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La tubercolosi, importante patologia riemergente sostenuta da micobatteri, causa nell’uomo e negli animali morbilità, mortalità e danni economici. In particolare Mycobacterium bovis rappresenta un importante problema di sanità pubblica per la sua capacità di infettare animali domestici, selvatici e uomo, mentre M. avium è patogeno per il suino ed è segnalato come patogeno umano in soggetti immunodepressi. L’infezione da M.bovis, M. avium e altri micobatteri è stata diagnosticata nel cinghiale (Sus scrofa) in molti Paesi europei, compresa l’Italia. Erysipelothrix rhusiopathiae è l’agente causale del mal rosso, malattia zoonosica diffusa in tutto il mondo con importante impatto economico sull’allevamento suino. Sebbene descritta nel cinghiale, esistono attualmente pochi studi sulla suscettibilità all’infezione e sul ruolo epidemiologico di tale suide selvatico. Nel presente lavoro sono state svolte indagini microbiologiche volte alla ricerca di tali agenti zoonosici in una popolazione di cinghiali a vita libera in Provincia di Bologna, per valutare l’implicazione di questo ungulato, in continua espansione demografica, nell’epidemiologia di tali infezioni.

Il maiale domestico (Sus scrofa domestica), condividendo con gli uccelli e i mammiferi i recettori cellulari per i virus influenzali, svolge un ruolo epidemiologico chiave nell’ecologia del virus dell’influenza di tipo A ed in particolare nell’emergenza di nuovi ceppi, come confermato dall’origine suina del virus pandemico H1N1 del 2009. Il cinghiale (Sus scrofa) è il progenitore selvatico del maiale domestico, con cui condivide sia una stretta affinità genetica sia la suscettibilità verso numerosi agenti patogeni, tra cui i virus influenzali. La sottospecie nominale (Sus scrofa scrofa) è la più comune e diffusa in Eurasia, dove può arrecare gravi danni economici e ambientali. Se da un lato l’epidemiologia delle infezioni da virus influenzali di tipo A ed il relativo impatto economico negli allevamenti suini sono noti, vi sono ancora scarse informazioni sulla dinamica di circolazione del virus nelle popolazioni di cinghiali a vita libera. Nel presente lavoro è stata condotta un’indagine sierologica per valutare l’esposizione a virus influenzali di tipo A di una popolazione di cinghiali a vita libera distribuiti in un'area protetta della Provincia di Bologna. Metodi. Durante i periodi maggio 2002-luglio 2003 e aprile 2010-aprile 2011, sono stati raccolti 741 campioni di sangue prelevati da cinghiali catturati o abbattuti selettivamente nel Parco Regionale dei Gessi Bolognesi e Calanchi dell’Abbadessa. In questa area protetta di 4.844 ettari situata nella fascia collinare preappenninica bolognese, dal maggio 2002 è applicato un modello di gestione demografica densità-dipendente basato sulla selezione ed il mantenimento di una popolazione a densità nota strutturata in base ad una piramide di popolazione sesso-età dipendente. In funzione dell’eruzione dentaria, gli animali campionati sono stati suddivisi in tre classi di età: 1a classe, 14 mesi. Per differenziare le positività sierologiche dovute ad immunità passiva materna (IPM) da quelle indotte da una risposta sierologica attiva (RSA) post-infezione, la 1a classe è stata ulteriormente suddivisa nelle sottoclassi 1a-IPM e 1a-RSA che comprendono rispettivamente i cinghiali di età

Nelle prime due settimane di gennaio 2011, circa 3.000 carcasse di tortore dal collare (Streptopelia decaocto) a vita libera sono state rinvenute nei pressi di un sito industriale, in provincia di Ravenna, dedito alla lavorazione di partite di semi o loro residui. L’esame autoptico di 322 soggetti evidenziava prevalentemente un grave danno renale, epatomegalia e ipoplasia splenica. Gli esami istologici a livello del rene mostravano nefrosi associata a necrosi tubulari e una nefrite interstiziale linfoplasmacellulare. Inoltre, si osservavano deplezione linfocitaria nella milza unitamente ad emosiderosi splenica ed epatica. La stima dell’età su 46 soggetti identificava il 78% di adulti e il 22% di giovani (entro il primo anno di vita). Le analisi chimiche sulle ingesta e su pool di fegati non evidenziavano tossicità da pesticidi clorurati e fosforati, carbammati, triazine, piretroidi, stricnina, neonicotinoidi, Pb, Cd, Cr, Hg, Zn, Cu, micotossine, perossidi. Indagini molecolari (RT-PCR Real-Time) escludevano la presenza di virus influenzali, mentre veniva evidenziato RNA di Paramyxovirus aviario tipo 1 (APMV-1) tramite RTPCR in 176 su 193 animali analizzati. L’isolamento di 27 ceppi di APMV-1 è stato ottenuto inoculando pool di organi su uova embrionate di pollo SPF. Tali ceppi risultavano patogeni in base alla sequenza aminoacidica del sito di clivaggio della proteina di fusione. Il sequenziamento parziale del gene F ha permesso di identificare 2 differenti genotipi cocircolanti: il lineaggio 4b (APMV-1 ceppo piccione) e un distinto cluster genetico del lineaggio 4.

Tra gli uccelli acquatici gli Anseriformi rappresentano il principale serbatoio dei virus influenzali di tipo A e possono albergare la maggior parte dei sottotipi virali caratterizzati sino ad oggi da 16 emoagglutinine e 9 neuroaminidasi diverse. Occasionalmente virus influenzali aviari possono essere trasmessi ad altre specie, compresi i volatili domestici ed i mammiferi. Scopo del lavoro è stato quello di valutare sia la circolazione di virus influenzali tipo A in Anatidi selvatici sia i patterns di prevalenza correlati a stagionalità, sesso e classi di età degli animali campionati all’interno dell’Oasi WWF “Laguna di Orbetello” (GR) nel periodo ottobre 2005/settembre 2006. L’RNA virale è stato estratto da 146 tamponi cloacali prelevati da anatre di superficie catturate con gabbie ad invito. Mediante one-step RT-PCR diretta ad amplificare un tratto specifico del gene M, sono stati identificati i campioni contenenti virus influenzali. Tali campioni sono stati quindi inoculati, per l’isolamento virale, nella cavità allantoidea di uova embrionate di pollo all’undicesimo giorno di incubazione. I liquidi allantoidei ottenuti sono stati analizzati in prove di emoagglutinazione ed ELISA diretta verso la nucleoproteina virale e sono stati considerati positivi i liquidi allantoidei emoagglutinanti positivi ad entrambe queste metodiche. I test del Chi-quadrato ed Esatto di Fisher sono stati utilizzati al fine di evidenziare differenze statisticamente significative in funzione dell’età e sesso dei soggetti campionati e di tre periodi di campionamento (sovrapponibili rispettivamente alla migrazione di discesa, allo svernamento ed al periodo post-riproduttivo). La prevalenza totale è risultata del 26% in RT-PCR e del 9,6% nelle prove di isolamento su uova embrionate. Durante l’intero anno di campionamento nessuna differenza significativa è stata riscontrata tra le classi di età, di sesso e tra i diversi periodi di campionamento mentre dal confronto degli isolamenti ottenuti in adulti e giovani, durante la stagione di svernamento (gennaio/marzo 2006) emerge una differenza significativa (P

La diffusione dei focolai di influenza aviaria A/H5N1 e gli episodi di mortalità nell’uomo registrati nei paesi del Sud-Est asiatico, hanno determinato un crescente allarme nella comunità scientifica e nell’opinione pubblica a causa del potenziale pandemico rappresentato dalla evoluzione del virus. La tempestiva identificazione del virus nelle specie aviarie domestiche e selvatiche, attraverso l’impiego di strumenti diagnostici altamente sensibili, specifici e di rapida esecuzione, è essenziale per l’adozione rapida ed efficace delle misure sanitarie di controllo. La real-time RT-PCR, basata sull’impiego di sonde fluorescenti, rappresenta lo strumento diagnostico in grado di garantire l’identificazione dei virus influenzali, sia umani che aviari, presentando notevoli vantaggi in termini di rapidità, sensibilità e specificità rispetto alle metodiche classiche di isolamento del virus e alle altre metodiche molecolari. Nell’ottica di un continuo miglioramento dell’iter diagnostico per l’identificazione del virus dell’influenza aviaria, è stato sviluppato un saggio di real-time RT-PCR, impiegando una sonda fluorescente Minor Groove Binder, che presenta una serie di innovazioni rispetto alle piattaforme per real-time sinora disponibili per la diagnostica virologica. Il sistema diagnostico è stato calibrato e ottimizzato in termini di specificità, utilizzando un panel di virus influenzali aviari, di origine suina, equina, oltre che umana, dimostrando inoltre una sensibilità tale da renderlo applicabile per lo screening di campioni biologici prelevati dalle specie aviarie domestiche e selvatiche.