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ResumoObjetivoAvaliar, in vitro, o comportamento biológico de células osteoblásticas na presença de diferentes superfícies implantares.MétodosForam utilizados 6 grupos de implantes. Os 2 primeiros formados por implantes maquinados, o terceiro, quarto e quinto por implantes jateados e submetidos a ataque ácido, segundo diferentes protocolos, e o sexto por implantes revestidos a spray de plasma de titânio. Os implantes foram semeados com células de medula óssea humana e cultivados por um período de 33 dias, tendo sido avaliados os seguintes parâmetros: adesão e padrão de crescimento celular por microscopia eletrónica de varrimento, morfologia celular através de microscopia confocal de varrimento laser, atividade da fosfátase alcalina, expressão génica de marcadores osteoblásticos e consumo de cálcio ionizado do meio de cultura. Os dados foram analisados com o teste estatístico MANOVA (alfa=0,05).ResultadosNão se verificaram diferenças entre os 6 grupos no que se refere à adesão e proliferação celular e à expressão génica de marcadores osteoblásticos. O padrão de crescimento apresentou diferenças com maior grau de complexidade nos implantes dos grupos 3 e 5. A atividade da fosfátase alcalina apresentou, aos 21 dias, diferenças estatisticamente significativas entre os grupos 3, 5 e 6 e o grupo controlo 1. Em relação aos níveis de cálcio ionizado no meio cultura os maiores consumos verificaram‐se nos grupos 3, 5 e 6.ConclusõesA superfície dos implantes parece influenciar o comportamento biológico in vitro para o conjunto dos parâmetros analisados, mesmo quando considerados implantes com a mesma designação de superfície, embora preparada segundo protocolos distintosAbstractObjectivesEvaluate the in vitro biological behavior of odontoblastic cells in the presence of different implant surfaces.Methods264 pure titanium implants were divided into six groups. The two first ones were formed by machined implants, the third, fourth and fifth by blast‐etched implants, according to different protocols, and the sixth one by plasma spraying coated titanium implants. The six group implants were cultured with human bone marrow cells for a 33‐day period to evaluate cell adhesion and proliferation by scanning electron microscopy, cytoskeleton organization by confocal laser scanning microscopy, alkaline phosphatase activity, osteoblast markers gene expression and ionized calcium consumption. Groups of data were evaluated using MANOVA (alfa=0.05).ResultsNo differences were observed in cell adhesion and proliferation and in gene expression of osteoblastic markers. The pattern of growth showed differences with more complexity observed in groups 3 and 5. Alkaline phosphatase activity at 21 days in groups 3, 5 and 6 showed statistically significant differences compared with control group 1. Consumption of ionized calcium from the culture media was higher in groups 3, 5 and 6.ConclusionImplant surface seems to influence in vitro biological behavior of osteoblasts even considering implants designate by the same surface treatment although prepared according to different protocols.

Dissertação de Mestrado em Biotecnologia para as Ciências da Saúde

Submitted by Nadir Basilio (nadirsb@uninove.br) on 2018-06-14T20:50:43Z No. of bitstreams: 1 Stella Maris Lins Terena.pdf: 2089344 bytes, checksum: 21a72af34c64206cc3ab2d9b66964a22 (MD5) Made available in DSpace on 2018-06-14T20:50:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Stella Maris Lins Terena.pdf: 2089344 bytes, checksum: 21a72af34c64206cc3ab2d9b66964a22 (MD5) Previous issue date: 2016-06-28 Skeletal muscle is a tissue of great adaptive capacity and is able to change its characteristics to meet various functional demands. This adaptation can be caused by mechanical overloading which results in an increase in the size of the area of muscle fiber and increase muscle mass. This process is known as muscle hypertrophy and during numerous modifications hypertrophy occur in both the muscle tissue and tendons. Studies with low-level laser (LLL) in skeletal muscle have demonstrated that its effects are positive with respect to the reduction process of inflammation, myonecrosis and reduced influence on the collagen fibers during the remodeling process.The present study aimed to analyze the effects of LLL (780nm) during the compensatory hypertrophy process on the muscular aspects and tendon of the plantaris muscle of mice (in vivo) and also evaluate its effects on human endothelial cells (HUVECs) in vitro. They were used for the in vivo experiment 22 Wistar rats were divided into control group, non-irradiated group and irradiated group hypertrophy hypertrophy. The parameters used for the irradiation were ?? = 780nm, beam area 0.04 cm2, 40mW output power, energy density of 10 J / cm2. periods of 7 and 14 days were analyzed. To cause hypertrophy model was used for ablation of synergists being taken for this study, the gastrocnemius medial and lateral muscles and the soleus muscle, leaving the plantaris muscle suffered overload. the cross-sectional area were analyzed, collagen area, the number of myonuclei and mature blood vessels in muscle tissue and the organization and arrangement of collagen fibers in the tendon. For the experiment in vitro endothelial cells were used (HUVECs) were divided into control group and the other groups irradiated also with ?? = 780nm, 0.04 cm2 beam area, 40mW output power and energy density of 1 J / cm2, 5J / cm2, 10 J / cm2 to 20J / cm2. The different application time was calculated for all groups received the same dose of energy. They assessed cell viability, total protein and vessel formation in Matrigel. The in vivo results showed that there was increased cross-sectional area of the irradiated group after 14 days (26.3%) when compared to non-irradiated group. There was also increased number of myonuclei in the irradiated group after 14 days. The total area of muscle collagen increased (4.2%) in the irradiated group in 7 days and decreased (6.4%) in the irradiated group after 14 days when compared to non-irradiated group in both periods. Analysis by birefringence in the tendons showed better organization of the fibers 7 and 14 days when compared to non-irradiated group. In vitro results have shown decrease in cell viability in all irradiated all groups compared to the control and counting mature vessels was increased number of vessels in the irradiated group even after 14 days. In conclusion laser irradiation increased muscle mass, the number of myonuclei and the number of mature vessels and decreased collagen total area of muscle tissue after 14 days; improved tendon collagen organization for 7 and 14 days and interfere with the viability and total protein concentration in a dose-dependent endothelial cells HUVECs. O m??sculo esquel??tico ?? um tecido de grande capacidade adaptativa e que ?? capaz de alterar suas caracter??sticas para atender ??s diversas demandas funcionais. Essa adapta????o pode ser causada por uma sobrecarga mec??nica que resulta num aumento do tamanho da ??rea da fibra muscular e aumento de massa muscular. Esse processo ?? conhecido como hipertrofia muscular e durante a hipertrofia in??meras modifica????es ocorrem tanto no tecido muscular quanto nos tend??es. Os trabalhos recentes com laser de baixa pot??ncia (LBP) no m??sculo esquel??tico tem demonstrado que seus efeitos s??o positivos no que diz respeito ao processo de redu????o da inflama????o, redu????o da mionecrose e influ??ncia sobre as fibras de col??geno durante o processo de remodelamento. Nesse contexto o presente estudo teve por objetivo analisar os efeitos do LBP (780nm) durante o processo de hipertrofia compensat??ria sobre os aspectos m??sculares e tend??neos do m??sculo plantar de ratos (in vivo) e tamb??m avaliar seus efeitos em c??lulas endoteliais humanas (Huvecs) in vitro. Foram utilizados para o experimento in vivo 22 ratos Wistar, divididos em 3 grupos: controle, n??o irradiado com hipertrofia e irradiado com hipertrofia. Os par??metros utilizados para a irradia????o foram ??= 780nm, ??rea do feixe 0,04 cm2, pot??ncia de sa??da 40mW, densidade de energia de 10J/cm2. Foram analisados os per??odos de 7 e 14 dias. Para causar a hipertrofia foi utilizado o modelo de abla????o dos sinergistas sendo retirados para este estudo os m??sculos gastrocn??mio lateral e medial e o m??sculo s??leo, restando o m??sculo plantar que sofreu a sobrecarga. Foram analisados a ??rea de sec????o transversa, a ??rea do col??geno, o n??mero de mion??cleos e vasos sangu??neos maduros no tecido muscular e organiza????o e disposi????o das fibras de col??geno no tend??o. Para o experimento in vitro foram utilizadas c??lulas endoteliais (Huvecs) divididas em grupos controle e os demais grupos irradiados tamb??m com ??= 780nm, ??rea do feixe 0,04 cm2, pot??ncia de sa??da 40mW e densidades de energia de 1J/cm2, 5J/cm2, 10J/cm2 e 20J/cm2. O tempo de aplica????o foi diferente, calculado para que todos os grupos recebessem a mesma dose de energia. Foram avaliados a viabilidade celular, prote??na total e a forma????o de vasos em matrigel. Os resultados in vivo obtidos demonstraram que houve aumento da ??rea de sec????o transversa do grupo irradiado ap??s 14 dias (26,3%) quando comparado ao grupo n??o irradiado. Houve tamb??m aumento do n??mero de mion??cleos no grupo irradiado ap??s 14 dias. A ??rea total do col??geno muscular aumentou (4,2%) no grupo irradiado em 7 dias e diminui (6,4%) no grupo irradiado ap??s 14 dias quando comparado ao grupo n??o irradiado nos dois per??odos. A an??lise por birrefring??ncia nos tend??es demonstrou maior organiza????o das fibras em 7 e em 14 dias quando comparadas ao grupo n??o irradiado. Os resultados in vitro demonstraram que as diferentes flu??ncias do laser interferiram de maneira diferente na viabilidade de c??lulas Huvecs em todos os per??odos avaliados. Com rela????o a contagem de vasos maduros houve aumento no grupo irradiado ap??s 14 dias. Em conclus??o a irradia????o laser aumentou a massa muscular, o n??mero de mion??cleos e o n??mero de vasos maduros e diminuiu a ??rea total de col??geno no tecido muscular ap??s 14 dias; melhorou a organiza????o do col??geno tend??neo em 7 e em 14 dias e interferiu na viabilidade e concentra????o de prote??na total de maneira dose dependente das c??lulas endoteliais Huvecs.

Submitted by Nadir Basilio (nadirsb@uninove.br) on 2022-04-11T19:18:50Z No. of bitstreams: 1 Tatiana Dias Schalch.pdf: 3125907 bytes, checksum: f11e58fb2df45f72a40538d0a299f3be (MD5) Made available in DSpace on 2022-04-11T19:18:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tatiana Dias Schalch.pdf: 3125907 bytes, checksum: f11e58fb2df45f72a40538d0a299f3be (MD5) Previous issue date: 2016-03-04 Squamous cell carcinoma accounts for 95% of cases oral cancer and treatment normally involves surgery, radiotherapy and/or chemotherapy. Oral mucositis is the most common complication in patients who receive chemotherapy and radiotherapy. Depending on the severity, this condition can compromise the continuity of cancer treatment. Low-level laser therapy (LLLT) has been used for the treatment and prevention of oral mucositis, but divergent findings are reported regarding the effects of this form of treatment on unintentionally irradiated tumor cells that may remain after cancer treatment. The aim of the present study was to analyze the effect of LLLT (with dosimetric parameters recommended for the treatment of oral mucositis) on the viability, invasiveness and osteoclastogenic potential of a line of oral squamous cell carcinoma (SCC9). The cells were cultured in DMEM/F12 medium supplemented with bovine fetal serum (10%) and hydrocortisone (400ng/mL). The cultures were irradiated with InGaAlP (660nm, 40mW, 4J/cm²) and GaAlAs (780nm, 40 and 70mW, 4J/cm²) lasers. Viability was evaluated after 1 and 3 days using MTT assays, crystal violet, neutral red and caspase 3 activity. Invasiveness was evaluated using the wound assay and osteoclastogenic potential was evaluated after 2 and 9 days based on the expression of IL-11 and PTHrP as well as after 7, 14 and 21 days based on the induction of TRAP activity in monocytes. Non- irradiated cultures served as the control for all evaluations. Statistical analysis involved ANOVA complemented by Tukey’s test. Low-level laser with irradiance at a fluence of 4 J/cm², both wavelengths (660 and 780nm) and both output powers (40 and 70mW) led to a reduction in viability as well as induced apoptosis in SCC9 cells. Cells irradiated with 780 nm at output powers of 40 and 70 mW demonstrated less invasive capacity in comparison to the control group. All dosimetric parameters investigated led to a reduction in the ability of SCC9 cells to induce TRAP activity and express IL-11. The expression of PTHrP was only diminished when cells were irradiated at a wavelength of 780nm and output power of 70mW. The present findings demonstrate that laser irradiation at 780nm, 70 mW and 4J/cm2 reduced the viability, osteoclastogenic potential and invasiveness of SCC9 cells. In contrast, infrared laser (780 nm) at a lower output power (40 mW and 4J/cm2) and red laser (660 nm, 40mW and 4J/cm2) did not demonstrate the same inhibition capacity. The findings underscore the importance of the choice of dosimetric parameters to the efficacy and safety of phototherapy for the treatment of oral mucositis. O carcinoma epidermóide de boca representa 95% dos cânceres da cavidade oral e seu tratamento normalmente envolve cirurgia, radioterapia e/ou quimioterapia. A complicação mais comum em pacientes que recebem quimioterapia e radioterapia é a mucosite oral que dependendo de sua severidade pode comprometer a continuidade do tratamento do tumor. O laser em baixa intensidade (LBI) tem sido usado para tratar e prevenir a mucosite, porém ainda existe controvérsia em relação aos efeitos desta irradiação sobre as células tumorais que possam ter permanecido na área a ser irradiada após o tratamento do câncer. O objetivo deste trabalho foi analisar o efeito do LBI (em parâmetros dosimétricos recomendados para o tratamento da mucosite oral) sobre a viabilidade, proliferação, invasividade e potencial osteoclastogênico de uma linhagem de células de carcinoma epidermóide de boca (SCC9). As células foram cultivadas em meio DMEM/F12 suplementado com soro fetal bovino (10%) e hidrocortisona (400 ng/mL). As culturas foram irradiadas com os lasers de InGaAlP (660nm em 40mW- 4J/cm²) e GaAlAs (780nm em 40 e 70mW- 4J/cm²) e avaliadas quanto a sua viabilidade (após 1 e 3 dias pelos ensaios MTT, Cristal Violeta, Vermelho Neutro e atividade da caspase 3), invasividade (pelo ensaio de ferida) e potencial osteoclastogênico (após 2 e 9 dias pela expressão de IL- 11 e PTHrP e após 7, 14 e 21 dias pela indução da atividade da TRAP em monócitos). Culturas não irradiadas serviram como controle em todas as avaliações. Os dados foram comparados pela análise de variância complementada pelo teste de Tukey. Os resultados demonstraram que a irradiação com LBI na fluência de 4J/cm², em ambos os comprimentos de onda (660 e 780nm) e potências (40 e 70mW) diminuiu a viabilidade e induziu a apoptose das células da linhagem SCC9. As células irradiadas com LBI de 780nm (em 40 e 70mW) demonstraram menor capacidade de invasão que as do grupo controle não irradiado. Todos os parâmetros dosimétricos avaliados diminuíram a capacidade das SCC9 em induzir a atividade da TRAP e em expressar IL-11. Já a expressão de PTHrP foi menor apenas quando as células foram irradiadas com laser de 780nm na potência de 70mW. Este estudo concluiu que a irradiação com laser de 780nm (70mW, 4J/cm2) diminuiu a viabilidade, o potencial osteoclastogênico e a invasividade de células da linhagem SCC9. O laser de infravermelho de 780nm utilizado com menor potência (40mW, 4J/cm2) e o laser vermelho de 660nm (40mW, 4J/cm2) não demonstraram a mesma capacidade de inibição nestas avaliações. Estes resultados corroboram a importância da escolha da dosimetria na determinação da eficácia e da segurança da fototerapia no tratamento da mucosite oral.

Made available in DSpace on 2017-07-24T19:22:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 STELLA M GLACI REINKE.pdf: 3927224 bytes, checksum: 373236863b3ac97c702e89a859ee8077 (MD5) Previous issue date: 2014-02-17 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior Glass ionomer cement (GIC) is a widely used material in dentistry for providing both adhesion to dental tissues and anticariogenic activity. Previous studies have suggested that the incorporation of antimicrobials to GIC allows an increase in the longevity of restorations as well as an antibacterial activity against biofilm deposited on the restorations. In order to have a better incorporation of an antimicrobial to GIC, this study aims at evaluating a GIC containing chlorhexidine digluconate (Clx Dg)-loaded (meth)acrylic microparticles. In brief, it was carried out a laboratory study (1) to formulate and to evaluate Clx Dg-loaded (meth)acrylic microparticles for being added into a commercial GIC and (2) to investigate the cytotoxic and mechanical properties of this novel material. Microparticles were obtained by the non-aqueous emulsion/solvent evaporation method using Eudragit® S100 and RS100 as polymers and Clx Dg at 10 and 25%. The characterization was performed by morphological, thermal and spectroscopic methods and by evaluating the drug content and drug release. The two best formulations of microparticles were incorporated into a commercial GIC and resulted in two new experimental materials. The pure GIC was used as control. The biocompatibility of these materials was investigated using dental pulp cells and human gingival fibroblasts. In addition, the antimicrobial activity and the mechanical properties (resistance to abrasion, compressive strength, diametral tensile strength and flexural strength) were carried out. Clx Dg-loaded (meth)acrylic microparticles were successfully prepared. Micrometer-sized, heat-stable, and amorphous/non-crystalline formulations with high drug-loading efficiencies, effective antimicrobial activity, and a controlled release of the drug were obtained. The incorporation of Clx Dg-loaded (meth)acrylic microparticles into GIC provided antimicrobial properties to this material and did not increase its cytotoxicity. The mechanical properties demonstrated positive and negative changes after the microparticles incorporation. However these changes did not contraindicate the use of this new material. It was concluded that it was possible to obtain a GIC containing innovative Clx Dg-loaded (meth)acrylic microparticles that showed suitable features and performance. This new material has a promising potential for restorative procedures. However, additional clinical studies are required. O cimento de ionômero de vidro (CIV) é um material amplamente utilizado na Odontologia, por apresentar capacidade de adesão aos tecidos dentários e atividade anticariogênica. Estudos anteriores têm sugerido que a incorporação de antimicrobianos ao CIV permite um aumento na longevidade das restaurações, assim como uma ação antibacteriana frente ao biofilme dental depositado sobre as restaurações. Com o intuito de otimizar a incorporação do antimicrobiano ao CIV o presente estudo propõe-se a desenvolver, caracterizar e avaliar um CIV contendo micropartículas (met)acrílicas de digluconato de clorexidina (Clx Dg). Realizou-se um estudo laboratorial para (1) formular e avaliar micropartículas (met)acrílicas de Clx Dg para serem adicionadas em um CIV comercial e (2) investigar as propriedades citotóxicas e mecânicas desse novo material. As micropartículas foram obtidas pelo método de emulsão em meio não aquoso/evaporação do solvente a partir dos polímeros (Eudragit® S100 e RS100) e do Clx Dg a 10 e 25%. A caracterização dos materiais microparticulados foi feita por métodos morfológicos, térmicos e espectroscópicos, avaliação do teor e liberação do fármaco. As duas melhores formulações de micropartículas foram incorporadas em um CIV já comercializado, obtendo-se dois materiais experimentais além do CIV puro, considerado como controle. Estes materiais foram submetidos à análise de biocompatibilidade com células de polpa dental e fibroblastos gengivais humanos, a atividade antimicrobiana e a avaliação de propriedades mecânicas (resistência à abrasão, à compressão, à tração diametral e flexão). As micropartículas (met)acrílicas de Clx Dg foram preparadas com sucesso, apresentando características de: partículas de tamanho micrométrico, termoestáveis, amorfas/não-cristalinas, com alta eficiência de encapsulação do fármaco, atividade antimicrobiana comprovada, liberação lenta e controlada do fármaco. A incorporação das micropartículas (met)acrílicas de Clx Dg ao CIV acrescentou capacidade antimicrobiana ao material e não causou aumento da citotoxicidade do mesmo. As propriedades mecânicas sofreram alterações positivas e negativas após a incorporação das micropartículas, porém sem contraindicar o uso desse novo material. Conclui-se que foi possível desenvolver, caracterizar e avaliar o CIV contendo micropartículas (met)acrílicas inovadoras de Clx Dg, e que o mesmo apresentou características e desempenho satisfatórios. Esse novo material tem potencial promissor para procedimentos restauradores, necessitando a realização de estudos clínicos.

Made available in DSpace on 2017-07-24T19:22:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marcio Cristiano de Souza Rastelli.pdf: 5926309 bytes, checksum: 1a36673541f01b28c69af14ba60a3af8 (MD5) Previous issue date: 2012-12-14 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior Desensitizing toothpastes that occlude dentinal tubules were shown to be effective in the treatment of dentinal hypersensitivity. The aim of this study was to develop and evaluate a desensitizing toothpaste containing hydroxyapatite nanoparticles. The in vitro study was performed in three steps: synthesis and characterization of hydroxyapatite nanoparticles, formulation and characterization of toothpastes and assessing the potential for occlusion of dentinal tubules. Hydroxyapatite nanoparticles were obtained by wet chemical synthesis at 37 º C, and from that it was developed the WCS nanoparticle hydroxyapatite and hydrothermal synthesis at 180 ° C (HS). The characterization was performed using scanning electron microscopy (SEM), microanalysis by energy dispersive spectroscopy, X-ray diffraction, spectroscopy in the infrared Fourier transform and micro-Raman, thermal analysis, and assessment of cytotoxicity. Four experimental toothpastes were formulated and compared to two commercially available ones. We carried out the characterization and quality control of these toothpastes by evaluating pH, consistency, density, analysis of loss on drying and incineration by SEM and EDS. The evaluation of the potential occlusion of dentinal tubules was performed using samples obtained from bovine teeth that were prepared to present exposure of the root dentin. 84 samples were used and divided according to the type of dentifrice used: Groups with negative control toothpaste without abrasive (DCNS), negative control toothpaste with abrasive (DCNC), experimental WCS (DEW), experimental HS (DEH), commercial toothpaste Colgate Sensitive Pro Relief™ (DCPA) and Sensodyne Fast Relief ™ toothpaste (DSRA). All samples were their own controls since the tests were performed before and after simulated toothbrushing. Tests of surface roughness, dentin permeability, X-ray diffraction, micro-Raman spectroscopy, atomic force microscopy and scanning electron microscopy and microanalysis by energy dispersive spectroscopy were performed. Characterization of hydroxyapatite nanoparticles showed that they were nanosized particles and presented chemical properties consistent with those of hydroxyapatite. These particles were not cytotoxic to human gingival fibroblasts when at low concentrations. The dentifrices showed adequate values of pH, consistency, density and loss on drying. The analysis of the residue showed that the toothpaste had the chemical components used in the formulations. Surface roughness was statistically different between DEW and DSRA group (p < 0.05), but no group showed a high value of surface roughness, which was demonstrated by atomic force microscopy. The dentin permeability was significantly reduced (p ˂ 0.05) for groups DEW, DEH and DSRA. The X-ray diffraction showed peaks for DEH crystallinity of greater intensity corresponding to calcium spectroscopy. The micro-Raman microanalysis and EDS showed that the toothpaste had the chemical components used in its formulation, being found in the same sample surfaces after brushing. The SEM images showed that there were variations on the dentin surface morphology, in which occlusion of dentinal tubules occured, being the DSRA the only group to show total occlusion. The experimental dentifrices showed potential for occlusion of dentinal tubules similar to those of commercially available produc ts. Dentifrícios dessensibilizantes que promovem a oclusão dos túbulos dentinários mostraram-se eficazes no tratamento da hipersensibilidade dentinária. O objetivo deste trabalho foi desenvolver e avaliar dentifrícios dessensibilizantes contendo nanopartículas de hidroxiapatita. O estudo in vitro foi realizado em três etapas: síntese e caracterização das nanopartículas de hidroxiapatita; formulação e caracterização dos dentifrícios e avaliação do potencial da oclusão dos túbulos dentinários. A obtenção das nanopartículas de hidroxiapatita foi feita por meio da síntese química por via úmida a 37º C, com a qual se elaborou a nanopartícula de hidroxiapatita WCS e síntese hidrotérmica a 180º C (HS). A caracterização foi realizada por meio de microscopia eletrônica de varredura, microanálise por espectroscopia por dispersão de energia, difração de raio-X, espectroscopias na região do infravermelho com transformada de Fourier e micro-Raman, análise térmica, avaliação de citotoxicidade. Foram formulados quatro dentifrícios experimentais e comparados com dois comerciais. Realizou-se a caracterização e controle de qualidade destes dentifrícios por meio da avaliação do pH, da consistência, densidade, análise da perda por dessecação e incineração e por MEV e EDS. A avaliação do potencial de oclusão dos túbulos dentinários foi realizada usando-se amostras obtidas de dentes bovinos que foram preparadas para apresentarem exposição da dentina radicular. Foram usadas 84 amostras que foram divididas de acordo com o tipo de dentifrício utilizado: Grupos com dentifrício controle negativo sem abrasivo (DCNS), controle negativo com abrasivo (DCNC), experimental WCS (DEW), experimental HS (DEH), dentifrício comercial Colgate® Sensitive Pró Alívio™ (DCPA) e dentifrício comercial Sensodyne® Rápido Alívio™ (DSRA). Todas as amostras foram seus próprios controles já que foram realizados os testes antes e após escovação simulada. Foram realizados testes de rugosidade superficial, permeabilidade dentinária, difração de raio-X, espectroscopia micro-Raman, microscopia de força atômica e eletrônica de varredura e microanálise espectroscopia por dispersão de energia. A caracterização das nanopartículas de hidroxiapatita mostrou que se tratava de partículas nanométricas e com propriedades químicas compatíveis com hidroxiapatita. Estas partículas não foram citotóxicas a fibroblastos gengivais humanos quando em baixas concentrações. Os dentifrícios apresentaram valores adequados de pH, consistência, densidade e perda por dessecação. A análise dos resíduos demonstrou que os dentifrícios apresentaram os componentes químicos usados nas formulações. A rugosidade superficial foi diferente estatisticamente (p˂0,05) entre o grupo DEW e DSRA, porém nenhum grupo apresentou alto valor de rugosidade superficial, o que se comprovou com a microscopia de força atômica. A permeabilidade dentinária foi reduzida significativamente (p˂0,05) para os grupos DEW, DEH e DSRA. A difração de raio-X apresentou para o DEH os picos de maior intensidade de cristalinidade correspondentes ao cálcio. A espectroscopia micro-Raman e a microanálise por EDS mostraram que os dentifrícios apresentavam os componentes químicos usados em sua formulação, sendo os mesmo encontrados nas superfícies das amostras após a escovação. As imagens de MEV mostraram que houve variações morfológicas sobre a superfície dentinária, nas quais houve oclusão de túbulos dentinários, sendo o DSRA o único a apresentar oclusão total. Os dentifrícios experimentais apresentaram potencial de oclusão de túbulos dentinários semelhantes aos produtos comerciais.

A antibioticoterapia em cirurgias de terceiros molares inferiores inclusos e/ou impactados é um assunto controverso no meio odontológico. O objetivo do presente estudo foi elucidar a real necessidade de prescrição de antibióticos nestes tipos de cirurgias realizadas por três operadores com experiências clínicas distintas. Um especialista, uma doutoranda e um aluno do último ano da graduação realizaram 50 cirurgias cada um, todas com remoção de osso e alto grau de dificuldade. Antibióticos não foram prescritos nos períodos pré e pós-operatório. No período préoperatório, 2o e 7o dias pós-operatórios foram analisados os seguintes parâmetros: dor, edema, trismo, temperatura corpórea, níveis de proteína C-reativa e contagem de neutrófilos salivares. Durante a cirurgia foram analisados: pressão arterial sistólica, diastólica e média, oximetria, freqüência cardíaca, qualidade da anestesia, quantidade de anestésico local, sangramento, dificuldade e tempo de duração da cirurgia. No dia da retirada de pontos, 7o dia pós-cirúrgico, foi avaliada a qualidade de cicatrização e os voluntários relataram a avaliação global do período póscirúrgico. Não houve nenhum caso comprovado de alveolite ou outro tipo de infecção no local operado. O tempo de cirurgia do graduando e da doutoranda mostraram valores médios maiores que os do especialista (p

Dissertação de mestrado em Patologia Experimental apresentada à Fac. de Medicina da Universidade de Coimbra O tecido adiposo, tal como o tecido ósseo, e derivado do mesenquima e contém estroma de suporte que pode ser facilmente isolado. Este estroma e uma fonte alternativa de células precursoras do mesenquima que possuem capacidade de renovação e diferenciação em diferentes tipos celulares, incluindo adipócitos, osteoblastos, condrócitos e mioblastos. Estas células têm um comportamento semelhante ao das células mesenquimatosas presentes na medula óssea e, assim, apresentam muitas aplicações clínicas potenciais, nomeadamente relacionadas com terapêuticas celulares de regeneração do tecido mesodérmico. O trabalho desenvolvido no âmbito deste estudo teve como objectivo estudar o padrão de proliferação e diferenciação osteoblástica de células mesenquimatosas isoladas de tecido adiposo de rato na presença de purmorfamina (2-(1-Naphthoxy)-6-(4-morpholinoanilino)-9-cyclohexylpurina), composto recente que parece estimular a diferenciação osteoblástica de células mesenquimatosas e, também, de células da linhagem osteoblástica. Em paralelo, o comportamento celular foi também estudado na presença de dexametasona, um indutor osteogénico clássico em sistemas in vitro. As células mesenquimatosas foram isoladas do tecido adiposo de ratos Wistar e cultivadas na presença de ácido ascórbico (50 μg/ml), β-glicerofosfato (10 mM) e purmorfamina (1 – 3 μM) ou dexametasona (10 nM). O comportamento celular foi estudado pela avaliação da viabilidade/proliferação e de parametros de diferenciação osteoblastica, como a actividade da fosfatase alcalina e a capacidade de formação de uma matriz extracelular mineralizada. Foram utilizados métodos bioquímicos e histoquímicos e observação das culturas por microscopia de luz e microscopia electrónica de varrimento. A purmorfamina causou um aumento da proliferação celular e uma indução muito significativa da actividade de fosfatase alcalina, mas não se observou deposição mineral. As culturas mostraram a presença de uma camada de células alongadas e organizadas em zonas de maior densidade celular. A presença de dexametasona resultou numa diminuição significativa da taxa de proliferação celular, formação de agrupamentos celulares bem definidos que apresentaram reacção histoquímica intensa para a fosfatase alcalina e, alguns deles, presença de depósitos mineralizados de fosfato de cálcio. A purmorfamina parece actuar como agonista da via de sinalização “Hedgehog”, que tem um papel importante no desenvolvimento de muitos tecidos e órgãos, incluindo o tecido ósseo. Assim, a modulação desta via pode, potencialmente, revestir-se de interesse terapêutico. Também, a purmorfamina pode constituir uma ferramenta farmacológica adicional na elucidação dos mecanismos envolvidos na diferenciação do tecido ósseo. Adipose tissue, such as bone, is derived from the mesenchyma and contains stromal of support that can be easily isolated. This stroma is an alternative source of stem cells which has the capacity for renewal and differentiation into different cells types, including adipocytes, osteoblasts, chondrocytes and myoblasts. These cells have a behaviour similar to that of mesenchymal cells from the bone marrow and, thus, have many potential clinical applications, in particular related to cellular therapies for tissue regeneration. The aim of this work was to study the proliferation and osteoblastic differentiation of mesenquymal cells from rat adipose tissue in the presence of purmorphamine (2-(1-Naphthoxy)-6-(4-morpholinoanilino)-9-cyclohexylpurina), a recent compound that appears to stimulate the osteoblastic differentiation of mesenquymal cells and, also, cells of the osteoblastic lineage. In parallel, the cellular behaviour was also studied in the presence of dexamethasone, a classic in vitro osteogenic inducer. The mesenchymal cells were isolated from the adipose tissue of Wistar rats and cultured in the presence of ascorbic acid (50 μg/ml), β- glycerophosphate (10 mM) and purmorphamine (1 – 3 μM) or dexamethasone (10 nM). The cellular behaviour was assessed for cell viability/proliferation and osteoblastic parameters, such as alkaline phosphatase activity and ability to form a mineralized extracellular matrix, by biochemical and histochemical methods and observation by light and scanning electronic microscopy. Purmorphamine caused an increase of the cell proliferation and a significant induction of alkaline phosphatase activity, but mineral deposition was not observed. The cultures showed the presence of a layer of elongated cells organized in areas of higher density. The presence of dexamethasone resulted in a significant decrease of the cell growth rate, formation of well-defined cellular groupments which presented an intense staining for alkaline phosphatase and, some of then, the presence of calcium phosphate mineralized deposits.