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Submitted by Ana Emília Brumatti Galiardi Campoy (anabrumatti@yahoo.com.br) on 2020-01-13T14:57:24Z No. of bitstreams: 1 final.pdf: 1906866 bytes, checksum: 84612a228cdc07edb6623e7ec5df9879 (MD5) Rejected by Elza Mitiko Sato null (elzasato@ibilce.unesp.br), reason: Solicitamos que realize correções na submissão seguindo as orientações abaixo: Problema 01) O ano descrito na CAPA e na FOLHA DE ROSTO deverá ser o ano de entrega da dissertação na Seção Técnica de Pós-Graduação(2020). Problema 02) Solicitamos que corrija na FOLHA DE APROVAÇÃO não é necessário colocar orientador, pois já consta na comissão examinadora. Problema 03) Após as ilustrações/figuras, na parte inferior, indicar a fonte consultada (elemento obrigatório, mesmo que seja produção do próprio autor), ABNT NBR 14724. Problema 04) Solicitamos corrigir no Sumário e no texto, o correto é REFERÊNCIAS e não Referências Bibliográficas. OBS:-Estamos encaminhando via e-mail o template/modelo das páginas pré-textuais para que você possa fazer as correções, sugerimos que siga este modelo pois ele contempla as normas da ABNT. Lembramos que o arquivo depositado no repositório deve ser igual ao impresso, o rigor com o padrão da Universidade se deve ao fato de que o seu trabalho passará a ser visível mundialmente. Agradecemos a compreensão. on 2020-01-13T19:09:43Z (GMT) Submitted by Ana Emília Brumatti Galiardi Campoy (anabrumatti@yahoo.com.br) on 2020-01-14T13:05:23Z No. of bitstreams: 1 tese - Ana Emília - final.pdf: 1910148 bytes, checksum: 13abb06a12519bc709785c9024c8b0b0 (MD5) Approved for entry into archive by Elza Mitiko Sato null (elzasato@ibilce.unesp.br) on 2020-01-14T13:57:11Z (GMT) No. of bitstreams: 1 campoy_aebg_dr_sjrp_par.pdf: 28064 bytes, checksum: 4871a161dcafb523a8b87510f5b2e013 (MD5) Made available in DSpace on 2020-01-14T13:57:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 campoy_aebg_dr_sjrp_par.pdf: 28064 bytes, checksum: 4871a161dcafb523a8b87510f5b2e013 (MD5) Previous issue date: 2019-12-16 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) O câncer cervical é um problema de saúde pública mundial, especialmente devido à sua relação com a infecção prévia pelo papilomavírus humano (HPV). Os HPV são uma família de vírus de DNA com mais de 200 tipos e podem ser classificados em HPVs de baixo e alto risco. Os HPVs de alto risco mais relevantes são os HPV-16 e -18, que juntos são responsáveis por mais de 70% dos casos de carcinoma cervical. As modalidades atuais de tratamento para o câncer cervical são cirurgia, e a combinação de quimioterapia à base de cisplatina com radiação, porém apresentam efeitos adversos graves. Portanto, esforços contínuos são necessários para desenvolver novas drogas e estratégias terapêuticas eficazes para aumentar a eficácia da quimioterapia e diminuir esses efeitos colaterais. A emodina tem atraído grande atenção devido a seu efeito anti-inflamatório, antineoplásico e proapoptótico nos últimos anos. Além disso, a emodina pode ser utilizada como agente fotossensibilizador na terapia fotodinâmica. O interesse na terapia fotodinâmica no tratamento do câncer tem crescido exponencialmente, uma vez que é um tratamento minimamente invasivo, onde se erradica as células alvo, evitando-se a toxicidade sistêmica e os efeitos colaterais nos tecidos saudáveis. Assim, o objetivo deste estudo foi analisar o efeito da emodina associada à terapia fotodinâmica em linhagens de carcinoma cervical infectadas por HPV de alto risco (SiHa e CaSki) e queratinócitos humanos imortalizados (HaCaT). Inicialmente, as investigações demonstraram que a emodina apresentou citotoxicidade em concentração e tempo dependentes, mostrando mais de 80% de viabilidade celular para linhagens celulares SiHa, CaSki e HaCaT em concentrações abaixo de 30 µmol/L. As imagens de microscopia de fluorescência mostraram uma internalização celular eficiente de emodina em todas as linhas celulares analisadas. Uma diminuição significativa da viabilidade celular para as linhagens celulares SiHa, CaSki e HaCaT foi observado após tratamento com emodina associada à terapia fotodinâmica. Isto foi acompanhado por um aumento na produção de EROs, aumento nas atividades de caspase-3 e aumento na intensidade de fluorescência dos vacúolos autofágicos, sugerindo morte celular por apoptose e autofagia, provavelmente devido ao aumento na produção de EROs. Além disso, 22 genes alvo de drogas anticâncer foram superexpressos e 2 genes alvo de drogas anticâncer tiveram sua expressão diminuída em células SiHa após o tratamento com terapia fotodinâmica mediada por emodina. Estes resultados mostram que a emodina em combinação com a terapia fotodinâmica tem um grande potencial terapêutico para ser utilizada como um tratamento alternativo para o câncer cervical. Cervical cancer is a worldwide public health problem, especially due to its relation to the previous infection by human papillomavirus (HPV). The HPV is a family of DNA viruses with more than 200 types, and can be classified in low and high risk HPVs. The most important high risk HPVs are the HPV-16 and -18, which together are responsible for more than 70% cervical carcinoma cases. Current treatment modalities for cervical cancer are surgery, and the combination of cisplatin based chemotherapy with radiation, however they present severe adverse effects. Therefore, ongoing efforts are necessary to developed new drugs and effective therapeutic strategies to enhance chemotherapeutic efficacy and decrease these side effects. Emodin has attracted extensive attention due to its anti-inflammatory, antineoplastic, and proapoptotic effects in recent years. Furthermore, emodin may be used as a photosensitizing agent in photodynamic therapy. The interest in photodynamic therapy in the treatment of cancer has grown exponentially, since it is a minimally invasive treatment where eradicate target cells while avoiding systemic toxicity and side effects on healthy tissues. So, the aim of this study was to analyze the effect of emodin associated with photodynamic therapy in cervical carcinoma cell lines infected with high-risk HPV (SiHa and CaSki) and immortalized human keratinocytes (HaCaT). Initially, the investigations demonstrated that emodin presented cytotoxicity in concentration and time-dependent manner showing more than 80% of cell viability for SiHa, CaSki and HaCaT cell lines in concentrations below 30 µmol/L. The fluorescence microscopy images showed an efficient cellular uptake of emodin in all the cell lines analyzed. A significant decrease of the cell viability for SiHa, CaSki and HaCaT cell lines was observed after treatment with photodynamic therapy mediated by emodin. This was accompanied by an increase of ROS production, increase in caspase-3 activity and increase in the fluorescence intensity of autophagic vacuoles, suggesting cell death by apoptosis and autophagy probably due to the increase in production of ROS. Additionally, 22 target genes for anti-cancer drugs were overexpressed and 2 target genes for anti-cancer drugs were downregulated in SiHa cells after treatment with photodynamic therapy mediated by emodin. These results show that emodin in combination with photodynamic therapy has a great therapeutic potential to be used as an alternative treatment for cervical cancer. CAPES: 88882.434472/2019-01

Submitted by Boris Flegr (boris@uerj.br) on 2021-01-06T20:57:48Z No. of bitstreams: 1 Cecilia de Andrade Bhering Dissertacao completa.pdf: 2170942 bytes, checksum: d862756248d590b09b2635a7fd970229 (MD5) Made available in DSpace on 2021-01-06T20:57:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cecilia de Andrade Bhering Dissertacao completa.pdf: 2170942 bytes, checksum: d862756248d590b09b2635a7fd970229 (MD5) Previous issue date: 2012-07-31 Fundação Carlos Chagas Filho de Amparo a Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro Emodin is an anthraquinone structurally similar to aloe-emodin and both have been identified as capable of causing oxidative damage by ROS production. Its presence in skin cosmetics and toiletries, associated to the information that the photoactivation of anthraquinones leads to increased oxidative damage caused by ROS, make studies about the association of emodin with UVA relevant. The aim of this study was to evaluate the cytotoxicity induced by the combination of emodin with sublethal doses of UVA radiation in Escherichia coli cells (wild strain and strains deficient in enzymes of BER) by bacterial survival assay (UVA dose rate equal to 20J/m²/s, totaling 108kJ/m² at the end of 90min of experiment); and in A549 cell line by trypan blue exclusion assay and clonogenic survival(dose rate of UVA equal to 20J/m²/s, totaling 36kJ/m² at the end of 30 minutes of experiment). Furthermore, the genotoxicity of these agents was studied by electrophoresis on agarose gel of plasmid DNA (dose rate of UVA equal to 16J/m²/s, totaling 57,6kJ/m² at the end of 60 minutes of experiment). According to the results: i) concentrations equal or below 5.55mM of emodin did not affect the survival in any of the studied strains; ii) proteins Xth and Fpg appear to have an important role in the repair of lesions induced by emodin, at high concentrations, suggesting the involvement of base excision repair (BER) in this process, iii) the association of emodin with UVA showed to be cytotoxic in all strains of E. coli iv) The nfo gene was the most important in bacterial resistance to damages induced by the association of the two agents, reinforcing the involvement of BER and indicating a possible role of the nucleotide incision repair (NIR), v) emodin appears to have interacted with plasmid DNA, altering its migration pattern in the agarose gel; vi) in A549 cell line, emodin caused immediate toxic effects that seemed to be repaired with time. However, when the drug remained for 24 hours in contact with the cells, there was a reduction in cell survival which seems to be in a dose dependent mode, vii) The concentrations of 10μM and 25μM of emodin, when associated with UVA, were responsible for a survival reduction of more than 50% survival in A549 cells, reaching 100% of death with the concentration of 50μM of emodin, viii) UVA radiation potentiates the cytotoxic effect of emodin in two experimental models in the present study, indicating that this interaction is genotoxic and therefore harmful to health. A emodina é uma antraquinona estruturalmente semelhante à aloe-emodina e ambas tem sido apontadas como capazes de causar lesões oxidativas pela produção de ERO. Sua presença em produtos dermocosméticos e de higiene pessoal, associada às informações de que a fotoativação de antraquinonas levaria ao aumento de lesões oxidativas causadas por ERO, torna relevante o estudo da associação da emodina com a radiação UVA. O objetivo desse trabalho foi avaliar a citotoxicidade induzida pela associação da emodina com doses subletais de radiação UVA, em células de Escherichia coli (selvagem e cepas deficientes em enzimas do BER), através de ensaios de sobrevivência bacteriana (taxa de dose de UVA igual a 20J/m²/s, totalizando 108kJ/m² ao final de 90min de experimento), e em células da linhagem A549 pela exclusão do corante azul de tripan e sobrevivência clonogênica(taxa de dose de UVA igual a 20J/m²/s, totalizando 36kJ/m² ao final de 30min de experimento). Além disso, a genotoxicidade desses agentes foi estudada por eletroforese em gel de agarose de DNA plasmidial (taxa de dose de UVA igual a 16J/m²/s, totalizando 57,6kJ/m² ao final de 60min de experimento). De acordo com os resultados: i) Concentrações iguais ou abaixo de 5,55mM de emodina não alteraram a sobrevivência em nenhuma das cepas estudas; ii) As proteínas Xth e Fpg parecem ter um papel importante no reparo das lesões causadas pela emodina, em altas concentrações, sugerindo a participação do reparo por excisão de bases (BER) nesse processo; iii) A associação da emodina com a radiação UVA se mostrou citotóxica em todas as cepas de E. coli; iv) O gene nfo foi o mais importante na resistência bacteriana às lesões induzidas pela associação dos dois agentes, reforçando o envolvimento do BER e indicando uma possível participação do reparo por incisão de nucleotídeos (NIR); v) A emodina parece ter interagido com o DNA plasmidial, alterando seu padrão de migração no gel de agarose; vi) Em células da linhagem A549, a emodina causa efeitos tóxicos imediatos que parecem ser reparados ao longo do tempo. Porém, quando a droga permaneceu por 24 horas em contato com as células, houve uma diminuição na sobrevivência celular que parece ser dosedependente; vii) As concentrações de 10μM e 25μM de emodina, quando associadas ao UVA, se mostraram responsáveis pela redução de mais de 50% na sobrevivência nas células A549, chegando a 100% de morte quando a concentração de emodina foi de 50μM; viii) A radiação UVA potencializou os efeitos citotóxicos da emodina, nos 2 modelos experimentais do presente estudo, indicando que a interação da emodina com a radiação UVA seja genotóxica e portanto prejudicial à saúde.

The phytochemical investigation of the wood extracts of Senna reticulata (Leguminoseae) yielded six anthraquinones: chrysophanol, physcion, aloe-emodin, 1,3,8-trihydroxyanthraquinone, 3-methoxy-1,6,8-trihydroxyanthraquinone, emodin and the chrysophanol-10,10' bianthrone. The triterpenes a and b-amirin, the steroids b-sitosterol and stigmasterol as well as the flavonoid kaempferol were also identified. The structures were established by spectral analysis, including two-dimensional NMR techniques. It is the first report of 1,3,8-trihydroxyanthraquinone and 3-methoxy-1,6,8-trihydroxyanthraquinone in higher plants.

Foram submetidas a técnicas de extração para compostos antracênicos de Cassia fastuosa Willd. Constatada a presenca de aloemodina, reína, emodina, senóside A e de senóside B, foram procedidos de doesamentos da reína e do semóside B. Além disso, foi realizado ensaio biológico preliminar, com o extrato aquoso a 10%, para a verificação da atividade laxante. Leaves of Cassia fastuosa Willd., Leguminosae, were subjected to extraction methods of anthracenic compounds. Three aglicon were detected in the ethereous extract: aloemodin, emodin and rhein (2.48%). Sennosides A and B were detected in the ethanolic extract. Preliminary biological assay in 10% aqueous extract confirmed the laxative activity and no toxic effect was observed in this concentration.