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Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES Petroleum asphalt cement is the main source of asphalt cement today. The handling and application of the binder on the pavement is only possible with the use of high temperatures, which causes the matrix to undergo an aging process through the volatilization of compounds such as polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) and their derivatives, such as nitrogen compounds (NHPAs). This process also results in harmful emissions to human health and the environment. Therefore, the present work investigated the presence of 16 NHPAs (1) in the volatile form of the matrix through the analysis of 21 samples of particulate matter (PM) emitted by the machining process of asphalt mixtures from a refinery in Ceará; and (2) in the fixed form of the matrix through the analysis of 3 binders from different refineries. For this purpose, high performance liquid chromatography coupled to photodiode array detection (HPLC-DAD) was used. Two chromatographic methods were developed and validated in order to enable the separation and identification of the compounds of interest, one based on the reversed-phase mechanism and the other based on the ion-pair mechanism. Both methods showed good linearity with a wide linear range for the compounds studied (ranging from 0.1 to 400 mg. L-1 for acridine and 12 to 600 mg. L-1 for 9-phenylcarbazole, for example) and good limits of detection and quantification, demonstrating the high sensitivity of the proposed methods. Furthermore, the precision and accuracy obtained were considered acceptable for the analysis of matrices of this nature. In order to allow the chromatographic analysis, the PM collected by means of active sampling was extracted in dichloromethane, concentrated and resuspended in acetonitrile. In the case of the binder samples, the asphaltenic fraction was obtained through precipitation in apolar solvent, according to the SARA method, which was further separated into acidic, basic and neutral fractions. These fractions underwent a cleaning process that used solid phase extraction in aminopropyl cartridges as an analytical tool. Analysis of all samples by HPLC-DAD was performed using the reversed-phase method. The results obtained confirmed the presence of N,N-dimethylaniline (ANL), 1-nitronaphthalene (1NN) and 1-nitropyrene (1NP) in the PM samples, which were later confirmed by APPI-MS/MS. ANL cannot be quantified, however 1NN was found in the matrix in concentrations ranging from 0.08 to 28.83 μg and 1NP in contractions ranging from 0.83 to 14.41 μg. In the ligand samples, the 1NN compound was found in the acid fraction of one of the investigated samples at a concentration of 350 mg. kg-1. The results obtained show the dynamics of the compounds between the fixed and volatile fractions, such as 1NN, which was found in the fixed form of the ligand and in the emissions from it, demonstrating the effectiveness of the present work for what is proposed, that is, identify and quantify the nitrogen compounds in the different forms of the matrix. O cimento asfáltico de petróleo é a principal fonte de cimento asfáltico da atualidade. O manuseio e aplicação do ligante no pavimento só é possível com o uso de altas temperaturas, o que faz com que a matriz sofra um processo de envelhecimento através da volatilização de compostos como os hidrocarbonetos policíclicos aromáticos (HPAs) e seus derivados, à exemplo dos compostos nitrogenados (NHPAs). Esse processo resulta, ainda, em emissões danosas à saúde humana e ao meio ambiente. Pelo exposto, o presente trabalho investigou a presença de 16 NHPAs (1) na forma volátil da matriz através da análise de 21 amostras de material particulado (MP) emitido pelo processo de usinagem de misturas asfálticas de uma refinaria do Ceará; e (2) na forma fixa da matriz através da análise de 3 ligantes oriundos de refinarias distintas. Utilizou-se para isso a cromatografia líquida de alta eficiência acoplada a detecção por arranjo de fotodiodos (HPLC-DAD). Foram desenvolvidos e validados dois métodos cromatográficos a fim de possibilitar a separação e identificação dos compostos de interesse, um deles baseado no mecanismo de fase reversa e o outro de par iônico. Ambos os métodos apresentaram boa linearidade com faixa linear ampla para os compostos estudados (variando entre 0,1 a 400 mg. L-1 para a acridina e 12 a 600 mg. L-1 para o 9-fenilcarbazol, por exemplo) e bons limites de detecção e quantificação, demonstrando a elevada sensibilidade dos métodos propostos. Ainda, a precisão e exatidão obtidas foram consideradas aceitáveis para a análise de matrizes dessa natureza. A fim de possibilitar a análise cromatográfica, o MP coletado por meio de amostragem ativa foi extraído em diclorometano, concentrado e ressuspendido em acetonitrila. Já no caso das amostras do ligante, obteve-se a fração asfaltênica por meio da precipitação em solvente apolar, conforme o método SARA, que foi ainda separada em frações ácidas, básicas e neutras. Essas frações passaram por um processo de limpeza que utilizou extração em fase sólida em cartuchos de aminopropil como ferramenta analítica. A análise de todas as amostras por HPLC-DAD foi realizada utilizando o método de fase reversa. Os resultados obtidos constataram a presença de N,N-dimetilanilina (ANL), 1-nitronaftaleno (1NN) e 1-nitropireno (1NP) nas amostras de MP, que foram posteriormente confirmados por APPI-MS/MS. A ANL não pode ser quantificada, no entanto 1NN foi encontrado na matriz em concentrações que variaram de 0,08 á 28,83 μg e o 1NP em contrações que variaram entre 0,83 e 14,41 μg. Já nas amostras do ligante, o composto 1NN foi encontrado na fração ácida de uma das amostras investigadas em uma concentração de 350 mg. kg-1. Os resultados obtidos exibem a dinâmica dos compostos entre as frações fixas e voláteis, a exemplo do 1NN, que foi encontrado na forma fixa do ligante e nas emissões provenientes do mesmo, demonstrando efetividade do presente trabalho para aquilo que se propõe, ou seja, identificar e quantificar os compostos nitrogenados nas diversas formas da matriz.

Submitted by Luan Costa Ciavdar Ruiz (luan.ciavdar@unesp.br) on 2021-08-04T15:25:22Z No. of bitstreams: 1 (2021) - Luan Dissertação.pdf: 2779185 bytes, checksum: d924bbd2557001e02fa38ca89481e7f7 (MD5) Approved for entry into archive by Ana Carolina Gonçalves Bet null (abet@iq.unesp.br) on 2021-08-04T17:20:53Z (GMT) No. of bitstreams: 1 ruiz_lcc_me_araiq_int.pdf: 2779185 bytes, checksum: d924bbd2557001e02fa38ca89481e7f7 (MD5) Made available in DSpace on 2021-08-04T17:20:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ruiz_lcc_me_araiq_int.pdf: 2779185 bytes, checksum: d924bbd2557001e02fa38ca89481e7f7 (MD5) Previous issue date: 2021-07-27 Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) As abordagens ômicas atualmente em destaque, e em desenvolvimento, tem por objetivo final o entendimento global do funcionamento de organismos a partir de uma perspectiva molecular abrangente. O preparo de amostra pode durar dias ou até semanas recorrendo a diversos tipos de técnicas, equipamentos e solventes. Claramente esse procedimento multietapas é fonte significativa de erros, gasto de solventes e tempo e por tempos acreditava-se que a elaboração de extrato era uma etapa crucial para estudos metabolômicos. Durante este processo evita-se alterar os metabólitos de um organismo, mantendo condições brandas da colheita até a análise em cromatografia líquida. Será que artefatos são gerados? Podemos confiar que os metabólitos não se decomponham até o fim das etapas de preparo? A resposta para estes questionamentos deriva de estudos a cerca de uma extração seguida dos processos de separação e detecção: extração em linha (do inglês, on-line extraction). Padronizando uma câmara de amostragem barata e de fácil acoplagem a um sistema de cromatografia, permitiu-nos evitar etapas longas de preparo de amostra. Neste método, substâncias discretas passaram a serem identificadas com elevado nível de precisão e reprodutibilidade. Este método, denominado OLE-UHPLC, permite fazer estudos a partir de 1 mg tecido fresco, onde o gradiente utilizado para a separação cromatográfica torna-se a mistura extratora da amostra. Parece uma solução próspera para análises de organismos pequenos ou até mesmo de fragmento tecidual com uma intensidade cromatográfica elevada, quando comparada aos métodos off-line. Por isso, comparou-se procedimentos de preparação de amostras para fingerprinting metabólico em tecidos vegetais com folhas de cana-de-açúcar como modelo, considerando a abrangência, a eficiência, a reprodutibilidade, a rapidez e a robustez. The omic approaches currently highlighted, and under development, have as their ultimate goal the global understanding of the functioning of organisms from a comprehensive molecular perspective. Sample preparation can take days or even weeks using different types of techniques, equipment and solvents. Clearly, this multi-step procedure is a significant source of errors, waste of solvents and time, and for some time it was believed that extract elaboration was a crucial step for metabolomic studies. During this process, the alteration of an organism's metabolites is avoided, maintaining mild conditions from harvest to analysis in liquid chromatography. Are artifacts generated? Can we trust the metabolites not to decompose until the end of the preparation steps? The answer to these questions derives from studies about one extraction followed by separation and detection processes: online extraction. Standardizing an inexpensive sampling chamber that is easy to attach to a chromatography system allowed us to avoid long sample preparation steps. In this method, discrete substances started to be identified with a high level of precision and reproducibility. This method, called OLE-UHPLC, allows studies to be carried out from 1 mg of fresh tissue, where the gradient used for chromatographic separation becomes the sample extracting mixture. It seems to be a successful solution for analyzing small organisms or even tissue fragments with a high chromatographic intensity, when compared to off-line methods. Therefore, we compared sample preparation procedures for metabolic fingerprinting in plant tissues with sugarcane leaves as a model, considering the range, efficiency, reproducibility, speed and robustness. 88887.147723/2017-00

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) O Cordyceps militaris é um fungo de crescente interesse popular e científico por sua complexa composição bioativa que lhe confere funções de relevância farmacológica. É composto por moléculas como ergosterol, manitol, adenosina, cordicepina e exopolissacarídeos. Essas moléculas bioativas são tradicionalmente produzidas a partir da frutificação do Cordyceps militaris, um processo longo e trabalhoso que sofre impacto da perda de produtividade em um curto espaço de tempo. Compostos bioativos estão também presentes no micélio deste fungo, mas em menor concentração, porém a produção de micélio permite fácil escalonamento e pode ser vantajoso para a produção em larga escala. Este trabalho propõe a utilização do melaço (subproduto da indústria açucareira) como principal fonte de carbono para a produção de micélio de Cordyceps militaris. A otimização do meio de cultivo se deu a partir da análise estatística de arranjo composto central (CCD) e o meio otimizado determinado foi capaz de produzir 25,1 g.L-1 de biomassa. Ensaios com a adição de azeite e sulfato de magnésio foram realizados para testar sua eficácia na produção de compostos bioativos. Para avaliação de compostos fenólicos e atividade antioxidante foram utilizados os métodos de Folin-ciocalteau e DPPH (2,2-difenil-1-picril-hidrazil), respectivamente. Ademais foram realizadas análises iniciais em cromatógrafo líquido de alta eficiência acoplado a espectrometria de massas (LC/MS-MS), com objetivo de identificar possíveis massas nos extratos, comparar e otimizar métodos de extração visando a melhor detecção de cordicepina. O extrato produzido a partir do meio líquido apresentou concentrações mais elevadas de compostos fenólicos e atividade antioxidante em relação ao extrato micelial. A produção de compostos fenólicos em 60 dias em meio otimizado é 50% maior que em 10 dias. Em comparação ao meio de manutenção o meio otimizado tem 14% mais compostos fenólicos (ambos com 60 dias de cultivo). Para o DPPH, o melhor resultado foi do extrato do meio líquido otimizado com EC50 de 9,98 ml/L. Em relação às extrações, o melhor método se mostrou ser 15 partições com acetato de etila, por ser mais seletivo à cordicepina, composto de maior interesse, e diminuir a presença de outros compostos que atrapalham sua determinação e podem acarretar em entupimento da coluna. O uso do melaço como fonte de carbono para C. militaris foi validado neste estudo, assim como sua concentração ideal e a produção ampliada de compostos fenólicos em detrimento ao meio de manutenção. Cordyceps militaris is a fungus of growing popular and scientific interest due to its complex bioactive composition that gives it functions of pharmacological relevance. It is composed of molecules such as ergosterol, mannitol, adenosine, cordycepin and exopolysaccharides. Such bioactive molecules are traditionally produced with Cordyceps militaris frutification, a long and demanding process affected by productivity loss in a short period of time. This fungus mycelium also contains bioactive compounds although in a lower concentration. Even though, the mycelium production allows an easier upscale and therefore might show an advantage. This research proposes the use of sugarcane molasses (a by-product of the sugar industry) as main carbon source for Cordyceps militaris mycelium production. The optimization of the culture medium was based on the statistical analysis of the central composite arrangement (CCD) and the optimized medium determined was capable of producing 25.1 g.L-1 of biomass. Tests with the addition of olive oil and magnesium sulfate were carried out to test its effectiveness in the production of bioactive compounds. Folin-ciocalteau and DPPH (2,2-diphenyl-1-picryl-hydrazil) methods were used to evaluate phenolic compounds and antioxidant activity, respectively. Initial analyzes were performed in highperformance liquid chromatography coupled to mass spectrometry (LC / MS-MS), to identify possible masses in the extracts, compare and optimizing extraction methods aiming at the better detection of cordycepin. The extract produced from the liquid medium showed higher concentrations of phenolic compounds and antioxidant activity compared to the mycelial extract. The production of phenolic compounds in 60 days in an optimized medium is 50% higher than in 10 days. In comparison to the maintenance medium, the optimized medium has 14% more phenolic compounds (both with 60 days of cultivation). For DPPH, the best result was the extract from the liquid medium optimized with EC50 of 9.98 ml / L. Regarding the extractions, the best method was shown to be 15 partitions with ethyl acetate, as it is more selective to cordycepin, a compound of greatest interest, and to reduce the presence of other compounds that hinder its determination and may cause clogging of the spine. The use of molasses as a carbon source for C. militaris was validated in this study, as well as its ideal concentration and the increased production of phenolic compounds to the detriment of the maintenance medium.

A análise de fármacos é fundamental tanto na medicina humana quanto na veterinária. Neste contexto, o controle de qualidade deve acompanhar todo o processo desde aquisição de uma matéria-prima até a transformação em produto acabado, visto que seu objetivo é a garantia de medicamentos seguros e eficazes para o consumidor final seja ele humano ou animal. Considerando o aumento expressivo em prescrições veterinárias contendo fármacos antimicrobianos, o presente trabalho realizou a busca de informações acerca da qualificação das preparações veterinárias atualmente disponíveis no mercado nacional, buscando, através da legislação, os parâmetros de qualidade aplicados aos produtos farmacêuticos de uso veterinário. Foi avaliada a qualidade de preparações farmacêuticas sólidas, utilizando a cefalexina, como representante da classe de antimicrobianos adquiridas no mercado farmacêutico veterinário nacional. As seis marcas diferentes de cefalexina comprimidos e drágeas analisadas neste estudo foram aprovadas em relação a identificação, peso médio, determinação de resistência mecânica em comprimidos, teste de desintegração e teor. Os resultados da determinação do teor tiveram uma variação entre 94,9% e 103%, estando dentro dos limites indicados para preparações de uso humano, conforme preconiza a USP 44 e Farmacopeia Brasileira 6º edição. Ainda assim, e importante ressaltar a necessidade de melhoria na legislação que rege o controle de qualidade de medicamentos de uso veterinário, uma vez que as normativas são pouco específicas, com ausência de parâmetros, especificações e procedimentos de liberação bem definidos, que assegurem quais ensaios necessários e relevantes devem ser executados. Esse estudo é uma perspectiva que pode trazer subsídios para mais investigações de outras classes farmacológicas, considerando o grande número de formulações disponíveis no mercado brasileiro de medicamentos veterinários. Drug analysis is fundamental in both human and veterinary medicine. In this context, quality control must accompany the entire process, from the acquisition of a raw material to the transformation into a finished product, given that its objective is to guarantee safe and effective medicines for the final consumer, whether human or animal. Considering the significant increase in veterinary prescriptions containing antimicrobial drugs, this study sought information about the qualification of pharmaceutical preparations currently available in the national market, reviewing, through legislation, the quality parameters applied to pharmaceutical products for veterinary use. In parallel, the quality of solid pharmaceutical preparations was evaluated, using cephalexin, as a representative of the class of antimicrobials in the national veterinary pharmaceutical market. The six different brands of cephalexin tablets and pills analyzed in this study were approved in terms of characterization, average weight and content. The results of the determination of the content had a variation between 94.9% and 103%, are within the indicated limits for preparations for human use, as recommended by USP 44 and Brazilian Pharmacopoeia 6th edition. Still, it is important to emphasize the need for improvement in the legislation that governs the quality control of veterinary medicines, since the regulations are not very specific, with a lack of well-defined parameters, specifications and release procedures, which ensure which tests necessary and relevant are carried out. This study is a perspective that can provide support for further investigations of other pharmacological classes, considering the large number of formulations available in the Brazilian veterinary medicine market.

RESUMO Com o objetivo de verificar o acúmulo de ácido chiquímico em plantas de laranja pêra (Citrus sinensis) num pomar comercial manejado com glifosato, um herbicida sistêmico de amplo espectro, foram coletadas amostras na Fazenda Jequitibá, tradicional no cultivo de citros, situada no Município de Santo Antônio de Posse, SP. O produtor aplicou de forma convencional Roundup® Original a 1.440 g.ha-1 de equivalente ácido (e.a.) do sal de isopropilamino de glifosato em 19/12/ 2006 na entrelinha de 15 plantas, deixando outras cinco como testemunha. A reaplicação de glifosato a 1.260 g.ha-1 de e.a. foi realizada em 2/4/2007. Em ambos os casos, imediatamente antes da aplicação e aos 3, 7, 10, 15, 20 e 35 dias após, foram coletadas 20 folhas de cada planta tanto da área tratada como da não tratada, analisando-se o teor de ácido chiquímico por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) de forma isocrática após extração por micro-ondas. Os resultados mostraram não ocorrer acúmulo do ácido chiquímico nas plantas de laranja pêra, não havendo diferenças significativas nos teores deste composto entre o material proveniente da área tratada com glifosato e o daquela capinada manualmente. ABSTRACT In order to check the accumulation of shikimic acid in a traditional commercial grove of citrus “Pêra” cultivar (Citrus sinensis) managed for weed control with glyphosate, a systemic herbicide with wide spectrum, samples were collected at Fazenda Jequitibá, in Santo Antonio de Posse County, São Paulo State, Brazil. The producer applied the following treatments of Roundup Original® glyphosate at 1,440 g.ha-1 a.e. of the isopropylamine salt on 19 December 2006 between rows of 15 plants, leaving five others as control. The reapplication of glyphosate at 1,260 g ha-1 was done on 2 April 2007. In both cases, immediately before application and at 3, 7, 10, 15, 20 and 35 days thereafter, 20 leaves from each treated and untreated plants were collected for analysis of the content of shikimic acid by isocratic high performance liquid chromatography (HPLC) assisted with microwave. The results showed no significant differences in levels of shikimic acid between the material from the area treated with glyphosate and that weeded manually.

Submitted by Yara Paula de Oliveira Nishiyama (yara.nishiyama@unesp.br) on 2020-09-25T18:46:39Z No. of bitstreams: 1 YPON - Tesis Yara versão final 25-09-2020.pdf: 4611309 bytes, checksum: b4d835e9d7fc966050b2c4216fbaefc8 (MD5) Approved for entry into archive by Elza Mitiko Sato null (elzasato@ibilce.unesp.br) on 2020-09-25T20:15:26Z (GMT) No. of bitstreams: 1 nishiyama_ypo_dr_sjrp_par.pdf: 2832580 bytes, checksum: b62d2a8eba23809c574ea3d0ba501a9d (MD5) Made available in DSpace on 2020-09-25T20:15:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 nishiyama_ypo_dr_sjrp_par.pdf: 2832580 bytes, checksum: b62d2a8eba23809c574ea3d0ba501a9d (MD5) Previous issue date: 2020-08-26 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Para valorização das uvas nacionais, o presente trabalho avaliou a variação na composição fenólica de diferentes safras das cultivares (cvs) BRS Carmem e BRS Magna produzidas no Noroeste Paulista bem como a aplicação do suco obtido da cultivar BRS Violeta como bioingrediente (não apenas para contribuir para a cor, mas também para auxiliar no aroma e doçura, além do incremento em compostos bioativos) no desenvolvimento de uma bala de goma. O estudo dos compostos de interesse presentes nas uvas, no suco e na bala de goma foram realizados utilizando técnicas de cromatografia líquida de alta eficiência acoplado a espectrometria de massas. Assim como utilizou-se de métodos de análise sensorial (aceitação e RATA (Rate-All-That-Apply)) para avaliar a qualidade da bala elaborada. Com a determinação dos perfis qualitativo e quantitativo das cvs pôde-se observar que entre os flavonóis há predominância dos compostos do tipo miricetina, exceto para a segunda safra da uva BRS Magna, no qual predominou-se os derivados do tipo quercetina (Q). Para ambas as cvs, a segunda safra analisada se diferenciou da primeira pela presença dos compostos derivados do kaempferol e do composto Q-3-acetilglucosídeo para a BRS Magna e, do composto siringetina-3-cumaroilglucosídeo para a BRS Carmem. Além disso, a BRS Carmem apresentou diferença significativa (p ≤ 0,05) nas concentrações totais de flavonóis (mg Q-3-glc/kg de fruta) entre as safras tanto para a fruta inteira (77,11 e 59,71) como para as cascas (76,05 e 51,05). Para a classe das antocianinas, os compostos derivados da delfinidina foram os majoritários tanto nas partes da BRS Magna (ambas as safras) como na primeira safra da BRS Carmem. Já na segunda safra desta última cultivar houve predominância dos compostos derivados da malvidina (mv). Nas safras de BRS Magna houve diferença significativa (p ≤ 0,05) entre as concentrações de antocianinas totais (mg malvidina-3,5-glc/kg fruta), tanto para as frutas inteiras (2580,79 e 1987,00) como para as cascas (1555,32 e 664,72). O flavan-3-ol majoritário em ambas as cvs e safras foi a catequina, sendo que a concentração total de flavan-3-óis (mg catequina/kg fruta) variou apenas entre as safras da BRS Magna, tanto nas sementes (246,92 e 689,50) como nas cascas (2,44 e 9,73). Quanto aos estilbenos, as primeiras safras das cvs apresentaram somente a forma cis e trans do piceido enquanto a segunda safra da BRS Carmem apresentou ainda o cis-resveratrol e a da BRS Magna a forma cis e trans do resveratrol. Os derivados do resveratrol foram predominantes nas cascas da BRS Magna e no caso da BRS Carmem nas sementes. Quanto a uva BRS Violeta, uma bala de goma foi elaborada contendo em sua composição 62% de seu suco, que foi utilizado como bioingrediente, além de gelatina (12%), mel (25%), ágar (0,7%) e aroma natural (0,3%). A bala apresentou concentração de antocianinas totais (mg malvidina-3,5-glc/kg fruta) de 686,78, com uma retenção de aproximadamente 41,01% em relação a concentração de antocianinas determinada no suco (1674,52) e 23,78% da determinada na fruta (2888,51). A bala produzida apresentou predomínio de antocianinas derivadas da delfinidina, assim como ocorreu no suco e na uva in natura e, comparativamente com a uva houve um aumento da concentração de antocianinas diglicosiladas, incluindo as cumariladas, por serem compostos mais estáveis as etapas de processamento. De acordo com a caracterização sensorial, a bala de goma apresentou aceitação global de 6,72 (entre os termos gosto ligeiramente e gosto moderadamente) e pelo método RATA, foi caracterizado principalmente por cor roxa e uniforme, aparência brilhosa e de gelatina, com odor e sabor de suco de uva, com textura gomosa e macia, além de ter sido considerada um produto agradável e interessante. For the valorization of national grapes, the present work evaluated the variation in the phenolic composition of different harvests of the cultivars (cvs) BRS Magna and BRS Carmem produced in the Northwest of São Paulo. The application of the juice obtained from the BRS Violeta cultivar as a bioingredient (not only to contribute to color, but also to aid in sweetness, aroma, organic acids and bioactive compounds) in the development of a gummy candy was also evaluated. For this purpose, high performance liquid chromatography techniques were used to study the compounds of interest present in the grapes, juice and gummy produced from it. Sensory analysis techniques (acceptance and RATA (Rate-All-That-Apply)) were used to assess the quality of the gummy. By the determination of the qualitative and quantitative profiles of the cvs, it can be observed that among the flavonols there is a predominance of miricetin type compounds except for the second harvest from BRS Magna that was the quercitin (Q) type compounds. For both cvs, the second harvest analyzed differed from the first due to the presence of compounds derived from kaempferol and the compound Q-3-acetylglucoside for BRS Magna and the compound syringetin-3-coumaroylglucoside for BRS Carmem. In addition, BRS Carmem showed a significant difference (p ≤ 0.05) in the total concentrations of flavonols (mg Q-3-glc/kg fruit) between harvests for both whole fruits (77.11 and 59.71) and skins (76.05 and 51.05). For the anthocyanins, the derivatives of delphinidin were the majority in both parts of BRS Magna (both harvests) and in the first harvest of BRS Carmem, in the second harvest of this cultivar there was a predominance of derivatives from malvidin (mv). In BRS Magna harvest there was a significant difference (p ≤ 0.05) between the total concentrations (mg mv-3,5-glc/kg fruit), both for whole fruits (2580.79 and 1987.00) and skins (1555.32 and 664.72). The major flavan-3-ol in both cvs and harvests was the catechin (C), and the total concentration (mg C/kg fruit) varied only between BRS Magna harvests, both in seeds (246.92 and 689.50) and skins (2.44 and 9.73). For stilbenes, the first harvests of cvs presented only the cis and trans form of piceid while the second harvest of BRS Carmem also presented cis-resveratrol and that of BRS Magna the cis and trans form of resveratrol. Resveratrol derivatives were predominant in the skins of BRS Magna and for BRS Carmem in seeds. For BRS Violeta grape, a gummy candy was made containing 62% of its juice, that was used as an bioingredient, in addition to gelatin (12%), honey (25%), agar (0.7%) and natural aroma (0.3%). The gummy showed a total anthocyanins concentration (mg mv-3,5-glc/kg fruit) of 686.78, with a retention of approximately 41.013% in relation to the concentration of anthocyanins determined in the juice (1674.52) and 23.78% of the determined in the fruit (2888.51). The produced gummy showed a predominance of anthocyanins derived from dp, as well as in juice and whole fruit. Comparing to the grapes, there was an increase for the gummy in the concentration of diglycosilated anthocyanins, including the coumarilated form, as they are more stable in the processing steps. According to the sensory characterization, the gummy showed an overall acceptance of 6.72 (between like slightly and moderately) and, according to the RATA method, it was considered with grape flavor, uniform color, shiny and gelatinous appearance, with odor and grape juice flavor, with a gummy and soft texture, in addition to being also considered a pleasant and interesting product, and with a positive correlation with the term tasty. Para la valorización de las uvas nacionales, el presente trabajo ha evaluado los cambios en la composición fenólica de distintas cosechas de los cultivares (cvs) BRS Magna y BRS Carmem producidas en la región del Noroeste Paulista así como el uso del zumo del cultivar BRS Violeta como bioingrediente (no solo para aportar color, como también azúcares, aroma, ácidos orgánicos y compuestos bioactivos) para el desarrollo de una gominola. El estudio de los compuestos de interés presentes en la uva, en el zumo y en la gominola se ha llevado a cabo con técnicas de cromatografía liquida de alta eficacia acoplada a espectrometría de masas. También se ha utilizado técnicas de análisis sensorial (aceptación y RATA (Rate-All-That-Apply)) para evaluar la calidad de la gominola. Con la determinación de los perfiles cualitativo y cuantitativo de los compuestos fenólicos de los cvs se observa que para los flavonoles hay la predominancia de los compuestos del tipo miricetina, excepto para la segunda cosecha del BRS Magna, donde predominaron los derivados del tipo quercetina (Q). Para ambos cvs la segunda cosecha evaluada se diferenció de la primera cosecha por la presencia de compuestos derivados del kaempferol y del compuesto Q-3-acetilglucósido para la BRS Magna y del compuesto siringetina-3-cumaroilglucósido para la BRS Carmem. Además, la uva BRS Carmem presentó distintas (p ≤ 0,05) concentraciones totales de flavonoles (mg Q-3-glc/kg fruto) en las cosechas para el fruto entero (77,11 y 59,71) y también para los hollejos (76,05 y 51,05); Para las antocianinas, los compuestos derivados de la delfinidina (dp) fueron los mayoritarios de BRS Magna (ambas cosechas) y también en la primera cosecha de BRS Carmem, pero en la segunda cosecha de este cultivar predominarón los derivados de malvidina (mv). Entre ambas cosechas de BRS Magna, 2014 y 2017, se encontraron diferencias (p ≤ 0,05) entre las concentraciones totales de antocianinas (mg mv-3-,5-glc/kg fruto), para los frutos enteros (2580,79 y 1987,00) y para los hollejos (1555,32 y 664,72). El flavan-3-ol mayoritario en ambos cvs y cosechas fue la catequina (C), siendo que la concentración total de flavan-3-oles (mg C/kg fruto) ha variado apenas entre las cosechas de BRS Magna, tanto en las semillas (246,92 y 689,50) como en los hollejos (2,44 y 9,73). Sobre los estilbenos, las primeras cosechas de los cvs presentaron solamente los isómeros cis y trans del piceido mientras la segunda cosecha de BRS Carmem presentó también el cis-resveratrol y la segunda cosecha de BRS Magna los isómeros cis y trans del resveratrol. Los derivados glucosilados del resveratrol fueron los estilbenos predominantes en los hollejos de BRS Magna y en el caso de la BRS Carmem en las semillas. La gominola elaborada a partir de la uva BRS Violeta contenía un 62% de zumo de uva, que fue utilizado como bioingrediente, además de la gelatina (12%), miel (25%), agar (0,7%) y aroma natural (0,3%). La concentración total de antocianinas (mg mv-3-glc/kg fruto) en la gominola fue de 686,78, con una retención de aproximadamente 41,01% en relación a concentración de antocianinas determinada en el zumo (1674,52) y 23,78% del determinado en el fruto (2888,51). La gominola producida presentó un predominio de antocianinas derivadas de la dp, al igual que la uva y el zumo del que procede. Sin embargo, se detectaron algunas diferencias en el perfil molar de los distintos antocianos entre la gominola y la uva de partida, con una mayor proporción en la gominola de antocianinas diglicosiladas, incluyendo las cumariladas, pues son compuestos más estables en las etapas el procesamiento. De acuerdo con la caracterización sensorial, la gominola presentó una aceptación global de 6,72 (entre “me gusta ligeramente” y “me gusta moderadamente”) y, de acuerdo al método RATA, se caracterizó por los siguientes descriptores: sabor de uva, color uniforme, apariencia brillante y de gelatina, olor y sabor de zumo de uva, textura suave y gomosa, además de haber sido considerada también como un producto agradable e interesante, y con una correlación positiva con el termino gustoso. CAPES: 1589349

Submitted by Carolina Olivati (carolina.olivati@unesp.br) on 2020-09-18T16:06:39Z No. of bitstreams: 1 Tese final_Carolina_Olivati_UNESP.pdf: 2866233 bytes, checksum: 9f378a8165c553eb92021cdad26ebd76 (MD5) Rejected by Elza Mitiko Sato null (elzasato@ibilce.unesp.br), reason: Solicitamos que realize correções na submissão seguindo as orientações abaixo: 01- Gostaríamos de saber se a sua tese foi feita em cotutela com a Universidad de Castilla-La Mancha? Caso seja cotutela há algumas orientações a serem observadas, a natureza da pesquisa e ficha catalográfica também precisam ser alteradas, Se for este caso entre em contato conosco. 02 – No SUMÁRIO e no texto, a seção REFERÊNCIAS não é numerada, e o correto é REFERÊNCIAS e não REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS. 03 - Ilustrações e tabelas: a norma orienta que devem ter a descrição da fonte abaixo delas, mesmo que seja produção do autor, algumas estão sem a fonte. 04 – Nos Resumos, iniciar cada palavra-chave (português , inglês e espanhol) com maiúscula e separa-las com ponto. 05 - Alguns quadros perpassam as folhas onde iniciam. Logo, é importante indicar ao seu leitor que é continuado nas próximas folhas.(continua, continuação e conclusão) 06 – Solicitamos corrigir no sumário e no texto os APÊNDICES são elementos pós-textuais e devem ser inseridos após as Referências e identificados por letra maiúscula sendo necessário também escrever o título. Ex: 6. CONCLUSÃO 141 7. CONCLUSIÓN 142 REFERÊNCIAS 143 APÊNDICE A - Termo de Consentimento Livre e Esclarecido 165 APÊNDICE B – Ficha Descritiva Prévia 166 APÊNDICE C – Ficha de Recrutamento 167 APÊNDICE D – Ficha de Aceitação Global 168 APÊNDICE E – Ficha Descritiva Utilizada para Análise Final 169 Sugerimos que siga as orientações do template para as correções, na página da Biblioteca, link: https://www.ibilce.unesp.br/#!/biblioteca/servicos-oferecidos/normalizacao/estrutura-do-trabalho-academico/ Lembramos que o arquivo depositado no Repositório deve ser igual ao impresso, o rigor com o padrão da Universidade se deve ao fato de que o seu trabalho passará a ser visível mundialmente. Agradecemos a compreensão on 2020-09-18T18:54:45Z (GMT) Submitted by Carolina Olivati (carolina.olivati@unesp.br) on 2020-09-22T21:00:58Z No. of bitstreams: 1 Tese_Carolina_Olivati_UNESP (1).pdf: 2872871 bytes, checksum: 40cecd21e55729f2355dc530b6fb474d (MD5) Approved for entry into archive by Elza Mitiko Sato null (elzasato@ibilce.unesp.br) on 2020-09-23T13:26:23Z (GMT) No. of bitstreams: 1 olivati_c_dr_sjrp_par.pdf: 761983 bytes, checksum: c6f2f068b62c836ccbb7b0b8b6349e01 (MD5) Made available in DSpace on 2020-09-23T13:26:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 olivati_c_dr_sjrp_par.pdf: 761983 bytes, checksum: c6f2f068b62c836ccbb7b0b8b6349e01 (MD5) Previous issue date: 2020-08-25 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) O presente trabalho teve como objetivo a avaliação da influência no perfil qualitativo e quantitativo dos compostos fenólicos, ocasionados pelo processamento de secagem para produção de uvas passas e da influência da cobertura com chocolate de uvas passas por drageamento. Dessa maneira, foi realizado o desenvolvimento de uvas passas a partir da cultivar BRS Clara utilizando azeite de oliva extra virgem (AOEV) como pré-tratamento para acelerar o processo de secagem, e consequentemente, preservar ao máximo os compostos fenólicos presentes na uva in natura. Em sequência foi realizado o drageamento com chocolate da uva passa produzida pelo método de secagem selecionado. A avaliação das alterações promovidas pelos processamentos aplicados nos compostos fenólicos presentes nas uvas in natura e nos produtos obtidos foi realizada por meio da aplicação de cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) acoplada a diferentes tipos de detectores. A análise de aceitação e do perfil sensorial, pela metodologia RATA (Rate-All-That-Apply), dos drageados produzidos foram realizadas. O emprego do pré-tratamento das uvas com o azeite promoveu uma redução média nos tempos de secagem de 39,33% ± 5,5% quando comparado as uvas controle (sem pré-tratamento). Após análise dos resultados de perfil qualitativo e quantitativo das uvas passas elaboradas a partir da cultivar BRS Clara (safras 2014, 2015 e 2016) sem e com AOEV, concluiu-se que o pré-tratamento com AOEV foi, de maneira geral, benéfico para o processo de desidratação da uva ao manter ainda uma elavada concentração de compostos fenólicos. Passas pré-tratadas com AOEV foram então utilizadas como núcleos naturais dos drageados de chocolate. Pode-se verificar que o drageamento com chocolate foi responsável por um aumento nas concentrações de flavan-3-óis (515 – 517 mg equivalente (eq.) de catequina/kg produto, em base seca (DW)) e proantocianidinas (768 – 783 mg eq. de catequina/kg de produto – DW) quando comparado somente as uvas passas. Para a classe dos flavonóis e dos DAHC, notou-se uma redução da concentração total dos compostos nos drageados em comparação as uvas passas. Além disso, houve forte influência do chocolate no perfil qualitativo com o surgimento novos compostos (quercetina-3-pentanosídeo, kampfterol-3- rutinosídeo, ácido p-cúmarico e ácido cafeoil-aspartato). Esses resultados de perfil fenólico em conjunto com as análises sensoriais realizadas, permitiram afirmar que o drageado de uva passa BRS Clara com chocolate além de possuir um interessante perfil e concentração de compostos fenólicos, também é um produto com ótima aceitação sensorial e descrito principalmente pela cor marrom, gosto doce, textura macia, e termos hedônicos gostoso e prazeroso. The present work aimed to evaluate the influence on the qualitative and quantitative profile of the phenolic compounds, caused by the drying processing for the production of dried grapes and the influence of the chocolate coating of these dried grapes by dredging. In this way, dried grapes were developed from the cultivar BRS Clara using extra virgin olive oil (AOEV) as a pre-treatment to accelerate the drying process, and consequently, preserve as much as possible the phenolic compounds present in fresh grapes. In sequence, dredging with chocolate was carried out with the dried grapes produced by the selected drying method. The evaluation of the changes promoted by the processing applied to the phenolic compounds present in fresh grapes and in the products obtained was performed through the application of high performance liquid chromatography (HPLC) coupled to different types of detectors. The acceptance and sensory profile analysis, using the RATA (Rate-All-That-Apply) methodology, of the dragées produced were performed. The use of pre-treatment with olive oil promoted an average reduction in drying times of the grapes of 39.33% ± 5.5% when compared to control grapes (without pre-treatment). After analysing the qualitative and quantitative profile data of dried grapes made from the cultivar BRS Clara (2014, 2015 and 2016 harvests) without and with AOEV, it was concluded that pre-treatment with AOEV was beneficial for the dehydration process, once that manteined an elevated phenolic compounds concentration. Dried grapes pre-treated with AOEV were then used as natural centres for chocolate dragées. It can be seen that the chocolate dredging was responsible for an increase in the concentrations of flavan-3-ols (515 - 517 mg equivalents (eq.) of catechin/kg product, DW) and proanthocyanidins (768 - 783 mg eq. of catechin/kg product, DW) when compared only to dried grapes. For the class of flavonols and DAHC, there was a reduction in the total concentration of compounds in dragées compared to dried grapes. Furthermore, there was a strong influence of chocolate in qualitative profile with the emergence of new compounds (quercetin-3-pentanoside, kampfterol-3-rutinoside, p-coumaric acid and caffeyl-aspartate). These results, together with the sensory analysis, allow us to state that the BRS Clara dried grapes chocolate dragées, not only have an interesting profile and concentration of phenolic compounds, but it is also an attractive product with good sensory acceptance. El presente trabajo tuvo como objetivo evaluar los cambios en el perfil cualitativo y cuantitativo de los compuestos fenólicos de la uva BRS Clara, como consecuencia del proceso de secado para la producción de pasas y la influencia en el perfil fenólico del posterior recubrimiento con chocolate de las pasas para formar grageas. De esta manera, las pasas se desarrollaron a partir del cultivar BRS Clara estudiando el uso directo de aceite de oliva virgen extra (AOVE) como pretratamiento para acelerar el proceso de secado y, en consecuencia, preservar en la medida de lo posible los compuestos fenólicos presentes en las uvas frescas, comparando los resultados con los de pasas producidas sin pretratamiento con AOVE. Posteriormente, se realizó el grageado con chocolate de la pasa producida por pretratamiento con AOVE. Una vez elaboradas las pasas y las grageas se estudiaron las consecuencias de estos procesos en los compuestos fenólicos, determinando mediante HPLC-DAD-ESI-MS su contenido tanto en las uvas frescas como en los productos elaborados. Finalmente se realizó el análisis de aceptación y perfil sensorial de las grageas producidas, utilizando la metodología RATA (Rate-All-That-Apply). El pretratamiento de uvas con AOVE promovió una reducción significativa en los tiempos de secado de las pasas, con una reducción promedio del 39.33% ± 5.5% en comparación con las uvas de control (sin pretratamiento). Después de analizar los datos del perfil cualitativo y cuantitativo de las pasas hechas del cultivar BRS Clara (cosechas de 2014, 2015 y 2016) sin y con AOEV, se concluyó que el pretratamiento con AOEV era beneficioso para el proceso de secado de la uva, pues aún mantuvo una elevada concentración de compuestos fenólicos. El grageado con chocolate fue responsable de un aumento en las concentraciones de flavan-3-ols (515 - 517 mg equivalentes (eq.) de catequina/ kg de producto, DW) y proantocianidinas (768 - 783 mg eq. de catequina/kg de producto - DW) cuando se compara con las pasas utilizadas como su centro. Para la clase de flavonoles y DAHC, hubo una reducción en la concentración total de compuestos en las grageas en comparación con las pasas. Además, hubo una fuerte influencia del chocolate en el perfil fenólico cualitativo con la aparición de nuevos compuestos (quercetina-3-pentosido, kampfterol-3-rutinósido, ácido p-cumarico y ácido cafeoil-aspartico). Estos resultados, junto con los análisis sensoriales realizados, nos permiten afirmar que las grageas de pasas de BRS Clara con chocolate, además de tener un interesante perfil y concentración de compuestos fenólicos, también son un producto atractivo con buena aceptación sensorial. CAPES: 001

Two analytical methods, green chemistry based, were developed, validated and compared for quantification of isosorbide dinitrate (ISDN) in sublingual tablets. The UV spectrophotometric method proved to be innovator and was carried out at maximum absorption of 205 nm using water as solvent. The HPLC method was stability indicating type, and ISDN was separated of its degradation products with a mobile phase consisting of methanol: water (50:50, v.v-1), in a flow rate of 1.0 mL.min-1 at room temperature. The forced degradation studies demonstrated the molecule intrinsic stability, which was unstable in hydrolysis and basic photolysis, oxidative medium and heat. In validation, the methods presented correlation coefficients greater than 0.99. The precisions were less than 3%. Both methods were robust for parameters tested and the accuracy values were found suitable. Statistical analysis proved that both methodologies are appropriate for ISDN quantification in quality control routine. The methods were considered simple, accessible, and economical and involved the use of reagents that are harmless to environment, to analysts and to components of the equipment, positive aspects that differentiate these methods from compendia and existing procedures in scientific literature. In addition, this article provides analytical methods both in developed industries and laboratories and in those with a structure still under development, what contributes to the reduction of health risk related to the quality of medicines.

Submitted by Neusa Fagundes (neusa.fagundes@unioeste.br) on 2020-10-21T18:07:23Z No. of bitstreams: 2 Fernanda_Santos2020.pdf: 4471007 bytes, checksum: 8eb0260f0f6fdf59fd7921e16105ffd5 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Made available in DSpace on 2020-10-21T18:07:23Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Fernanda_Santos2020.pdf: 4471007 bytes, checksum: 8eb0260f0f6fdf59fd7921e16105ffd5 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2020-02-14 Nordihydroguaiaretic acid is one of the main metabolites produced by Larrea tridentata plant, to which clinical studies have testified its safety and efficacy in therapeutic effects, such as anti-inflammatory and antineoplastic ones. High antioxidant potential is attached to this molecule, because its chemical structure is composed of catechol sheets. Currently, regulatory agencies such as ANVISA and FDA, have determined guidelines to register processes and post-registration of drug therapies. According to such area, analytical methodologies are required to fulfill with norms, such as the resolutions of the collegial board of directors – RDC No 166, 2017 e RDC No 53, 2015. This research aimed at developing and validating an analytical method as a suggestion of stability for nordihydroguaiaretic acid raw material by high performance liquid chromatography. The development was carried out based on initial tests, with optimizations of mobile phase, column, concentration of solutions among others, until the methodology was shown to be validated. Then, the degradation profile of the active was defined according to the forced degradation study that tends to evaluate the analytical method applicability to separate impurities produced after some stress conditions. The conditions were defined based on national and international guides’ recommendations that meet chemical and physical stresses demands. Chemical stresses consisted on exposing samples to the following conditions: hydrolysis in a wide pH range, besides oxidation by metal ions and oxidizing reagent. While, physical degradation conditions consisted on exposing samples to heating, humidity and photodegradation. When the method development was concluded, validation parameters were followed such as: selectivity, linearity, linear range, accuracy, precision (intra- and inter-day) and robustness. The chromatographic system, defined along the development, was in gradient mode using as mobile phase water and methanol with 1.0 mL/min flow, and 3-μl volume injection, 150 mm x 4.6 mm x 5 μm XDB-C18- Agilent Eclipse column, at room temperature and 283-nm detection. The proposed method proved to be selective, since the products from degradation did not interfere on a precise, exact, linear and robust NDGA detection as well as quantification, within the working range. After the successful completion of all analyses concerning the analytical methodology validation, it can be concluded that the proposed method is an indicative of stability to dose NDGA raw matter. O ácido nordihidroguaiarético (NDGA) é um dos principais metabólitos gerados pela planta Larrea tridentata, cujos estudos clínicos comprovam sua segurança e eficácia em efeitos terapêuticos, como anti-inflamatório e antineoplásico. É atribuído elevado potencial antioxidante a esta molécula, devido à estrutura química ser composta por grupamentos catecóis. Atualmente, órgãos de regulamentação, tais como ANVISA e FDA, delimitam diretrizes para os processos de registro e pós-registro de medicamentos. Dentro desta esfera, metodologias analíticas são exigidas para cumprimento de normas, como as resoluções da diretoria colegiada – RDC nº 166, 2017 e RDC nº 53, 2015. Assim, esta pesquisa teve como objetivo desenvolver e validar um método analítico indicativo de estabilidade para a matéria-prima do NDGA por cromatografia líquida de alta eficiência. O desenvolvimento foi realizado a partir de testes iniciais, que envolveram otimizações da fase móvel, coluna, concentração das soluções entre outros, até que a metodologia apresentou-se como apta para ser validada. Em seguida, o perfil de degradação do ativo foi definido por estudo de degradação forçada que tende a avaliar a aplicabilidade do método analítico na separação das impurezas geradas após condições de estresse. As condições foram definidas a partir de recomendações contidas em guias nacionais e internacionais que contemplam estresses químicos e físicos. Os estresses químicos consistiram da exposição das amostras a condições de: hidrólise em ampla faixa de pH, além da oxidação por íons metálicos e reagente oxidante. Já as condições de degradação física consistiram da exposição das amostras para aquecimento, umidade e fotodegradação. Após concluir o desenvolvimento do método, seguiu-se com os parâmetros da validação: seletividade, linearidade, intervalo linear, precisão, exatidão e robustez. O sistema cromatográfico definido no desenvolvimento foi em modo gradiente utilizando como fase móvel água e metanol com fluxo de 1,0 mL/min, em um volume de injeção de 3 µL, coluna Agilent Eclipse XDB-C18 150 mm x 4,6 mm x 5 µm em temperatura ambiente e a detecção foi realizada em 283 nm. O método proposto demonstrou ser seletivo, pois os produtos de degradações gerados não interferiram na detecção nem na quantificação do NDGA, preciso, linear e robusto dentro da faixa de trabalho. Após a exitosa realização de todas as análises pertencentes à validação da metodologia analítica, conclui-se que o método proposto é indicativo de estabilidade para dosar a matéria-prima do NDGA.

Orientadores: Helena Teixeira Godoy, Wellington da Silva Oliveira Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos Resumo: A presente pesquisa teve por objetivo validar um método analítico para estimar a ocorrência de desreguladores endócrinos, sendo bisfenol A (BPA), benzofenona, benzofenona-1 (BP-1), benzofenona-3 (BP-3), benzofenona-8 (BP-8) e benzofenona-12 (BP-12) em fórmulas infantis. A avaliação foi realizada por cromatografia líquida acoplada ao detector de arranjo de diodos e fluorescência. Vinte e cinco amostras de fórmula infantil comercializados na cidade de Campinas foram analisadas em triplicata (n=75). O trabalho está divido em 2 capítulos, sendo o primeiro uma revisão acerca de métodos de detecção e quantificação, preparo de amostra e ocorrência de desreguladores endócrinos em alimentos. No segundo capítulo é abordado o desenvolvimento de uma metodologia para avaliar a presença destes contaminantes em amostras de fórmulas infantis, utilizando HPLC-DAD-FL. Para tanto, foi utilizado três ferramentas estatísticas com o intuito de otimizar o preparo de amostra, visado a extração simultânea dos 6 contaminantes. As ferramentas utilizadas no presente trabalho foram Planejamento Plackett-Burman, Delineamento composto central rotacional e a função de desejabilidade de Derringer Suich, respectivamente. Após a otimização, os fatores que apresentaram significância foram: quantidade de acetonitrila, água e o sal adsorvente Primary Secondary Amine (PSA), que posteriormente foram aplicados à técnica de partição em baixas temperaturas (LTP) em conjunto com a extração em fase sólida-dispersiva (d-SPE). O método para determinação de BPA e BPs foi validado e apresentou limites de detecção variando de 0,02 mg.kg-1 a 0,5 mg.kg-1, bem como os limites de quantificação entre 0,06 mg.kg-1 e 2 mg.kg-1 e precisão (%RSD) com base na reprodutibilidade e repetibilidade intralaboratorial menores que 20%, além de taxas de recuperação satisfatórias para a avaliação dos contaminantes, simultaneamente. Com relação a ocorrência dos compostos, não foram detectados em nenhuma das amostras de fórmulas infantis, garantindo a qualidade e segurança do produto frente ao consumo, principalmente por bebês Abstract: The present research aimed to validate an analytical method to estimate the occurrence of endocrine disruptors, bisphenol A (BPA), benzophenone, benzophenone-1 (BP-1), benzophenone-3 (BP-3), benzophenone-8 (BP -8) and benzophenone-12 (BP-12) in infant formulas. The evaluation was performed by liquid chromatography coupled to diode array and fluorescence detector. Twenty-five samples of infant formula purchased in the Campina’s city were analyzed in triplicate (n = 75). The work is divided into 2 chapters, the first being a review of detection and quantification methods, sample preparation and the occurrence of endocrine disruptors in food. In the second chapter, the development of a methodology to evaluate the presence of these contaminants in samples of infant formulas, using HPLC-DAD-FL is discussed. Therefore, three statistical tools were used in order to optimize the sample preparation, aiming at the simultaneous extraction of the 6 contaminants. The tools used in the present work were Plackett-Burman Planning, Rotational central composite design and Derringer & Suich's desirability function, respectively. After optimization, the factors that showed significance were amount of acetonitrile, water and the Primary Secondary Amine (PSA) adsorbent salt, which were subsequently applied to the low temperature partition (LTP) technique with solid phase extraction - dispersive (d-SPE). The method for determining BPA and BPs was validated and presented detection limits ranging from 0.02 mg.kg-1 to 0.5 mg.kg-1, as well as the limits of quantification between 0.06 mg.kg-1 and 2 mg.kg-1 and precision (% RSD) based on intra-laboratory reproducibility and repeatability less than 20%, in addition satisfactory values recovery were found for the evaluation of contaminants, simultaneously. Regarding the occurrence of the compounds, they were not detected in any of the samples of infant formulas, ensuring the quality and safety of the product by your consumption, especially by babies Mestrado Ciência de Alimentos Mestra em Ciência de Alimentos CAPES 88882.329526/2019-01

A lignina é um polímero aromático muito abundante na biosfera, onde representa cerca de 30% de todo o carbono orgânico, além de ser a principal fonte de compostos aromáticos em plantas vasculares. A valorização desse polímero tem despertado o interesse na produção sustentável de insumos, pois os produtos de sua degradação, possuem importantes aplicações industriais. O objetivo deste trabalho foi otimizar as condições de cultivo para produção de lacase na presença de lignina Kraft pelo isolado fúngico JUMAD053 e avaliar os produtos da sua biodegradação. Quarenta e sete isolados fúngicos foram avaliados quanto à produção de lacase constitutiva em meio líquido. O microrganismo que apresentou maior atividade de lacase nas condições pré-estabelecidas teve sua produção enzimática otimizada por um delineamento experimental 33 em 15 ensaios experimentais. Variou-se as concentrações de extrato de levedura (0,5 até 3,0%) e lignina Kraft (0 até 0,5%) e o tempo de cultivo variou de 4 até 10 dias. A atividade de lacase foi determinada utilizando-se os substratos ABTS e DMP. Posteriormente o isolado selecionado foi cultivado conforme as condições otimizadas nos respectivos planejamentos fatoriais e os cultivos foram extraídos com solventes orgânicos e submetidos à CLAE. O isolado JUMAD053 foi selecionado por apresentar maior atividade de lacase constitutiva (5,37 U/mL). O planejamento fatorial demonstrou máxima atividade de lacase de 9,8 U/mL utilizando-se o substrato ABTS nas condições: 1,125% de extrato de levedura, 0,5% de lignina Kraft e 10 dias de cultivo. A máxima atividade de lacase utilizando-se o substrato DMP foi de 8,4 U/mL, seguindo as condições: 1,125% de extrato de levedura, 0,25% de lignina Kraft e 7 dias de cultivo. A incubação do microrganismo nas condições otimizadas para ABTS levou a produção de dois possíveis produtos da biodegradação da lignina Kraft, dentre eles, o ácido benzoico. Com relação aos cromatogramas resultantes das condições otimizadas para DMP, foi observada a produção de outros dois compostos, sendo essas substâncias possíveis produtos da biodegradação da lignina Kraft. Os perfis de metabólitos obtidos a partir da biodegradação da lignina Kraft validam os objetivos deste trabalho e baseiam futuros experimentos para a valorização da lignina. Lignin is a very abundant aromatic polymer in the biosphere where it represents about 30% of all organic carbon and is the main source of aromatic compounds in vascular plants. The valorization of this polymer has aroused the interest in the sustainable production of derivatives, since its degradation products have important industrial applications. The objective of this work was to optimize the culture conditions for laccase production in the presence of Kraft lignin by the fungal isolate JUMAD053 and to evaluate the products of lignin biodegradation. Forty-seven fungal isolates were evaluated for constitutive laccase production in liquid medium. The microorganism that presented higher laccase activity under the pre-established conditions had its enzymatic production optimized by a factorial design 33 in 15 experimental assays. It was varied the concentrations of yeast extract (0.5 to 3.0%) and Kraft lignin (0 to 0.5%) as well as cultivation period, from 4 to 10 days. Laccase activity was determined using the substrates ABTS and DMP. Subsequently, the selected isolate was cultivated according to the optimized conditions pointed by the respective factorial designs and the cultures were extracted with organic solvents and submitted to HPLC. Isolate JUMAD053 was selected because it presented the highest constitutive laccase activity (5.37 U/mL). Factorial design demonstrated a maximum laccase activity of 9.8 U/mL using the substrate ABTS under the conditions: 1.125% yeast extract, 0.5% Kraft lignin and 10 days of cultivation. The maximum laccase activity using the substrate DMP was 8.4 U/mL, following the conditions: 1.125% yeast extract, 0.25% Kraft lignin and 7 days of cultivation. The incubation of the microorganism under conditions optimized for ABTS led to the production of two possible products of Kraft lignin biodegradation, such as benzoic acid. Regarding the chromatograms resulting from the optimized conditions for assays with DMP, it was observed the production of another two compounds, possible products of Kraft lignin biodegradation. The profiles of metabolites obtained from the biodegradation of Kraft lignin validate the objectives of this work and base future experiments for lignin valorization.