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Orientadores: Valéria Helena Alves Cagnon Quitete, Fabio Montico Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: O câncer de próstata (CaP) é a segunda principal causa de morte por câncer entre homens em todo o mundo. O índice elevado dessa doença está associado a diversos fatores, como genético, senilidade e estilo de vida não saudável. Esses fatores são capazes de alterar o microambiente prostático, levando a processos inflamatórios e ocorrência de aumento de radicais livres, os quais estão associados ao desenvolvimento e/ou progressão do CaP. O Tempol, fármaco pertencente à família dos nitróxidos, tem demonstrado propriedades antioxidantes, catalisando o metabolismo de espécies reativas de oxigênio (EROs) celular. O Tempol vem demonstrando ser um coadjuvante promissor para diversos tratamentos de canceres, com efeitos diretos sobre processos inflamatórios e o estresse oxidativo das células. No entanto, ainda há escassez de estudos na literatura que correlacionem a resposta biológica do microambiente prostático frente ao tratamento com Tempol e a progressão do adenocarcinoma de próstata. Dessa maneira, o presente estudo objetivou analisar o efeito do tratamento curto ou prolongado com Tempol em diferentes estágios da progressão do adenocarcinoma de próstata, considerando processos angiogênicos, proliferativos, e remodelação estromal tanto in vivo quanto in vitro. O lobo dorsolateral da próstata de camundongos transgênicos para adenocarcinoma de próstata (TRAMP) foi avaliado em dois estágios de progressão do CaP (in vivo); inicial e tardio, frente ao tratamento, via gavagem, por período curto (4 semanas) ou prolongado (8 semanas) com Tempol (50mg/kg). Após o período de tratamento, o lobo dorsolateral da próstata foi processado para análises morfológica, angiogênica e da remodelação estromal através de microscopia de luz, imunohistoquímica e Western Blotting. In vitro, a resposta proliferativa, angiogênica e remodelação estromal das linhagens celulares LNCaP e PC-3 foi analisada frente ao tratamento com o Tempol. Os resultados demonstraram que o Tempol mitigou a evolução das lesões histopatológicas da próstata dos camundongos TRAMP. Apesar desse atraso da progressão do CaP, moléculas relacionadas à processos angiogênicos e remodelação estromal foram alteradas, especialmente no tratamento prolongado com Tempol e em tumores avançados, podendo contribuir para a progressão do CaP, tanto in vivo quanto in vitro. Assim, concluiu-se que o Tempol atrasou o avanço das lesões prostáticas no lobo dorsolateral da próstata dos animais TRAMP, contudo demonstrou ter efeitos pró-angiogênico e de desequilíbrio do microambiente estromal glandular, principalmente no tratamento prolongado e no CaP avançado, o que é um fator de atenção para o uso desse fármaco Abstract: Prostate cancer (PCa) is the second cause of death due to cancer among men worldwide. The high PCa rate is associated with different factors, such as genetics, senility and unhealthy lifestyle. These factors are capable of altering the prostatic microenvironment, leading to inflammatory processes and free radical increase and both are associated with PCa development and/or progression. Tempol, a nitroxide family drug, has demonstrated antioxidant properties, catalyzing the metabolism of cellular reactive oxygen species (ROS). This drug seems to be a promising adjuvant for several cancer treatments, with direct effects on inflammatory processes and/or in cellular oxidative stress. However, there are few studies in literature, which correlate the biological response of the prostatic microenvironment to Tempol treatment and the progression of prostate adenocarcinoma. Thus, the present study aimed at analyzing the effects of short or long treatment periods with Tempol in different stages of prostate adenocarcinoma progression, considering the angiogenic and proliferative processes; and the stromal remodeling in both in vivo and in vitro. The dorsolateral lobe of the prostate of Transgenic Adenocarcinoma of the Mouse Prostate (TRAMP) at two distinct stages of PCa progression was evaluated (in vivo); initial and late treatments, via gavage, compared to short (4 weeks) or long (8 weeks) treatment periods with a 50mg/kg Tempol dose. After the treatment periods, the dorsolateral lobes were processed for morphological, angiogenic and stromal remodeling analysis by light microscopy, immunohistochemistry and Western Blotting. In vitro, the proliferative, angiogenic and stromal remodeling responses of the LNCaP and PC-3 cell lines were analyzed compared to the Tempol treatment. The results showed that Tempol mitigated the evolution of prostatic lesions, in the histopathological analysis of the prostate of TRAMP mice. However, in the long term treatment and advanced PCa, some molecules related to angiogenic processes and stromal remodeling, altered in a negative pathway which could contribute to a possible increase of PCa progression in both in vivo and in vitro. Thus, it can be concluded that Tempol delays the progression of prostatic lesions in the dorsolateral lobe of the prostate of TRAMP mice. But, it can also lead to a pro-angiogenic and glandular stromal microenvironment imbalance, especially in long treatment periods and to advanced PCa, which is a factor of attention for the use of this drug Mestrado Anatomia Mestre em Biologia Celular e Estrutural CAPES 88887.478923/2020-00

Orientador: Alexandre Leite Rodrigues de Oliveira Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: A lesão do nervo periférico em animais neonatos resulta em extensa morte neuronal na medula espinal e nos gânglios das raízes dorsais. Como a maior parte da perda neuronal é devido ao estresse oxidativo e mecanismos apoptóticos, vários estudos têm sido realizados a fim de investigar o efeito de substâncias neuroprotetoras. Dentre esses fármacos, o antioxidante Tempol tem mostrado resultados promissores, uma vez que é capaz de quelar espécies reativas de oxigênio (ROS) e minimizar, ou mesmo prevenir, danos teciduais. Neste sentido, o presente trabalho teve como objetivo avaliar os efeitos neuroprotetores do Tempol sobre a morte neuronal induzida pela secção do nervo isquiático em ratos recém-nascidos. Para as análises morfológicas, ratos Wistar com dois dias de idade (P2), foram submetidos à secção do nervo isquiático esquerdo e foram divididos em dois grupos: (1) grupo tratado com Tempol (24mg/kg), 10 minutos, 6 horas e a cada 24 horas após a lesão por até 1 semana; (2) grupo veículo - tratado com o veículo de diluição do Tempol nos mesmos períodos de tratamento. Os animais de ambos os grupos foram sacrificados em tempos de sobrevida de 8, 12, 24, 72 horas e uma semana após a lesão. O lado contralateral da medula foi utilizado como controle interno para análise dos resultados. Após os respectivos dias de sobrevida, os animais foram anestesiados e submetidos à toracotomia para perfusão com solução salina e fixadora. Em seguida, o conjunto contendo a intumescência lombar e as raízes nervosas foram processadas para posterior confecção dos cortes histológicos. Secções transversais de 12 ?m da intumescência lombar foram utilizadas nas técnicas de Microscopia de luz para avaliação da sobrevivência neuronal e TUNEL para detecção e quantificação de células apoptóticas. Os resultados demonstraram que o tratamento com Tempol aumentou a sobrevivência de motoneurônios da medula espinal em 15% após 8 horas; 19% após 12 horas; 13% após 24 horas; 15% após 72 horas e 21% após uma semana pós-lesão (p