibitor to factor VIII development is the most important complication of hemophilia A (HA) treatment, and consist in antibodies directed against factor VIII infused. The risk factors for the development of inhibitor can be genetic and non-genetic (environmental), however, why only some patients develop inhibitors is not yet known and suggests that the formation of inhibitors is related to a complex multifactorial process. Objective: To assess the influence of genetic factors in the development of FVIII inhibitors in patients with severe hemophilia A from different regions of Brazil. Methods: FVIII inhibitors were detected using modified Bethesda assay; Intron 22 and 1 inversions in gene F8 were genotyped by inverse shifting polymerase chain reaction (IS-PCR); F8 point mutations were detected by automated sequencing, and the SNPs in immune regulatory genes were genotyped using TaqMan® SNP Genotyping Assay Kit. Results: The severe hemophilia A (FVIII:C 0.6 UB/mL on at least two occasions) were detected in 97 of the 422 HA, and in 82 of these cases, the inhibitor was of the high-responding type (? 5 UB/mL). Considering the risk of development according to the ethnic group, black patients with severe hemophilia A are twice as likely as white patients to produce inhibitors against factor VIII protein (OR= 2.18; 95%CI, 1.36-3.50). While, descendants of brazilian indians were less likely to develop an inhibitor (OR=0.12; 95%CI 0.01-0.90). In addition, analysis of the different types of mutations in the F8 gene showed that the risk of developing anti-FVIII antibodies was higher among patients with nonsense and frameshift mutations (OR=2.54, 95%CI, 1.17-5.52 and OR=3.08, 95%CI, 1.03-9.22, respectively) compared with individuals with intron 22 inversion, the most frequent cause of severe HA. Regarding the studied SNPs (single nucleotide polymorphism) in immune regulatory genes, the results indicated increased susceptibility to inhibitors development in patients with the -857CT genotype in gene TNFA (OR=1.89; 95%CI 1.11-3.21). However, patients with the -819TT genotype and -592AA in the gene IL10 and "CG/CG" haplotype in gene TNFA are lower risk to develop inhibitors (OR=0.34; 95%CI 0.13-0.88 e OR=0.52; 95%CI 0.33-0.83, respectively). Conclusion: The study in different populations is important to understand the risk factors for the development of inhibitors. This was one of the first works in Brazil, to study patients from various regions and to analyze different factors and their involvement in the development of inhibitors. The determination of these risk factors will help in the future to determine differential treatment for the control and in particular, for preventing the development of inhibitors Mestrado Clínica Médica Mestra em Ciências CAPES 01-P-3487/2014, 01-P-4351/2015

ResumoEstudos mostram haver uma diminuição da quantidade de linfócitos T e B, assim como dos efeitos citotóxicos das células natural killer (NK), em decorrência da diminuição acentuada na concentração dos estrogênios circulantes, o que ocorre no período menopausal e pós-menopausal. Assim, existe uma relação direta entre senescência e deficiência do sistema imunológico, que tem como consequência o aumento de doenças neoplásicas, infecciosas, crônico-degenerativas, assim como de inflamações crônicas. Assim, para prevenir ou amenizar a imunossenescência, com consequente prevenção de diversas doenças dessa parcela da população, estudos mostram que existe uma normalização da resposta imunológica após a reposição hormonal, o que se torna um fator importante no controle dessas doenças. Dessa maneira, a reposição hormonal torna-se importante não somente para minimizar os efeitos da pós-menopausa, mas também no combate e na prevenção de doenças de caráter imunológico, como as doenças autoimunes e as neoplásicas.AbstractStudies show that there is a decreased amount of T and B lymphocytes, as well as the cytotoxic effects of natural killer cells (NK), due to the sharp decrease in the concentration of circulating estrogens, which occurs in the menopausal and post-menopausal period. Thus, there is a direct relationship between senescence and immune system deficiency, resulting in the increase of tumors, infectious, degenerative chronic diseases, as well as the chronic inflammation. So to prevent or lessen the immunosenescence, resulting in prevention of various diseases in this part of the population, studies show that there is a normalization of the immune response after hormonal replacement therapy, becoming an important factor in controlling these diseases. Thus, hormone replacement therapy becomes important not only to minimize the alterations that occurs in the post-menopausal period, but also in fighting and preventing immune diseases, such as tumors.

Objective: To investigate scientific evidence related to the term protection and clinical indicators and etiologic factors for nursing diagnosis Ineffective protection in adolescents with cancer. Method: Integrative literature review in the databases of Scopus, Web of Science, National Library of Medicine and National Institutes of Health (PubMed) and Cochrane; by intersection of the descriptors protection and childhood cancer, which resulted in seven articles. These were insufficient for a comprehension of the term protection and aspects related to its impairment, therefore it was necessary to include a further three reference books. Results: Five clinical indicators and three etiologic factors associated to Ineffective protection were identified some of which were not cited in NANDA-International. Conclusions: There are clinical and etiologic factors important for the identification of ineffective protection in adolescents with cancer.

JUSTIFICATIVA Y OBJETIVOS: El creciente uso de opioides para el tratamiento del dolor es una realidad en varios paises. Con el incremento de su uso van surgiendo cuestionamientos menos comunes, como la influencia de los opioides en las respuestas inmunologicas. El presente estudio tiene el objetivo de detallar la respuesta inmunologica explorando las influencias de los efectos de los opioides sobre la respuesta inflamatoria en situaciones experimentales y clinicas, como tambien su importancia para la practica diaria. CONTENIDO: Despues de la revision de los articulos publicados en revistas indexadas en el Medline, se describio la respuesta inmunologica de forma general, especialmente en su aspecto celular. Despues de ese abordaje, se identificaron los mecanismos de liberacion de los opioides endogenos y la modulacion de la respuesta inmune a los opioides exogenos en el dolor agudo y cronico, siempre finalizando con las implicaciones clinicas y con su aplicabilidad en la rutina de atencion. CONCLUSIONES: Aunque varios estudios nos indiquen un efecto inmunodepresor de los opioides, la relevancia clinica de esas observaciones continua sin conocerse por completo y solo sirve como un prerrequisito para que nuevas investigaciones en esa area puedan llegar a buen puerto. Las recomendaciones definitivas para la aplicacion de los opioides en las mas variadas situaciones de la practica clinica con relacion a las consecuencias inmunologicas de esos farmacos, todavia no han salido a la luz.

Além do seu papel na homeostase do cálcio, acredita-se que a forma ativa da vitamina D apresenta efeitos imunomoduladores sobre as células do sistema imunológico, sobretudo linfócitos T, bem como na produção e na ação de diversas citocinas. A interação da vitamina D com o sistema imunológico vem sendo alvo de um número crescente de publicações nos últimos anos. Estudos atuais têm relacionado a deficiência de vitamina D com várias doenças autoimunes, como diabetes mellitus insulino-dependente (DMID), esclerose múltipla (EM), doença inflamatória intestinal (DII), lúpus eritematoso sistêmico (LES) e artrite reumatoide (AR). O artigo faz uma revisão da fisiologia e do papel imunomodulador da vitamina D, enfatizando sua participação nas doenças reumatológicas, como o lúpus e a artrite reumatoide.

A obesidade é uma doença complexa de etiologia multifacetada, com sua própria fisiopatologia, comorbidades e capacidades desabilitantes. Aceitar a obesidade como uma doença é fundamental para o seu tratamento. Atualmente, o tecido adiposo é um dos principais focos das pesquisas em obesidade, devido a uma revolução no entendimento da função biológica desse tecido desde a última década. Já está muito claro que o tecido adiposo branco secreta múltiplos peptídeos bioativos, denominados adipocinas (proteínas sintetizadas e secretadas pelo tecido adiposo). Dessa forma, o objetivo deste trabalho de revisão foi investigar a relação entre obesidade e adipocinas inflamatórias, buscando discutir o papel do exercício físico no tratamento dessa patologia. Os resultados demonstram que uma das mais importantes descobertas das pesquisas recentes em obesidade é o conceito de que ela é caracterizada por uma inflamação crônica. Dentre todas as adipocinas, sem dúvida, a IL-6, o TNF-α, a leptina (pró-inflamatórias) e a adiponectina (anti-inflamatória) vêm recebendo atenção especial da literatura especializada. O aumento da concentração dessas adipocinas promove grande impacto em diversas funções corporais que estão fortemente correlacionadas com doenças cardiovasculares. Uma vez que a obesidade é considerada uma doença inflamatória e o exercício físico modula de forma direta tais processos, é essencial que tenhamos como um dos objetivos principais de nossos programas de exercícios físicos a melhora da resposta inflamatória de obesos.

Orientadores: Pablo Agustin Vargas, Lynne Bingle Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba Resumo: O carcinoma espinocelular de boca usualmente se desenvolve a partir de uma lesão oral potencialmente maligna, como por exemplo, a leucoplasia ou eritroleucoplasia. O sistema imune, por sua vez, desempenha importante papel no reconhecimento de células malignas precursoras. No entanto, as células tumorais através do mecanismo de imunoedição são capazes de escapar da imuno vigilância. Objetivo: Avaliar a expressão de células dendríticas de Langerhans (CDL) imaturas e maduras, células dendríticas plasmocitoides (CD plasmocitoides) e linfócitos T em displasia epitelial oral (DE), leucoplasia verrucosa proliferativa (LVP) e carcinoma espinocelular bucal (CEC) e correlacionar essa expressão com os dados clínicos disponíveis. Material e métodos: Cinquenta casos de CEC, 48 casos de DE e 15 casos de LVP foram submetidos a técnica imunoistoquímica para os anticorpos CD1a, CD83, CD303 e CD8. Os resultados dessas imunomarcações foram avaliados através da análise quantitativa de cinco campos consecutivos de cada lâmina utilizando um aumento de 400x. Resultados: A análise mostrou diminuição significativa da expressão de CD83 no grupo CEC em comparação ao grupo DE. CD303 mostrou aumento significativo no grupo CEC em comparação ao grupo DE. A expressão de CD8 não apresentou diferença significativa entre os grupos avaliados. Para o grupo LVP a expressão de CD1a e CD8 apresentou aumento gradual nas lesões de hiperqueratose, displasia leve/moderada e displasia epitelial intensa. A expressão de CD83 apresentou diminuição gradual nas lesões de hiperqueratose, displasia leve/moderada e displasia epitelial intensa. Não houve correlação estatística com os dados clínicos. Conclusão: O aumento no número de CDL maduras no grupo DE em relação ao grupo CEC sugere que essas células possam ter migrado até os linfonodos para dar início a resposta imune. O aumento no número de CD plasmocitoides no grupo CEC, sugere que essas células desempenham papel importante na defesa do organismo contra lesões tumorais, no entanto não está claro se promovendo ou inibindo a progressão tumoral. No grupo LVP a expressão de CDL imaturas e linfócitos T CD8 sugere que o sistema imune encontra-se vigilante e ativo, respectivamente. No entanto, a expressão de CDL maduras sugere que pode haver algum tipo de falha na resposta imune Abstract: Oral squamous cell carcinomas (OSCC) may arise from potential malignant lesions, such as leukoplakia. The immune system plays an important role recognizing tumor precursor cells. However, due to the immunoediting mechanisms cancer cells are able to escape the immune system surveillance. Objective: Evaluate the profile of imature and mature dendritic Langerhans cells (DLC), plasmacytoid dendritic cells (plasmacytoid DC) and T cells in epithelial displasya (OED), proliferative verrucous leukoplakia (PVL) and OSCC and correlate these fndings with clinical data available. Study design: Fifty cases of OSCC, 48 of OED and 15 of PVL were immunostained for CD1a, CD83, CD303 and CD8 followed by a quantitative analysis. Results: Analysis revealed a significant decrease in the number of CD83 positive cells in OSCC compared with OED group. CD303 positivity was significantly increased in the OSCC group when compared to OED whilst there was no statistical difference in CD8 positivity between OSCC and OED. In the PVL group analysis revealed increased expression of CD1a from hyperkeratosis to severe epithelial dysplasia and decreased expression of CD83 from hyperkeratosis to severe epithelial dysplasia. The expression of CD8 increased from hyperkeratosis to severe epithelial dysplasia. No statisticant correlation was found for clinical data. Conclusion: The numbers of mature DLC were decreased in OSCC compared with OED lesions suggesting that maybe these cells might have migrated to lymph nodes to present the tumour antigen and activate the immune system. The numbers of plasmacytoid DC was significantly increased in the OSCC group compared with the OED group. This suggests they may play an important role in the defence against tumours although it is not clear whether this is promoting or inhibiting malignant progression. In the PVL group, the expression of immature DLC and CD8 T cells suggest that the immune system is vigilant and active, respectively, however the expression of mature DLC suggest that in some extent it is impaired Doutorado Patologia Doutora em Estomatopatologia FAPESP 2013/18321-8 CAPES CNPQ PDSE 99999.008317/2014-03

O zinco apresenta funções catalíticas, estruturais e reguladoras, sendo componente de várias enzimas. Os sintomas observados na deficiência deste elemento incluem lesões de pele, anorexia, retardo do crescimento, hipogonadismo e alteração na função imune. O objetivo desta revisão foi apresentar as funções metabólicas e funcionais do zinco, enfatizando as conseqüências da deficiência e os aspectos que justificam os estudos envolvendo a suplementação com zinco e seus efeitos sobre o crescimento, sistema imunológico e diabetes. Considerando que algumas doenças predispõem o organismo à deficiência de zinco, a suplementação, isoladamente ou associada a outros elementos, demonstra benefícios, especialmente no aumento da velocidade de crescimento, funcionamento do sistema imunológico, diminuição das afecções respiratórias e controle das diarréias. A suplementação em pacientes com diabetes está relacionada com as variáveis do controle metabólico e as concentrações plasmáticas e eritrocitárias de zinco. As estratégias de suplementação com zinco, em populações de risco, devem ser implementadas, considerando-se as doses adequadas de ingestão. Zinc has catalytic, structural and regulatory functions and is a component of many enzymes. Skin lesions, anorexia, growth retardation, hypogonadism, immune suppression function are the symptoms caused by zinc deficiency. This review aims to present the structural and metabolic zinc functions, emphasising the consequences of zinc deficiency and the aspects that justify the studies on zinc supplementation, affecting growth, immune system and diabetes. Considering that some diseases predispose the organism to zinc deficiency, supplementation, either in isolation or in conjunction with other elements, demonstrates benefits, specifically in improved growth rate, immune system function, reduced respiratory infections and diarrhoea control. In diabetic patients, zinc supplementation has been associated with the variables in metabolic control and the concentrations of plasma and erythrocyte zinc. In populations at risk, Zinc supplementation strategies should be implemented, taking into consideration the adequacy of doses intake.

Orientador: Edgard Graner Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba Resumo: A ácido graxo sintase (FASN) é a enzima responsável pela biossíntese endógena de ácidos graxos e apontada como uma oncoproteína metabólica, por favorecer a proliferação e sobrevivência das células tumorais nas quais sua expressão é elevada. Vários são os compostos capazes de inibir a atividade de FASN, dentre eles o orlistat (Xenical®), que possui efeitos antiproliferativos previamente mostrados em células de câncer de mama, próstata, boca e melanoma. O sistema imunológico apresenta um importante papel na prevenção e defesa do organismo contra neoplasias malignas. As células do sistema imune que se infiltram nos melanomas são produtoras de uma vasta gama de citocinas, dentre elas interleucina 12 (IL-12) e interferon gama (IFN-?) que favorecem uma resposta imune bem sucedida contra os tumores, porém, as células dos melanomas possuem capacidade de produzir interleucina 10 (IL-10) e fator de crescimento transformante beta (TGF-?), capazes de inibir as células imunocompetentes, favorecendo a progressão tumoral e disseminação metastática. O objetivo deste estudo foi avaliar a secreção das citocinas IL-10, IL-12, IFN-? e TGF-? pelas células de melanoma murino B16-F10 após tratamento com orlistat. Para isto, inicialmente determinou-se a dosagem de orlistat capaz de inibir a proliferação celular em 50% (IC50). Em seguida, as células foram tratadas por 24 e 48 horas, quando realizou-se a quantificação da secreção das citocinas por ELISA. Após 24 horas de tratamento, observou-se aumento da secreção de IL-10 e IL-12, no entanto, após 48 horas de tratamento não foi detectada diferenças estatisticamente significantes na secreção de ambas as citocinas, quando comparadas aos seus controles. IFN-? e TGF-? não foram detectáveis. Assim, os resultados desta pesquisa mostram que o tratamento com orlistat alterou a produção das citocinas IL-10 e IL-12, sugerindo que o tratamento promove um equilíbrio entre estas citocinas pró e anti-inflamatórias nas células estudadas Abstract: Fatty acid synthase (FASN) is the enzyme responsible for the endogenous biosynthesis of fatty acids suggested as a metabolic oncoprotein by promoting proliferation and survival of cancer cells. Several compounds are known to inhibit FASN activity, including orlistat (Xenical®), which has antiproliferative effects in breast, prostate, and oral cancer as well as melanoma cells. Melanoma is an aggressive malignant tumor of melanocytes with high propensity for metastatic spread and resistant to chemotherapy. The immune system plays an important role in the prevention and defense against malignant neoplams. In fact, immune cells that infiltrate melanomas produce a wide range of cytokines, such as interleukin 12 (IL-12) and interferon gamma (IFN-?), which favor a successful immune response against the tumor. However, melanomas cells are able to produce interleukin 10 (IL-10) and transforming growth factor beta (TGF-?) and in turn inhibit immunocompetent cells, favoring tumor progression and metastatic spread. The aim of this research was to evaluate the effect of the FASN inhibitor orlistat on the secretion of the cytokines IL-10, IL-12, IFN-? and TGF-? by B16-F10 mouse melanoma cells. For this purpose, we first searched for the IC50 Of orlistat in B16-F10 cells. Then, cells were treated for 24 and 48 hours with the drug and the secretion of cytokines quantified by ELISA. After 24 hours of treatment the secretion of IL-10 and IL-12 was increased, however, after 48 hours there were no statistically significant changes in the secretion of both cytokines, compared to their controls. IFN-? and TGF-? were not detectable. Thus, the results of this study show that the treatment with orlistat change the production of IL-10 and IL-12, suggesting a balance between the secretion of pro- and anti-inflammatory cytokines Mestrado Estomatopatologia Mestre em Estomatopatologia CNPQ 370824/2012-1

O Role-Playing Game (RPG) é definido como um jogo de interpretação de papéis, no qual os participantes podem jogar uns contra os outros, ou trabalharem juntos em prol de um objetivo. Assim, elaborou-se um jogo de RPG para trabalhar o conteúdo de Imunologia com crianças e adolescentes (5a a 8a série) onde as batalhas medievais, envolvendo criaturas fantásticas, se associam a elementos que compõem o Sistema Imunológico, como um xamã que representa um linfócito T. O mestre, neste caso o professor, guiará os participantes para ensinar o conteúdo de forma lúdica, ao longo de uma “guerra” dentro de uma pessoa. Os alunos controlarão os personagens responsáveis por atacar e defender o corpo (agentes infecciosos e glóbulos brancos, respectivamente) dispondo de um dado para a rolagem de suas ações no jogo. Como resultado, espera-se com este trabalho que o conteúdo de Imunologia seja fixado mais facilmente, de forma agradável e divertida. RPG is defined as a Role-Playing Game, in which participants can play against each other, or work together towards a objective. Thereby, an RPG game was developed to work on the content of Immunology with children and adolescents (5th to 8th grade) where medieval battles, involving fantastic creatures, are associated with elements that make up the Immune System, such as a shaman representing an T lymphocyte. To teach Immunology through the RPG is primarily needed a master, will guide the participants to teach the content in a playful way, throughout a "war" within a person. The students who will control the characters responsible for attacking and defending the body (infectious agents and white blood cells, respectively) having a dice for the scrolling of their actions in the game. As a result, it is expected with this work that Immunology content will be more easily fixed in a fun and enjoyable way.