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[Resumen]: Las mitocondrias son orgánulos intracelulares, y es el lugar donde tiene lugar la fosforilación oxidativa, a través de la cual se produce energía celular en forma de adenosina trifosfato (ATP). Estos orgánulos tienen su propio genoma constituido por genes que codifican para ARNs ribosomales (ARNr), ARNs de transferencia (ARNt), y proteínas de la cadena respiratoria y proteínas ribosomales. Drosophila melanogaster se ha utilizado como modelo animal para comprender la biología de distintas enfermedades mitocondriales relacionadas con el genoma mitocondrial, y, además, secuencias del ADN mitocondrial (ADNmt) se han usado para establecer relaciones filogenéticas entre especies próximas de Drosophila y de otros muchos géneros del reino animal. En el presente trabajo hemos amplificado mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) fragmentos del ADNmt de D. buzzatii B6 (salvaje) y D. buzzatii white (mutante), y se secuenciaron 6 fragmentos de ADNmt. Utilizando el software Ugene hemos realizado un alineamiento múltiple de secuencias con una secuencia de referencia consenso del genoma mitocondrial de Drosophila buzzatii. Los datos indican discrepancias entre las secuencias amplificadas y la secuencia de referencia, la mayor parte de los cambios son sustituciones, de las cuales, la mayoría son transiciones y también se observan transversiones y deficiencias. Hay estudios que muestran que alteraciones puntuales en el ADNmt de Drosophila tienen un efecto en el fenotipo de los individuos y en la biología mitocondrial. Sería necesario realizar más investigaciones para saber si los cambios que hemos detectado entre los fragmentos de ADNmt y la secuencia de referencia tienen algún efecto a nivel mitocondrial en Drosophila buzzatii. [Resumo]: As mitocondrias son orgánulos intracelulares e é o lugar onde ten lugar a fosforilación oxidativa, a través da cal prodúcese enerxía celular en forma de adenosin trifosfato (ATP). Estes orgánulos teñen un xenoma propio composto por xenes que codifican os ARN ribosómicos (ARNr), os ARN de transferencia (ARNt) e as proteínas da cadea respiratoria e as proteínas ribosómicas. Drosophila melanogaster usouse como modelo animal para comprender a bioloxía de diferentes enfermidades mitocondriales relacionadas co xenoma mitocondrial e, ademais, usáronse secuencias de ADNmt para establecer relacións filoxenéticas entre especies próximas de Drosophila e de outros moitos xéneros do reino animal. No presente traballo, amplificamos mediante a reacción en cadea da polimerasa (PCR) fragmentos de ADNmt de D. buzzatii B6 (salvaje) y D. buzzatii white (mutante), e se secuenciaron 6 fragmentos de ADNmt. Usando o software Ugene, realizamos unha aliñación de secuencias múltiples cunha secuencia de referencia do xenoma mitocondrial de Drosophila buzzatii. Os datos indican discrepancias entre as secuencias amplificadas e a secuencia de referencia, a maioría das modificacións son substitucións, e a maior parte delas son transicións, tamén se observan transversións e deficiencias. Outros estudos demostraron que os cambios puntuais no ADNmt de Drosophila teñen un efecto sobre o fenotipo de individuos e na bioloxía mitocondrial. Será necesario máis investigación para ver se os cambios detectados entre os fragmentos de ADNmt e a secuencia de referencia teñen algún efecto a nivel mitocondrial en Drosophila buzzatii. [Abstract]: Mitochondria are intracellular organelles, where oxidative phosphorylation takes place, through which cellular energy is produced in the form of adenosine triphosphate (ATP). These organelles have their own genome consisting of genes that code for ribosomal RNAs (rRNAs), transfer RNAs (tRNAs), and respiratory chain proteins and ribosomal proteins. Drosophila melanogaster has been used as an animal model to understand the biology of different mitochondrial diseases related to the mitochondrial genome. Additionally, mtDNA sequences have been used to establish phylogenetic relationships among closely related animal species. In the present work, we have amplified by PCR (polymerase chain reaction) several fragments of mtDNA of D. buzzatii B6 (wild type) and D. buzzatii white (mutant), and 6 fragments were sequenced. Using the Ugene software, we have performed a multiple sequence alignment with a reference sequence of the Drosophila buzzatii mitochondrial genome. The data indicates discrepancies between the amplified sequences and the reference sequence, most of the changes are substitutions, and most of them are transitions, and transversions, and deletions are also observed. Other studies have shown that point changes in Drosophila mtDNA have an effect on the phenotype of individuals and on mitochondrial biology. More research would be required to see if the changes we have detected between the mtDNA fragments and the reference sequence could have any effect at the mitochondrial level in Drosophila buzzatii. Traballo fin de grao (UDC.CIE). Bioloxía. Curso 2019/2020

La identificación de sospechosos en casos criminales se ha facilitado desde la aplicación de pruebas de ADN a diferentes muestras. El uso de esta técnica para la tipificación forense a partir de muestras fecales humanas aún presenta complicaciones, por lo que en esta investigación se evaluaron dos protocolos de extracción de ADN con ciertas modificaciones para determinar el de mayor efectividad. Se realizaron extracciones orgánicas y mediante el kit comercial “DNA IQTM Casework Sample Kit para Maxwell ®16” a trozos de 4 cm2 y 1 cm2 de papel FTA impregnado con heces de un mismo individuo. En todos los casos se obtuvieron resultados útiles. Sin embargo, la tipificación forense óptima (dadas las características del electroferograma) se logró al utilizar el kit comercial en un área de papel FTA impregnado de 1 cm2 en dilución 1:4. The identification of suspects in criminal investigations has been facilitated since DNA test are executed on different samples. The application of this technology for forensic typification from human fecal samples still presents complications therefore this research evaluated two DNA extraction protocols with modifications to determine that of major efficiency. Organic extractions and extractions using the commercial kit “IQTM DNA Casework Sample Kit for Maxwell ® 16” on FTA portions of 4cm2 and 1cm2 impregnated with feces from the same individual were done to accomplish the objective. In all the assays the results were useful, however; the best forensic typification (by the electropherogram characteristics) was obtained by using the commercial kit in an area of 1 cm2 of FTA paper impregnated in a 1:4 dilution.