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Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas (FAPEAM) Klebsiella pneumoniae resistant to beta-lactams are present in hospitals worldwide and reduce treatment alternatives. In this study, 40 K. pneumoniae isolates were characterized. All of them were resistant to beta-lactam antibiotics and classified as multidrug resistant. Among these, eight isolates were resistant to carbapenems and six of which had the gene blaKPC-2, encoding the enzyme Klebsiella pneumoniae carbapenemase (KPC). The blaTEM and blaCTX-M genes were found in 80% of the samples. The 40 isolates were grouped into 12 pulses (A to L) according to the genetic similarity determined by the DNA macro-restriction followed by pulsed-field gel electrophoresis. A total of 20 isolates were classified as pulsotype A, which was subdivided into 13 subtypes (A1 to A13), with subtype A1 being the most prevalent. Representatives of pulsotype A belong to the ST11, clonal complex CC258. In this study, we identified four new STs: ST2540, ST2308, ST2258, and ST2307. AMKP5 and AMKP2, belonging to subtypes A7 and A8, respectively, are resistant to carbapenems but did not present the blaKPC gene. Sequencing of the AMKP5 genome indicated mutations in the C-terminal region of the OmpK36 porin which may alter the entry of carbapenems into the cell. Genome sequencing of the AMKP10 isolate identified the plasmid pAMKP10, with 48.454 bp belonging to the IncX5 incompatibility group. In this plasmid, the blaKPC-2 gene was found in a non-Tn4401 genetic element (NTEKPC) containing tnpA-ISEc63-like / tnpR-Tn3 / tnpA-ISKpn27 / blaKPC-2 / ΔISKpn6, based on Tn1722. All isolates with the blaKPC-2 gene had the same plasmid. Conjugation of this plasmid to Escherichia coli J53 occurred from ST11 isolates with low conjugation frequencies (8.23 x 10-12 to 1.31 x 10-7) resulting in resistance to carbapenems. Finally, the outbreak of carbapenem-resistant K. pneumoniae resistant of this Amazonian hospital involved the transfer of the NTEKPC-containing pAMKP10 between two lineages (ST11 and ST2302) but was largely due to the clonal dissemination of the ST11 endemic lineage. Klebsiella pneumoniae resistentes aos beta-lactâmicos estão presentes em hospitais do mundo todo e reduzem as alternativas de tratamento. Nesse estudo, 40 isolados de K. pneumoniae foram caracterizados. Todos foram classificados como multirresistentes e com resistência aos antibióticos beta-lactâmicos. Dentre estes, oito amostras são resistentes aos carbapenêmicos e seis delas têm o gene blaKPC-2, que codifica a enzima Klebsiella pneumoniae carbapenemase (KPC). Os genes blaTEM e blaCTX-M foram encontrados em 80% das amostras. Os 40 isolados foram agrupados em 12 pulsotipos (A a L) de acordo com a similaridade genética determinada pela macrorrestrição do DNA seguida de eletroforese em gel de campos pulsados. Um total de 20 isolados foram classificados como pulsotipo A, o qual foi subdividido em 13 subtipos (A1 a A13), sendo o subtipo A1 o prevalente. Representantes do pulsotipo A pertencem ao ST11, complexo clonal CC258. Neste estudo, quatro novos STs foram identificados: ST2540, ST2308, ST2258 e ST2307. AMKP5 e AMKP2, dos subtipos A7 e A8, respectivamente, são resistentes aos carbapenêmicos, mas não apresentaram o gene blaKPC. O sequenciamento do genoma da AMKP5 indicou mutações na região C-terminal da porina OmpK36 que pode alterar a entrada dos carbapenêmicos na célula. O sequenciamento do genoma da amostra AMKP10 identificou o plasmídeo pAMKP10, com 48,454 pb pertencente ao grupo de incompatibilidade IncX5. Neste plasmídeo, o gene blaKPC foi encontrado em um ambiente genético diferente do Tn4401 (NTEKPC do inglês, non-Tn4401 genetic element) contendo tnpA-ISEc63-like/tnpR-Tn3/tnpA-ISKpn27/blaKPC-2/ΔISKpn6, baseado no Tn1722. Todos os isolados com o gene blaKPC-2 apresentaram o mesmo plasmídeo. A conjugação deste plasmídeo para Escherichia coli J53 ocorreu a partir dos isolados ST11 com baixas frequências de conjugação (de 8,23 x 10-12 a 1,31 x 10-7) resultando em resistência aos carbapenêmicos. Por fim, observou-se que o surto de K. pneumoniae resistentes aos carbapenêmicos deste hospital Amazonense envolveu a transferência do pAMKP10 contendo NTEKPC entre duas linhagens (ST11 e ST2302), mas ocorreu em grande parte devido à disseminação clonal da linhagem endêmica ST11. FAPEAM: 24868.484.14650.07112014-35526 FAPESP: 13/07600-l3 CNPq: 131314/2018-1

Relatório de Estágio do Mestrado Integrado em Ciências Farmacêuticas apresentado à Faculdade de Farmácia FARMÁCIA COMUNITÁRIA:A farmácia comunitária é uma das principais áreas de atuação do farmacêutico. A realização de estágio curricular nesta área é fundamental para completar a nossa formação, complementando e sedimentando os conhecimentos adquiridos ao longo dos últimos cinco anos. O meu estágio teve a duração de aproximadamente quatro meses. Durante o primeiro mês, ensinaram-me e desempenhei funções de back-office (principalmente entrada de encomendas, organização do armazém, gestão de devoluções, controlo de prazos de validade, registo dos termohigrómetros) e assisti a atendimentos. No período seguinte, para além dessas funções também comecei a prestar atendimento à população (uma das funções mais complexas). Na duração do estágio, foram-me também mostradas situações mais específicas como o fecho da faturação e receituário e a gestão de medicamentos psicotrópicos. Durante o tempo que estagiei tive a oportunidade de fazer determinações analíticas (glicémia, colesterol total e triglicéridos) e reconstituição de suspensões orais. Também pude participar em algumas formações, que esclareceram muitas das minhas dúvidas a nível de aconselhamento de produtos de venda livre.FARMÁCIA HOSPITALAR:O estágio curricular marca o primeiro contacto com a atividade profissional e o mundo do trabalho para o estudante finalista. Desta forma, para completar a minha formação académica optei por realizar uma parte do meu estágio final no Centro Hospitalar e Universitário de Coimbra. Os Serviços Farmacêuticos são compostos por diversas unidades funcionais, que atuam de forma bem coordenada para garantir que o medicamento certo chega ao doente certo na altura certa. O meu estágio decorreu em duas dessas unidades funcionais: na distribuição (onde se procede à validação das prescrições médicas e distribuição dos diferentes tipos de medicação aos doentes e serviços) e na farmacotecnia (composta por três áreas distintas de preparação de formas farmacêuticas – misturas intravenosas, citotóxicos e radiofármacos). Enquanto estagiária aprendi muito e consegui aplicar conhecimentos já previamente adquiridos, no dia-a-dia do funcionamento dos serviços farmacêuticos e graças à realização de trabalhos, apresentações e pesquisas diversas.MONOGRAFIA:Os carbapenemos fazem parte da classe de antibióticos β-lactâmicos; estes atuam inibindo a síntese da parede bacteriana, estrutura de grande importância para a sobrevivência das bactérias. Ao longo do tempo, algumas bactérias desenvolveram mecanismos de resistência, como forma de sobreviver à ação bactericida destes agentes; um dos mecanismos de maior relevo é a produção de carbapenemases (β-lactamases que degradam diversos β-lactâmicos, incluindo os carbapenemos). As β-lactamases podem ser classificadas de acordo com características enzimáticas (funcional) ou através da homologia de aminoácidos (molecular). Na classificação molecular de Ambler, as carbapenemases encontram-se nas classes A, B e D (sendo que A e D têm serina no local ativo e B tem zinco). As carbapenemases mais relevantes de cada classe são: SME, NMC, IMI, KPC e GES (classe A), VIM, IMP, GIM, SIM, SPM, NDM (classe B), OXA (classe D). Estas carbapenemases têm espetros de ação diferentes, comportamentos diferentes a nível da inibição enzimática e distribuições geográficas diferentes. Nos últimos anos, a resistência a carbapenemos tem crescido a nível europeu, especialmente observado em Acinetobacter spp. e Enterobacteriaceae. Os países mediterrânicos são os mais afetados por esta problemática, que é responsável por elevada mortalidade e morbilidade. O Centro Europeu de Prevenção e Controlo das Doenças (ECDC) é uma entidade europeia que promove a monitorização dos padrões de resistência e a adoção de medidas que ajudem a ultrapassar este grave problema. COMMUNITY PHARMACY:Community pharmacy is one of the most important fields for a pharmacist. A curricular internship in this area is fundamental to complete our development, complementing the concepts learned the last five years. My internship had a duration of, approximately, four months. During the first month, I completed back-office functions (especially entering orders, organizing said orders, managing the devolutions, controlling the due dates, weekly registering the data of the thermohygrometers) and also observing the customer service. After that, I also started helping the customers (one of the most complex functions). During this internship, I also learned about specific situations such as the closing of the month and the management of psychotropic drugs. I was able to make analytic determinations (glycaemia, total cholesterol and triglycerides) and reconstitution of oral suspensions. I also had the opportunity to participate in lectures, that helped answering my questions about over-the-counter (OTC) products.HOSPITAL PHARMACY: The curricular internship marks the first contact with the professional activity and the world of work for a finalist student. Therefore, to complete my academic formation, I chose to do a part of my final internship in Hospital Pharmacy. The Pharmaceutical Services have many functional unities, that work together coordinately to assure that the right medication is used on the right patient at the right time. My internship occurred in two of those unities: on distribution (where medical prescriptions are validated and different medication is distributed to the patients or services) and on pharmacotechny (on three distinct areas – production of intravenous mixtures, cytotoxic preparations and radiopharmaceuticals). As an intern, I learned several things and I was able to apply some of my prior knowledge, by accompanying the daily work schedule on the pharmacy and by making some presentations and varied researches.MONOGRAPH:Carbapenems are part of the β-lactam class; they inhibit the synthesis of the bacteria cell wall, an important structure for the survival of bacteria. Some bacteria have developed, over time, mechanisms of resistance in order to survive to the bactericide action of these agents; one of the most important mechanisms is the production of carbapenemases (β-lactamases that hydrolyze a variety of β-lactams, including carbapenems). The β-lactamases can be classified according to enzymatic characteristics (functional) or amino acid homology (molecular). In Ambler’s molecular classification, carbapenemases are found in three classes: A, B and D (A and D have serine at the active-site and B requires zinc at the active-site). The most relevant carbapenemases of each class are: SME, NMC, IMI, KPC e GES (class A), VIM, IMP, GIM, SIM, SPM, NDM (class B), OXA (class D). These carbapenemases have different hydrolysis spectrums, different behaviors of enzymatic inhibition and different geographic spread. In the last years, carbapenem resistance has increased in Europe, especially in Acinetobacter spp. and Enterobacteriaceae. Mediterranean countries appear to be the most affected by this problem that is responsible to high mortality and morbidity rates. The European Centre for Disease Prevention and Control (ECDC) is a European organization that promotes the monitoring of resistance patterns and the adoption of measures that help diminish this serious problem.

CAPEs Objetivo: Investigar as alterações dos encéfalos e olhos de conceptos recém-nascidos de ratas que se submeteram a peritonite fecal autógena e avaliar as respostas com a intervenção de dois esquemas terapêuticos com moxifloxacino-dexametasona e meropenem realizados durante a prenhez. Métodos: Foram incluídas, de forma aleatória, 30 ratas Wistar para acasalamento. Dessas, 15 ratas tiveram esfregaço vaginal positivo para prenhez. O experimento foi realizado em duas fases: 1. Desenvolvimento do modelo experimental: As ratas foram distribuídas em : AGrupo estudo com cinco ratas após peritonite fecal autógena com suspensão de fezes a 10 %, na dose de três ml/Kg no nono dia de prenhez, B- Grupo estudo com cinco ratas após peritonite fecal autógena com suspensão de fezes a 10 %, na dose de quatro ml/Kg no nono dia de prenhez e C- grupo de cinco ratas prenhes sem peritonite fecal autógena (controle). Após o parto, foi realizada a eutanásia e o inventário das cavidades abdominal e torácica das ratas dos grupos estudo A e B e os dados de seus conceptos. 2.Intervenção com esquemas terapêuticos: Grupo1: Duas ratas prenhes após peritonite fecal autógena com suspensão de fezes a 10 %, na dose de quatro ml/Kg no nono dia de prenhez que receberam moxifloxacino - dexametasona intraperitoneal em 48 e 72 horas e Grupo 2: Duas ratas prenhes após peritonite fecal autógena com suspensão de fezes a 10 %, na dose de quatro ml/Kg no nono dia de prenhez que receberam meropenem intravenoso em 48 e 72 horas. Após o parto, foi realizada a eutanásia e o inventário das cavidades abdominal e torácica destas e a decapitação com inspeção do crânio, da consistência dos cérebros e os olhos de todos os conceptos. O projeto foi aprovado pelo Comitê de Ética da Faculdade de Ciências Médicas de Campina Grande- Paraíba. P ≤ 0.05 foi usado para rejeição da hipótese de nulidade. Resultados: O modelo de peritonite fecal autógena selecionado foi o que utilizou a dose de quatro ml/Kg da suspensão de fezes a 10%. Das 15 ratas com esfregaço vaginal positivo dez estavam prenhas, sendo três no grupo A, quatro no grupo B e três no grupo C. Os cérebros dos conceptos das ratas que receberam quatro ml/kg da suspensão de fezes a 10% se mostraram, significantemente, menores e com consistência menos firme que aqueles do grupo controle, assim como, comparados com os das intervenções terapêuticas. Cataratas congênitas foram observadas em nove de 26 (34,6%) conceptos das ratas que receberam quatro ml/Kg da suspensão de fezes a 10% e não receberam intervenção terapêutica, sendo sete bilateral e dois unilateral. Nenhuma catarata congênita foi observada nos 20 recém-nascidos das ratas que receberam a combinação de moxifloxacino - dexametasona intraperitoneal. Catarata congênita foi observada em três (13.6%) dos 22 recém-nascidos das ratas que receberam meropenem intravenoso. Conclusões: Septicemia gestacional em ratas pode produzir alteração cerebral e catarata congênita nos conceptos. Com a utilização dos esquemas terapêuicos, nas ratas prenhas submetidas à peritonite fecal autógena com a dose de quatro ml/Kg da suspensão de fezes a 10%, houve menor número de casos de conceptos com alterações encefálicas e oculares. Purpose: To investigate the abnormalities of brains and eyes of newborn fetuses of rats that underwent autologous fecal peritonitis and evaluate the responses with the intervention of two treatment regimens with moxifloxacin and meropenem - dexamethasone performed during pregnancy. Methods: Randomly, 30 Wistar rats for mating. Of these, 15 rats had a positive vaginal smear for pregnancy. The experiment was conducted in two phases: 1. Development the experimental model: The rats were divided into: Group A- study with five rats after fecal peritonitis autogenous with faeces of a 10% suspension at a dose of three ml/kg on the ninth day of pregnancy, group B study with five rats after fecal peritonitis autogenous with faeces of a 10% suspension at a dose four ml/kg on the ninth day of pregnancy and C-group of five pregnant rats without autologous fecal peritonitis (control). After delivery, euthanasia and inventory of abdominal and thoracic cavities of study groups A and B and the data of their fetuses. 2.Intervention with therapeutic regimens : Group 1 : Two pregnant rats after fecal peritonitis autogenous suspension of faeces to 10 % at a dose four ml / kg on the ninth day of pregnancy who received moxifloxacin - intraperitoneal dexamethasone at 48 and 72 hours and Group 2 : Two pregnant rats, autogenous after peritonitis with stool suspension at 10 % in doses four ml / kg on the ninth day of pregnancy who received intravenous meropenem in 48 and 72 hours. After delivery, euthanasia and inventory of abdominal and chest cavities of these and the beheading with skull inspection was carried, the consistency of the brain and the eyes of all fetuses . The project was approved by the Ethics Committee of the Faculty of Medical Sciences of Campina Grande - Paraíba. P ≤ 0.05 was used to reject the null hypothesis. Results: The fecal peritonitis autogenous model selected was that using 10% faeces suspension at a dose four ml/kg. Of the 15 rats with positive vaginal smear ten were pregnant, three in group A, four in group B and three in group C. The brains of fetuse of rats given four ml/kg of 10% faeces suspension is shown, significantly, smaller and less firm consistency than those of the control group, as compared with the therapeutic interventions. Congenital cataract was observed in nine of 26 (34.6%) fetuses of rats given four ml/kg of 10% faeces suspension received no therapeutic intervention, seven bilateral and two unilateral. No congenital cataract was observed in 20 newborns of rats given the combination of intraperitoneal moxifloxacin - dexamethasone. Congenital cataract was observed in three (13.6%) of 22 infants of rats given intravenous meropenem. Conclusions: Gestational septicemia in rats can produce brain abnormalities and congenital cataracts in fetuses. With the use of treatment regimens, in pregnant rats submitted autologous fecal peritonitis with a dose of four ml/kg of 10% faeces suspension, there were few cases of fetuses with brain and eye abnormalities.

INTRODUÇÃO: A disseminação de Klebsiella pneumoniae carbapenemase (KPC) no Brasil e a recente detecção de bactérias produtoras de New Delhi metalo-β- lactamase (NDM-1) em hospital terciário do sul do Brasil indicam a necessidade da avaliação da presença destas enzimas em enterobactérias resistentes a carbapenêmicos (ERC). OBJETIVO: Avaliar prevalência de carbapenemases nas ERC em quatro hospitais terciários de Porto Alegre, por meio de PCR multiplex em tempo real. MÉTODOS: Estudo descritivo, período de abril a dezembro de 2013. Isolados bacterianos de pacientes internados foram identificados pelo sistema automatizado VITEK 2, com realização do teste de suscetibilidade aos antimicrobianos. Amostras com isolados de ERC foram encaminhadas ao laboratório de referência para análise por PCR em tempo real para identificação de carbapenemases. RESULTADOS: Total de 701 isolados. As ERC predominantes foram K. pneumoniae (47% das amostras positivas) e Enterobacter cloacae (18%). As carbapenemases mais frequentes foram KPC (48%), OXA-48-like (3%) e NDM (2%). Em 47% das amostras não foi identificado o mecanismo de resistência. Isolados originados de culturas de vigilância foram associados com maior positividade para carbapenemases do que isolados de amostras clínicas (p

A espécie Acinetobacter baumannii é a representante mais importante do gênero, sendo considerado o patógeno de maior relevância, dentro do complexo A. baumannii – A. calcoaceticus, para as instituições de saúde mundialmente. Sua importância clínica tem aumentado nos últimos anos em parte devido a sua notável capacidade de aderência a superfícies devido a presença de estruturas como pili, produção de EPS (exopolissacarídeo) e presença de genes que favorecem a formação de biofilme, proporcionando maior adesão entre as células e consequente resistência aos antimicrobianos. Outro destaque é sua capacidade de regular ou adquirir resistência, em particular por meio das oxacilinases, codificadas pelo gene OXA, que apresentam atividade hidrolítica potente contra penicilinas resistentes às penicilinases. Até o momento, 250 tipos de OXA já foram descritas. A expressão de genes OXA pode ser aumentada na presença do elemento de inserção ISAba1, localizado à montante do gene, conferindo uma vantagem seletiva para o isolado quando este depende da expressão eficiente de uma variedade de genes de resistência a antibióticos. Na sua ausência, a resistência geralmente é expressa na presença de dois ou mais genes OXA. A capacidade de formar biofilme e a presença dos genes blaPER-1, OXA-23, OXA-40, OXA-51, OXA-58 e ISAba1 foram investigados em 84 isolados provenientes de 64 pacientes de UTIs de Goiânia. Observou-se que 78,5% dos isolados formaram biofilme, dos quais 23% apresentaram o gene blaPER-1. A presença do gene OXA-51 foi detectada em todos os isolados, enquanto que 64,3% dos isolados apresentavam o gene OXA-23, e em 24% dos isolados foi encontrado o gene OXA-58. O gene ISAba1 foi detectado à montante dos genes OXA-51, OXA-23 e OXA-58, em 33,3% (28/84), 92,6% (50/54) e 10% (2/20) dos isolados, respectivamente. Nenhum isolado estudado apresentou o gene OXA-40. Dos 62 isolados resistentes ao imipenem e meropenem, 76% dos isolados possuíam o gene OXA-23 enquanto que 24,2% possuíam o gene OXA-58. Dentre estes isolados, 79% (49/62) apresentaram a sequência de inserção ISAba1. No presente estudo, a presença do gene blaPER-1 não foi associada com a formação de biofilmes, enquanto que a presença de genes OXA estava relacionada à resistência em Acinetobacter baumannii. The species Acinetobacter baumannii is the most important representative of the genus, being globally considered the pathogen of larger relevance, within the complex A. baumannii – A. calcoaceticus, to healthcare institutions worldwide. Its clinical significance has increased in recent years partly due to its notable capacity of adherence to surfaces due to presence of structures such as pili, production of EPS (exopolysaccharides) and presence of genes that favor biofilm formation, providing larger adhesion between the cells and consequent resistance to the antimicrobials. Another important characteristic is its capacity to regulate or to acquire antibiotic resistance, specifically through oxacilinases, encoded by the gene OXA, that presents potent hydrolytic activity against penicilinase-resistant penicillins. Until the moment, 250 types of OXA were already described. The expression of OXA genes can be increased in the presence of the insertion element ISAba1, which when located upstream of the gene, confer a selective advantage for the isolate when this depends on the efficient expression of a variety of resistance genes. In its absence, the resistance is usually expressed in the presence of two or more OXA genes. The capacity of biofilm formation and the presence of the genes blaPER-1, OXA-23, OXA-40, OXA- 51, OXA-58 and ISAba1 were investigated among 84 isolates from 64 patients of the Intensive Care Units of Goiânia. It was observed that 78.5% of the isolates formed biofilm, of which 23% presented the gene blaPER-1. The presence of OXA-51 gene was detected in all isolates, whereas 64.3% of the isolates had the OXA-23 gene and 24.0% of the isolates had the OXA-58 gene. The ISAba1 gene was detected upstream of the OXA-51, OXA-23 and OXA-58 genes in 33.3% (28/84), 92.6% (50/54) and 10.0% (2/20) of the isolates, respectively. None of the isolates studied presented the gene OXA-40. Of the 62 isolates resistant to imipenem and meropenem, 76.0% possessed the OXA-23 gene while 24.2% of the isolates possessed the OXA-58 gene. Of these isolates, 79.0% (49/62) presented the gene ISAba1. In the present study, the blaPER-1 gene presence was not associated with the biofilm formation, while the presence of OXA genes was related to resistance in Acinetobacter baumannii. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

INTRODUÇÃO E OBJETIVO: A resistência bacteriana é problema frequente e importante no ambiente nosocomial. Nesse contexto, várias bactérias apresentam habilidade de desenvolver mecanismos de resistência enzimáticos, destacando-se as Enterobacteriaceae. Nesta família de microrganismos, a produção de Klebsiella pneumoniae carbapenemase (KPC) é um mecanismo emergente, o que justifica sua vigilância constante. MATERIAL E MÉTODO: Este trabalho pesquisou o fenótipo de KPC em 30 isolados clínicos de enterobactérias resistentes a cefalosporinas de terceira geração e sensibilidade diminuída a carbapenem oriundas de dois hospitais (em Porto Alegre e na Grande Porto Alegre, RS). Realizou-se discodifusão com imipenem, meropenem e ertapenem, e 14 cepas com halo < 22 mm para o último antimicrobiano foram submetidas ao teste de Hodge modificado. RESULTADOS: Nenhuma amostra apresentou carbapenemase (Hodge negativo). DISCUSSÃO: Apesar de não ter sido detectada carbapenemase, a resistência aos carbapenens possivelmente pode ser atribuída à presença de betalactamases cromossômicas (AmpC) e/ ou de amplo espectro (ESBL) associada à alteração de permeabilidade nos canais de porina. CONCLUSÃO: Considerando o caráter emergente da KPC, torna-se importante seu rastreamento em isolados de enterobactérias com sensibilidade diminuída ao ertapenem. INTRODUCTION AND OBJECTIVE: Bacterial resistance is a frequent and important problem in the nosocomial environment. In this context, several bacteria have the ability to develop mechanisms of enzymatic resistance, mainly Enterobacteriaceae. In this family of microorganisms, the production of Klebsiella pneumoniae carbapenemase (KPC) is an emerging mechanism, which should be under constant observation. MATERIAL AND METHOD: This study investigated the phenotype of KPC in 30 clinical isolates of Enterobacteriaceae resistant to third generation cephalosporin and carbapenem from two hospitals (Porto Alegre city and Porto Alegre, RS). It was performed disk diffusion method with imipenem, meropenem and ertapenem. Additionally, 14 strains with halo < 22 mm for the last antimicrobial agent underwent modified Hodge test. RESULTS: No sample showed carbapenemase (Hodge negative). DISCUSSION: Despite the fact there was no carbapenemase, resistance to carbapenems is possibly attributed to the presence of beta-lactamases AmpC and/or ESBL associated with changes in the permeability of porin channels. CONCLUSION: Given the emerging nature of KPC, it is important to trace it in Enterobacteriaceae isolates with decreased susceptibility to ertapenem.