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Póster presentado en la XI Reunión del Grupo de Microbiología Molecular de la Sociedad Española de Microbiología (SEM), celebrada en Sevilla del 6 al 8 de septiembre de 2016., Las altas concentraciones de azúcar del mosto de uva hacen que el estrés osmótico sea uno de los factores limitantes del crecimiento de S. cerevisiae durante las primeras etapas de fermentación. Los mecanismos de adaptación de las levaduras a dicho estrés han sido ampliamente estudiados, conociéndose los genes implicados en las principales cascadas de transducción de señal que desencadenan la respuesta de la célula, sin embargo constantemente se descubren nuevos aspectos fisiológicos de las células bajo estas condiciones. Este trabajo pretende identificar nuevos genes implicados en la tolerancia de la levadura al estrés osmótico mediante una aproximación a escala genómica, no sesgada; con experimentos de competición de colecciones de cepas de levaduras con una representación de todas las deleciones posibles de genes individuales y marcadas con código de barras. Los experimentos se realizaron por triplicado en cultivo continuo durante diez generaciones, equivalente a un crecimiento exponencial, en dos medios diferentes, con glucosa o sorbitol como agente estresante. La abundancia relativa de cada cepa al inicio y final del experimento se estimó mediante secuenciación masiva, tras amplificar la región correspondiente a los dos códigos de barras de cada cepa. Para la identificación de genes cuya deleción tiene un efecto negativo y específico sobre la tolerancia al estrés, se tuvieron en cuenta los resultados del experimento control, en condiciones no estresantes. El experimento permitió también identificar deleciones que confieren una desventaja selectiva en medio basal, pero que pueden ser rescatadas, elevando la presión osmótica del medio. Los resultados obtenidos son diferentes entre los experimentos con glucosa o sorbitol, aunque hay coincidencias, como el gen HOG1. Además, se revela la importancia de funciones no relacionadas hasta ahora con la tolerancia al estrés osmótico. Así, se aprecia que las células son muy dependientes del buen funcionamiento mitocondrial para tolerar el estrés por glucosa, o del control de la gluconeogénesis y funciones del peroxisoma, en el caso del sorbitol. También se observa el rescate por alta presión osmótica de cepas defectivas en algunos procesos de control transcripcional o en el sistema de membranas internas (Golgi, endosoma, retrómero, o los complejos EXCRT-I, II, y III)., Ministerio de Economía y Competitividad: proyecto AGL2015-63629-R, Junta de Andalucía: proyecto P10-AGR6544.

Póster presentado en el XXV Congreso de la Sociedad Española de Microbiología (SEM), celebrado en Logroño del 7 al 10 de julio de 2015.