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Submitted by JOANA ALEXANDRIA FERREIRA DIAS (ja.dias@unesp.br) on 2022-07-28T21:57:00Z No. of bitstreams: 1 organized.pdf: 5943834 bytes, checksum: 8e87cd1aed53a49f21f29456dccf6424 (MD5) Approved for entry into archive by Elida Daniele de Antonio null (elida_daniele@btu.unesp.br) on 2022-07-29T18:05:41Z (GMT) No. of bitstreams: 1 dias_jaf_me_bot.pdf: 5943834 bytes, checksum: 8e87cd1aed53a49f21f29456dccf6424 (MD5) Made available in DSpace on 2022-07-29T18:05:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dias_jaf_me_bot.pdf: 5943834 bytes, checksum: 8e87cd1aed53a49f21f29456dccf6424 (MD5) Previous issue date: 2022-06-30 INTRODUÇÃO: Melasma é uma discromia de alta prevalência que afeta focalmente áreas fotoexpostas, especialmente em mulheres adultas. Sua patogênese não é bem compreendida, mas mastócitos na derme superior são mais proeminentes no melasma do que na pele adjacente não afetada. Por essa razão, acredita-se que essas células desempenhem um papel fundamental na patogênese do melasma. Todavia, até o momento, não há estudos explorando a estabilização de mastócitos e o bloqueio de H2 como uma potencial estratégia terapêutica. OBJETIVO: Avaliar a eficácia, segurança e tolerabilidade do cetotifeno combinado com famotidina, anti-histamínicos orais, no tratamento do melasma. MÉTODOS: Realizamos um estudo prospectivo, duplo-cego, paralelo, randomizado, controlado com placebo, entre março de 2020 a fevereiro de 2021, envolvendo 74 mulheres adultas portadoras de melasma facial moderado a grave selecionadas através de amostragem por conveniência durante o ambulatório de dermatologia. Todas as participantes receberam filtro solar com cor (FPS 90), durante o estudo. As participantes foram randomizadas e alocadas consecutivamente em dois grupos, um grupo (AH) contendo cápsulas com cetotifeno 1mg e famotidina 40mg para uso duas vezes ao dia, por 8 semanas; o outro grupo, placebo. O desfecho primário foi a mudança do escore mMASI avaliado em D0 e D60. Os participantes também foram avaliados quanto ao MELASQoL, quanto à colorimetria do melasma e da pele não acometida adjacente (Dif-L* – diferença de luminosidade colorimétrica entre eles). A Global Aesthetic Improvement Scale (GAIS) foi utilizada para avaliar a diferença na aparência global do melasma por meio de fotografias padronizadas (D0 vs. D60), por dois avaliadores cegos. Os desfechos foram analisados de acordo com a população de tratamento, segundo intenção de tratar. O dimensionamento amostral foi es- timado a partir da expectativa de diferença do efeito da magnitude de mais de 10% (poder = 0,90 e alfa = 0,05). As variáveis categóricas foram representadas por seus percentuais e comparadas entre os grupos pelo teste qui-quadrado de Pearson e modelo logístico ordinal. As variáveis contínuas foram avaliadas quanto à normalidade pelo teste de Shapiro-Wilk. Os resultados principais e secundários foram comparados entre os grupos ao longo do tempo por modelos lineares generalizado. RESULTADOS: Ambos os grupos apresentaram reduções em mMASI, MELASQoL e colorimetria após 60 dias (p

Submitted by Nadir Basilio (nadirsb@uninove.br) on 2022-04-12T19:35:42Z No. of bitstreams: 1 Simone K Martins.pdf: 2789928 bytes, checksum: 52d113f1219c2ccb1359431329b8fc0e (MD5) Made available in DSpace on 2022-04-12T19:35:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Simone K Martins.pdf: 2789928 bytes, checksum: 52d113f1219c2ccb1359431329b8fc0e (MD5) Previous issue date: 2021-12-16 Allergic rhinitis (AR) is an inflammatory disorder of the nasal mucosa and is a worldwide health problem with a significant impact on the quality of life. The main goal of AR treatment is to relieve symptoms. However, standard treatments have considerable side effects or are not effective. Photobiomodulation (PBM) has emerged as an alternative treatment. Here, we evaluated the effects of transcutaneous systemic (tail) or local (skin over nostrils) PBM using a light emitting-diode (LED). Adult rats were sensitized with 7 intradermal injections of ovalbumin (OVA) plus alum. After the immunization, a nasal challenge was performed by intranasal instillation of OVA (2%) daily for 7 days. The symptoms and signs of AR were then provoked by intranasal instillation of OVA (1%) daily for 3 days. The animals were treated with PBM (local or systemic) immediately after the last instillation of OVA. Our results showed that local PBM treatment (100mW power, 15J radiant energy, 5,35J/cm2 radiant exposure, 150 seconds, 3 consecutive days, 1 time/day) reduced mast cell degranulation in the nasopharynx and nostrils, levels of leukotriene B4, thromboxane A2, and interleukin 4 (IL-4) in the nasopharynx, as well as gene expression of IL-4. Moreover, we showed higher levels and gene expression of IL-10 after local PBM treatment. In conclusion, our data showed that local treatment with PBM improved parameters related to AR in an experimental model, and should be tested clinically. A rinite alérgica (RA) é uma doença inflamatória da mucosa nasal, considerada um problema de saúde mundial com um impacto significativo na qualidade de vida. O principal objetivo do tratamento da RA é aliviar os sintomas. No entanto, o tratamento padrão possui efeitos colaterais consideráveis ou não são eficazes. A Fotobiomodulação (FBM) tem emergido como um tratamento alternativo. Assim, avaliamos o efeito da FBM local (sobre narinas) utilizando a fonte de luz LED (Light Emitting-Diode). Os ratos foram sensibilizados com 7 injeções intradérmicas de ovalbumina (OVA). Após a imunização, foi realizado desafio intranasal de OVA (2%) diariamente, durante 7 dias. Os sintomas e sinais de RA foram então provocados pela instilação intranasal de OVA (1%) diariamente, durante 3 dias. Os animais foram tratados com FBM local após a última instilação de OVA. Nossos resultados mostraram que o tratamento local com FBM (660 nm, 100mW de potência, 15J de emissão radiante total, 5,35J/cm 2 de exposição radiante, 150 segundos, 3 dias consecutivos, 1 vez ao dia) reduziu a degranulação de mastócitos na nasofaringe e narina, níveis de leucotrieno B4, tromboxano A2, interleucina 4 (IL-4) na nasofaringe, bem como expressão gênica de IL-4. Além disso, mostramos maior nível de expressão gênica de IL-10 após tratamento local com FBM. Em conclusão, nossos dados mostraram que o tratamento local com FBM melhora os parâmetros relacionados à RA em um modelo experimental animal e abre possibilidades para ser testado clinicamente.

Submitted by Nadir Basilio (nadirsb@uninove.br) on 2022-04-12T19:27:03Z No. of bitstreams: 1 Robson Alexandre Brochetti.pdf: 1580525 bytes, checksum: 3f99b10ebaa6904d29573c18b481ce46 (MD5) Made available in DSpace on 2022-04-12T19:27:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Robson Alexandre Brochetti.pdf: 1580525 bytes, checksum: 3f99b10ebaa6904d29573c18b481ce46 (MD5) Previous issue date: 2021-12-09 Asthma is a heterogeneous disease generally characterized by chronic and reversible inflammation of the bronchi with inflammatory cells, smooth muscle cell hypertrophy, and bronchial airway hyperreactivity. It is defined by a history of respiratory symptoms, such as wheezing, dyspnea, retrosternal chest tightness, and coughing, which vary with time and intensity, and predominantly at night and in the morning. Corticosteroids are the mainstay of asthma treatment as they block the production of inflammatory cytokines. However, a considerable proportion of patients with asthma do not respond to corticosteroid therapy, even when administered in high doses, these patients present a profile of resistance to the anti-inflammatory actions of corticosteroids, developing a more severe type of asthma, with cellular characteristics of the neutrophilic type, than eosinophilic, which differs from allergic asthma, and this type of asthma is characterized by steroid-resistant asthma. In this sense, our objective was to evaluate the effect of photobiomodulation using infrared light emitting diodes (LEDs) on the development of corticosteroid-resistant asthma. Therefore, we used male Wistar rats and randomly divided them into 4 groups: basal group, unmanipulated control rats; ARC group: asthmatic rats; ARC+LED group: asthmatic rats treated with LED and ARC+DEXA group: asthmatic rats treated with dexamethasone. The three groups, except the basal group, were sensitized on the 1st day with grade V ovalbumin plus complete freund's adjuvant (FA) and on the 21st and 22nd day underwent inhalation challenge (nebulization) with 1% ovalbumin grade III, to create neutrophil-type corticosteroid-resistant asthma; the ARC + LED group was treated with the LED directly on the skin over the respiratory tract at a single point, in the parameters: wavelength 810 nm; power 100 mW; energy density 5 J/cm; total energy 15J; time 150s; The ARC + Dexa group was treated with the drug dexamethasone (2mg/ml) injected intraperitoneally (ip) on the 21st and 22nd days 3 hours before each inhalation challenge. Therefore, we evaluated pulmonary inflammation (total number of cells in the BAL), the determination of myeloperoxidase activity, inflammatory and anti-inflammatory drugs (cytokines), gene expression and mast cell degranulation. Our experimental model was able to induce asthma with neutrophil characteristics. Corticosteroid treatment did not reverse cell migration to the bronchoalveolar lavage, nor did it reduce the levels of leukotriene B4, interleukins 17 and 6. Treatment with FBM, on the other hand, reduced cell migration to the alveolar space, myeloperoxidase activity, degranulation of mast cells and the levels of leukotriene B4, thromboxane B2, prostaglandin E2, tumor necrosis factor alpha and interleukins 17 and 6. In addition to the increase in the level of interleukin 10, by FBM. We show promising effects of LED in the infrared range when irradiated directly into the respiratory tract as an alternative treatment for corticosteroid-resistant asthma. A asma é uma doença heterogênea, geralmente caracterizada por inflamação crônica e reversível dos brônquios com células inflamatórias, hipertrofia das células do musculo liso e hiperreatividade brônquica das vias aéreas. Ela é definida pela história de sintomas respiratórios, tais como sibilos, dispneia, opressão torácica retroesternal e tosse, os quais variam com o tempo e na intensidade, e predominantemente a noite e pela manhã. Os corticosteroides são a base do tratamento da asma, visto que eles bloqueiam a produção das citocinas inflamatórias. No entanto, uma proporção considerável de pacientes com asma não responde à corticoterapia, mesmo quando administrados em altas doses, estes pacientes apresentam um perfil de resistência às ações antiinflamatórias dos corticosteroides, desenvolvendo um tipo de asma mais grave, com características celulares do tipo neutrofílica, do que eosinofílica, o que difere da asma alérgica, e este tipo de asma é caracterizado por asma resistente a corticoide. Neste sentido, nosso objetivo foi avaliar o efeito da fotobiomodulação usando diodos emissores de luz (LEDs) infravermelho no desenvolvimento de asma resistente a corticosteroides. Para tanto, utilizamos ratos wistar machos e dividimos aleatoriamente em 4 grupos, sendo: grupo basal ratos controle não manipulados; grupo CRA: ratos asmáticos; grupo CRA+LED: ratos asmáticos tratados com LED e grupo CRA+DEXA: ratos asmáticos tratados com dexametasona. Os três grupos, exceto o grupo basal, foram sensibilizados no 1º dia com ovalbumina grau V acrescidos de adjuvante completo de freund (AF) e nos dias 21º e 22º dia foi submetido ao desafio inalatório (nebulização) com ovalbumina a 1% grau III, para a criar a asma resistente a corticoide do tipo neutrofílica; o grupo CRA + LED foi tratado com o LED diretamente na pele sobre o trato respiratório em um único ponto, nos parâmetros: comprimento de onda 810 nm; potência 100 mW; densidade de energia 5 J/cm; energia total 15J; tempo 150s; O grupo CRA + Dexa, foi tratado com o medicamento dexametasona (2mg/ml) injetada por via intraperitoneal (ip) nos dias 21º e 22º 3 horas antes de cada desafio inalatório, Sendo assim, avaliamos a inflamação pulmonar (número total de células no LBA), a determinação da atividade da mieloperoxidase, os medicadores (citocinas) inflamatórias e antiinflamatórias, a expressão gênica e a desgranulação mastocitária. Nosso modelo experimental foi capaz de induzir asma com caraterísticas neutrofílica. O tratamento com corticosteroides não reverteu a migração de células para o lavado broncoalveolar, nem reduziu os níveis de leucotrieno B4, interleucinas 17 e 6. Já o tratamento com FBM reduziu a migração de células para o espaço alveolar, a atividade de mieloperoxidase, a degranulação de mastócitos e os níveis de leucotrieno B4, tromboxano B2, prostaglandina E2, fator de necrose tumoral alfa e interleucinas 17 e 6. Além do aumento do nível de interleucina 10, pela FBM. Mostramos efeitos promissores do LED na faixa infravermelho quando irradiado diretamente sobre o trato respiratório como um tratamento alternativo para asma resistente a corticosteroides.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES Mast cell tumors are neoplastic proliferations of mast cells, uncommon in most species and frequent in pets. Majority of MCT occur in the dermis and subcutaneous tissue and the etiopathogenesis is unknown. Its clinical appearance varies a lot and must always be considered potentially malignant, and may be associated with the expression of clinical signs caused by the release of vasoactive amines that are present in mast cell granules. Metastases should be searched and, whenever possible, surgical removal for histological grading of the tumor, which is the gold standard exam in the prognostication of mast cell tumor. The cytopathological exam is the initial, inexpensive, fast, and non-invasive tool for diagnosing mast cell tumors. Recently, cytological grading systems for mast cell tumors have been proposed, enabling the early identification of the tumor grade, which can be useful to plan treatment strategies and discuss the prognosis with the dog's owner. Other markers should be used to identify the proliferative index of the tumor, such as the count of argyrophilic nucleolar organizer regions (AgNORs). This work aims to generate information to advise about the presentation of patients with mast cell tumors in association with the AgNOR proliferative index. Thus, two manuscripts were produced about the practical approach of the canine patient with mast cell tumor. In the first manuscript, a technique to determine the AgNOR proliferative index collected from cytology was standardized, through which it was possible to impregnate slides previously stained with routine dyes, thus anticipating the tumor proliferative index. In the second manuscript, 63 cases of dogs with mast cell tumors were selected, which had the AgNOR index related to sex, breed, location and cytological grade. The findings demonstrate that there is no sexual or racial predisposition to high AgNOR indices, but in some anatomical sites the development of mast cell tumors has higher proliferative indices. It was also observed that high AgNOR indices are associated with high cytological grade mast cell tumors, which may represent a worse prognosis. Thus, it is suggested to evaluate the patient with mast cell tumor in the pre-surgical period by clinical staging, cytological analysis and cytological AgNOR index for the proper targeting of therapeutic strategies. The use of the AgNOR proliferative marker is useful because it is quick and easy to perform and provides support for the clinical approach having better results, helping to define the need for complementary therapeutic procedures in addition to surgical removal. Mastocitomas são proliferações neoplásicas de mastócitos pouco comuns na maioria das espécies e frequentes em animais de estimação. A grande maioria ocorre na derme e tecido subcutâneo e a etiopatogenia é desconhecida. Sua aparência clínica varia amplamente e sempre deve ser considerado potencialmente maligno, podendo estar associado à manifestação de sinais clínicos causados pela liberação de aminas vasoativas que estão presentes nos grânulos dos mastócitos. Deve ser feita investigação de possíveis metástases e, sempre que possível, remoção cirúrgica para graduação histológica do tumor, que é o exame padrão-ouro na determinação prognóstica do mastocitoma. O exame citopatológico é a ferramenta diagnóstica inicial, de baixo custo, rápida e não invasivo para o diagnóstico do mastocitoma. Recentemente, sistemas de graduação citológica do mastocitoma vem sendo propostos, possibilitando a identificação precoce do grau do tumor, o que pode ser útil para planejar estratégias de tratamento e discutir o prognóstico com o proprietário do cão. Outros marcadores podem e devem ser empregados para identificar o índice proliferativo do tumor, como a contagem de regiões organizadoras nucleolares argirofílicas (AgNORs). Este trabalho busca gerar dados que auxiliem na caracterização da apresentação do paciente com mastocitoma em associação ao índice proliferativo AgNOR. Neste sentido, foram gerados dois manuscritos acerca da abordagem prática do paciente canino com mastocitoma. No primeiro manuscrito, foi padronizada uma técnica para determinar o índice proliferativo AgNOR coletadas citológicas, através da qual possibilitou-se impregnar lâminas previamente coradas com corantes de rotina, antecipando assim o índice proliferativo tumoral. No segundo manuscrito, foram selecionados 63 casos de cães com mastocitoma, os quais tiveram o índice AgNOR relacionado ao sexo, raça, local e grau citológico. Os achados demonstram que não há predisposição sexual nem racial para elevados índices AgNOR, mas em alguns locais anatômicos o desenvolvimento do mastocitoma possui maiores índices proliferativos. Também observou-se que altos índices AgNOR estão associados a mastocitomas de alto grau citológico, o que pode representar um pior prognóstico. Dessa forma, sugere-se avaliar o paciente com mastocitoma no précirúrgico através do estadiamento clínico conjuntamente à análise citológica e índice AgNOR citológico para o adequado direcionamento das estratégias terapêuticas. A utilização do marcador proliferativo AgNOR é vantajosa pois é de execução rápida e fácil e fornece suporte para que a abordagem clínica tenha melhores resultados, permitindo definir a necessidade de procedimentos terapêuticos complementares além da remoção cirúrgica.

Submitted by Nadir Basilio (nadirsb@uninove.br) on 2021-11-03T22:29:50Z No. of bitstreams: 1 Paula Tatiane Alonso Pinto.pdf: 1139187 bytes, checksum: e69202dc5143888002c3fc2a11702304 (MD5) Made available in DSpace on 2021-11-03T22:29:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Paula Tatiane Alonso Pinto.pdf: 1139187 bytes, checksum: e69202dc5143888002c3fc2a11702304 (MD5) Previous issue date: 2021-08-06 Asthma is a chronic inflammatory disease characterized by recurrent and reversible episodes of wheezing, dyspnea, chest stiffness, and cough. Its treatment includes several drugs, high cost, and considerable side effects. Photobiomodulation (PBM) emerges as an alternative treatment, showing good results, and it can be applied locally or systemically. We evaluated the effect of Vascular Photobiomodulation (VPBM) by Light Emitting Diode (LED) in the course of asthma. Adult rats were sensitized and challenged or not with ovalbumin (OVA) plus alum for induction of asthma and irradiated or not with VPBM in the caudal artery (Power: 100mW; Wavelength 660 ± 10 nm; Total radiant emission 15 J; Spot Size: 2,8 cm2; Energy density at aperture: 5,35 J/cm2; Irradiance: 33,3 mW/cm2; Total time: 150 s). Our investigations prioritized the cell migration into the alveolar space and lung, tracheal responsiveness, release and gene expression of cytokines, mast cell degranulation, and anaphylactic antibodies. Our results showed that VPBM reduced the cell migration and mast cell degranulation without altering the tracheal responsiveness and ovalbumin antibody titers. The VPBM increased the levels of interleukin 10 (IL-10) in the bronchoalveolar lavage fluid without altering the gene expression of cytokines in the lung tissue. Thus, the VPBM reduced lung inflammation by altering mast cells degranulation and IL-10 level. Considering that this study is a pioneer in the used of Light Emitting Diode (LED) by the systemic route to treat asthma, the data are interesting and instigate future investigations, mainly in relation to the mechanisms involved and in dosimetry. A asma é uma doença inflamatória crônica caracterizada por episódios recorrentes e reversíveis de chiado, dispneia, rigidez torácica e tosse. Seu tratamento inclui vários medicamentos com alto custo e efeitos colaterais consideráveis. A Fotobiomodulação (FBM) surge como um tratamento alternativo com resultados positivos locais ou sistematicamente. Avaliamos o efeito da Fotobiomodulação Vascular (FBMV) por LED (Light Emitting Diode) no desenvolvimento da asma. Ratos adultos foram sensibilizados e desafiados ou não com ovalbumina (OVA) para indução de asma e irradiados ou não com FBMV na artéria caudal (Potência: 100mW; Comprimento de onda: 660 ± 10nm; Energia Total: 15 J; Feixe de saída: 2,8 cm²; Exposição Radiante: 5,35 J/cm²; Irradiância: 33,3 mW/cm²; Tempo total: 150 segundos). Investigamos a migração celular para o espaço alveolar e pulmão, resposta de contração traqueal, liberação e expressão gênica de citocinas, degranulação mastocitária e títulos de anticorpos anti-ovalbumina. Nossos resultados mostraram que a FBMV reduziu a migração celular e a degranulação mastocitária sem alteração da resposta de contração traqueal e os títulos de anticorpos anti-ovalbumina. A FBMV aumentou os níveis de interleucina 10 (IL-10) no fluído do lavado broncoalveolar sem alterar a expressão gênica de citocinas no tecido pulmonar. Assim, a FBMV reduziu a inflamação pulmonar alterando mastócitos e IL-10. Considerando que este estudo é pioneiro no uso de luz de diodo vermelha (LED) sistemicamente para o tratamento da asma, os dados são interessantes e instigam investigações futuras, principalmente na busca dos mecanismos envolvidos e dosimetria.

Tobacco is one of the main risk factors for periodontal diseases, although this relationship is not fully understood. The aim of the study was to perform a histopathological evaluation of the gingiva of rats exposed to tobacco smoke inhalation. Thirty Wistar rats were grouped into three groups: rats not exposed to tobacco smoke (n=10); rats exposed to tobacco smoke inhalation for 30 days (n=10); rats exposed to tobacco smoke inhalation for 60 days (n=10). After euthanasia, plasma and gingiva were collected. In the 60-day group, a higher frequency of apoptosis, exocytosis, necrosis, hyperkeratosis, higher density of mast cells and lower percentage of collagen were observed (p>0,05). A weak, inversely proportional correlation was observed between the percentage of collagen and the density of mast cells (p>0,05). The inhalation of tobacco smoke negatively affected body mass gain besides provoking reduction in collagen percentage and increased mast cell density in the gingival tissue of rats. Thus, the findings play an important role in alerting health authorities about the deleterious effects of exposure to tobacco smoke, especially on gingival tissue. El tabaco es uno de los principales factores de riesgo de las enfermedades periodontales, aunque esta relación no se comprende del todo. El objetivo del estudio fue realizar una evaluación histopatológica de la encía de ratas expuestas a la inhalación de humo de tabaco. Treinta ratas Wistar se agruparon en tres grupos: ratas no expuestas al humo del tabaco (n = 10); ratas expuestas a la inhalación de humo de tabaco durante 30 días (n = 10); ratas expuestas a la inhalación de humo de tabaco durante 60 días (n = 10). Después de la eutanasia, se recolectaron plasma y encía. En el grupo de 60 días se observó una mayor frecuencia de apoptosis, exocitosis, necrosis, hiperqueratosis, mayor densidad de los mastocitos y menor porcentaje de colágeno (p>0,05). Se observó una correlación débil e inversamente proporcional entre el porcentaje de colágeno y la densidad de los mastocitos (p>0,05). La inhalación del humo del tabaco afectó negativamente aumento de masa corporal y llevó a una reducción en porcentaje del colágeno y aumentó densidad de la célula de mástil en el tejido gingival de ratas. Así, los hallazgos desempeñan un papel importante en alertar a autoridades sanitarias sobre los efectos perjudiciales de la exposición al humo del tabaco, especialmente sobre tejido gingival. O tabaco é um dos principais fatores de risco para doenças periodontais embora essa relação ainda não seja completamente compreendida. O objetivo do estudo foi realizar avaliação histopatológica da gengiva de ratas exposta à inalação da fumaça de tabaco. Trinta ratas wistar, foram agrupadas em três grupos: ratas não expostas à fumaça do tabaco (n=10); ratas expostas à inalação da fumaça do tabaco por 30 dias (n=10); ratas expostas à inalação da fumaça do tabaco por 60 dias (n=10). Após eutanásia foram coletados plasma e gengiva. No grupo 60 dias foi observada maior frequência de apoptose, exocitose, necrose, hiperqueratose maior densidade de mastócitos e menor porcentagem de colágeno (p>0,05). Foi observada fraca correlação, inversamente proporcional, entre o percentual de colágeno e a densidade de mastócitos (p>0,05). A inalação da fumaça do tabaco afetou negativamente o ganho de massa corporal além provocar redução no percentual de colágeno e aumento da densidade de mastócitos no tecidual gengival de ratas. Assim, os achados têm importante papel no sentido de alertar as autoridades de saúde sobre os efeitos deletérios da exposição à fumaça do tabaco, em especial no tecido gengival.

O mastocitoma é uma das neoplasias cutâneas mais frequentemente diagnosticadas em cães e possui comportamento biológico amplo, variando de tumores bem diferenciados a tumores com comportamento maligno e doença metastática disseminada. As principais localizações anatômicas das metástases em cães são pouco estudadas, principalmente devido à falta de realização de necropsia nesses casos. O objetivo deste estudo foi avaliar os principais sítios metastáticos de mastocitomas cutâneos caninos e descrever os aspectos macroscópicos e histológicos das metástases. Foi conduzido um estudo retrospectivo nos arquivos de necropsia do Laboratório de Patologia Veterinária da Universidade Federal do Rio Grande do Sul de Janeiro de 2008 a Março de 2020 em busca de casos de mastocitomas cutâneos com metástases em cães. No período de 12 anos foram detectados 49 casos, todos classificados como mastocitomas cutâneos de alto grau. Os principais sítios metastáticos relatados foram os linfonodos (47/49; 95,9%), seguidos do baço (33/49;67,3%), fígado (29/49; 59,2%), medula óssea (20/49; 40,8%), rim (16/49; 32,7%) e coração (14/49; 28,6%). Outras localizações incomuns incluíram os pulmões (9/49; 18,4%), glândulas adrenais (4/49; 8,2%), músculo esquelético (4/49; 8,2%), osso (3/49; 6,1%), bexiga (2/49; 4.1%), próstata (2/49; 4.1%), esôfago (2/49; 4.1%), intestino delgado (2/49; 4.1%) e palato mole (1/49; 2%). Macroscopicamente, os linfonodos afetados apresentavam, em todos os casos, leve a acentuado aumento de volume, frequentemente com perda de distinção corticomedular. O padrão de metástase esplênica foi predominantemente caracterizado por esplenomegalia (28/33; 84,8%), por vezes associado a nódulos (13/33; 39,4%) e áreas puntiformes brancas (4/33; 12,1%). Hepatomegalia foi a principal apresentação macroscópica de metástase hepática (28/29; 96,5%), associada a áreas puntiformes brancas (9/29; 31%) e nódulos (2/29; 6,9%). Metástases renais eram caracterizadas por nódulos unilaterais ou bilaterais (9/16; 56,3%), áreas puntiformes brancas (3/16; 18,8%) ou palidez difusa do parênquima (1/16; 6,3%). O coração exibia nódulos na superfície epicárdica (6/14; 42,9%), palidez difusa (2/14; 14,3%) ou múltiplas áreas brancas no miocárdio (1/14; 7,1%). Nódulos metastáticos pulmonares foram observados em dois casos, enquanto nos demais sete cães as lesões eram apenas microscópicas e envolviam os vasos dos septos alveolares. Histologicamente, os linfonodos apresentavam obliteração do parênquima por mastócitos neoplásicos, os quais também estavam presentes nos seios medulares. No baço, as células neoplásicas estavam dispersas no parênquima (16/33; 48,5%), formando nódulos (10/33; 30,3%) ou difusamente distribuídas (9/33; 27,3%). No fígado, os mastócitos estavam principalmente nos sinusoides (24/29; 82,8%), formavam nódulos (10/29; 34,5%) e ocupavam espaços periportais (5/29; 17,2%). Nos rins e no coração, metástases intersticiais e nodulares foram observadas. Todas os mastocitomas apresentaram marcação imuno-histoquímica positiva para proteína KIT, com padrão de marcação KIT III em 29 casos (59,2%) e KIT II em 20 casos (40,8%). Mast cell tumor (MCT) is one of the most common cutaneous neoplasms of dogs, and it has a variable biological behavior, ranging from well differentiated to more aggressive tumours with metastatic disease. Nonetheless, the main metastatic sites of MCT are poorly described because of the lack of necropsy in cases with MCT-related disease and death. This study aimed to evaluate the metastatic sites of canine MCT and describe the macroscopic and histologic aspects of the metastases. A retrospective study was performed using the necropsy database of the pathology laboratory of the Universidade Federal do Rio Grande do Sul between January 2008 and March 2020 in search for cases of metastatic cutaneous MCTs. In the 12-year period, 49 cases were selected, and all tumours were classified as high-grade MCTs. The main metastatic sites were the lymph nodes (47/49; 95.9%), followed by spleen (33/49; 67.3%), liver (29/49; 59.2%), bone marrow (20/49; 40.8%), kidneys (16/49; 32.7%) and heart (14/49; 28.6%). Other sites included the lungs (9/49; 18.4%), adrenal glands (4/49; 8.2%), skeletal muscle (4/49; 8.2%), bone (3/49; 6.1%), urinary bladder (2/49; 4.1%), prostate gland (2/49; 4.1%), esophagus (2/49; 4.1%;), small intestine (2/49; 4.1%) and soft palate (1/49; 2%). Grossly, there was mild to severe lymphadenomegaly in all cases, which was frequently accompanied by loss of the nodal corticomedullary differentiation. Splenic metastases were mainly characterized by splenomegaly (28/33; 84.8%), occasionally associated with nodules (13/33; 39.4%) and white pinpoint areas (4/33; 12.1%). Hepatomegaly was the most common gross feature of hepatic metastasis (28/29; 96.5%) and was associated with white pinpoint foci (9/29; 31%) and nodular areas (2/29; 6.9%). Renal metastases were characterized by unilateral or bilateral nodules (9/16; 56.3%), white pinpoint areas (3/16; 18.8%) or pale discoloration of the parenchyma (1/16; 6.3%). The heart had nodules in the epicardial surface (6/14; 42.9%), pale myocardium (2/14; 14.3%) or multifocal white areas in the myocardium (1/15; 7.1%). The lungs had metastatic nodules in 2 dogs, while in the remaining cases there were only histologic lesions with neoplastic mast cells in the blood vessels of alveolar septa. Histologically, the lymph nodes were obliterated by neoplastic mast cells, which were also in the medullary sinus. In the spleen, neoplastic mast cells were multifocally scattered (16/33; 48.5%), arranged in nodules (10/33; 30.3%) or diffusely distributed (9/33; 27.3%). In the liver, neoplastic cells were mainly in the sinusoids (24/29; 82.8%), but also formed nodules (10/29; 34.5%) and were arranged in a periportal pattern (5/29; 17.2%). In the kidneys and heart, interstitial and nodular metastases were observed. All neoplasms had positive immunolabeling for KIT protein, with KIT III staining pattern in 29 cases (59.2%) and KIT II staining pattern in 20 cases (40.8%).

Submitted by Geyza Borges (geyza_lb@hotmail.com) on 2021-11-29T13:46:35Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Mestrado Geyza Borges.pdf: 1825994 bytes, checksum: d085ed80b0bef3ac9c58ec72587f6841 (MD5) Approved for entry into archive by Delba Rosa (delba@ufba.br) on 2021-11-29T15:19:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação Mestrado Geyza Borges.pdf: 1825994 bytes, checksum: d085ed80b0bef3ac9c58ec72587f6841 (MD5) Made available in DSpace on 2021-11-29T15:19:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação Mestrado Geyza Borges.pdf: 1825994 bytes, checksum: d085ed80b0bef3ac9c58ec72587f6841 (MD5) FAPESB A resposta inflamatória é definida como uma reação de defesa do organismo, frente a agentes agressores, cujo objetivo final é devolver a homeostase e recuperar os tecidos lesados. Dentre os principais tipos celulares envolvidos neste processo encontramos os mastócitos, cuja função é sintetizar, armazenar e liberar potentes mediadores químicos do processo inflamatório, através da sua degranulação. É conhecido que os Lasers e os LEDs de baixa potência, emitindo na região do vermelho e infravermelho, podem modular o processo inflamatório, sendo a degranulação de mastócitos, um dos fenômenos observados. Porém, pouco se sabe sobre efeitos da utilização clínica do LED violeta sobre os tecidos biológicos. Dessa forma, o objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos das fototerapias LED Infravermelho ( 850 ± 10 nm, emissão contínua, Dose = 20 J/cm2 ) e LED violeta ( 405 ± 10 nm, emissão contínua, Dose = 20 J/cm2 ), com a fotobiomodulação dos mastócitos após o estímulo da luz, bem como seu índice de degranulação, em mucosa de língua de ratos. Para tanto, foram utilizados 27 ratos da linhagem Wistar, que foram distribuídos aleatoriamente em três grupos: Grupo Controle, Grupo LED IV ( 850 ± 10 nm) e Grupo LED violeta ( 405 ± 10 nm). Os tempos de remoção do tecido oral foram: imediatamente, 20 minutos, 45 minutos e 2 horas após o procedimento de irradiação. Após a remoção da língua, os tecidos foram processados para análise histológica, através da coloração Azul de Toluidina, e feita a contagem dos mastócitos íntegros e degranulados. Em relação ao grupo controle, os grupos irradiados mostraram um aumento no número de mastócitos (íntegros e degranulados) no tecido superficial em todos os tempos, e no tecido profundo no tempo imediato do grupo LED violeta. Os maiores índices de degranulação foram observados no tecido profundo dos dois grupos irradiados. O grupo do LED violeta, apresentou destaque da degranulação no tecido profundo dos tempos imediato (70,25%) e 20 minutos (81,11%). Dessa forma, foi possível concluir que a luz LED infravermelha e violeta mostraram-se efetivas no processo de estimulação da proliferação e degranulação de mastócitos em mucosa de língua de rato. The inflammatory response is defined as a defense reaction of the body, against aggressive agents, whose ultimate goal is to return homeostasis and recover damaged tissues. Among the main cell types involved in this process, mast cells are found, whose function is to synthesize and release potent chemical mediators of the inflammatory process, through degranulation. It is well-known that low power Lasers and LEDs, emitting in the red and infrared region, can modulate biological process, with mast cell degranulation being one of the observed phenomena. However, the literature is scarce about the effects of the clinical use of the violet LED on biological tissues. The aim of this study was to evaluate the effects of infrared LED phototherapies ( 850 ± 10 nm, continuous emission, Dose = 20 J/cm2 ) and violet LED ( 405 ± 10 nm, continuous emission, Dose = 20 J/cm2 ), with mast cells photobiomodulation after light stimulation, as well as their degranulation index, in tissues of the mucosa of tongue of rats. To this end, 27 Wistar rats were used, which were randomly distributed into three groups: Control Group, LED IV Group ( 850 ± 10 nm) and violet LED Group ( 405 ± 10 nm). Tissue removal times were oral: immediately, 20 minutes, 45 minutes and 2 hours after the irradiation procedure. After removal of the tongue, the tissue was processed for histological analysis with Toluidine Blue stanning technique and count of intact and degranulated mast cells. In relation to the control group, the irradiated groups showed an increase in the number of mast cells (intact and degranulated) in the superficial tissue at all times, and in the deep tissue in the immediate time of the violet LED group. The highest rates of degranulation were observed in the deep tissue of the two irradiated groups. The group of the violet LED, showed a highlight of the degranulation in the deep tissue of the immediate (70.25%) and 20 minutes (81.11%) times. Thus, it was possible to conclude that the infrared and violet LED light proved effective in the process of stimulating the proliferation and degranulation of mast cells in the mucosa of the rat's tongue.

Objetivo: Analisar as alterações histopatológicas na cardiopatia hipertensiva e descrever e comparar os achados para esclarecer os fatores determinantes. Métodos: 42 fragmentos do miocárdio do ventrículo esquerdo e do ramo circunflexo da artéria coronária esquerda foram obtidos de indivíduos autopsiados no Hospital das Clínicas da Universidade Federal do Triângulo Mineiro (UFTM) no período de 1984 a 2018. Os grupos foram divididos em indivíduos com cardiopatia hipertensiva (CH) e indivíduos sem cardiopatia (SC). A espessura da parede livre do ventrículo esquerdo foi medida com um paquímetro digital e tomografia computadorizada. A quantificação das fibras de colágeno foi realizada por morfometria computadorizada e a densidade de mastócitos foi avaliada por métodos imunohistoquímicos. Resultados: O peso cardíaco do grupo CH foi significativamente maior do que no grupo SC (p=0.0002). A espessura da parede do ventrículo esquerdo do grupo CH foi significativamente maior do que do grupo SC (p=0.04). A densidade de fibras colágenas no ventrículo esquerdo do grupo CH foi significativamente maior do que do grupo SC (p

Dissertação de Mestrado em Biotecnologia Farmacêutica apresentada à Faculdade de Farmácia A obesidade é considerada um fator de risco para o aparecimento de melanoma maligno. Um dos órgãos para o qual os melanócitos tumorais apresentam maior tropismo é o pulmão. A resposta imunológica pulmonar é um dos fatores-chave que modula a metastização, estando muita investigação a ser feita nesse âmbito. Resultados recentes sugerem que a metastização pulmonar do melanoma está reduzida em animais obesos. Pretendeu-se investigar esta questão, analisando a influência da obesidade em dois componentes muito importantes no controlo da metastização: a inflamação crónica, associada ao excesso de tecido adiposo, e o sistema imunitário pulmonar. Analisaram-se metástases e parênquima pulmonar de ratinhos C57Bl6/J obesos (submetidos a dieta gorda) e não obesos. Começou-se por quantificar a proliferação e a apoptose nas metástases, tendo-se observado que estas encontram-se, predominantemente, em latência metabólica, quer em animais obesos quer normoponderais. Foram quantificados, seguidamente, os focos inflamatórios e os mastócitos pela coloração de Giemsa, tendo-se observado que os animais obesos apresentam um estado inflamatório latente mais evidente, com maior número de mastócitos no seu parênquima, mas menor nas metástases. Para melhor caracterizar a interação melanoma-macrófagos alveolares no pulmão, foram realizados ensaios em culturas celulares de macrófagos RAW 264.7 e de melanoma B16F10, em meio condicionado de adipócitos 3T3L1, tendo-se verificado que o meio condicionado de 3T3L1 reduz a viabilidade de ambos os tipos celulares e contribui muito pouco para a repolarização das RAW 264.7 quando ativadas pelo LPS de E.coli. Os resultados obtidos sugerem que a obesidade reduz a metastização pulmonar do melanoma através da redistribuição da população imunológica local e do efeito da inflamação latente. Obesity is considered a risk factor for the appearance of malignant melanoma. One of the organs for which tumor melanocytes present the greatest tropism is the lung. The pulmonary immune response is one of the key factors that modulate metastasis, with much research to be done in this area. Recent results suggest that lung metastasis of melanoma is reduced in obese animals. The aim of this study was to investigate the influence of obesity on two very important components in the control of metastasis: chronic inflammation, associated with excess adipose tissue, and the pulmonary immune system. Metastases and lung parenchyma of obese C57Bl6/J (fat diet) and non-obese mice were analyzed. It was begun by quantifying the proliferation and apoptosis in the metastases, being observed that these are predominantly in metabolic latency, in both obese and normoponderal animals. The inflammatory foci and mast cells were, then, quantified by Giemsa staining. Obese animals had a more evident latent inflammatory state, with a higher number of mast cells in their parenchyma, but lower in metastases. In order to better characterize the melanoma-alveolar macrophages interaction in the lung, assays were performed on cell cultures of RAW 264.7 macrophages and B16F10 melanoma in conditioned medium of 3T3L1 adipocytes. The conditioned medium of 3T3L1 was found to reduce the viability of both cell types and contributes very little to the repolarization of RAW 264.7 when activated by LPS of E.coli. The results suggest that obesity reduces lung metastasis of melanoma through redistribution of the local immunological population and the effect of latent inflammation.

Submitted by VICTOR GUSTAVO BALERA BRITO (victor_balera@hotmail.com) on 2018-07-03T00:06:47Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Mestrado (Victor G B Brito) (FINAL).pdf: 4446716 bytes, checksum: 348cbec88d5fb2161f9d4aaa27992ac2 (MD5) Approved for entry into archive by Ana Paula Rimoli de Oliveira null (anapaula@foa.unesp.br) on 2018-07-03T12:24:17Z (GMT) No. of bitstreams: 1 brito_vgb_me_araca_int.pdf: 4446716 bytes, checksum: 348cbec88d5fb2161f9d4aaa27992ac2 (MD5) Made available in DSpace on 2018-07-03T12:24:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 brito_vgb_me_araca_int.pdf: 4446716 bytes, checksum: 348cbec88d5fb2161f9d4aaa27992ac2 (MD5) Previous issue date: 2018-06-13 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) Introdução: A doença periodontal (DP) é uma desordem inflamatória dos tecidos de suporte dos dente, iniciada pelo acumulo de biofilme bacteriano, apresentando consequências locais e sistêmicas. A coexistência de doenças sistêmicas, como a hipertensão, pode levar a uma inflamação exacerbada, maior reabsorção óssea e dano sistêmico pronunciado. Além disso, células imunes residentes têm importante papel na progressão da DP, porém, a participação dos mastócitos (MC) ainda não é bem compreendida. Objetivos: Avaliar o papel dos MC sobre o metabolismo ósseo local (mandíbula) e sistêmico (fêmur), em modelo animal normotenso (ratos Wistar) e hipertenso (ratos SHR) com DP. Métodos: Ratos machos Wistar e SHR (10 semanas) foram utilizados. A depleção de MC foi conduzida pelo pré-tratamento com o composto 48/80 e a DP foi induzida por ligadura bilateral nos primeiros molares inferiores, mantida por 15 dias. Foi realizada a identificação de MC no tecido gengival, por coloração com Azul de Toluidina. A perda óssea alveolar e parâmetros de arquitetura óssea na mandíbula e fêmur foram avaliados por microtomografia computadorizada, a expressão gênica de marcadores de formação, remodelamento e reabsorção na mandíbula e fêmur foram avaliada por RT-PCR em tempo real, e a produção de citocinas nos tecidos de interesse foi avaliada por ELISA. Principais resultados: Observamos significativa perda óssea induzida por DP, principalmente no SHR, em comparação ao Wistar, e a depleção de MC foi capaz de prevenir esta perda. A DP levou a expressão aumentada de Opn, Opg, Rankl e Rank, Trap, Ctsk, Vtn, Itga5 e Itgb5, além de aumento na produção de TNF-α, IL-6, IL-10 e CXCL3 na mandíbula, o que foi reduzido em animais depletados de MC. No fêmur, a DP não levou a alterações da arquitetura óssea, mas foi capaz de aumentar a expressão de Runx2, Opn, Opg, Rankl, Rank, Trap, Mmp2, Mmp9, Vtn, Itga5 e Itgb5, o que também foi significativamente reduzido pela depleção de MC. Conclusões: Nossos dados sugerem um importante papel dos MC nas consequências ósseas locais (mandíbula) da DP, especialmente nos animais SHR, além dos efeitos sistêmicos (fêmur) onde os MC possivelmente têm participação na modulação da expressão de marcadores ósseo, alterados pela DP, o que foi mediado por vias diferentes das observadas na resposta local. Introduction: Periodontal disease (PD) is an inflammatory disorder of the tissues supporting the teeth, which start from the bacterial biofilm accumulation, and results in local and systemic damage. The coexistence of systemic diseases, such as hypertension, can lead to exacerbated inflammation, increased alveolar bone resorption and increased systemic damage. In addition, resident immune cells have an important role in PD progression, however the mast cells (MC) participation is still not well understood. Aims: To evaluate the role of MC in the local (mandible) and systemic (femur) bone metabolism in a normotensive (Wistar) and hypertensive (SHR) rats with PD. Methods: Males Wistar and SHR rats (10-week old) were used. MC depletion was conducted by compound 48/80 treatment and PD was induced by bilateral ligature placed in the lower first molars, which was maintained for 15 days. The identification of MC in the gingival tissue was done by Toluidine Blue staining, alveolar bone loss and bone architecture parameters of mandible and femurs were evaluated by micro-computed tomography, bone markers gene expression on the mandible and femur were evaluated by real time RT-PCR, and the cytokines production was evaluated by ELISA. Key results: We observed a more significant PD-induced bone loss in SHR, compared to Wistar, and MC depletion was able to prevent this loss. PD increased the expression of Opn, Opg/ Rankl/Rank, Trap, Ctsk, Vtn, Itga5 and Itgb5, as well as increased production of TNF-α, IL-6, IL-10 and CXCL3 in the mandible, what was prevented by MC depleted animals. In the femur, PD did not change bone architecture parameters, but was able to increase expression of Runx2, Opn, Opg/Rankl/Rank, Trap, Mmp2, Mmp9, Vtn, Itga5 and Itgb5, which also was significantly reduced by MC depletion. Conclusions: Our data suggest an important role of MC in the local bone consequences (mandible) of PD, especially in SHR, as well the systemic effects (femur), where MC may have a role in bone dynamics by modulating the expression of bone markers, altered by PD, through different mechanism from those observed in the local response. 15/03965-2

Submitted by Karen Henriette Pinke null (kpinke@ibb.unesp.br) on 2017-06-12T13:06:37Z No. of bitstreams: 1 Tese Karen H Pinke.pdf: 4584732 bytes, checksum: 6aaf28737188bcdd9ab5d0867adca83f (MD5) Rejected by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com), reason: Solicitamos que realize uma nova submissão seguindo a orientação abaixo: O arquivo submetido está sem a ficha catalográfica. A versão submetida por você é considerada a versão final da dissertação/tese, portanto não poderá ocorrer qualquer alteração em seu conteúdo após a aprovação. Corrija esta informação e realize uma nova submissão com o arquivo correto. Agradecemos a compreensão. on 2017-06-13T16:17:26Z (GMT) Submitted by Karen Henriette Pinke null (kpinke@ibb.unesp.br) on 2017-06-13T19:12:30Z No. of bitstreams: 1 Tese Karen H Pinke.pdf: 4731413 bytes, checksum: c0779e983bdbdb52e983c0b5e2d28074 (MD5) Approved for entry into archive by LUIZA DE MENEZES ROMANETTO (luizamenezes@reitoria.unesp.br) on 2017-06-14T18:30:33Z (GMT) No. of bitstreams: 1 pinke_kh_dr_bot_parc.pdf: 990061 bytes, checksum: cef12a1b4df21847d262d250f66ef475 (MD5) Made available in DSpace on 2017-06-14T18:30:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 pinke_kh_dr_bot_parc.pdf: 990061 bytes, checksum: cef12a1b4df21847d262d250f66ef475 (MD5) Previous issue date: 2017-06-08 Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) A Esclerose múltipla é uma doença autoimune degenerativa que acomete jovens adultos, causando danos neuroaxonais e áreas de desmielinização no sistema nervoso central (SNC) devido a uma resposta autoimune mediada por linfócitos Th1, Th17 e T citotóxicos. A encefalomielite autoimune experimental (EAE) constitui seu principal modelo de estudo e mastócitos parecem contribuir para os processos inflamatórios envolvidos na patogênese da EM/EAE. Seguindo este raciocínio, substâncias estabilizadoras de mastócitos, como o fumarato de cetotifeno, poderiam afetar o desenvolvimento destas doenças através do bloqueio dos processos de exocitose e desgranulação. O objetivo principal deste trabalho foi avaliar o efeito desta droga no desenvolvimento da EAE. Para isto, camundongos C57BL/6 fêmeas submetidas à indução da EAE através da imunização com MOG/CFA e injeção de toxina pertussis, foram tratados com fumarato de cetotifeno (0,4 mg/kg via intraperitoneal) durante 11 dias, a partir do 7º dia após a indução. O efeito do tratamento no desenvolvimento clínico da EAE foi determinado pela avaliação de peso corporal e escore clínico. Posteriormente, parâmetros histopatológicos e imunológicos associados à doença, bem como a quebra da função da barreira hematoencefálica (BHE) foram avaliados. As comparações dos valores de incidência, escores clínicos diários e máximos, e de variação de peso corpóreo revelaram que o tratamento com cetotifeno reduziu a incidência e a gravidade da EAE. Este efeito protetor determinado pelo cetotifeno foi associado com a normalização da função da BHE e consequente ausência ou redução da infiltração de linfócitos no SNC, e ativação reduzida de micróglia. Também se verificou menor expressão gênica de quimase-1, mMCP-4 e carboxipeptidase-1 no SNC e grande ativação da resposta imune periférica em amostras de linfonodos e baço dos animais imunizados e tratados com cetotifeno. Considerando os resultados obtidos, concluiu-se que o tratamento com fumarato de cetotifeno impede o desenvolvimento clínico da EAE por mecanismos que envolvem a manutenção da função da BHE e consequente bloqueio da infiltração de linfócitos no SNC. Multiple sclerosis is one of the most prevalent neurological human diseases. It triggers axonal damage and demyelinated areas in central nervous system (CNS) by an autoimmune response mediated by Th1, Th17 and T cytotoxic lymphocytes. Experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) is the most employed model of study this disease and mast cells appear to contribute to MS- and EAE- underlying immunopathogenesis. In this scenario, mast cell stabilizer drugs, such as ketotifen fumarate, could affect the development of these diseases by the blockage of exocytosis and degranulation. The aim of this study was to evaluate the effect of this drug on the development of EAE. For this, MOG/CFA-immunized female C57BL/6 mice were treated with ketotifen fumarate. The effect of treatment was determined by body weight loss and clinical score. Subsequently, EAE-associated histopathological and immunological parameters, as well as breakdown of blood-brain and blood-spinal cord barrier were analyzed. Comparisons about incidence values, daily and maximum clinical scores, and body weight loss revealed that ketotifen-treatment reduced the EAE-incidence and -severity. This protection was associated with the restoration of blood-spinal cord barrier function, absence or reduction of SNC lymphocytic infiltration and reduced microglial activation. Lower chymase-1, mMCP-4 and carboxypeptidase-1 gene expressions were also detected in the CNS, as well as higher activation of peripheral immune response in lymph node and splenic samples from immunized mice treated with ketotifen. Considering these results, it was concluded that the treatment with ketotifen fumarate prevents the clinical development of EAE by mechanisms related to maintenance of blood-spinal cord barrier function and consequent blockage of CNS inflammatory infiltrate. FAPESP: 14/00239-6

Submitted by SARA DE SOUZA COSTA null (sarah_sc_0705@hotmail.com) on 2017-03-30T13:36:06Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Sara de Souza Costa.pdf: 2766240 bytes, checksum: 20b447fe5bf3c49e40aa0b5fdf4dff1f (MD5) Approved for entry into archive by Juliano Benedito Ferreira (julianoferreira@reitoria.unesp.br) on 2017-04-06T13:29:26Z (GMT) No. of bitstreams: 1 costa_ss_me_sjrp.pdf: 2766240 bytes, checksum: 20b447fe5bf3c49e40aa0b5fdf4dff1f (MD5) Made available in DSpace on 2017-04-06T13:29:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 costa_ss_me_sjrp.pdf: 2766240 bytes, checksum: 20b447fe5bf3c49e40aa0b5fdf4dff1f (MD5) Previous issue date: 2017-03-02 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) As lesões uterinas são causas importantes de desconforto, infertilidade e óbito entre as mulheres no Brasil e no mundo. O câncer de endométrio é um tumor maligno frequente e sua incidência vem aumentando nas últimas décadas. Enquanto, o tumor uterino benigno mais comum, o leiomioma, acomete cerca de 40% das mulheres na idade reprodutiva, sendo relacionado à menorragia, dismenorreia e infertilidade. Investigações indicam que o microambiente tumoral é crucial para o avanço do câncer, sendo caracterizado, principalmente, pela composição alterada da matriz extracelular, alta densidade de microvasos e abundância de células inflamatórias, como mastócitos (MCs). MCs desgranulados liberam fatores quimiotáticos e proteases, como triptase e quimase, para o meio extracelular, contribuindo na degradação da matriz extracelular, promoção da angiogênese, propiciando ambiente favorável para invasão tumoral e remodelação tecidual por meio de proteólises seletivas na matriz e ativação de metaloproteinases. Outro aspecto importante no crescimento tumoral é a proteína anti-inflamatória Anexina A1 (ANXA1), relacionada à regulação dos processos de crescimento e migração/invasão celular, sendo seus efeitos mediados por receptores para peptídeos formilados (FPRs), especialmente FPR1 e FPR2. Diante da importância dos MCs e da ANXA1/FPR no desenvolvimento tumoral, o objetivo desta investigação foi analisar a heterogeneidade dos MCs e a expressão das proteínas ANXA1, FPR1 e FPR2 em biópsias humanas das variáveis clínico-patológicas de útero normal: hiperplasia endometrial simples (HES), adenomiose, leiomiomas e adenocarcinoma (ADC) endometrial de graus I e II. Os MCs foram quantificados de acordo com seu estado de ativação e expressão das proteases triptase e quimase. A expressão da ANXA1 e seus receptores FPR1 e FPR2 nos MCs e tecidos uterinos foram analisadas nas diferentes biópsias estudadas. Nossos resultados mostraram MCs intactos e desgranulados, no endométrio e miométrio normais e aumentados na HES, margens tumorais nos leiomiomas, adenomiose e ADC endometrial de graus I e II, e diminuídos significantemente na região tumoral do leiomioma. Com relação à heterogeneidade, os MCs triptase-positivos foram observados em maior quantidade. As expressões endógenas da ANXA1 e do FPR1 foram observadas nos tecidos uterinos e MCs, com ausência para o FPR2. As modulações dos MCs, da proteína ANXA1 e de modo específico do receptor FPR1, nas variáveis clínico-patológicas das lesões uterinas investigadas indicam o envolvimento dessas células e a interação ANXA1/FPR1 no desenvolvimento de inflamação e neoplasia uterina. Uterine lesions are important causes of discomfort, infertility and death among women in Brazil and in the world. Endometrial cancer is a frequent malignant tumor and its incidence has been increasing in the last decades. Besides, the most common benign uterine tumor, leiomyoma, affects about 40% of women at reproductive age, being related to menorrhagia, dysmenorrhea and infertility. Investigations indicate that the tumor microenvironment is crucial for the advancement of cancer, being characterized mainly by the altered composition of the extracellular matrix, high microvessel density and abundance of inflammatory cells, such as mast cells (MCs). Degranulated MCs release chemotactic and protease factors, such as tryptase and chymase, to the extracellular medium, contributing to the degradation of the extracellular matrix, promoting angiogenesis, providing a favorable environment for tumor invasion and tissue remodeling through selective proteolysis in the matrix and activation of metalloproteinases. Another important aspect of tumor growth is the anti-inflammatory protein Annexin A1 (ANXA1), related to the regulation of growth and migration / invasion processes, and its effects mediated by receptors for formylated peptides (FPRs), especially FPR1 and FPR2. The objective of this investigation was to analyze the heterogeneity of the MCs and the expression of the ANXA1, FPR1 and FPR2 proteins in human biopsies of clinical-pathological variables of normal uterus: simple endometrial hyperplasia (HES), adenomyosis, leiomyomas and endometrial adenocarcinoma (ADC) of grades I and II. MCs were quantified according to their state of activation and expression of tryptase and chymase proteases. Expression of ANXA1 and its FPR1 and FPR2 receptors in the MCs and uterine tissues were analyzed in the different biopsies studied. Our results showed intact and degranulated MCs in the normal endometrium and myometrium and increased MCs in HES, tumor margins in leiomyomas, adenomyosis and endometrial ADC of grades I and II, but significantly decreased in the leiomyoma tumor region. In relation to the heterogeneity, it was observed that the tryptase-positive MCs were observed in greater quantity. Endogenous expressions of ANXA1 and FPR1 were observed in uterine tissues and MCs, but absent for FPR2. Modulations of MCs and ANXA1 protein expression and the specificity of FPR1 receptor immunolabeling in the clinical-pathological variables of the investigated uterine lesions indicate the involvement of these cells and the interaction ANXA1/FPR1 in the development of inflammation and uterine neoplasia.

Introduction: Chronic inflammation plays an important role on the transformation and tumor progression during oral carcinogenesis. There is a great number of chronic inflammatory lesions (CIL) in the oral cavity which are related to dysplastic processes of the epithelium, immune response and changes on the collagen deposition. Objectives: To investigate the presence of dysplasia and to histologically grade them in the CIL of traumatic cause, as well as toaccessthe density of mast cells and different types of collagen fibers in cases of epithelial dysplasias and oral squamous cell carcinomas (OSCC). Material and Method: Initially, 183 CIL cases were evaluated as to the presence of dysplasia and also classified according to its degree of epithelial dysplasia. Among those lesions, 45 CIL cases were selected and divided into two groups: group 1 (15 cases of mild dysplasia), group 2 (15 cases of moderate/severe dysplasia). The control group was composed by 15 cases of OSCC.They were stained with toluidine blue in order to quantify the mast cells and picrosirius red to semi-quantify the collagen type fibers. Results: The mast cells were detected in all groups presenting a mean of 6,76 cells/mm2, 10.82 cells/mm2 and 19.18 cells/mm2 in the control, group 1and 2 respectively. Regarding the collagen fibers, type III was more prevalent on groups 2 and control while type I fibers were more abundant on group 1. Conclusion: Oral chronic inflammatory lesions showed dysplastic changes in most analyzed cases. The results suggests an active participation of mast cells in the stage of tumor transformation, since it was detected a higher density onthe dysplasia cases when compared to the OSCC cases. Nevertheless, the gradual change of collagen type fibers indicates that collagenproducing cells become altered during the stages of dysplasia (tumor transformation). Introdução: A inflamação crônica tem um papel importante na transformação e progressão tumoral durante a carcinogênese oral. Muitas lesões inflamatórias crônicas (LIC) da cavidade oral estão relacionadas a processos displásicos do epitélio, à resposta imune e à mudança na deposição do colágeno. Objetivos: Investigar a presença de displasia e graduá-las histologicamente nas LIC de origem traumática, como também, avaliar a densidade de mastócitos e de diferentes tipos de fibras colágenas nas LIC com displasias epiteliais e comprar aos casos de carcinomas de células escamosas (CCE). Material e Métodos: Inicialmente 183 LIC foram avaliadas quanto à presença de displasia e classificadas em relação ao grau. Em seguida, 45 casos foram divididos em: Grupo controle (CCE), Grupo 1 (displasia leve- DL), Grupo 2 (displasia moderada/severa- DM/S). Foram corados com Azul de Toluidina para quantificar os mastócitos e Picrosirius Red para avaliação dos tipos de fibras colágenas I e III. Resultados: As LIC foram mais frequentes em mulheres (n=107) com idade de 36,6 anos. O sítio mais afetado foi a mucosa do lábio inferior (29,7%), já a lesão mais frequente foi o fibroma traumático (39,2%). A displasia leve esteve presente em 56,3% da amostra. Os mastócitos foram evidenciados nos três grupos: grupo controle (6,76 mastócitos/mm), grupo 1 (10,82 mastócitos/mm2) e grupo 2 (19,18 mastócitos/mm2).Quando analisadas as fibras colágenas, observouse no grupo controle e no grupo 2 que as fibras tipo III foram mais prevalentes, já no grupo 1 prevaleceu-se as fibras tipo I. Conclusão: Lesões inflamatórias crônicas orais apresentaram alterações displásicas na maior parte dos casos. O estudo sugere uma participação dos mastócitos na fase de transformação tumoral. E a alteração gradativa dos colágenos tipo I e III indica alteração das células produtoras de colágeno, durante transformação tumoral.

Cissampelos sympodialis Eichl (Menispermaceae) is a native plant of Paraiba region which is used in folk medicine to treat various inflammatory conditions such as asthma and rhinitis. This plant has several biologically active metabolites such as warifteine, methyl warifteine, milonine, among others. Preliminary data show that warifteine exhibits anti-inflammatory activity in a murine model of asthma. The aim of this study was to evaluate whether milonina, metabolite of Cissampelos sympodialis has acute anti-inflammatory activity. For this purpose, we used the model of paw edema induced by phlogistic agents, histological analysis, anaphylactic shock reaction, scratching behavior and antinociceptive activity tests such as writhing and hot plate. The pretreatment of animals with milonina was able to inhibit significantly (p

Nas Américas milhões de pessoas são portadoras da doença de Chagas causada pelo Trypanosoma cruzi. A cardiopatia chagásica crônica é a forma mais grave da doença, caracterizada por lesões no miocárdio associadas a processo inflamatório e fibrose que muitas vezes evoluem para progressiva diminuição das funções cardíacas. A doença de Chagas durante o envelhecimento pode ter aspectos específicos que precisam ser mais claramente entendido. O objetivo do estudo foi descrever a relação da angiogênese e da densidade de mastócitos com a fibrose miocárdica em idosos portadores de cardiopatia chagásica crônica. Para tanto foram selecionados fragmentos do ventrículo esquerdo de pacientes autopsiados no Hospital das Clínicas da Universidade Federal do Triângulo Mineiro. Formou-se quatro grupos, idosos com cardiopatia chagásica – 6 (Idoso CC); idosos sem cardiopatia chagásica – 5 (Idoso SC); Não-idosos com cardiopatia chagásica – 5 (não idoso CC); Não-idosos sem cardiopatia chagásica - 5 (não idoso SC). Realizou-se a técnica de picrosirius para quantificação da porcentagem do colágeno sob luz comum e objetiva de 10x. A imunohistoquímica foi realizada para obtenção da densidade de mastócitos utilizando o anticorpo monoclonal antitriptase, e para a densidade de vasos sanguíneos o anticorpo monoclonal CD34, ambas foram avaliadas sob luz comum e objetiva de 40x. A porcentagem de colágeno foi significativamente maior no grupo de idosos CC, quando comparada aos outros grupos (p=0,003). A densidade de mastócitos foi maior no grupo de idosos CC, mas sem diferença significativa (p=0,226). A densidade de vasos sanguíneos foi menor no grupo de idosos CC e sem diferença significativa (p=0,224). Portanto, foi verificada no grupo de idosos CC maior quantidade de colágeno, e ainda, maior densidade de mastócitos e menor densidade de vasos sanguíneos, embora não significativa, que provavelmente estão relacionados com a etiopatogênese das lesões miocárdicas na cardiopatia chagásica crônica durante o envelhecimento. In Americas million people are carriers of Chagas disease caused by Trypanosoma cruzi. Chronic chagasic cardiopathy is the most severe form of the disease, characterized by lesions in the myocardium associated with inflammation and fibrosis which often evolve to progressive decrease of heart function. Chagas’ disease during aging may have specific aspects that require further studies. The aim of the study was to describe the relationship of angiogenesis and mast cell density with myocardial fibrosis in elderly patients with chronic Chagas' disease. To reach this goal we selected left ventricular fragments of autopsied patients at the Clinical Hospital, Federal University of Triangulo Mineiro. The samples were divided into four groups: elderly with chagasic cardiopathy - 6 (CC elderly); elderly without chagasic cardiopathy - 5 (SC elderly); Non-elderly with chagasic cardiopathy - 5 (no elderly CC); Non-elderly without chagasic cardiopathy - 5 (no elderly SC). Picrosirius red staining was performed for quantifying the percentage of collagen in common light and 10x magnification. Immunohistochemistry was performed to obtain the mast cell density, using antitriptase monoclonal antibody, and the density of blood vessels, using CD34 monoclonal antibody. The samples were evaluated under common light and at 40x magnification. The percentage of collagen was significantly higher in the elderly CC group compared to the other groups (p = 0.003). The density of mast cells was higher in elderly CC group, but no significant difference (p = 0.226). The density of blood vessels was lower in the elderly CC group and no significant difference (p = 0.224). Therefore, in elderly CC group there was more collagen, and also higher density of mast cells and lower density of blood vessels, although not significant, which are probably associated to the etiopathogenesis of myocardial lesions in chronic Chagas' disease during aging.

Os mastócitos são um grupo de células multifuncionais, derivadas de células progenitoras hematopoiéticas, sob influência do fator de células-tronco. Estudos obtiveram evidências que reforçam a importância dessas células no desenvolvimento da fibrose renal. Relatam que a deposição intrarenal de colágeno foi significativamente menor nos animais deficientes em mastócitos, quando comparados aos controles não deficientes, 7 e 14 dias após obstrução uretérica. Outros estudos observaram que o aumento da deposição de fibras de colágeno nos rins induzido pela obstrução ureteral é mais intenso em machos do que em fêmeas; notaram, ainda, que a orquiectomia inibiu o desenvolvimento de fibrose renal associada à amarração do ureter. Assim, no presente trabalho objetivamos: (i) avaliar o número de mastócitos, a expressão de α-actina, PCNA e o nível de fibrose em rins submetidos à amarração ureteral em animais pré-tratados com cromoglicato de sódio (inibidor da desgranulação mastocitária) ou salina; (ii) avaliar se a orquiectomia e a administração de testosterona altera o padrão de alterações renais induzidas no modelo. Para isso, cada animal permaneceu 21 dias em experimentação, sendo considerado o dia 0 (zero), o dia do início dos experimentos. Neste dia os animais eram submetidos à falsa-operação ou a orquiectomia. No 7º dia, os animais eram submetidos à falsa operação ou à amarração do ureter esquerdo. Decorridos 14 dias de amarração os animais eram anestesiados e sacrificados para coleta do material biológico. A reposição hormonal iniciou-se um dia após a orquiectomia, i.e., no dia 1, o tratamento com cromoglicato iniciou-se no 5º dia. O rim foi fixado e processado, e em seguida foi realizado cortes para corar com azul de toluidina, com o intuito de quantificar mastócitos; Picrosirius red, para análise do colágeno; hematoxilina e eosina para análise do glomérulo e morfologia. Além disso, foram realizadas duas imunohistoquímicas, para α- actina e PCNA. Foi possível observar uma diminuição da área do glomérulo e do tufo capilar no grupo em que foi induzida a lesão renal. Além disso, ocorreu um aumento da densidade de mastócitos, sendo que a orquiectomia e o tratamento com cromoglicato diminuíram esse efeito, o mesmo foi observado para o colágeno. Também houve um aumento de células PCNA+ nos rins lesionados, porém somente a orquietomia bloqueou parcialmente esse efeito. Enquanto que a avaliação da α-actina, o cromoglicato e a orquiectomia diminuiram parcialmente o aumento da expressão de α-actina causada pela lesão renal. O presente estudo sugere que há uma interação entre mastócito e testosterona no desenvolvimento de fibrose renal no modelo de obstrução ureteral. Mast cells are a group of multifunctional cells derived from hematopoietic stem cells, under the influence of stem cell factor. Studies have found evidence that reinforce the importance of these cells in the development of renal fibrosis. These studies report that intrarenal collagen deposition was significantly lower in mice deficient in mast cells, when compared to non-deficient controls, 7 and 14 days after ureteric obstruction. Other researches described that increased deposition of collagen fibers in kidneys with induced ureteral obstruction is more intense in males than females; they have also noticed that orchiectomy inhibited the development of renal fibrosis associated with ureteral obstruction. Thus, the present study aimed to: (i) assess the number of mast cells, the expression of α-actin, PCNA and the level of fibrosis in kidneys of animals underwent ureteral obstruction pretreated with sodium cromoglycate (an inhibitor of mast cell degranulation) or saline; (ii) to evaluate whether orchiectomy and testosterone administration alters the pattern of renal changes induced in the experimental model. To do so, each animal remained 21 days in trial, and it is considered day 0 (zero) the day of the beginning of the experiments. On this day the animals were subjected to a false-operation or orchiectomy. On the 7th day, the animals were subjected to a false-operation or ureteral obstruction. After 14 days of the obstruction the animals were anesthetized and sacrificed to collect biological material. Hormone replacement began one day after orchiectomy, wich means, on day 1 and the treatment with cromoglycate began on the 5th day. The kidney was fixed, embedded, sectioned and then stained with toluidine blue, in order to quantify mast cells; Picrosirius red, for analysis of collagen; Hematoxylin and eosin for examination of the glomerulus and morphology. In addition, two immunohistochemical analysis were performed: α- actin and PCNA. It was observed a decrease in the glomerulus and the capillary tuft area in the group that was induced renal damage. Furthermore, mast cells had an increased density, while orchiectomy and cromoglycate treatment decreased this effect and the same was observed for collagen. There was also an increase in PCNA + cells in the injured kidney, but only orchiectomy partially blocked this effect. Whilst evaluation of α-actin, cromoglycate and orchiectomy partially diminished the increased expression caused by renal injuries. The present study suggests that there is an interaction between mast cells and testosterone in the development of renal fibrosis model of ureteral obstruction. Dissertação (Mestrado)

Introdução: o estresse psicológico aumenta a permeabilidade intestinal em roedores e humanos, potencialmente levando a inflamação de baixo grau e aos sintomas em distúrbios gastrintestinais funcionais. No entanto, o efeito do estresse agudo combinado ao estresse da vida crônica, que mimetiza potencialmente melhor a situação humana, é desconhecido. Além disso, há poucos dados disponíveis sobre os efeitos do estresse em intestino delgado versus cólon. Métodos: ratos Wistar foram alocados em quatro protocolos de estresse: 1/ controles; 2/ estresse agudo (isolamento e movimentos limitados); 3/ Crowding stress:crônico e 4/ estresse agudo + estresse crônico. Amostras de jejuno e cólon foram colhidas para estudar a permeabilidade em câmaras deUssing, a expressão gênica de moléculas de junção firmes e a densidade de mastócitos. Níveis de corticosterona no plasma foram medidos. Principais resultados:corticosterona plasmática foi avaliada nas três condições de estresse, teve níveis mais altos na condição de estresse combinado. Permeabilidade do jejuno foi aumentada em todas as condições de estresse e correlacionada com os níveis de corticosterona. O aumento da expressão das claudinas 1, 5 e 8, daocludina e da ZO-1 foi detectado no estado de estresse agudo no jejuno. Em contraste, a permeabilidade do cólon foi aumentada no protocolo de estresse combinado, e a expressão de moléculas das junção firmes permaneceu inalterada. O aumento da densidade de mastócitos foi observado no cólon nos ratos submetidos aos estresses crônico e combinado. Conclusão e inferências:os estresses agudo, crônico e combinado influenciam diferentemente a permeabilidade intestinal, a expressão de moléculas de junção firmes e a atividade dos mastócitos, no jejuno e no cólon. Estes resultados fornecem uma visão mais aprofundada dos mecanismos de hiperpermeabilidade intestinal relacionadas ao estresse. Background: Psychological stress increases intestinal permeability in rodents and humans, potentially leading to low-grade inflammation and symptoms in functional gastrointestinal disorders through disturbances in brain-gut axis. However, the effect of acute stress on the background of Crhonic life stress, potentially better approaching the human situation, is unknown. Moreover, only limited information is available on the effects in small intestine versus colon in animal model. Methods: Wistar rats were allocated to 4 stress protocols: 1/ sham; 2/ acute stress (isolation and limited movement); 3/ Crhonic crowding stress and 4/ acute + Crhonic stress (n = 8 per group). Jejunum and colon were harvested to study permeability in Ussing chambers, gene expression of tight junction molecules and mast cell density. Plasma corticosterone levels were measured. Key Results: Plasma corticosterone was elevated in all three stress conditions, with the highest levels in the combined stress condition. Permeability of the jejunum was increased in all stress conditions and correlated with corticosterone levels. Increased expression of claudin 1, 5 and 8, occludin and ZO-1 was detected in the acute stress condition in the jejunum. In contrast, colonic permeability was increased in the acute on Crhonic stress protocol only and the expression of tight junction molecules was unaltered. Increased mast cell density was observed in the Crhonic and acute on Crhonic stress condition in the colon only. Conclusion and Inferences: Acute, Crhonic and combined stress differentially affect intestinal permeability, expression of tight junction molecules and mast cells in the jejunum and the colon. These findings provide further insight in the mechanisms of stress-related intestinal hyperpermeability and barrier.

O câncer gástrico é a segunda causa mais comum de mortalidade relacionada ao câncer em todo mundo, principalmente devido a infecção crônica pela bactéria Helicobacter pylori. Investigações epidemiológicas, clínicas, patológicas e moleculares buscando um melhor entendimento destes tumores permitem estabelecer um melhor prognóstico para a doença bem como o desenvolvimento de melhores possibilidades terapêuticas. Em especial o microambiente tumoral tem sido estudado para melhor entender as vias de interação das neoplasias com o sistema imune. Dentro deste contexto, o objetivo deste trabalho foi realizar um levantamento retrospectivo do perfil epidemiológico e anatomopatológico de pacientes com câncer gástrico em um hospital de Goiânia e avaliar aspectos patológicos, clínicos bem como a densidade de mastócitos em alguns casos selecionados. Para tanto, foram revisados 220 prontuários de pacientes com câncer gástrico avançado no período de 2005 a 2009 do hospital Araújo Jorge de acordo com critérios de inclusão estabelecidos. Coletou-se dados como sexo, idade, tipo histológico, grau de diferenciação, local de incidência do câncer de acordo com a topografia do estômago e cirurgias paliativas realizadas, para determinação do perfil-clínico patológico dos pacientes. Selecionou-se os blocos com a biópsia de alguns casos (29 casos) para corte e coloração das lâminas por imunohistoquímica e hematoxilinaeosina para avaliação da densidade de mastócitos presente nas amostras. Os resultados mostraram que a maioria dos pacientes (62,96%) eram do sexo masculino, sendo que a maioria dos casos de câncer gástrico foi encontrado em idosos com mais de 60 anos (62%). Os tumores localizaram-se preferencialmente no antro do estômago (32%) ou na região antro/corpo (28%). No que tange ao grau de diferenciação, a maioria (46%) dos tumores são de grau 3 (pouco diferenciados) e, com relação ao subtipo histológico, o tipo intestinal foi o mais prevalente totalizando 49,38% dos casos. Observou-se também que 52,38% dos pacientes fizeram a gastrectomia como cirurgia paliativa. Nos estudos de marcação dos mastócitos, os carcinomas apresentaram uma densidade significativamente menor de células mastocitárias quando comparado com o controle – margem livre de doença (p=0,01). Entretanto, não observou-se diferença na densidade de mastócitos para as diferentes idades, gênero tipo histológico. Houve diferença na topografia e grau de diferenciação. Estes estudos demonstraram a necessidade e a importância de se investigar o papel dos mastócitos nas regiões tumorais. Gastric cancer is the second most common cause of cancer-related mortality worldwide, mainly due to chronic infection by the bacteria Helicobacter pylori. Epidemiological, clinical, pathological and molecular investigations seeking a better understanding of these tumors may help establish a better prognosis for the disease and the development of better therapeutic possibilities. In particular the tumor microenvironment has been studied to better understand the ways of interacting with the immune system and neoplasms. Within this context, the aim of this study was a retrospective survey of the epidemiology and pathology of patients with gastric cancer in a hospital in Goiânia and evaluate pathological, clinical aspects as well as the density of mast cells in some selected cases. To do so, we reviewed medical records of 220 patients with advanced gastric cancer in the period 2005-2009 of Araújo Jorge Hospital according to established inclusion criteria. Data were collected as gender, age, histological type, grade of differentiation, site of cancer incidence according to the topography of the stomach and palliative surgeries performed to determine the clinical-pathological profile of patients. Blocks were selected with the biopsy some cases (29 cases) for cutting and staining of slides for immunohistochemistry and hematoxylin-eosin to evaluate the density of mast cells present in the samples. The results showed that most patients (62.96%) were males, with the majority of cases of gastric cancer has been found in elderly over 60 years (62%). Tumors were located preferably in the antrum of the stomach (32%) or the antrum / body region (28%). Regarding the degree of differentiation, the majority (46%) of the tumors are grade 3 (poorly differentiated) and, with respect to the histological subtype, the intestinal type was more prevalent totaling 49.38% of cases. It was also observed that 52.38% of patients underwent gastrectomy as palliative surgery. In studies of marking the mast cell carcinomas showed a significantly lower density of mast cells when compared to the control - the free margin of the disease (p = 0.01). However, no difference was observed in the density of mast cells for different ages, gender, histological type. Differences in topography and degree of differentiation. These studies demonstrated the necessity and the importance of investigating the role of mast cells in tumor regions.

Introduction: Basal Cell Carcinoma (BCC) is defined as a slow-growing locally invasive tumor. As it spreads, it elicits a chronic inflammatory process with the recruitment of several cell types. Objective: To characterize the inflammatory infiltrate describing the different subtypes of BCC through the identification and quantification of its cells. Method: This was a retrospective study of 71 paraffin blocks from patients diagnosed with non-recurrent BCC. The immunohistochemical analyses were performed using the Streptavidin-biotin-peroxidase technique (CD3, CD20, CD68, CD8, CD4, and Ki-67 cell MAST), and the toluidine blue technique for mast cells. Results: The most frequent subtypes found were infiltrating (26%) and superficial (23%) BCC. Regarding the composition of the inflammatory infiltrate, the TCD 4 + lymphocytes corresponded to the largest population (216.2 ± 22.23), followed by mast cells (111.0 ± 7.88), TCD8 + lymphocytes (57.38 ± 5.94), B lymphocytes (55.9±6.83) and macrophages (21.18 ± 2.58). The total cell proliferative activity was generally low (47.61 ± 7.48), except for more aggressive forms of the disease, in which infiltrates rich in mast cells could be found. The adenoid subtype showed a denser infiltrate, while the Cystic subtype presented a scanty infiltrate. There was an inverse relationship between the number of mast cells and the number of T lymphocytes, without correlation with aggressiveness. Conclusion: In the BCC, the peritumoral inflammatory infiltrates suggests an immune response mediated by TCD 4+ and a composition which varies according to the type of tumor. It has been suggested that the characteristics of each tumor type might reveal differences in the tumor tissue microenvironment, which cause alterations in the composition of the infiltrate, thereby favoring or impeding tumor growth. Introducción: El carcinoma de celulas basales (CCB) se define como un tumor localmente invasivo y de lenta progresion. A medida que se propaga, se inicia un proceso inflamatorio cronico con la incorporacion de distintos tipos de celulas. Objetivo: Caracterizar el infiltrado inflamatorio en los diferentes subtipos de CCB, a traves de la identificacion y cuantificacion de sus celulas. Método: Se trato de un estudio retrospectivo de 71 bloques de parafina de pacientes diagnosticados con CCB no recurrentes. El analisis inmune-histoquimicas se llevaron a cabo por la tecnica de Estreptavidina-biotina-peroxidasa (CD3, CD20, CD68, CD8, CD4, Ki-67 y mastocitos), ademas de la tecnica de azul de toluidina para mastocitos. Resultados: Los subtipos mas frecuentes fueron el infiltrado (26%) y el superficial (23%). En la composicion del infiltrado inflamatorio, los linfocitos TCD 4+ correspondian a la poblacion mas numerosa (216,2 ± 22,23), seguida de mastocitos (111,0 ± 7,88), los linfocitos TCD 8+ (57,38 ± 5,94), los linfocitos B (55,9 ± 6,83) y macrofagos (21,18 ± 2,58). Hubo una baja actividad proliferativa celular total (47,61 ± 7,48), sin embargo en formas mas agresivas este dato fue lo opuesto y con infiltrado rico en mastocitos. El subtipo adenoidea presento el mas denso infiltrado, mientras que el quistico presento el mas discreto. Hemos observado una relacion inversa entre el numero de mastocitos y de linfocitos T, sin correlacion con la agresividad. Conclusión: En el CCB, el infiltrado inflamatorio peritumoral sugiere una respuesta inmunologica mediada por celulas TCD 4+ y composicion puede variar segun el tipo de tumor. Se sugiere que las caracteristicas de cada tumor puedan promover las diferencias en el microambiente del tejido, induciendo cambios en la composicion de la infiltracion que podria tanto ayudar, como impedir el crecimiento del tumor. Introdução: O carcinoma basocelular (CBC) e definido como um tumor localmente invasivo e de progressão lenta. A medida que ele se espalha, inicia-se um processo inflamatório crônico com recrutamento de diversos tipos celulares. Objetivo: Caracterizar o infiltrado inflamatório, nos diferentes subtipos de CBC, através da identificação e quantificação de suas células. Método: Foi realizado estudo retrospectivo de 71 blocos de parafina de pacientes diagnosticados com CBC não recorrente. As analises imuno-histoquímicas foram realizadas pela técnica de estreptoavidina-biotinaperoxidase (CD3, CD20, CD68, CD8, CD4, Ki-67 e MAST cell), além da técnica do azul de toluidina para mastócitos. Resultados: Os subtipos mais frequentes foram o infiltrativo (26%) e o superficial (23%). Na composição do infiltrado inflamatório, os linfócitos TCD 4+ corresponderam a população mais numerosa (216,2 ± 22,23), seguida por mastócitos (111,0 ± 7,88), linfócitos TCD 8+ (57,38 ± 5,94), linfócitos B (55,9 ± 6,83) e macrófagos (21,18 ± 2,58). Houve uma baixa atividade proliferativa celular total (47,61 ± 7,48), no entanto em formas mais agressivas esse dado foi inverso e com infiltrado rico em mastócitos. O subtipo adenoide apresentou o mais denso infiltrado, enquanto o cístico apresentou o mais discreto. Observou-se relação inversa entre o número de mastócitos e de linfócitos T, sem correlação com agressividade. Conclusão: No CBC, o infiltrado inflamatório peritumoral sugere uma resposta imunológica mediada por células TCD 4+ e composição variando de acordo com o tipo de tumor. Sugere-se que as características de cada tumor possam promover diferenças no microambiente tecidual, induzindo alterações na composição do infiltrado que poderiam tanto auxiliar quanto impedir o crescimento tumoral. &nbsp

O manejo adequado dos tumores filóides (TFs) mamários continua desafiador, devido à dificuldade do diagnóstico pré-operatório correto. O objetivo deste estudo foi avaliar a utilidade do Ki-67, do CD34, do CD10, do CD117, da p53 e do número de mastócitos no diagnóstico diferencial entre os TFs benignos e fibroadenomas celulares (FCs), bem como na graduação dos TFs. Foram examinados 51 TFs primários e 14 FCs por imunohistoquímica (IH). Na marcação pelo CD117, houve maior expressão epitelial nos FCs e maior número de mastócitos nos TFs benignos. A expressão estromal do Ki-67, da p53, do CD10 e CD34 mostrou-se significante na graduação dosTFs. The proper management of breast phyllodes tumors (PTs) remains challenging, due to the difficulty of the correct preoperative diagnosis. The aim of this study was to evaluate the usefulness of the Ki-67, CD10, CD34, p53, CD117 and the number of mast cells for the differential diagnosis between benign PTs and cellular fibroadenomas (CFs), and also at the grading of PTs. 51 primary PTs and 14 FCs were examined by immunohistochemistry (IH). Through the evaluation of the expression of CD117, greater epithelial expression was found at the FCs and an increased number of mast cells in benign TFs. The stromal expression of the Ki-67, CD10, CD34 and p53 showed relevance to the grading of PTs.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-06-06Bitstream added on 2014-06-13T20:01:17Z : No. of bitstreams: 1 araujo_ac_dr_botib_parcial.pdf: 268121 bytes, checksum: edd3cb8f63dfdeca1bdff45c6a285127 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-06-25T13:00:45Z: araujo_ac_dr_botib_parcial.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-25T13:03:12Z : No. of bitstreams: 1 000716406_20160731.pdf: 207684 bytes, checksum: 3b5f8364b84761be0ff6e1a7cadcc796 (MD5) Bitstreams deleted on 2016-08-01T11:30:02Z: 000716406_20160731.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-08-01T11:30:58Z : No. of bitstreams: 1 000716406.pdf: 1009644 bytes, checksum: 9956487a11a013c64929e4fac5497961 (MD5) As reações alérgicas afetam grande parte da população e tem aumentado nos últimos anos. Nesse sentido, a histamina liberada pelos mastócitos é um mediador importante e a procura por compostos que inibam a liberação do referido mediador se faz necessária tendo em vista que os tratamentos disponíveis apresentam limitações. Estudos prévios demonstraram que o extrato metanólico bruto da casca do caule de Hymenaea stigonocarpa (ME) apresenta atividade inibitória sobre a liberação de histamina. Assim, o presente trabalho realizou o fracionamento biomonitorado do ME a fim de identificar a(s) frações mais ativa(s). As frações foram avaliadas em suspensão de mastócitos peritoneais de ratos Wistar machos desafiados com ionóforo A23187 e composto 48/80 (apenas as frações mais ativas). Posteriormente, a fração mais ativa foi avaliada em mastócitos sensibilizados com ovoalbumina (OVA). A dosagem de histamina foi realizada utilizando-se um sistema fluorimétrico automatizado e a análise fitoquímica por CG/EM. Os resultados mostraram que a fração acetato de etila foi a mais ativa e, na concentração de 100 g/mL inibiu em 78, 98 e 85% a liberação de histamina induzida pelo ionóforo A23187, composto 48/80 e OVA respectivamente. O fracionamento biomonitorado desta fração por cromatografia líquida sob vácuo (CLV) gerou seis sub-frações, das quais as mais ativas demonstraram ser constituídas por terpenos e ácidos graxos de cadeia longa Allergic reactions affect most of the population and has increased in recent years. Accordingly, histamine released by mast cells is an important mediator and search for compounds that inhibit release of that mediator is necessary in order that the treatments available have limitations. Previous studies demonstrated that the crude methanol extract of the stem bark of Hymenaea stigonocarpa (ME) has an inhibitory activity on the histamine release. Thus, the present study performed the bioguided fractionation of the ME in order to identify (s) most active fractions (s). The fractions were evaluated on the histamine release from rat peritoneum mast cells challenged with ionophore A23187 and compound 48/80 (only the most active fractions). Subsequently, the most active fraction was evaluated in mast cells sensitized with ovalbumin (OVA). The dosage of histamine was performed using an automated fluorimetric system and phytochemical analysis by GC/MS. The results showed that the ethyl acetate fraction was the most active and at concentration of 100 g/mL inhibited by 78, 98 and 85% histamine release induced by ionophore A23187, compound 48/80 and OVA, respectively. The bioguided-fractionatation of this fraction by vacuum liquid chromatography (VLC) generated six sub-fractions, of which the most actives showed the presence of terpenes and long chain fatty acids

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2017-02-09T14:23:37Z No. of bitstreams: 1 Jomel Francisco dos Santos.pdf: 1033055 bytes, checksum: 0882131c9f37caac6cc396d21eb8c175 (MD5) Made available in DSpace on 2017-02-09T14:23:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jomel Francisco dos Santos.pdf: 1033055 bytes, checksum: 0882131c9f37caac6cc396d21eb8c175 (MD5) Previous issue date: 2013-06-03 Joint contractures are a severe complication of joint injuries that can permanently limit the extremity function. Current treatments for contractures in humans have little effect and there is an obvious need for clarification of the pathophysiology of this chronic and disabling dysfunction. Sheep joint is a promising model for the investigation of normal and pathologic states by the similarity with the biomechanics of certain human joints. The aim of this study was to investigate by the techniques of immunohistochemistry and cytochemistry the presence of key components for the development of joint contractures in sheep and to evaluate the potential of this species as an experimental model to study this disease. Therefore, we used 15 knee joint capsules of healthy Santa Inês ewes to identify myofibroblasts and mast cells. For investigation of myofibroblasts was performed immunohistochemical technique. Following histologic routine preparation, the antigen retrieval was performed by heating in citrate, followed by peroxidases blockage, blocking nonspecific protein and then primary antibody was incubated. After the secondary antibody was added to the cuts, and DAB chromogen was added. Slides were counterstained with Harris Hematoxylin and mounted. In cytochemical technique was applied the stain Toluidine Blue to disclosure mast cells. Analysis of the cuts was made under a light microscope. Positive controls of myofibroblasts (ovine cervix) and mast cells (umbilical cord) were stained satisfactorily by the standard techniques. In joint capsules, α-SMA protein was observed in the wall of arteries and rare myofibroblasts were observed in each section, as well as few mast cells were scored. Other studies about ovine joint capsule injuries must be conducted to confirm the presence of myofibroblasts and the development of joint contracture. As contraturas articulares são complicações severas de doenças articulares que podem limitar permanentemente a função de extremidades. Os tratamentos atuais para contratura em seres humanos têm pouca eficácia e há uma evidente necessidade de esclarecimento sobre a patofisiologia dessa disfunção crônica e incapacitante. A articulação do ovino é um modelo promissor para a investigação dos estados normais e patológicos, pela semelhança com a biomecânica de determinadas articulações humanas. O objetivo deste trabalho foi investigar por meio das técnicas de imuno-histoquímica e citoquímica a presença de componentes-chave para o desenvolvimento da contratura articular na espécie ovina e avaliar a potencialidade desta espécie como modelo experimental para estudo desta patologia. Para tanto, foram utilizadas 15 cápsulas articulares de joelhos de ovelhas Santa Inês sadias para localização de miofibroblastos e mastócitos. Para investigação de miofibroblastos foi realizada a técnica de imuno-histoquímica. Após a preparação para rotina histológica, a recuperação antigênica foi realizada por aquecimento em citrato, seguida pelo bloqueio das peroxidades, bloqueio de proteínas inespecíficas e então, o anticorpo primário foi incubado. Após, o anticorpo secundário foi acrescentado aos cortes, e o cromógeno DAB foi adicionado. As lâminas foram contracoradas com Hematoxilina de Harris e montadas. Na técnica citoquímica, foi aplicada a coloração de Azul de Toluidina para evidenciação dos mastócitos. As análises dos cortes foram feitas em microscópio de luz. Os controles positivos da pesquisa de α-SMA (cérvix ovina) e de mastócitos (cordão umbilical) foram marcados ou corados satisfatoriamente pelas respectivas técnicas. Nas cápsulas articulares, a proteína foi observada na parede de artérias e raros miofibroblastos foram observados em cada corte, assim como poucos mastócitos foram corados. Outros estudos sobre lesões de cápsula articular de ovinos devem ser conduzidos para confirmar a presença de miofibroblastos e o desenvolvimento da contratura articular.

Mast cells are connective tissue cells responsible for initiating the inflammatory reaction and chronicity of the process, and play an important role in the dynamics of the repair scar. The use of natural or synthetic biological membranes in the repair of extensive dermal wounds, in turn, has been widely discussed in the literature, particularly those based on collagen, due to biocompatibility and interactivity of these materials. Propolis is a natural product that presents anti-inflammatory properties, so that it could be useful to the repair scar. The red variety of this product, however, is still less studied, although there are some reports of a probable healing action. Thus, the objective of this study was to analyze the effect of the combination of collagen membranes to red propolis on the mast cells population during repair scar by second intention in rats. For this purpose, membranes were prepared from collagen extracted from bovine tendon (10-15mm thick) containing hydroalcoholic extract of red propolis to 0.1%. Subsequently, 1cm2 standard-sized wounds were performed in th back of 30 Wistar rats, which were divided into six groups (n=5): G1- untreated animals sacrificed at 7 days; G2 – animals treated with collagen membrane sacrificed at 7 days; G3 – animals treated with collagen membrane containing red propolis sacrificed at 7 days; G4 - untreated animals sacrificed at 14 days; G5 – animals treated with collagen membrane sacrificed at 14 days; and G6 – animals treated with collagen membrane containing red propolis sacrificed at 14 days. The removed specimens were fixed, histologically processed and embedded in paraffin and histological sections were stained with toluidine blue. On the seventh day, the average population of mast cells in total and marginal G1 was significantly lower than in G2 and G3 (P

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:47Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-02-17Bitstream added on 2014-06-13T19:30:24Z : No. of bitstreams: 1 ferioli_rb_me_botfmvz.pdf: 479951 bytes, checksum: 6950eaf7a2aab7b7e904602236642185 (MD5) Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) O mastocitoma cutâneo (MTC) canino é uma neoplasia maligna constituída por mastócitos, que corresponde a aproximadamente 11% das neoplasias cutâneas do cão. A classificação histopatológica em três graus de malignidade, proposta por Patnaik et al. (1984) para os MTCs é o principal fator prognóstico. Recentemente, uma nova classificação com dois graus de malignidade foi proposta (KIUPEL et al., 2011) e parece trazer menor discordância na graduação. Neste estudo foram avaliadas as expressões proteicas de SCF, IGF-1, m-TOR e c-KIT através da técnica de imunoistoquímica (IHQ) em MTCs caninos em busca de novos fatores prognósticos. Analisaram-se as relações entre estas quatro proteínas e, entre IGF-1 e SCF com fatores prognósticos como o grau histológico, índice mitótico e proliferação celular, além de dados epidemiológicos como idade, gênero, porte físico e localização da lesão. Foram utilizadas 133 amostras de MTCs de 133 cães dispostas em lâminas de microarranjo de tecidos (TMA). A associação estatística foi observada entre a expressão de SCF e grau histológico de acordo com Kiupel et al. (2011), índice mitótico, proliferação celular pelo KI-67, localização da Iesão, idade, c-KIT e IGF-1. A expressão do fator de crescimento IGF-1 teve relação com o índice mitótico, o porte físico dos animais e a expressão de c-KIT e m-TOR. A expressão de SCF está relacionada ao padrão aberrante de expressão do seu receptor c-KIT. Com base nas relações observadas podemos concluir que as proteínas IGF-1, m-TOR, SCF e c-KIT interagem no desenvolvimento dos MTCs caninos e que cães de porte grande e gigante apresentam maior expressão de IGF-1, corroborando com maior incidência de MTCs nestas raças The canine mast cell tumor (MTC) is a malignant neoplasm composed of mast cells, which corresponds to approximately 11% of cutaneous neoplasms of the dog. The histopathological classification in three grades of malignancy, proposed by Patnaik et al. (1984), for MTCs is the main prognostic factor. Recently, a new classification with two malignancy degrees was suggested (KIUPEL et al., 2011) and seems to bring less disagreement in diagnosis. We carried out the study evaluating the protein expression of SCF, IGF-1, m-TOR and c-KIT by immunohistochemical technique (IHC) in canine MTCs searching new prognostic factors. We analyzed the relationships between these four proteins, and between IGF-1 and SCF with prognostic factors such as histological grade, mitotic index and cell proliferation, as well as epidemiological data such as age, gender, physical size and location of the lesion. Were used 133 samples of canine MTCs. The statistical association was observed between the expression of SCF and histological grade according to Kiupel et al. (2011), mitotic index, cell proliferation by Ki-67, Iesion location, age, c-KIT and IGF-1. The growth factor IGF-1 expression was related to mitotic index, the animals physical size and the m-TOR expression. The SCF expression is related to the aberrant pattern of expression of its c-KIT receptor. The association between the IGF-1 expression and the animal size was observed, and seems to interact with the m-TOR co-expression. Based on the observed relationships we can conclude that IGF-1, m-TOR, SCF and c-KIT proteins interacts on the development of canine MTCs, and large and giant-sized animals show higher expression of IGF-1, confirming increased incidence of MTCs on these races

The objective of this study was to evaluate the density of mast cells in the lesions of actinic cheilitis and its correlation with the processes of inflammation and epithelial dysplasia. We selected 33 cases of actinic cheilitis recorded in the Department of Head and Neck Surgery, Hospital Dr. Laureano Napoleon, PB. The paraffin blocks were cut and stained with hematoxylin and eosin and toluidine blue. The count of mast cells was performed in 8 fields per case and final reading with the average value expressed. Analysis was descriptive and inferential statistics, and tests were applied to the Mann-Whitney U, Kuskall-Wallis test, chi-square and Spearman coefficient, considering p