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Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior T.gondii infecta a mucosa intestinal invadindo diretamente as células epiteliais do intestino delgado e essas células podem responder diretamente a infecção promovendo uma resposta imune local. Camundongos C57BL/6 infectados oralmente com alta carga parasitária de T.gondii são altamente susceptíveis, apresentando uma ileíte letal. Recentemente foi verificado que o tratamento prévio com antígeno solúvel de taquizoítas (STAg) protege camundongos C57BL/6 contra patologia intestinal causada pela infecção por T.gondii. Com o intuito de verificar os mecanismos induzidos por STAg no intestino delgado frente a infecção por via oral com T. gondii, camundongos BALB/c e C57BL/6 foram tratados com STAg 48 horas antes da infecção por via oral com 30 cistos da cepa ME-49 de T. gondii e sacrificados aos 8 dias após a infecção. O tratamento prévio com STAg foi capaz de diminuir o parasitismo e patologia em órgãos periféricos de animais BALB/c e C57BL/6, alem de induzir um aumento na quantidade de células caliciformes, células positivas para IgA, células de Paneth e maior expressão de criptidina no intestino delgado de ambas as linhagens, além disso os animais BALB/c apresentaram maior quantidade dessas células em comparação com os animais C57BL/6. Os resultados sugerem que STAg é capaz de promover mecanismos protetores nas duas linhagens de animais, porem essa proteção é mais evidenciada nos animais BALB/c, e esses mecanismos podem, em parte, ser mediados pelo aumento de células caliciformes, células de Paneth e secreção local de IgA no intestino delgado de camundongos infectados oralmente por T.gondii. T. gondii can infect the gut mucosa by direct invasion of epithelial cells in the small intestine and these cells may respond directly to infection promoting a local immune response. C57BL/6 mice orally infected with a high parasitic load of T.gondii are highly susceptible, presenting a lethal ileitis. Recently, it was demonstrated that pretreatment with STAg protects C57BL/6 mice against intestinal pathology in oral T. gondii infection. To investigate the mechanisms induced by STAg in the small intestine in oral T.gondii infection, BALB/c and C57BL/6 mice were treated with STAg 48 hours before oral infection with 30 ME-49 cysts and sacrificed at 8 days of infection. Previous treatment with STAg were able of decrease parasitism and pathology in peripheral organs of BALB/c and C57BL/6 mice and induced a increase in amounts of goblet cells, IgA positive cells, Paneth cells and expression of cryptidin in the small intestine of both lineages of mice, moreover BALB/c mice presented higher amount of these cells comparing with C57BL/6 mice. The results suggests that STAg is able of promoting protective mechanisms in both lineages of mice, although these protection is more evidenced in BALB/c mice, and these mechanisms could be in part mediated by increase in goblet, Paneth and local secretion of IgA in the small intestine of mice orally infected with T.gondii. Dissertação (Mestrado)

A microbiota intestinal é alterada por diversos fatores, sendo a dieta o que mais influência, assim como os aditivos moduladores do microbioma. Objetivou-se, neste estudo, avaliar os efeitos dos aditivos promotores de crescimento na dieta, sobre a porcentagem de células caliciformes com mucina ácida e neutra no intestino delgado de suínos, por modularem a microbiota e atuar na imunidade intestinal, avaliou a porcentagem de células intestinais em proliferação pela técnica de imunoistoquímica por PCNA, certificar e quantificar a presença de células de Paneth por coloração específica e por imunoistoquímica, relatos da literatura cita a ligação de probióticos com o epitélio intestinal via células de Paneth e caliciformes. O experimento foi conduzido em uma GRSC, aplicando o DIC. Utilizaram-se 480 leitões machos castrados, em cinco tratamentos, com dez leitões por gaiola, com oito repetições e no tratamento basal realizou-se 16 repetições. Sendo, T1=dieta basal, denominado de controle negativo, T2=T1+ antimicrobiano Avilamicina, T3=T1+probiótico Scchacaromyces cerevisae T4=T1+prebiótico MOS, T5=T1+probiótico Scchacaromyces cerevisae + o prebiótico MOS, foram abatidos com 65 dias de idade. A dieta foi à base de milho e farelo de soja mais um suplemento mineral e vitamínico. Ocorreram alterações com maior aumento na quantidade de células caliciformes com muco neutro comparativamente com aquelas de muco ácido e com o controle negativo. Não houve alterações expressivas para as células com muco ácido. A porcentagem de células no intestino delgado em proliferação pela técnica de imunoistoquímica para PCNA não apresentou alterações significativas, confirmou-se a presença de células de Paneth por colorações especiais e por imunoistoquímica. A quantidade de células de Paneth do duodeno alteraram-se em função dos aditivos utilizados, em comparação ao controle negativo que teve a maior quantidade, com a adição de antimicrobiano houve a menor quantidade, com prebiótico e simbiótico ocorreu redução mais branda, o que sugere ter ocorrido uma imunomodulação Os aditivos promotores de crescimento nas rações são tecnologias que favorecem ganhos significativos e podem ser recomendados, pois os resultados são compensatórios em produtividade. Além de promover uma melhor saúde intestinal em função de uma microbiota mais saudável e mais apta à criação de leitões na fase de creche Gut microbiota is changed by various factors, being the diet which has the highest influence, as well as the modulating additives of the microbiome. The purpose of this work was to evaluate the effects of growth promoting additives in the diet on the percentage of goblet cells with acid and neutral mucin in small intestine of pigs, the percent of gut cells in proliferation by the technique of immunohistochemistry by PCNA, to certify and quantify the presence of Paneth’s cells by specific staining and by immunohistochemistry, since that cell has a great importance in the immunity and in the gut microbiota. The experiment was conducted in a certified swine breeding farm (CSBF), applying the CRD (completely randomized design). Four hundred and eighty castrated male piglets were used, in five treatments, with ten piglets by cage, eight repetitions, and in the basal treatment 16 repetitions were used, being T1=basal diet, denominated negative control, T2=T1+antimicrobial agent, T3=T1+probiotic, Saccharomyces cerevisiae, T4=T1+prebiotic MOS, T5=T1+probiotic Saccharomyces cerevisiae + the prebiotic MOS. The diet was based on corn and soybean meal plus a supplement of minerals and vitamins. There were changes with higher increase in quantity of goblet cells, calculated by millimeter of gut mucosa with neutral mucus compared to those with acid mucus and to the negative control. There were no expressive changes for cells with acid mucus. The percentage of proliferating cells in small intestine by the immunehistochemistry technique for PCNA did not show significant changes and the presence of Paneth’s cells was confirmed by special staining and by immunehistochemistry. The quantity of Paneth’s cells of duodenum changed according to additives used, in comparison with the negative control which had a greater quantity. With the addition of antimicrobial agent there was a lesser quantity. With the prebiotics and synbiotics occurred milder reduction and this suggests that immunomodulation occurred. Besides promoting a better gut health due to a healthier and more appropriate microbiota to the rearing of piglets in the nursery phase, the addition of growth promoters in feeds favors significant gains and can be recommended, since the results are compensatory in productivity. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

This study described morphological aspects of the digestive tract of the giant anteater (Myrmecophaga tridactyla), five specimens were used, belonging to the collection of the Laboratório de Ensino e Pesquisa em Animais Silvestres in UFU, were processed by usual methods of macroscopic anatomical, histological and scanning electron microscope (SEM) analysis. The esophagus is a narrow tube that goes straight in the thoracic cavity. The stomach has the shape of the letter J, have the cardiac, fundic, corpus and pyloric regions. The small intestine is long, has a duodenum, jejunum and ileum. The large intestine is short, consisting of ascending colon, transverse colon, descending colon, rectum and anus. The lining epithelial of the esophagus is stratified squamous, non-glandular; and scanning electron microscopic examination of the esophagus is smooth and pleated. Stomach is simple prismatic relatively low, with shallow crypts; and rough surface. In the small intestine is simple prismatic, the duodenum has goblet cells, a huge amount of Paneth cells, the jejunum has an increase of Paneth cells, the ileum has a few Paneth cells and an increase of goblet cells; and villous surface; the large intestine is simple prismatic, an increase goblet cells; and smooth surface with openings of intestinal crypts. Este estudo descreveu aspectos morfológicos do tubo digestório de Myrmecophaga tridactyla, foram utilizados cinco espécimes, pertencentes ao acervo do Laboratório de Ensino e Pesquisa em Animais Silvestres da UFU e foram processados conforme métodos rotineiros de análise anatômica macroscópica, histologia e microscopia eletrônica de varredura. O esôfago é um tubo estreito que percorre a cavidade torácica sem angulações. O estômago possui o formato da letra J, com regiões cárdica, fúndica, do corpo e pilórica. O intestino delgado é longo, possui um duodeno, jejuno e íleo. O intestino grosso é curto, formado por colón ascendente, cólon transverso, cólon descendente, reto e ânus. O epitélio de revestimento do esôfago é estratificado pavimentoso, aglandular; e a análise microscópica eletrônica de varredura do esôfago é superfície lisa com pregas. No estômago é simples prismático mucíparo, relativamente baixo, com criptas rasas; e superfície rugosa. No intestino delgado é simples prismático; no duodeno tem células caliciformes e uma enorme quantidade de células de Paneth, no jejuno aumento das células de Paneth, no íleo poucas células de Paneth e aumento das células caliciformes; e superfície com vilos; no intestino grosso é simples prismático, aumento da quantidade das células caliciformes; e superfície lisa com aberturas das criptas intestinais. Mestre em Ciências Veterinárias

The intestinal epithelium is formed and sustained by a population of stem cells capable of generating different cell lines while maintaining pluripotent and self-renewal capacity. Glutamine is a conditional essential amino acid important for the maintenance of the intestinal epithelium. However, few studies to date have explored the role of glutamine in the fine regulation of the intestinal crypt cell turnover. In order to evaluate the role of glutamine in the crypt cell turnover, an in vitro enteroid model was used, where stem cells are capable of generating an epithelium containing the main intestinal secretory cell lines (Paneth, goblet, and enteroendocrine cells) and absorptive enterocytes as well, while forming a villus-crypt like structure. This model was used to test the effect of 24h of glutamine deprivation (standard media with 2mM glutamine vs glutamine-free media) on epithelial turnover by counting EdU- labeled cells/total number per section and cell apoptosis by counting cleavage-caspase 3- labeled cells/total number per section. In order to assess crypt secretory function, Paneth and goblet crypt cell ratios (target secretory cell/total cell number per crypt) were measured. The number of Paneth and goblet cells was measured with the aid of confocal microscopy and lysozyme and mucin-2 immunostainning. In addition, Paneth and globet cell product transcripts (lysozyme and mucin, respectively) were measured using quantitative Real-time PCR. In order to assess the potential immunomodulatory role of glutamine, innate immune element transcripts, Toll like receptor and their accessory protein MD-2, and cytokines, as follows: TNF-α, IL-1β and CXCL-1, were measured. Glutamine deprivation reduced the number of EdU positive cell ratio as compared with the enteroid under the standard media (p=0.006). No significant differences regarding Paneth and goblet cell ratios were seen between groups following glutamine deprivation. Glutamine deprivation significantly decreased lysozyme transcripts as compared with the enteroid under the standard media (p=0.007), but not for mucin-2 transcripts, related to goblet cell function. Decreased TNF-α and MD-2 transcription (p=0.005 and p=0.016, respectively) were found following glutamine deprivation. Altogether, our findings reinforce the glutamine positive role on the intestinal epithelial turnover and furthermore suggest an important glutamine regulatory effect over Paneth cells and the innate immune system. The enteroid model provides an important tool the dissect the mechanisms of glutamine protection and shed light for future studies. O epitélio intestinal é formado e mantido por uma população de células-tronco capaz de gerar diferentes linhagens celulares, mantendo a pluripotência e a capacidade de auto-renovação. A glutamina é um aminoácido essencial condicional importante para a manutenção do epitélio do intestino. No entanto, poucos estudos têm explorado o papel da glutamina na regulação fina do turnover celular da cripta intestinal. Com o propósito de avaliar o papel da glutamina n o turnover de células da cripta, foi utilizado um modelo in vitro de enteroide, onde as células-tronco são capazes de gerar um epitélio contendo as principais linhagens de células secretoras intestinais (célula de Paneth, célula caliciforme e célula enteroendócrina), além dos enterócitos absortivos, com a formação de uma estrutura tipo vilosidade-cripta. Este modelo foi usado para testar o efeito de 24 horas de privação de glutamina (meio padrão com glutamina a 2 mM vs meio livre de glutamina) no turnover epitelial através da contagem de células marcadas por Edu/número total por secção e ainda na apoptose celular, através da contagem de células marcadas para caspase 3-clivada/número total por secção. A fim de avaliar a função secretora das criptas, as razões das células de Paneth e caliciformes por cripta (célula alvo/número total de células secretoras por cripta) foram medidas. O número de células de Paneth e caliciformes foi obtido com o auxílio da microscopia confocal e imunomarcação para lisozima e mucina-2. Além disso, os transcritos dos produtos das células de Paneth e caliciformes (lisozima e mucina, respectivamente) foram analisados utilizando o método de PCR quantitativo em tempo real. Com intuito de avaliar o potencial papel imunomodulador da glutamina, transcritos de elementos da imunidade inata, receptor de tipo Toll e sua proteína acessória MD-2, e citocinas, a saber: TNF-α, IL-1β e CXCL-1, foram medidos. A privação de glutamina reduziu o número de células Edu positivas, em comparação com o enteroide sob meio padrão (p=0,006). Não houve diferença significativa em relação às razões das células de Paneth e células caliciformes entre os grupos após privação de glutamina. A privação da glutamina diminuiu significativamente os transcritos de lisozima, em comparação com o enteroide sob meio padrão (p = 0,007), mas não para mucina-2, transcrição relacionada com a função das células caliciformes. Uma transcrição reduzida para TNF- α e MD-2 (p=0,005 e p=0,016, respectivamente) foi observada após a privação de glutamina. Ao todo, nossos achados reforçam o papel positivo da glutamina sobre o turnover do epitélio intestinal e, além disso, sugerem um importante efeito regulador da glutamina sobre as células de Paneth e resposta imune inata. O modelo enteroide fornece uma ferramenta importante para dissecar os mecanismos de proteção pela glutamina e guiar estudos futuros.

INTRODUCTION. Colorectal cancer (CRC) is one of the most prevalent neoplasms worldwide, being one of the leading causes of death from cancer. In Brazil, it is the third most frequent cancer in men and second in women. In the last decades new drugs incorporated into the clinical protocols for the treatment of mCRM have provided a significant increase in the survival of patients with this type of malignancy. Among these drugs, irinotecan occupies a prominent place and is commonly used as the first line in the treatment of metastatic RCC. However, since all chemotherapy treatments have a burden, a quarter of patients receiving irinotecan have a severe intestinal mucositis as a more noticeable side effect. Deregulation of cell signaling pathways is certainly one of the main reasons for the development of cancer. The mammalian rapamycin target protein (mTOR) is responsible for cell growth and the PI3K / Akt / mTOR axis is often dysregulated in several types of cancer. Thus, this work focused on investigating the role of mTOR during experimental intestinal mucositis induced by irinotecan. METHODS. C57BL / 6 male mice (n = 6 / group) were given intraperitoneally with saline or irinotecan (75 mg / kg or 45 mg / kg) for four consecutive days and treated with rapamycin or everolimus (mTOR inhibitors, 1.5 mg / Kg and 3 mg / kg, respectively) followed by irinotecan administration. Periodically the body weight variation and scores were evaluated for the degree of diarrhea. After euthanasia of the animals, ileus samples were collected for determination of myeloperoxidase activity (MPO), histopathology and morphometric analysis and cytokine levels measurement [KC (human IL-8 analogue chemokine), IL-1β, TGF-β And IFN-γ]. Gene expression of the mRNA of the PI3K / Akt / mTOR pathway proteins was performed by qRT-PCR. Blood was also collected from the animals to evaluate the total white blood cell count. The ANOVA / Bonferroni or Kruskal-Wallis / Dunn tests were used for statistical analysis. P

Morfofisiologia comparada do trato gastrointestinal de três espécies de morcegos com hábitos alimentares diferentes Comparative morphophysiology of the gastrointestinal tract of three bat species with different eating habits Este estudo descreveu e comparou o estômago e intestinos de Anoura caudifer, Artibeus lituratus e Myotis nigricans, três espécies de morcegos com dietas diferentes. Os morcegos foram capturados em fragmentos de Mata Atlântica nos municípios de Bicas e Viçosa em Minas Gerais. Para o processamento histológico, os órgãos foram pesados e seccionados. Amostras dos tecidos foram processadas de acordo com os métodos rotineiros para análise histológica, histoquímica e ultraestrutural. Através dos resultados obtidos, entendeu-se que existem características morfofisiológicas peculiares em cada espécie, revelando adaptações a cada tipo de dieta. O estômago do morcego frugívoro A. lituratus se difere por possuir formato triangular, com vestíbulo cárdico, fundo cego proeminente e porção pilórica alongada. Em relação às observações histológicas do estômago, foram identificadas semelhanças entre as espécies, como: aumento da muscular circular interna na região pilórica para a formação do esfíncter gastroduodenal; proeminentes gânglios no plexo mioentérico entre as subcamadas musculares; e mucinas neutras sendo as mais abundantes. Enquanto as diferenças, destaca-se a distribuição celular nas glândulas gástricas nas diferentes regiões; o abundante tecido adiposo na submucosa de A. lituratus e as significativas diferenças histométricas nas camadas das regiões gástricas. Não foi identificada diferença macroscópica entre os intestinos delgado e grosso, entretanto, os constituintes dos segmentos, quando comparados entre as diferentes espécies, apresentaram diferenças histométricas significativas. Em sua mucosa, o intestino delgado exibia grandes vilos com diversos formatos ao longo do tubo nas três espécies. Outras características interessantes nestes animais são: presença de células de Paneth em todo o intestino; proeminente borda estriada em toda extensão do tubo intestinal, inclusive no intestino grosso; presença de Placas de Peyer na junção íleo/cólon das três espécies, e no reto, nódulos linfoides em A. caudifer e A. lituratus. A histoquímica possibilitou observar nos intestinos, as células caliciformes secretando mucinas ácidas, neutras e mistas. As células endócrinas argentafins estavam presentes somente no morcego frugívoroA. lituratus, todavia as células argirófilas foram encontradas em todas as espécies, com maior representatividade no intestino grosso de A. lituratus. As características morfofisiológicas destacadas neste trabalho indicam a otimização na digestão, no processamento e na absorção dos nutrientes pelo trato digestivo, e consequentemente, garantem a estes animais rápida disponibilidade de energia, e rápido esvaziamento do tubo, favorecendo o voo. Palavras-chave: Dieta. Trato digestivo. Histologia. Histometria. Histoquímica. Phyllostomidae. Vespertilionidae. Adaptations of the gastrointestinal tract of bats to different feeding habits have ensured these evolutionary success, allowing rapid food processing and satisfactory nutrient absorption. This study described and compared the stomach and intestines of Anoura caudifer, Artibeus lituratus and Myotis nigricans, three species of bats with different diets. The bats were captured in Atlantic Forest fragments in the municipalities of Bicas and Viçosa in Minas Gerais. For histological processing, organs were weighed and sectioned. Tissue samples were processed according to routine methods for histological, histochemical and ultrastructural analysis. Through the results obtained, it was understood that there are peculiar morphophysiological characteristics in each species, revealing adaptations to each type of diet. The stomach of the fruit bat A. lituratus differs by having a triangular shape, with a cardiac vestibule, prominent blind bottom and elongated pyloric portion. Regarding the histological observations of the stomach, similarities between the species were identified, such as: increased internal circular muscle in the pyloric region for the formation of the gastroduodenal sphincter; prominent ganglia in the myenteric plexus between the muscle sub-layers; and neutral mucins being the most abundant in the stomach of the three species. As the differences, the cellular distribution in the gastric glands in the different regions; the abundant adipose tissue in the submucosa of A. lituratus and the significant histometric differences in the layers of the gastric regions stand out. No macroscopic difference was identified between the small and large intestines, however, the constituents of the segments, when compared between the different species, showed significant histometric differences. In its mucosa, the small intestine exhibited large villi with various shapes along the tube in all three species. Other interesting features in these animals are the presence of Paneth cells throughout the intestine; prominent striated border throughout the intestinal tube, including the large intestine; presence of Peyer's patches at the ileum/colon junction in all three species, and in the rectum, lymphoid nodules in A. caudifer and A. lituratus. Histochemistry made it possible to observe in the intestines the calliciform cells secreting acid, neutral and mixed mucins. The argentaphyne endocrine cells were present only in the fruit bats A. lituratus, but argyrophilic cells were found in all species, with higher representation in thelarge intestine of A. lituratus. The morphophysiological characteristics highlighted in this study indicate the optimization in digestion, processing and absorption of nutrients by the digestive tract, and consequently, guarantee to these animals fast energy availability, and fast emptying of the tube, favoring flight. Keywords: Diet. Digestive tract. Histology. Histometry. Histochemistry. Phyllostomidae, Vespertilionidae.

The present study is a systematic review with the objective of characterizing the main findings in the literature, which report the action of exogenous melatonin in the digestive system of mice that suffered early weaning. The bibliographic research was carried out in PubMed, VHL and SCIELO using the following key words: melatonin, stress and digestive tract. A total of 118 articles were found in the 3 databases analyzed. However, after applying the inclusion/exclusion criteria, only 1 article left. The paper found addresses the action of melatonin in the small intestine of mice that were weaned early. Collectively, melatonin supplementation improves body weight gain and intestinal morphology, while exerting little effect on cell proliferation and apoptosis, as well as on goblet cells and Paneth cells in the ileum of weaning mice. El presente estudio es una revisión sistemática con el objetivo de caracterizar los principales hallazgos en la literatura, que informan de la acción de la melatonina exógena en el sistema digestivo de ratones que sufrieron destete temprano. La investigación bibliográfica se llevó a cabo en PubMed, VHL y SCIELO utilizando las siguientes palabras clave: melatonina, estrés y tracto digestivo. Se encontraron un total de 118 artículos en las 3 bases de datos analizadas. Sin embargo, después de aplicar los criterios de inclusión/exclusión, sólo queda 1 artículo. El documento encontrado aborda la acción de la melatonina en el intestino delgado de los ratones que fueron destetados temprano. Colectivamente, la suplementación con melatonina mejora el aumento de peso corporal y la morfología intestinal, mientras que ejerce poco efecto sobre la proliferación celular y la apoptosis, así como en las células de la copa y las células de Paneth en el íleon de los ratones destete. O presente estudo é uma revisão sistemática com o objetivo de caracterizar os principais achados na literatura, que relatam a ação da melatonina exógena frente ao sistema digestório de camundongos que sofreram desmame precoce. A pesquisa bibliográfica foi realizada no PubMed, BVS e SCIELO utilizando as seguintes palavras chaves: melatonin, stress e digestive tract. Foram encontrados no total 118 artigos nas 3 bases de dados analisadas. No entanto, após aplicar os critérios de inclusão / exclusão, restou apenas 1 artigo. O artigo encontrado aborda a ação da melatonina frente ao intestino delgado de camundongos que foram desmamados precocemente. Coletivamente, a suplementação de melatonina melhora o ganho de peso corporal e a morfologia intestinal, enquanto exerce pouco efeito frente a proliferação celular e apoptose, assim como nas células caliciformes e células Paneth no íleo de camundongos em desmame.

CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior Outra Agência As formas digestiva e cardiodigestiva da doença de Chagas são observados em 2% a 15% dos pacientes na fase crônica da infecção, mas os mecanismos imunopatológicos permanecem não definidos. Embora estudos demonstrem a importância da inflamação e presença do parasita no esôfago e cólon no processo patofisiológico de geração do megacólon e megaesôfago em pacientes chagásicos crônicos. O mecanismo pelo qual os pacientes desenvolvem estas alterações anatomopatológicas não estão claros. A molécula NOD2 (Nucleotide-Binding Oligomerization Domain 2) é um receptor da imunidade inata expresso principalmente em macrófagos e células dendríticas. NOD2 também é expresso em células de Paneth e mantêm a homeostase intestinal, prevenindo a penetração de bactérias no epitélio gastrointestinal. Esse trabalho teve como objetivo avaliar o papel do receptor NOD2 na patogenia do sistema digestivo na doença de Chagas. Inicialmente a expressão de RNAm de NOD2, RIP2 (Receptor-interacting protein kinase 2) e defensinas 5 e 6 foi avaliada em células mononucleares do sangue periférico de pacientes com as formas indeterminada (n=18), cardíaca (n=17), digestiva (n=15) e cardiodigestiva (n=15) da doença de Chagas, usando a PCR em tempo real, e correlacionada ao grau de dilatação do esôfago, cólon sigmóide e reto. Os pacientes com as formas digestiva e cardiodigestiva da doença apresentaram expressão ausente ou reduzida de NOD2 e elevada expressão de RIP2 e defensina 6, quando comparados aqueles com as formas indeterminada e cardíaca. Também foi observada a correlação negativa entre a expressão de RNAm de NOD2 com o grau de dilatação do esôfago e a dimensão do sigmóide e do reto. Posteriormente camundongos C57BL/6 e NOD2-/- foram infectados com 1×103 tripomastigotas sanguíneos do isolado RN25 (obtido de paciente com a forma digestiva) e avaliada a susceptibilidade a infecção (parasitemia e mortalidade) e alterações do trato gastrointestinal (motilidade, inflamação e desnervação). Camundongos NOD2-/- apresentaram maior parasitemia do 17o ao 30o dia após infecção, quando comparado a animais C57BL/6. Ademais, fêmeas deficientes de NOD2 apresentaram redução da motilidade intestinal 15 e 180 dias após infecção, quando comparado a animais C57BL/6. A análise histopatológica do cólon dos animais NOD2-/- e C57BL/6 fêmea demonstraram focos inflamatórios discretos durante a fase aguda da infecção (19 dias após infecção). Durante a fase crônica da infecção (12 meses) ocorreu inflamação e hipertrofia da camada muscular no cólon e jejuno dos animais NOD2-/-, alterações não observadas nos camundongos C57BL/6. Em seguida, elevamos o inóculo de T. cruzi para os camundongos foi aumentado com intuito de promover o aumento da gênese de lesões do trato gastrointestinal. Devido a baixa virulência do isolado RN25, camundongos C57BL/6 e NOD2-/- fêmeas foram infectados com 5×104 tripomastigotas sanguíneos da cepa CL de T. cruzi e avaliada a susceptibilidade a infecção (parasitemia e mortalidade), alterações do trato gastrointestinal (motilidade, inflamação e desnervação) e expressão de RNAm de receptores da imunidade inata (TLR2, TLR4), fator de transcrição da resposta Th1 (T-bet), citocinas (IL-10, IL-17, TNF-, IFN-) e outros mediadores inflamatórios (iNOS e defensina A) no cólon. Animais NOD2-/- apresentam parasitemia mais elevada entre o 30o e 60o dias após a infecção, redução da motilidade intestinal durante a fase aguda da infecção e menor sobrevivência (60%) quando comparado aos animais C57BL/6 (100% de sobrevivência). Camundongos nocautes de NOD2 infectados apresentaram aumento na expressão da maioria dos mediadores inflamatórios analisados na fase aguda (15 dias após a infecção), quando comparado a animais selvagens. Entretanto, durante a fase crônica (60 dias após a infecção) foi observada a expressão dos mediadores inflamatórios no trato gastrointestinal dos animais nocautes de NOD2 e C57BL/6 infectados com a cepa CL, semelhante ao grupo de camundongos não infectados. Desta forma, a expressão deficiente de NOD2 em pacientes com a forma digestiva da doença de Chagas e o aumento de lesões com diminuição de motilidade do trato gastrointestinal em camundongos NOD2-/- experimentalmente infectados pelo isolado RN25 de T. cruzi, indicam que a ausência ou baixa expressão de RNAm de NOD2 pode estar correlacionada ao desenvolvimento da forma digestiva da doença de Chagas. Associado ao perfil genético do parasito que gera infecção persistente e discreta em diversos locais do trato gastrointestinal, que quando somadas podem atingir o nível crítico de desnervação do plexo mientérico levando a hiperexcitabilidade, descoordenação dos movimentos peristálticos e a hipertrofia. Digestive and cardiodigestive forms of Chagas' disease are observed in 2% to 15% of the patients, but immunopathological mechanisms remain undefined. Although studies have demonstrated the importance of inflammation and the presence of the parasite in the esophagus and colon in the pathophysiological process of megacolon and megaesophagus generation in chronic chagasic patients. The mechanism by which some patients develop these anatomopathological alterations is unclear. The NOD2 molecule is an innate immune receptor, expressed mainly in macrophages and dendritic cells. The NOD2 receptor is also highly expressed in Paneth cells and maintains intestinal homeostasis, prevents the penetration of bacteria into the epithelium of the gastrointestinal tract. This work aimed to evaluate the role of the NOD2 receptor (Nucleotide-Binding Oligomerization Domain 2) in the pathogenesis of the digestive system in Chagas' disease. The expression of NOD2, RIP2 (Receptor-interacting protein kinase 2) and defensins 5 and 6 was evaluated in peripheral blood mononuclear cells of patients with the indeterminate (n = 18), cardiac (n = 17), digestive (n = 15) and cardiodigestive (n = 15) of Chagas disease, using real-time PCR, correlated with the degree of dilation of the esophagus, sigmoid colon and rectum. Patients with the digestive and cardiodigestive forms of the disease had absent or reduced expression of NOD2 and high expression of RIP2 and defensin 6 when compared with those with indeterminate and cardiac forms. The negative correlation between the expression of NOD2 mRNA with the degree of esophageal dilation and the size of the sigmoid and rectum was also observed. Subsequently C57BL/6 and NOD2-/- mice were infected with 1 × 103 blood trypomastigotes of the isolated RN25 (obtained from patient with the digestive form) and evaluated the susceptibility to infection (parasitemia and mortality) and alterations of the gastrointestinal tract (motility, inflammation and denervation). NOD2-/- mice showed higher parasitemia from the 17th to the 30th day after infection when compared to C57BL/6 animals. In addition, NOD2-/- deficient females had reduced intestinal motility 15 and 180 days after infection when compared to C57BL/6 animals. Histopathological examination of the colon of NOD2-/- and female C57BL/6 animals demonstrated discrete inflammatory foci during the acute phase of infection (19 days post infection). During the chronic phase of the infection (12 months) there was inflammation and hypertrophy of the muscular layer in the colon and jejunum of the NOD2-/- animals, changes not observed in the C57BL/6 mice. Next, we raised the inoculum of T. cruzi to the mice was increased in order to promote the increase of the genesis of lesions of the gastrointestinal tract. Due to the low virulence of the RN25 isolate, female C57BL/6 and NOD2-/- mice were infected with 5 × 104 trypomastigotes of T. cruzi CL strain and infection susceptibility (parasitemia and mortality), gastrointestinal tract (TLR2, TLR4), transcription factor Th1 (T-bet), cytokines (IL-10, IL-17, TNF-, IFN-) and the expression of innate immunity receptors (TLR2, TLR4) ) and other inflammatory mediators (iNOS and defensin A) in the colon.. NOD2-/- animals present higher parasitemia between 30 and 60 days post infection, reduction of intestinal motility during the acute phase of infection and lower survival (60%) when compared to C57BL/6 animals (100% survival). Knockout mice of infected NOD2 showed increased expression of most of the inflammatory mediators analyzed in the acute phase (15 days post infection) when compared to wild animals. However, during the chronic phase (60 days after infection) the expression of inflammatory mediators in the gastrointestinal tract of NOD2 and C57BL/6 knockout animals infected with the CL strain was observed, similar to that of uninfected mice. Thus, deficient expression of NOD2 in patients with the digestive form of Chagas' disease and the increase of lesions with decreased motility of the gastrointestinal tract in experimentally infected NOD2-/- mice by T. cruzi isolate RN25 indicate that the absence or low NOD2 mRNA expression may be correlated with the development of the digestive form of Chagas' disease. Associated with the genetic profile of the parasite that generates persistent and discrete infection in several sites of the gastrointestinal tract, which when added can reach the critical level of myenteric plexus denervation leading to hyperexcitability, incoordination of peristaltic movements and hypertrophy.

Resumo O carcará é uma ave com reconhecido papel ecológico, atuando no controle de populações de pequenas aves e mamíferos, alimentando-se tanto de presas vivas, quanto de animais em decomposição. Objetivou-se analisar a histologia do trato intestinal do carcará. Foram eutanasiados cinco carcarás provenientes do Centro de Triagem de Animais Silvestres de Pernambuco, para retirada do intestino e cloaca. Os tecidos foram corados por Hematoxilina/Eosina, Alcian Blue pH 1,0 e Ácido Periódico de Shiff. As vilosidades do intestino delgado e grosso são revestidas por epitélio simples colunar, com microvilosidades e células caliciformes. A lâmina própria contém linfócitos, formando folículos linfáticos no interior de algumas vilosidades. Já a muscular da mucosa está disposta no sentido longitudinal. A camada submucosa só foi observada na cloaca e a camada muscular possui fibras transversais e longitudinais. A serosa reveste externamente todo trato intestinal, sendo composta por mesotélio e tecido conjuntivo submesotelial. Pregas longitudinais foram encontradas no intestino grosso. Conclui-se que o intestino do Carcará apresenta de forma geral estrutura compatível com o padrão histológico observado em outras espécies de aves; entretanto, as células de Paneth e camada submucosa não foram observadas. Folículos linfáticos foram encontrados no interior das vilosidades e um elevado número de células caliciformes na porção final do íleo e intestino grosso. Abstract The Southern Crested Carcara is a bird with a recognized ecological role in the population control of small birds and mammals, feeding on live prey as much as on decaying animals. The objective of this study was to analyze the histology of Carcara`s intestinal tract of five Carcaras from the Wild Animal Screening Center of Pernambuco were euthanized to remove their intestines and cloacae. The tissues were stained with Hematoxylin/Eosin, Alcian Blue pH 1.0, and Periodic Acid Schiff. The villi of the small and large intestines are lined with a simple columnar epithelium with microvilli membranes and goblet cells. The lamina contains lymphocytes and form lymphatic follicles within some of the villi. The mucosal muscle is arranged in a longitudinal direction. The submucosal layer was only observed in the cloaca and the muscle layer has transverse and longitudinal fibers. The serous membrane lines the whole intestinal tract and is composed of mesothelium and submesothelial connective tissue. Longitudinal folds were found in the large intestine. The conclusion is that the Carcara`s intestine exhibits an overall structure compatible with the histological pattern observed in other species of birds; however, Paneth cells and the submucosal layer were not observed. Lymph follicles were found inside the villi and a high number of goblet cells at the end of the ileum and large intestine.

Diabetes mellitus type 1 (DM1) is characterized by an increase in circulating blood glucose concentrations associated with abnormalities in the metabolism of carbohydrates, proteins and lipids. Currently this disease affects about 382 million people worldwide and Brazil are 12 million affected individuals. The DM1 has systemic complications such as cardiovascular disease (CVD), renal insufficiency (RI), anemia and infections. In addition, disorders of the gastrointestinal tract are common in DM1 and carriers reported symptoms include nausea, vomiting, abdominal pain, dysphagia, regurgitation, heartburn, constipation and diarrhea, being these symptoms may be associated as morphological changes. The use of compounds rich in nutritious and antioxidants for the prevention and / or treatment of diabetes are often reported. Edible mushrooms have beneficial effects and are used as nutritional supplements worldwide. The Agaricus blazei Murrill (ABM), has anti-cancer properties, anti-inflammatory, hypoglycemic and antioxidant. In addition to high nutritional value. The aim of this study was to evaluate the diabetes table evolution and treatment effect of hydroalcoholic extract of Agaricus blazei Murrill about blood components and morphoquantitative parameters do jejunum of rats with streptozotocin-induced diabetes. Dehydrated and crushed Basidiomata A .blazei underwent hydroalcoholic extraction, and the resultant filtrate was lyophilized and stored in a freezer at -20 ° C. Subsequently, the hydroalcoholic extract was evaluated for its content of phenolic compounds, proteins and carbohydrates, as well as the antioxidant potential by DPPH assay (1.1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl). 24 adult male Wistar rats were used (Rattus norvegicus), average initial body weight of 304 ± 4:35 grams, being induced diabetes by intravenous injection of streptozotocin (45 mg / kg) and treatment with daily gavage of hydroalcoholic extract of A. blazei (200mg / kg). The following groups were formed: normoglycemic (N), diabetic (D), normoglycemic treated (NB) and treated diabetic (DB) with A. blazei extract for 16 weeks. The ethics committee approved all experimental procedures involving the use of animals for experimentation State University Animal Maringá (seem 001/2015). During the trial period, it was monitored body weight and food and water consumption. After 120 days the animals were euthanized, weighed and measured in the naso-anal length to obtain the Lee index, and collected samples of retroperitoneal fat, and mesenteric periepididymal for weighing. Blood was collected to assess blood glucose, triglycerides, total cholesterol and HDL, total protein, albumin, globulin, creatinine, urea, transaminases aspartate aminotransferase and alanine aminotransferase and blood count. After collecting and measuring the length of the small intestine, jejunum, samples were fixed and processed for histological analysis (H.E), immunohistochemistry (P.A.S) and immunohistochemistry (anti-serotonin, anti-PCNA). Later as the technique was performed morphometric analysis of the total wall (PT), mucous membrane (TM), villus height (AV), crypt depth (PC), muscularis externa (MM), quantification to Paneth cells, goblet cells , serotoninergic cells and intestinal epithelial cells in cell proliferation. Data were statistically analyzed using the Kolmogorov-Sminov test or Shapiro Wilk to verify the normality of the data, followed by the test analysis of variance (one-way ANOVA) and Tukey's test for parametric data and Kruskal -Wallis and Dunn's post-test for nonparametric data with the help of statistical program GraphPadPrism® 5.0. The significance level was 5% and the results expressed as mean ± standard error. The hydroalcoholic extract of A. blazei showed the following components (mg / g extract): total phenolics (28.60 ± 0:55), protein (5.45 ± 0.01), total carbohydrates (375.50 ± 23.66), reducing carbohydrates (245.40 ± 3.60) and non-reducing (130), and potent antioxidant activity (EC50 = 0:39 mg / ml). The diabetes model has been proven to increase blood glucose and reducing body mass and weight of fats, Lee index and increased consumption of food and water. Regarding the blood parameters, diabetes promoted reduction in HDL levels, albumin and globulins and increase in urea. The hemogram analysis indicated diabetes promoting effect of increasing the concentration of hematocrit and mean corpuscular volume, mean corpuscular hemoglobin reduced, mean corpuscular hemoglobin concentration, and latelets. An effect of treatment with blazei on the final body weight, feed intake and water, globulin, urea and platelets. Morphometric parameters of the jejunum of diabetic rats indicate an increase in PT, TM, AV, PC, and the number of proliferating cells beyond reduce the thickness of TMU and the number of goblet cells, Paneth and serotoninergic. Treatment with blazei maximized morphometry jejunal except crypt depth and interfered in the population of goblet cells and proliferation. We conclude that treatment with hydroalcoholic extract of A. blazei (200mg / kg) showed a positive effect on the behavior of polyphagia, platelets and dynamics of goblet cells in diabetic rats. O diabetes mellitus tipo 1 (DM1) caracteriza-se pelo aumento das concentrações de glicose sanguínea circulante associada com anormalidades no metabolismo de carboidratos, proteínas e lipídeos. Atualmente esta doença atinge cerca de 382 milhões de pessoas em todo o mundo e no Brasil são 12 milhões de indivíduos afetados. O DM1 apresenta complicações sistêmicas, como doenças cardiovasculares (DCV), insuficiência renal (IR), anemia e infecções. Além disso, transtornos do trato gastrointestinal são frequentes em portadores de DM1 e os sintomas relatados incluem náuseas, vômitos, dor abdominal, disfagia, regurgitação, azia, constipação e diarreia, sendo que estes sintomas podem estar associados as alterações morfológicas. A utilização de compostos nutritivos e ricos em antioxidantes para a prevenção e/ou tratamento do diabetes são frequentemente relatados. Os cogumelos comestíveis possuem efeitos benéficos e são utilizados como suplementos alimentares em todo o mundo. O Agaricus blazei Murrill (ABM), possui propriedades anticancerígenas, anti-inflamatórias, hipoglicemiante e antioxidante, além de ter um alto valor nutritivo. O objetivo deste estudo foi avaliar a evolução do quadro de diabetes e o efeito do tratamento com extrato hidroalcoólico de Agaricus blazei Murrill sobre componentes sanguíneos e parâmetros morfoquantitativos do jejuno de ratos com diabetes induzida por estreptozotocina. Basidiomas desidratados e triturados de A. blazei foram submetidos à extração hidroalcoólica, sendo que o filtrado resultante foi liofilizado e armazenado em freezer a -20ºC. Posteriormente, o extrato hidroalcoólico foi avaliado quanto ao seu conteúdo de compostos fenólicos, proteínas e carboidratos, bem como o potencial antioxidante através do ensaio DPPH (1.1-difenil-2-picril-hidrazil). Foram utilizados 24 ratos Wistar machos adultos (Rattus novergicus), massa corporal média inicial de 304 ± 4.35 gramas, sendo induzido o diabetes por injeção endovenosa de estreptozotocina (45mg/Kg) e tratamento com gavagem diária de extrato hidroalcóolico de A. blazei (200mg/Kg). Foram constituídos os seguintes grupos: normoglicêmicos (N), diabéticos (D), normoglicêmicos tratados (NB) e diabéticos tratados (DB) com extrato de A. blazei durante 16 semanas. Todos os procedimentos experimentais envolvendo o uso de animais foram aprovados pelo Comitê de Ética em Experimentação Animal de Universidade Estadual de Maringá (Parecer 001/2015). Durante o período experimental foram monitorados a massa corporal e consumos de ração e água. Após 120 dias os animais foram eutanasiados e mensurados no comprimento naso-anal para obtenção do Ìndice de Lee, e coletadas amostras das gorduras retroperitonial, periepididimal e mesentérica, para pesagem. O sangue foi coletado para avaliação de glicemia, triglicerídeos, colesterol total e HDL, proteínas totais, albumina, globulinas, creatinina, ureia, as transaminases aspartato aminotransferase e alanina aminotransferase e hemograma. Após coleta e mensuração do comprimento do intestino delgado, amostras do jejuno foram fixadas e processadas para análise histológica (H.E), histoquímica (P.A.S) e imunohistoquimica (anti-serotonina e anti-PCNA). Posteriormente conforme a técnica foi realizada análise morfométrica da parede total (PT), túnica mucosa (TM), altura de vilosidades (AV), profundidade de criptas (PC), túnica muscular externa (MM), quantificação para células de Paneth, células caliciformes, células serotoninérgicas e células epiteliais intestinais em proliferação celular. Os dados foram submetidos à análise estatística utilizando o teste Kolmogorov-Sminov ou Shapiro Wilk para verificação da normalidade dos dados, seguidos pelos testes de análise de variância (one-way ANOVA) e pós-teste de Tukey, para dados paramétricos e teste de Kruskal-Wallis e pós-teste de Dunn's para dados não paramétricos com auxílio do programa estatístico GraphPadPrism® 5.0. O nível de significância adotado foi de 5% e os resultados expressos como média ± erro padrão. O extrato hidroalcoólico de A. blazei apresentou os seguintes componentes (mg/g extrato): compostos fenólicos totais (28.60 ± 0.55), proteínas (5.45 ± 0.01), carboidratos totais (375.50 ± 23.66), carboidratos redutores (245.40 ± 3.60) e não-redutores (130), além de potente atividade antioxidante (EC50=0.39 mg/ml). O modelo de diabetes foi comprovado com elevação da glicemia em jejum e redução da massa corporal e peso de gorduras, índice de Lee e aumento do consumo de ração e água. Com relação aos parâmetros sanguíneos, o diabetes promoveu redução nos valores de HDL, albumina e aumento nas globulinas e ureia. A análise do hemograma indicou efeito do diabetes promovendo aumento na concentração do hematócrito e volume corpuscular médio, redução na hemoglobina corpuscular média, concentração de hemoglobina corpuscular média e no número de plaquetas. Houve efeito do tratamento com A. blazei sobre a massa corporal final, consumo de ração e água, níveis de globulinas, ureia e número de plaquetas. Parâmetros morfométricos do jejuno de ratos diabéticos indicam aumento na PT, TM, AV, PC e número de células em proliferação além da reduzir a espessura da TMU e o número de células caliciformes, serotoninérgicas e de Paneth. O tratamento com A. blazei maximizou a morfometria jejunal com exceção da profundidade das criptas e interferiu na população de células caliciformes e em proliferação. Concluiu-se que o tratamento com extrato hidroalcoólico de A. blazei (200mg/Kg) apresentou efeito positivo sobre o comportamento de polifagia, número de plaquetas e dinâmica das células caliciformes em ratos diabéticos tipo 1. 68 f

Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais Toxoplasma gondii is an obligatory protozoan parasite that present several antigens capable of activating immune responses. In this work, we aimed to study two immunomodulatory antigens in pre-treatment for acute and immunization for chronic infection. The first was to evaluate the role of soluble tachyzoite antigen (STAg) on epithelial cells to control intestinal inflammation during acute infection. It was demonstrated STAg treatment was able to preserve Paneth cell numbers during infection, and to maintain epithelial integrity and function. We also observed that STAg treated and infected C57BL/6 mice produce secretory IgA against pathogenic bacteria, controlling microbiota and diminishing intestinal inflammation. The second objective was to evaluate the role of T. gondii heat shock protein of 70 kDa (TgHSP70) as a vaccinal antigen in murine chronic infection. It was observed that immunization with alum-adsorbed TgHSP70 reduced cyst numbers and diminished inflammation in the brain, and also induced high titers of TgHSP70-specific antibodies. We demonstrated that these antibodies do not act directly on the parasite, but seem to neutralize free TgHSP70 that induce nitric oxide production in RAW264.7 cells. In summary, this work demonstrated action mechanisms of two T. gondii immunomodulatory antigens, STAg and TgHSP70, and strengthens the use of these antigens as tools for vaccination or pre-treatment in order to control infection and intestinal inflammation. Toxoplasma gondii é um parasita intracelular obrigatório que apresenta diversos antígenos capazes de modular a resposta imune. Neste trabalho, visamos estudar dois antígenos imunomoduladores através do pré-tratamento para fase aguda e de imunização para fase crônica da infecção. O primeiro objetivo foi estudar o papel do antígeno solúvel de taquizoítas (STAg) nas células epiteliais para controle da inflamação intestinal durante a infecção aguda por T. gondii. Foi demonstrado que o tratamento com STAg preserva o número de células de Paneth durante a infecção, além de manter a integridade e a função do epitélio intestinal. Observamos também que camundongos tratados com STAg produzem IgA secretória contra bactérias patogênicas, controlando a microbiota e diminuindo a inflamação intestinal. Em outra vertente, avaliamos o papel da proteína de choque térmico de 70 kDa de T. gondii (TgHSP70) como um antígeno vacinal contra a infecção crônica. Observamos que a imunização com TgHSP70 adsorvida em alúmen reduziu o número de cistos e a inflamação no cérebro de animais infectados, bem como induziu a produção de elevados títulos de anticorpos específicos e imunocomplexos anti-TgHSP70. Mostramos que estes anticorpos não exercem sua função diretamente no parasita, mas parece desenvolver seu papel neutralizando a TgHSP70 livre, a qual induz a produção de óxido nítrico pelas células RAW264.7. Em suma, este trabalho demonstrou os mecanismos de ação de dois antígenos imunomoduladores de T. gondii, TgHSP70 e STAg, e reforça o uso destes antígenos como ferramentas para vacinação ou pré-tratamento no controle da infecção e da inflamação intestinal. Doutor em Imunologia e Parasitologia Aplicadas

A metaplasia intestinal gástrica (MIG) é considerada como lesão precursora para o câncer gástrico, mas isto não tem levado a um controle maior dos portadores. Estudamos uma população dispéptica adulta e detectamos a prevalência de MIG. Vários marcadores têm sido testados para indicar qual paciente portador de metaplasia intestinal deva ser acompanhado com exames periódicos. Um destes marcadores é a pesquisa da proteína de membrana CD44v6 em lesões pré-malignas. Objetivo: estudar a expressão da CD44v6 em pacientes dispépticos com Helicobacter pylori (H. pylori) e metaplasia intestinal gástrica. Local: Hospital de Clínicas de Porto Alegre, Universidade Federal do Rio Grande do Sul. Pacientes: 642 pacientes dispépticos dos quais foram estudados 56 pacientes com MIG e comparados com outros dois grupos, um de pacientes com H. pylori e outro, sem H. pylori e sem MIG. Métodos: estudo da MIG com colorações HE (hematoxilina-eosina), PAS/AB (periodic acid-Schiff/ Alcian blue), HID (high iron diamine) e, para estudar a expressão da CD44v6, empregou-se a imuno-histoquímica. Resultados: De 642 pessoas avaliadas, 424 eram portadoras de Helicobacter pylori e 218 não. Das portadoras, 77 tinham MIG (18,2%) e das não portadoras, 15 (6,9%). Das pessoas com MIG, estudamos 56 casos, sendo MIG do tipo I em 55% (31/56) dos casos, 22% (12/56) do tipo II e 23% (13/56) do tipo III. A MIG teve igual proporção entre os sexos, foi mais frequente no antro, o tipo de MIG não teve relação com a extensão da metaplasia e não houve aumento proporcional com a idade. Na nossa população de estudo, a MIG foi de baixa frequência relativa (14,4%). Quanto à CD44v6, todos os nossos casos foram negativos para esta proteína. Conclusões: 1) Os nossos casos foram todos negativos para CD44v6 e não vemos utilidade de utilizar este marcador no nosso meio no rastreamento de pacientes com metaplasia intestinal gástrica que mereceriam um acompanhamento subsequente. 2) Biópsias do antro e da incisura detectaram quase a totalidade (93%) dos casos de metaplasia intestinal gástrica nos nossos casos e isto pode ser uma indicação para a prática clínica. 3) A distribuição da metaplasia intestinal gástrica entre os sexos seguiu a proporção no grupo estudado, concluindo-se que não há diferença entre os sexos. 4) Não encontramos alteração da freqüência da metaplasia intestinal gástrica conforme a idade. 5) O achado de borda em escova ou células de Paneth não exclui que naquela lâmina haja glândulas metaplásicas do tipo incompleto. 6) Não houve relação entre o local da metaplasia intestinal gástrica e seu tipo. 7) Não houve relação entre extensão e tipo de metaplasia intestinal gástrica. 8) A população estudada tem baixa prevalência de metaplasia intestinal gástrica. The gastric intestinal metaplasia (GIM) is considered a premalignant lesion for gastric cancer, but this has not led to greater control of the carriers. We studied a dyspeptic adult population and detected the prevalence of GIM. Several markers have been tested to indicate which patients with intestinal metaplasia should be followed with periodic examinations. One of these markers is the membrane protein CD44v6. Objective: To study the expression of CD44v6 in dyspeptic patients with Helicobacter pylori (H. pylori) and gastric intestinal metaplasia. Location: Hospital de Clinicas de Porto Alegre, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Porto Alegre, RS, Brazil. Patients: 642 dyspeptic patients of which 56 patients with GIM and compared with two other groups, one of patients with H. pylori and another without H. pylori. Methods: A study of GIM with HE staining (hematoxylin-eosin), PAS / AB (periodic acid-Schiff / Alcian blue), HID (high iron diamine). We used immunohistochemistry (IHC) to study the expression of CD44v6. Results: Of 642 patients evaluated, 424 were carriers of Helicobacter pylori and 218 did not. The carriers had 77 MIG (18.2%) and noncarriers, 15 (6.9%). Of those GIM 56 study cases, GIM type I by 55% (31/56) cases, 22% (12/56) Type II and 23% (13/56) of Type III. GIM had equal sex ratio, was more frequent in the antrum, the type of GIM was not related to the extent of metaplasia and there was no proportional increase with age. In our study population, the GIM has low relative frequency (14.4%). As to CD44v6, all our cases were negative for this protein. Conclusions: 1 ) Our cases were all negative for CD44v6 and we do not see the usefulness of using this marker in screening patients with gastric intestinal metaplasia that merit a subsequent follow-up. 2) Biopsies of the antrum and incisura detected almost all (93 %) cases of gastric intestinal metaplasia in our cases and this can be an indication for clinical practice. 3) The distribution of gastric intestinal metaplasia between the sexes followed the proportion in the group studied, and so there is no difference between the sexes. 4) No change was found in the frequency of gastric intestinal metaplasia according to age. 5) The finding of brush border and Paneth cells does not preclude that metaplastic glands is not of the incomplete type. 6) There was no relationship between the location of gastric intestinal metaplasia and its type. 7) There was no relationship between the extent and type of gastric intestinal metaplasia. 8) The population has a low prevalence of gastric intestinal metaplasia.

Sacha kiruma (Plukenetia volubilis L.) is an oleaginous native plant of the Peruvian Amazon. The oil extracted from its seeds is very rich in polyunsaturated fatty acids, directly related to the prevention of cardiovascular diseases, among them, the atherosclerosis. For transportation, lipids form complexes with proteins, the apoproteins. The apoprotein E (Apo E) is mainly synthesized in the liver and intestine and is related to the cellular uptake of triglyceride-rich chylomicrons and VLDL remmants. The production of knockout animals for the apoprotein E gene presents as main characteristic the rapid and spontaneous development of atherosclerosis lesions in the arteries, similar to those found in humans. The small intestine is the site of absorption of dietary components, including lipids, whiles the liver is the site of modification and/or storage of compounds. The objectives were extract sacha kiruma seeds´s oil by chemical method (hexane) and determine the acid profile. Also evaluate the histological structure of the duodenum and the liver of Apo E-/- mice and wild BlackC57/6 after the treatment with this oil. The evaluation of the oil extracted in this study indicates the percentage of polyunsaturated fatty acids similar to that found in the literature. There were no histological changes due the treatment in the duodenum, with regard to the surface absorption, morphology of the crypt and the thickness of muscle layers and mucosa. With respect to the height of the absorptive epithelium, the control animals have high average compared with animals treated with the oil. The frequency of enterocytes, lymphocytes, goblet cells and Paneth cells did not change due to the proposal treatment. In relation to the goblet cell AB+PAS+ was observed more frequently in the groups of BlackC57/6 mice treated with the sacha kiruma´s oil compared to control groups. In the liver were not found differences due to the treatment in the frequency of liver components or the ratio cytoplasm/ nucleus of the liver cells. The solvent extraction method was efficient in extracting oil from sacha kiruma´s seeds. The oil showed similar lipid composition from the described in the literature. The test showed no evidence that the diet with sacha kiruma oil may have altered the histological structure of the duodenum and liver of mice Apo E -/- or wild BlackC57/6. Sacha kiruma (Plukenetia volubilis L.) é uma planta oleaginosa nativa da Amazônia Peruana. O óleo extraído de suas sementes é muito rico em ácidos graxos poliinsaturados, diretamente relacionados à prevenção de doenças cardiovasculares, dentre elas, a aterosclerose. Para seu transporte, os lipídeos formam complexos com proteínas, as apoproteínas. A apoproteína E (Apo-E) é sintetizada principalmente no fígado e no intestino e se relaciona com a absorção celular de quilomícrons ricos em triglicerídeos remanescentes e VLDL. A produção de animais knockout para o gene da apoproteína E apresenta como principal característica o rápido e espontâneo aparecimento de lesões ateroscleróticas nas artérias, similares àquelas encontradas em humanos. O intestino delgado é o sítio de absorção de componentes da dieta, dentre eles os lipídeos, enquanto o fígado apresenta-se como o sítio de modificação e/ou armazenamento de compostos. Os objetivos foram extrair o óleo de sementes de sacha kiruma por meio de método químico (hexano), determinar o perfil de ácidos graxos e avaliar os efeitos desse óleo na estrutura do duodeno e fígado de camundongos Apo-E -/- e selvagens BlackC56/7. Os resultados da avaliação do óleo extraído para este estudo indica percentual de ácidos graxos similar ao citado na literatura. Entre os tratamentos não foram encontradas alterações no duodeno com relação à superfície de absorção, morfometria de cripta e espessura das camadas musculares e da mucosa. Com relação à altura do epitélio absortivo, os animais knockout do grupo controle apresentaram maior média se comparados com os grupos knockout tratados com o óleo. A freqüência de enterócitos, linfócitos, células caliciformes e células de Paneth não sofreram alterações devido ao tratamento proposto. Em relação às células caliciformes AB+PAS+, foi observada maior freqüência nos grupos selvagens tratados com óleo de sacha kiruma em relação aos controles. No fígado também não foram encontradas diferenças devido ao tratamento na frequência dos componentes hepáticos, nem na relação de diâmetro do citoplasma/ diâmetro do núcleo dos hepatócitos. Com isso, concluiu-se que o método de extração com hexano mostrou ser eficiente na extração de óleo das sementes de sacha kiruma. Este óleo apresentou composição lipídica similar daquela descrita na literatura, mantendo suas propriedades terapêuticas. O ensaio não mostrou indícios de que a dieta com o óleo de sacha kiruma possa ter alterado a estrutura histológica no duodeno ou fígado dos camundongos.

O objetivo deste trabalho foi analisar os efeitos da infecção causada pelo Toxoplasma gondii sobre a parede do duodeno de gatos. Foram utilizados seis gatos (Felis catus), com cerca de três meses de vida, distribuídos aleatoriamente em Grupo controle (G1; n = 3) e Grupo infectado (G2; n = 3). Os animais do G2 receberam, por via oral, 200 cistos teciduais da cepa ME49 (tipo II) do T. gondii. Após 40 dias, os animais foram submetidos à eutanásia, laparotomia e retirada do duodeno, que foi fixado em solução de Bouin e submetido à rotina histológica para obtenção de cortes transversais de 3 µm. Os cortes foram corados com Hematoxilina-Eosina (HE), Azan, Ácido Periódico de Schiff (PAS), Alcian-Blue e Tricrômio de Mallory. Realizou-se uma avaliação qualitativa da parede intestinal e medidas comparativas entre os dois grupos, com relação: à espessura da túnica mucosa, túnica muscular, parede total, altura dos vilos, profundidade das criptas e altura dos enterócitos e seus núcleos. As células caliciformes, os linfócitos intraepiteliais e as células de Paneth foram quantificados. Os resultados mostraram que a infecção levou à atrofia da túnica mucosa, túnica muscular e parede intestinal do duodeno de gatos do G2 (p < 0,05). A altura dos enterócitos apresentou um aumento significativo (p < 0,05) nos animais do G2. Na avaliação qualitativa, as fibras colágenas ocupavam visivelmente uma maior área dos estratos da parede intestinal, o que sugere que estejam aumentadas. Observou-se a redução da secreção de sulfomucinas e o aumento das células de Paneth nesses mesmos animais (p < 0,05). This paper analyzes the effects of the infection caused by Toxoplasma gondii on the cat duodenal wall. Six cats (Felis catus) with 3-month-old were randomly divided into Control Group (G1; n = 3) and Infected Group (G2; n = 3). The animals from G2 received orarilly 200 T. gondii tissye cysts of ME49-strain (type II). After 40 days, the animals were submitted to euthanasia, laparotomy and had their duodenum removed, fixed in Bouin solution and submitted to histological routine obtaining 3 µm transverse cuts. The cuts were stained with Hematoxylin-Eosin (HE), Azan, Periodic acid - Schiff (PAS), Alcian-Blue, and Mallory trichrome. Qualitative assessment of the intestine wall as well as comparative measurements with respect to the thickness of mucosa, muscle tunic, total wall, the height of the villous, the depth of the crypts, and the height of the enterocytes and their nuclei were carried out. Calciform cells, the intraepithelial lymphocytes, and the Paneth cells were quantified. The results showed that the infection led to the atrophy of the mucosa, muscle tunic, and the intestinal wall of the duodenum of G2 cats (p < 0.05). The enterocytes height presented significant (p < 0.05) increase for G2 animals. According to the qualitative analysis, the collagen fibers were visibly taken a broader area on the intestinal wall layers, what suggests they have increased in size. Decrease in the sulphomucins secretion and the increase of Paneth cells were observed for these animals (p < 0.05).

Made available in DSpace on 2016-04-28T20:18:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009 - Lu?s Gustavo Picorelli de Oliveira.pdf: 8291753 bytes, checksum: d0e3e8919d70356d42c7098b6af1d1a4 (MD5) Previous issue date: 2009-01-28 CAPES - Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior Ninety bovine bladders, from a slaughterhouse from the district of Barra Mansa/RJ and from bovine necropsies in Pteridium arachnoideum invaded locations, were examined when associated with clinical signs as those found in bovine enzootic hematuria. A diffuse wrinkling of the bladder mucosa was found in 40% of the cases which was correlated to increased mucous normal irregularity, polyp proliferation, lamina propria thickening, fibrose and, in severe cases, urotelial carcinoma multicentric proliferation of endophitic growth. Papillary tumours were microscopically classified as urotelial carcinoma in 35% of cases and papiloma in 65%. In some cases, carcinoma and adenocarcinoma presented less commom differentiation patterns as intestinal, of Paneth cells, and a mesonefroid adenocarcinoma in the trigone area, which demonstrated bladder embryological origin influence on different types of lesions that were found. Mucosal hemorrhagic lesions occurred in 100% of the cases and were associated with vascular proliferation and lamina propria hemorrhage or, in sever cases, 77,4% of hemorrhagic elevations were correlated to hemangioma or hemangiosarcoma. At last, we have established a correlation between P. arachnoideum chronic poisoning lesions and ionizing radiation bladder alteration in humans. Em um frigor?fico no munic?pio de Barra Mansa, RJ, e por ocasi?o de visitas a campo em regi?es infestadas pela Pteridium arachnoideum, foram coletadas 90 bexigas de bovinos que apresentavam sinais cl?nicos e ou les?es macrosc?picas compat?veis com o quadro de hemat?ria enzo?tica. As les?es encontradas tanto ao exame macrosc?pico quanto microsc?pico foram mais frequentes no corpo e na base da bexiga. ? macroscopia um enrugamento difuso da mucosa da bexiga foi observado em 40% dos casos, o que foi correlacionado ao aumento do pregueamento da mucosa, ? prolifera??o de p?lipos, ao espessamento da l?mina pr?pria, ? fibrose e, nos casos mais graves, ? prolifera??o multic?ntrica de carcinomas uroteliais com crescimento endof?tico. Tumores papiliformes foram classificados microscopicamente como carcinomas uroteliais em 35% dos casos e papilomas em 65%. Carcinomas e adenocarcinomas apresentaram, em alguns casos, diferencia??es consideradas pouco frequentes, como intestinal, em c?lulas de Paneth e em c?lulas claras. Um adenocarcinoma mesonefr?ide foi encontrado na posi??o do tr?gono, o que demonstra a influ?ncia da origem embriol?gica da bexiga sobre os tipos de les?es encontradas. Les?es hemorr?gicas na mucosa ocorreram em 100% dos casos, e estavam correlacionados a prolifera??es vasculares e hemorragias na l?mina pr?pria ou, nos casos mais graves, 77,4% das eleva??es hemorr?gicas foram correlacionadas a hemangiomas ou a hemangiossarcomas. Foi estabelecida uma identidade entre as les?es produzidas pela intoxica??o cr?nica por P. arachnoideum em bovinos e as altera??es provocadas na bexiga de seres humanos expostos a radioterapia ou ? radia??o ionizante ambiental.

Submitted by Sandra Pereira (srpereira@ufrrj.br) on 2020-09-15T19:10:44Z No. of bitstreams: 1 2002- Ticiana do Nascimento Fran?a.pdf: 3708638 bytes, checksum: a8e1ac384d5b5f09726b79614ac7e86f (MD5) Made available in DSpace on 2020-09-15T19:10:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2002- Ticiana do Nascimento Fran?a.pdf: 3708638 bytes, checksum: a8e1ac384d5b5f09726b79614ac7e86f (MD5) Previous issue date: 2002-02-07 Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior, CAPES, Brasil. The bladder lesions of 59 cattle, from the states of Rio de Janeiro, S?o Paulo, Minas Gerais, Esp?rito Santo, Rio Grande do Sul, Santa Catarina, Paran? and Amazonas affected by Bovine Enzootic Haematuria (BEH) werw studied histologically. The objective of this study was to describe and reclassify neoplastic and non neoplastic alterations not yet reported, according to the more complete and current nomenclature used in human medicine. There was an almost complete indentity with alterations observed in the bladder of humans. Due to the ocurrence of two or more neoplasms in yhe same animal, differences of the methodology and the concept of classification was not possible. Coexistence of different types of epithelial and/or mesenchymal neoplasms was frequently seen. Rare neoplasms not yet descibed werw found in the bladder of some the animals by BEH. Those were trabecular carcinoma with differentiation in Paneth cells, mesonephroid adenoma and adenocarcinoma, ?signet ring? cell carcinoma, plasmocytoid carcinoma, chromophobe cell carcinoma and nested type of transitional cell carcinoma. Malignization of benign tumors, as for example a transformation of haemangiomas into haemangiosarcomas, was Aldo observed. The study also revealed the occurrence of many tumors with anaplasia and pronounced infiltrative features, but which did not metastize. The elucidation regarding the cause(s) of this ?barrier against met?stases? and its relationships with the chemical carcinogenesis induced by the ptaquiloside, the active principle of bracken fern (Pteridium aquilinum), could be of interest for future research with the objective to control neoplasms in humans and animals. om o objetivo de descrever altera??es neopl?sticas e n?o neopl?sticas ainda n?o reportadas e, paralelamente, reclassific?-las de acordo com nomenclatura mais completa e atual utilizada em Medicina Humana, foram estudadas , histologicamente, les?es BA bexiga de 59 bovinos com Hemat?ria Enzo?tica Bovina (enfermidade causada pela ingest?o de Pteridium aquilinum), oriundos dos Estados do Rio de Janeiro, S?o Paulo, Minas Gerais, Esp?rito Santo, Rio Grande do Sul, Santa Catarina, Paran? e Amazonas. Verificou-se, em termos qualitativos, quase uma perfeita identidade com as les?es de bexiga observadas em seres humanos. Compara??es mais exatas com rela??o ? freq??ncia dessas altera??es ficaram prejudicadas, dadas a ocorr?ncia de duas ou mais neoplasias em um mesmo animal e as diferen?as da metodologia empregada ou do conceito de classifica??o. Coexist?ncia entre neoplasias diversas, epiteliais e/ou mesenquimais, foi vista com freq??ncia. Neoplasias raras, ainda n?o descritas na bexiga de bovinos, como carcinoma trabecular com diferencia??o em c?lulas de Paneth, adenoma e adenocarcinoma mesonefr?ides, carcinoma ?signet ring? (anel de sinete), carcinoma plasmocit?ide, carcinoma de c?lulas crom?fobas e carcinoma transicional tipo ninhado, foram observadas na bexiga de alguns animais com HEB. Tamb?m foi identificada maligniza??o de tumores benignos, como por exemplo a transforma??o de hemangiomas em hemangiossarcomas. O estudo revelou, ainda, a ocorr?ncia de diversos tumores com anaplasia e car?ter infiltrativo acentuados, incapazes, por?m, de metastizarem. O esclarecimento da (s) causa (s) dessa ?barreira ? met?stase e suas rela??es com a carcinog?nese qu?mica induzida pelo ptaquilis?deo talvez possa ser de interesse em futuros estudos que visem combater o c?ncer no homem e nos animais.