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Se evaluó la sensibilidad in vitro al benznidazol y al extracto de hojas de la planta Zanthoxylum chiloperone de diez cepas del Trypanosoma cruzi. Se utilizaron formas epimastigotas de las cepas, pertenecientes a diferentes linajes, diferente procedencia geográfica, incluidas tres de Paraguay, y aisladas de hospederos distintos, abarcando humanos, triatominos y animales silvestres. El grado de sensibilidad a la droga y al extracto vegetal fue estimado por el porcentaje de lisis de los parásitos a las 24 y 48 horas de exposición. Se observó un amplio rango de variación en el porcentaje de lisis entre las cepas, de 22,2% a 90,8% a la concentración del benznidazol de 200 µg/mL, con el hallazgo de una cepa con sensibilidad nula al mismo. Con respecto al extracto vegetal, tres concentraciones fueron testadas, de 500, 700 y 900 µg/mL, observándose variaciones en los porcentajes de lisis entre las cepas con las dos primeras concentraciones, entre un 2,1% y 100%, con lisis total en todas las cepas a la concentración de 900 µg/mL. No se observó asociación entre la diversidad de respuesta a los compuestos y la clasificación de las cepas ni con su origen geográfico y tipo de hospedero. Estas diferencias observadas resaltan la heterogeneidad de las poblaciones naturales del T. cruzi, aspecto importante a tener en cuenta en los estudios de sensibilidad a quimioterapéuticos y en los tamizajes primarios de nuevos antichagásicos. Así mismo, se destaca la eficacia del extracto vegetal sobre diferentes cepas de este parásito. The in vitro sensitivity of ten Trypanosoma cruzi strains to benznidazole and the leaf extract of the plant Zanthoxylum chiloperone was evaluated. Epimastigotes forms of strains that belonged to different lineages, different geographic origin, including three from Paraguay and isolated from different hosts (humans, triatomines, wild animals) were used. The degree of sensitivity to the drug and vegetal extract was estimated by the lysis percentage of the parasites at 24 and 48 hs of exposure. It was observed a wide range of variation in the lysis percentages between strains from 22.2% to 90.8% at a benznidazole concentration of 200 µg/mL, finding a strain without sensitivity to the drug. In relation to the vegetal extract, three concentrations were tested, 500, 700 and 900 µg/mL, observing variations in the lysis percentages between strains with the two first concentrations, between 2.1% and 100%, and with total lysis in all strains at the concentration of 900 µg/mL. Association was not observed between the diversity of responses to the compounds and the strain classification, geographic origin and host type.The observed differences emphasizes the heterogeneity of the natural populations of T. cruzi, an important aspect to be considered in the sensitivity studies of chemotherapics and in the primary screenings of new antichagasic drugs. It should also be remarked the efficacy of the vegetal extract on different strains of this parasite.