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The Hartree-Lowry method was developed and implemented for quantification of protein in Arthorspira platensis microalgae by spectrophotometry UV-Vis. In order to achieve this goal, the protein extraction factors were optimized by Box Behnken design of response surface and the following results of the implementation parameters were obtained: the linearity showed a coefficient of determination (R2 ) greater than 0.995, a coefficient of variation less than 2% for repeatability, a percentage recovery within 94% to 101%, the limit of detection and limit of quantification were 2.36 µg/mL and 7.86 µg/mL respectively, and the robustness showed that some parameters such as sample weight and volume of reagent C presented high influence in the evaluated factors. La metodología analítica implementada para la cuantificación de proteínas en la microalga Arthorspira platensis por espectrofotometría UV-Vis fue el método de Hartree-Lowry. Para lograr este objetivo, se optimizaron los factores de extracción de proteínas por el método estadístico de diseño de superficie de respuesta de Box Behnken y se obtuvieron lossiguientes resultados de los parámetros implementados: la linealidad, donde se reportó un coeficiente de determinación (R2 ) mayor a 0,995, en el estudio de repetibilidad un coeficiente de variación menor al 2 %, un porcentaje de recuperación entre 94 % y 101 %, los límites de detección y cuantificación fueron 2,36 µg/mL y 7,86 µg/Ml, respectivamente y el estudio de la robustez demostró que el método analítico tuvo mayor sensibilidad al cambio del peso de la muestra y al cambio del volumen de reactivo C respecto al resto de factores evaluados.