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Um experimento foi realizado com o objetivo de estimar a concentração espermática das espécies dourado (Salminus brasiliensis), curimba (Prochilodus lineatus), jundiá (Rhamdia quelen), cascudo-preto (Rhinelepis aspera) e tilápia-do-nilo (Oreochromis niloticus) pelo método de espermatócrito. Utilizaram-se 19, 58, 51, 43 e 85 reprodutores de dourado, curimba, jundiá, cascudo-preto e tilápia-do-nilo, respectivamente. Com exceção da tilápia-do-nilo, os reprodutores foram submetidos ao processo de indução hormonal e posteriormente submetidos a coleta de sêmen. Foram comparadas as técnicas de mensuração da concentração espermática do sêmen por contagem em câmara hematimétrica de Neubauer e por espermatócrito. Os resultados obtidos foram submetidos à análise de regressão a 5% de probabilidade. As concentrações espermáticas mensuradas por ambas as técnicas apresentaram relação linear, para curimbas, jundiás e tilápias-do-nilo, com equações y = 6,6624 × 10(9) + 3,68553 × 10(8)x; y = 2,153 × 10(9) + 4,426 × 10(8)x e y = -9,0897 × 10(8) + 6,0167 × 10(8), respectivamente. O método de espermatócrito pode ser utilizado para estimar a concentração espermática do sêmen de curimbas, jundiás e tilápias-do-nilo.The objective of this experiment was estimate sperm concentration of "dourado" (Salminus brasiliensis), "curimba" (Prochilodus lineatus), "jundiá" (Rhamdia quelen), "cascudo-preto" (Rhinelepis aspera) and Nile tilapia (Oreochromis niloticus) by the method of spermatocrit. It was used 19, 58, 51, 43 and 85 brood fish of "dourado", "curimba", "jundia", "cascudo-preto" and Nile tilapia, respectively. Except for the Nile tilapia, the fishes were subjected to the hormonal induction process and then submitted to the semen collection. The measurement techniques of the sperm concentration by sperm count in Neubauer chamber (CSPZ) and by spermatocrit (ESPMT) were compared. The results were submitted to the regression analysis at 5% of probability. It was observed that the variables CSPZ and ESPMT presented linear relationship to the "curimba", "jundia" and Nile tilapia with equations y = 6.6624 × 10(9) + 368553 × 10(8)x; y = 2.153 × 10(9) + 4.426 × 10(8)x and y = -9.0897 × 10(8) + 6.0167 × 10(8), respectively. The method of spermatocrit can be used to estimate the sperm concentration of "curimba", "jundiá" and Nile tilapia.