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Submitted by EDER DOS SANTOS SOUZA null (ederss1@hotmail.com) on 2020-09-02T12:39:50Z No. of bitstreams: 1 TESE EDER DOS SANTOS SOUZA_2020.pdf: 3017234 bytes, checksum: 956d5f0a7f0c8afaa04ebf9eb3fa25fb (MD5) Approved for entry into archive by Maria Irani Coito (irani@fcfar.unesp.br) on 2020-09-02T15:31:26Z (GMT) No. of bitstreams: 1 souza_es_dr_arafcf_int.pdf: 2930136 bytes, checksum: bbb4b422f79f43578d74cb45712daf7d (MD5) Made available in DSpace on 2020-09-02T15:31:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 souza_es_dr_arafcf_int.pdf: 2930136 bytes, checksum: bbb4b422f79f43578d74cb45712daf7d (MD5) Previous issue date: 2020-07-21 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Triatominae são insetos hematófagos que transmitem a doença de Chagas. Entre os 19 gêneros da subfamília, aqueles com maior importância epidemiológica em relação à disseminação de Trypanosoma cruzi são Panstrongylus, Rhodnius e Triatoma. Dentre esses três gêneros, Rhodnius é o que apresenta maiores dificuldades para a definição específica, assim existe a necessidade de facilitar a identificação das espécies desse gênero. Neste estudo, a metodologia MALDI-MS foi utilizada para identificar 12 espécies de Rhodnius, dentre as 20 admitidas. A metodologia MALDI-MS permitiu a caracterização específica por meio da identificação de peptídeos e proteínas, a partir de quatro diferentes métodos de extração: A) Acetonitrila/ácido fórmico (ACN/AF), B) Acetonitrila/ ácido trifluoroacético (ACN/TFA), C) Isopropilamida/ácido fórmico (IPA/AF), e D) Metanol/ácido fórmico (MeOH/AF), e quatro tipos de matrizes MALDI/TOF: ácido α-ciano-4-hidroxicinâmico (CHCA), ácido sinápico (SA), 6-aza-2-tiotimina (ATT) e 2,6-di-hidroxiacetofenona (DHAP). Os experimentos foram realizados combinando os quatro solventes e quatro matrizes para selecionar a melhor extração/matriz de MALDI. A aplicação da técnica MALDI-TOF-MS, pela abordagem espectrométrica digital combinada com métodos quimiométricos foi capaz de distinguir com precisão as 12 espécies de Rhodnius. Assim, tendo em vista os resultados obtidos, a metodologia utilizada neste trabalho pode ser aplicada com rapidez, eficiência e para a identificação de espécies de Rhodnius. Triatominae are hematophagous insects involved in the transmission of Chagas disease. Among the 19 genera of the subfamily, those with the highest epidemiological importance regarding the dissemination of Trypanosoma cruzi are Panstrongylus, Rhodnius, and Triatoma. Of these three genera, Rhodnius presents the greatest difficulties for specific identification. Thus, there is a need to overcome the difficulties in identifying phenotypes of similar species of this genus. In the present study, the MALDITOF MS methodology was used to identify 12 Rhodnius species, among the 20 admitted. The MALDI-TOF MS methodology allowed specific characterization through the identification of peptides and proteins, starting from four different methods of extraction: (A) acetonitrile/formic acid (ACN/AF), (B) acetonitrile/trifluoroacetic acid (ACN/TFA), (C) isopropyl/formic acid (IPA/AF), and (D) methanol/formic acid (MeOH/AF), and four types of MALDI-TOF matrices: α-cyano-4-hydroxycinnamic acid (CHCA), sinapic acid (SA), 6-aza-2-thiothymine (ATT), and 2,6-dihydroxyacetophenone (DHAP). The experiments were performed by combining the four solvents and four matrices to select the best MALDI extraction/matrix. The application of the MALDI-TOF MS technique, through the digital mass spectrometry approach combined with chemometric tools, such as partial least squares-discriminant analysis (PLS-DA), was able to discriminate 12 species of Rhodnius genus, which are difficult to identify using morphological characteristics. Thus, in view of the results obtained, the methodology described in the presente article can be applied with speed and efficiency for the discrimination of Triatominae species. 88882.330106/2019-01

Submitted by Rossana Falcone null (rossana_falcone@yahoo.com.br) on 2016-08-07T17:57:15Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Rossana Falcone Finalizada e completa.pdf: 2103008 bytes, checksum: 95c81226fad97c4c05a4ce7c902c18b9 (MD5) Approved for entry into archive by Juliano Benedito Ferreira (julianoferreira@reitoria.unesp.br) on 2016-08-10T14:40:00Z (GMT) No. of bitstreams: 1 falcone_r_me_arafc_par.pdf: 1087921 bytes, checksum: 2f69e4237592b8104470393f4d09f62d (MD5) Made available in DSpace on 2016-08-10T14:40:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 falcone_r_me_arafc_par.pdf: 1087921 bytes, checksum: 2f69e4237592b8104470393f4d09f62d (MD5) Previous issue date: 2016-07-07 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Estima-se que 6 a 7 milhões de pessoas estejam infectadas com Trypanosoma cruzi no mundo, a maioria na América Latina, sendo a transmissão vetorial responsável ainda por, aproximadamente, 80% dos casos. Atualmente são descritas 151 espécies de triatomíneos agrupadas em cincos tribos formadas por 18 gêneros. O gênero Rhodnius conta com 19 espécies de potenciais vetores, podendo veicular T. cruzi e Trypanosoma rangeli. É considerado um dos gêneros taxonomicamente mais complexos da subfamília Triatominae, devido as semelhanças morfológicas e a distribuição geográfica que podem se sobrepor entre algumas de suas espécies dificultando seu estudo, apesar das diversas técnicas empregadas para sua distinção. Com o desenvolvimento atual das técnicas moleculares tornou-se possível a caracterização de espécies de triatomíneos por meio de marcadores mitocondriais e nucleares, tendo essa se tornado uma variável a mais para a taxonomia dos triatomíneos, assim como a já utilizada morfologia e a recentemente popularizada morfometria geométrica. A adição de novas variáveis possibilita que dados já existentes possam ser comprovados e/ou corrigidos. Neste trabalho foram obtidos subsídios que ampliam o conhecimento e que agregados aos já existentes podem proporcionar uma diferenciação mais minuciosa e precisa de espécies englobadas no gênero Rhodnius, de modo a contribuir para estabelecer uma classificação mais apropriada. A obtenção dos dados foi conduzida, por meio de estudo molecular, utilizando-se os marcadores mitocondriais – citocromo b e citocromo oxidase I, além de estudos morfológicos, utilizando-se como caracteres o processo mediano do pigóforo, o ângulo ânterolateral e a presença de colarinho nos ovos, a morfometria geométrica da cabeça também foi empregada, a fim de se distinguir populações de R. neglectus e R. prolixus. Os resultados obtidos a partir dessa análise multiparamétrica sugeriram que, as colônias identificadas como Rhodnius prolixus pertencem à espécie, que algumas colônias de R. neglectus analisadas apresentaram padrões condizentes com R. prolixus, já as demais apresentaram padrões condizentes com a espécie. Worlwide, it is estimated that 6 to 7 million people are infected with Trypanosoma cruzi, mostly in Latin America and the vector transmission is still responsible for approximately 80% of the cases. There are currently 151 described species of triatomine, grouped into five tribes, formed by 18 genres. The Rhodnius genre includes 19 species, which can transmit T. cruzi and Trypanosoma rangeli. It is considered one of the most complex taxonomically genera of Triatominae, due to its morphological similarities and geographical distribution that may overlap among some species hindering their study, despite the various techniques used for their distinction. With the current development of molecular techniques it has become possible to characterize triatomine species through mitochondrial and nuclear markers, this became one more toll for the taxonomy of triatomines, just as the already used morphology and recently popularized geometric morphometry. The addition of new variables enables the verification and or correction of existing data. This work has generated valueable data that amplify the knowledge which in addition to the existing may provide a more accurate differentiation of species included in the genre Rhodnius, in order to help establish a more appropriate classification. Data collection was performed by DNA analysis, using mitochondrial markers - cytochrome b and cytochrome oxidase I, in addition to morphological parameters, as, median process of pygophore, the anterolateral angle and the presence of collar in eggs, geometric morphometry of the head was also used in order to help distinguish populations of R. neglectus and R. prolixus. The results obtained from this multiparameter analysis suggested that colonies identified as R. prolixus belong to the species, a few colonies of R. neglectus analyzed showed consistent patterns with R. prolixus, the others colonies of R. neglectus showed consistent patterns to the species originally identified. CAPES: 23038.005285/2011-12

O presente registro acerca da identificação de infecção aguda de dois plasmódios e um Trypanosoma constitui evento raro. Pré-escolar, sexo feminino, 5 anos de idade, apresentou síndrome febril; foi submetida a exame de gota espessa no qual foram identificadas formas assexuadas e sexuadas de Plasmodium vivax e P. falciparum, respectivamente, além de tripomastigotas sanguíneos de Trypanosoma cruzi. No peridomicílio, foram encontrados insetos da espécie Rhodnius sp. Os autores reforçam a importância dos estudos dos ciclos peridomiciliares de T. cruzi em ambientes silvestres na Amazônia e discutem a importância da estratégia de vigilância continuada de Trypanosomas spp. nos exames de gota espessa. This report describes a rare case of acute infection caused by two Plasmodia and one Trypanosoma. 5 year-old female patient attending kindergarten presented persistent fever syndrome. She was submitted to thick smear exam, in which asexual and sexual forms of Plasmodium vivax and P. falciparum were detected, respectively, as well as trypomastigotes of Trypanosoma cruzi. Rhodnius sp. triatomines were found in the vicinity. The authors reinforce the importance of investigating the domiciliary cycles of T. cruzi in the Amazon region. Moreover, we discuss the importance of continuous monitoring of Trypanosomas spp. in thick smear exams.

Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. O município de Oriximiná (PA), situado à margem esquerda do rio Trombetas na Amazônia Oriental, é um dos mais importantes da Calha Norte, pois com a extração de bauxita em Porto Trombetas, torna-se o principal pólo de extração de minério do mundo. Apresenta uma posição geográfica estratégica, por fazer fronteira com os países da Guiana e Suriname, e limites com o estado de Roraima. O Estado do Pará, onde está inserido politicamente, tem apresentado o maior número de casos agudos de doença de Chagas nas últimas duas décadas, cuja forma de transmissão tem sido atribuída ao consumo de frutos de palmeiras nativas. O objetivo deste trabalho foi estudar a eco-biologia dos triatomíneos desta região, até então não estudada, contribuindo com os serviços para as ações de vigilância e controle dos triatomíneos. As investigações foram realizadas em áreas silvestres e rurais utilizando o método de busca passiva, com o uso das armadilhas de Noireau e a busca ativa. O material coletado foi identificado em nível de espécie utilizando a chave dicotômica de Lent & Wygodzinsky e pela técnica da PCR Multiplex. Os triatomíneos capturados foram examinados para averiguar a presença de tripanosomatídeos e o isolado, cartacterizado por tipagem molecular. A identificação das fontes alimentares foi feita pelo método de ELISA. Dos 442 espécimes coletados, 289 foram identificados como Rhodnius robustus e 153 como Rhodnius pictipes. A taxa de infecção para tripanosomatídeos foi de 17,4% e o isolado classificado como Z3. Devido à falta de conteúdo estomacal dos insetos, trabalhou-se com pool para avaliação da fonte alimentar e, sendo assim, as 54 amostras utilizadas para o teste de ELISA foram constituídas de 118 insetos. Dos 11 anti-soros testados, apenas quatro positivaram para ave, hemolinfa, cavalo e roedor. Verificou-se uma variação morfológica nos espécimes que foram confirmados como R. robustus por PCR Multiplex. R. robustus apresentou uma associação com palmeiras do tipo inajá, que formam aglomerados, tornando-se abundantes em áreas rurais, ao contrário de R. pictipes encontrados em outras espécies de palmeiras no ambiente silvestre. A comprovação de espécies de triatomíneos na região estudada e a presença de T. cruzi em um dos espécimes coletados nas proximidades da Sede do Município evidenciou a importância da vigilância entomológica e epidemiológica na área estudada. The municipality of Oriximiná located on the left bank of the river Trombetas, in the eastern Amazon, is one of the most important cities of Northern Rail, as with bauxite mining at Porto Trombetas, becomes the main hub of the mining world. Presents a strategic geographical position, by making the border with the countries of Guyana and Suriname, and limits to the state of Roraima. The state of Pará, where it operates politically, has submitted the largest number of acute cases of Chagas disease in the past two decades, whose mode of transmission has been attributed to consumption of fruits of native palms. This work aims to study the eco- biology of the insects of this region, hitherto not studied, contributing to the vigilance and control of triatomines. The investigations were conducted in wilderness areas and rural areas using the method of passive search, with the use of Noireau traps and active search. The material collected was identified to the species level using the dichotomous key of Lent & Wygodzinsky and Multiplex PCR, was also used to investigate the presence of tripanosomatids and the identification of the feeding habits using the ELISA method. Of the 442 specimens collected, 289 were identified as Rhodnius robustus and 153 as Rhodnius pictipes. The infection rate for trypanosomatids was 17.4% and one strain was identified as Z3. Due to the lack of gut contents of the insects, we worked with a pool for the evaluation of food source and, thus, the 54 samples used for ELISA, were composed of 118 insects. Of the 11 antisera tested, only four were positive for bird, hemolymph, horse and rodent. There was a morphological variation in specimens that were confirmed as R. robustus by Multiplex PCR. The association of R. robustus with palm type inajá, which form clusters, becoming abundant in rural environments, was confirmed as opposed to R. pictipes which was found in other palm species in the wild. Evidence of species of insects in the region studied and the presence of T. cruzi in one of the specimens, near the headquarters of the city, highlighted the importance of epidemiological and entomological surveillance in the region.

Uma nova espécie de Rhodnius é descrita e ilustrada baseada em um exemplar macho do nordeste brasileiro. O espécime foi encontrado morto e ressecado. Esta espécie pode ser separada da espécie afim, R. paraensis Sherlock, Guitton & Miles, pelo seu maior tamanho, pelo aspecto geral de coloração do corpo, pela cor uniforme das pernas, pelas diferentes proporções entre as estruturas morfológicas da cabeça e dos segmentos do rostro; ainda, na genitália masculina, pelo aspecto do processo mediano do pigóforo, do falosoma e de seu processo. A new species of Rhodnius is described and illustrated from a male specimen from northeastern Brazil. The specimen was found died and dried. This species can be distinguished from its similar congener R. paraensis Sherlock, Guitton & Miles by the greater size, the general aspect of the color of the body, by the uniform color of the legs, different proportions between the morphological structures of the head and the segments of the rostrum; also, in the male genitalia by the aspect of median process of pygophore, dorsal phallotheca plate and phallotheca process.

Submitted by Franciene Aguiar (franciene.aguiar@ucb.br) on 2019-07-05T17:55:21Z No. of bitstreams: 1 JulianaFariasMendesTCCGraduacao2009.pdf: 670236 bytes, checksum: b6cf1c58540924af0ee964c64127b8e4 (MD5) Approved for entry into archive by Sara Ribeiro (sara.ribeiro@ucb.br) on 2019-07-08T14:28:12Z (GMT) No. of bitstreams: 1 JulianaFariasMendesTCCGraduacao2009.pdf: 670236 bytes, checksum: b6cf1c58540924af0ee964c64127b8e4 (MD5) Made available in DSpace on 2019-07-08T14:28:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 JulianaFariasMendesTCCGraduacao2009.pdf: 670236 bytes, checksum: b6cf1c58540924af0ee964c64127b8e4 (MD5) Previous issue date: 2009 A distribuição geográfica potencial de Rhodnius pictipes sensu latu e outras espécies da linhagem pictipes trans andina (R. ecuadoriensis, R. pallescens e R. colombiensis) foi predita usando modelagem de nicho ecológico a partir de dois algoritmos (GARP e Maxent) e considerando 21 variáveis bioclimáticas. R. pictipes mostrou a mais ampla distribuição potencial, principalmente na região amazônica. R. ecuadoriensis apresentou áreas preditas na cordilheira dos Andes, enquanto R. pallescens e R. colombiensis apresentaram áreas preditas principalmente ao norte da Amazônia. Diferenças de nicho ecológico foram observadas; R. pallescens, R. pictipes e R. colombiensis ocorreram em áreas mais quentes e úmidas, enquanto R. ecuadoriensis ocorreu em áreas mais secas, com maiores altitudes. A análise multivariada indicou que baixos valores de precipitação no trimestre mais seco combinados com baixos valores de temperatura nos meses mais frios descrevem melhor o nicho ecológico de R. ecuadoriensis. A distribuição potencial com GARP apresentou maior sobreprevisão que a com Maxent, principalmente para espécies com distribuição restrita. Fatores bióticos, como associação com aves e palmeiras, também devem influenciar a distribuição geográfica das espécies de Rhodnius. Finalmente, a modelagem de nicho ecológico mostrou ser uma abordagem útil para estudar aspectos biogeográficos, ecológicos e evolutivos das espécies de Rhodnius da linhagem pictipes. The potential geographical distribution of Rhodnius pictipes sensu latu and other species of the trans-Andean lineage (R. ecuadoriensis, R. pallescens and R. colombiensis) was predicted using ecological niche modelling from two algorithms (GARP and Maxent) and considering 21 bioclimatic variables. R. pictipes showed the widest potential distribution, especially in the Amazon region. R. ecuadoriensis showed predicted areas in the Andes, while R. pallescens and R. colombiensis had predicted areas mainly in Northern Amazon. Ecological niche differences were observed. R. pallescens, R. pictipes and R. colombiensis occurred in the warmest and wettest areas, while R. ecuadoriensis occurred in the driest areas, with the highest altitudes. The multivariate analysis showed that low levels of precipitation in the driest quarter combined with lower temperature in the cooler months better describe the ecological niche of R. ecuadoriensis. The potential distribution with GARP showed higher commission error than the Maxent, especially for species with restricted distribution. Biotic factors, such as association with birds and palm trees, should also influence the geographical distribution of Rhodnius species. Finally, the ecological niche modelling has proven to be a useful approach to study biogeographic, ecological and evolutionary aspects of the Rhodnius species of the lineage pictipes.

Adults of Rhodnius prolixus, R. pictipes and Panstrongylus geniculatus found in houses in Manaus have high rates of Trypanosoma cruzi infection. Rhodnius spp. were found throughout the year, but males of P. geniculatus were significantly more frequent in the dry season.

Descreve-se característica morfológica diferencial que permite distinguir os ovos de Rhodnius neglectus e R. prolixus. Trata-se de formação saliente ao redor da região pré-opercular disposta à maneira de "colarinho", existente na primeira e ausente na segunda dessas espécies. An evident structural process allowing the distinction between the Rhodnius neglectus and R. prolixus eggs is described. The former presents a complete collar occupying the preopercular region whilst in the latter species this formation is lacking.

Secretaria Geral do Estado do Par?. Diretoria Geral de Sa?de P?blica. Instituto de Pathologia Experimental do Norte. Bel?m, PA, Brasil. Secretaria Geral do Estado do Par?. Diretoria Geral de Sa?de P?blica. Instituto de Pathologia Experimental do Norte. Bel?m, PA, Brasil. The interest of the subject dealt w i t h in this report lies chiefly in the knowledge of a new blood-sucking bug of domestic habits and feeding on man. The A . A . confirm the hematophagism of some hemipterous insects of the Lyg^aeidae family, and add their observations to Bergroth's reference of hematophagic habits of an Australian species of the genus Clerada, C. nidicola, w i t h wild habits. The American species observed, C. apicicornis, shows a better adaptation to hematophagism, living in human habitations and drawing blood from human beings. The importance of the domiciliary habits of C. apicicornis found in the Amazon estuary grows in interest w i t h the fact that i t has not yet been possible to find in this region domiciliary reduvid bugs, but only Panstrongylus geniculatus which is knowvto live in the jungle, and Rhodnius pictipes that the A . A . believe to have the same w i l d habits. These two bugs, called by the natives "bruxas" (witches) can be found from August to January in the habitations where they enter in small numbers, draw the blood of the inhabitants, and go back to the jungle soon after. Finally, the fact that C. apicicornis was found in the only two houses searched so distant one from the other, seems to denote a large incidence and wide distribution for the new hematophage.