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Negli ultimi anni la babesiosi sta assumendo sempre maggiore importanza come infezione potenzialmente zoonosica. I casi umani segnalati in Europa si riferiscono per la maggior parte a B. divergens. In Italia è stato recentemente segnalato un caso il cui ceppo è stato denominato Babesia “European Union 1” (EU1). Nonostante non sia stata ancora chiarita precisamente l’eziologia e l’epidemiologia della babesiosi umana, è ipotizzabile che ruminanti domestici e selvatici giochino un ruolo importante nel mantenimento dell’infezione. Tra giugno 2005 e marzo 2006 sono stati raccolti campioni di sangue da 116 bovini, 83 ovini, 24 caprini e 81 ruminanti selvatici di diverse specie (49 caprioli, 15 daini, 9 camosci, 5 cervi, 3 mufloni) provenienti dall’Italia nord-orientale. Su tutti i campioni raccolti (ad esclusione di 6 bovini) è stata condotta la PCR per la ricerca di piroplasmi. I campioni positivi sono stati sequenziati e testati verso le sequenze del gene 18S rRNA di Babesia spp. e Theileria spp. presenti nei database GenBank, EMBL e DDBJ, utilizzando BLAST. Solo i campioni bovini sono stati analizzati sierologicamente tramite test IFI commerciale per B. bigemina e B. bovis. Nessun ovi-caprino è risultato positivo, mentre un’alta percentuale di bovini (21/110) e di ruminanti selvatici (29/81) sono risultati positivi alla PCR. Al sequenziamento solo una parte dei positivi è risultata riconducibile a Babesia spp. e in particolare: nei bovini B. microti (1), B. divergens (1) e B. microti-like (15); nei selvatici B. divergens-like (21), Babesia EU1 (1) e Babesia ovis (2). Le positività dei rimanenti campioni sono risultate attribuibili a varie specie del genere Theileria. Le siero-prevalenze riscontrate nei bovini sono risultate del 53,4% (62/116) per B. bovis e del 10,3% (12/116) per B. bigemina, caratterizzate in entrambi i casi da titoli tendenzialmente bassi (1:40-1:320 per B. bovis e 1:80-1:320 per B. bigemina). I risultati della presente indagine evidenziano una circolazione notevole di Babesia spp. quantomeno nelle popolazioni di bovini e di ruminanti selvatici. La definizione delle caratteristiche epidemiologiche e della potenzialità zoonosica dei vari ceppi riscontrati necessita di ulteriori studi, ma il ritrovamento di Babesia EU1 in un capriolo della Provincia di Verona e quello di molti isolati riconducibili ai gruppi B. microti-like e B. divergens-like, entrambi possibili responsabili di zoonosi, suggeriscono che il rischio non debba essere sottovalutato. Il riscontro di positività sierologiche a bassi titoli verso specie di Babesia tipiche del bovino non esclude la presenza di altri ceppi, considerando la tendenza alla cross-reattività del test IFI.

L’identificazione e la classificazione tradizionale di Babesia spp. è basata sugli aspetti morfologici della forma intraeritrocitaria visibile negli strisci di sangue di animali infetti. Questa analisi, insieme alla specificità dell’ospite, ha portato alla descrizione di più di 100 specie di Babesia, che infettano un’ampia varietà di vertebrati. Si è però visto che specie differenti possono sembrare nello stesso ospite morfologicamente simili e viceversa lo stesso parassita può avere caratteristiche microscopiche differenti in ospiti diversi. Recenti studi molecolari hanno evidenziato come alcune specie di Babesia in grado di infettare differenti ospiti, siano in realtà sinonimi di una stessa specie. In questo lavoro sono riportati i risultati dell’applicazione di metodiche biomolecolari nello studio delle babesiosi degli animali selvatici. E’ stata messa a punto una metodica di PCR su sangue prelevato da animali selvatici (cinghiale, capriolo, daino, cervo, camoscio, muflone, volpe, lepre) in varie zone del nord Italia, amplificando un frammento di circa 800bp del 18S-rRNA. Per questo è stata utilizzata una coppia di primer: il primo genericamente usato per gli apicomplexa (CRYPTO- F), l’altro più specifico per Babesia spp. (RLB-R2). I campioni positivi sono stati sequenziati e sottoposti ad analisi filogenetica, e su una parte degli amplificati sono state effettuate prove per discriminare le diverse specie di emoprotozoi con l’uso di diversi enzimi di restrizione. Sono stati esaminati complessivamente 241 animali. È stata riscontrata una notevole variabilità di specie di piroplasmi: i caprioli sono risultati positivi per B. divergens, Babesia EU1, Babesia MO1, Theileria spp. e un ceppo riconducibile a quello descritto in un cane in Spagna, correlato a B. microti; quest’ultimo è stato riscontrato anche in una volpe. In daini e cinghiali è presente essenzialmente Theileria spp. Il lavoro svolto ha permesso di: 1) ottimizzare la PCR, impostando una temperatura di annealing di 63°C al fine di diminuire la presenza di bande aspecifiche dovute a protozoi ruminali che, specialmente in animali abbattuti, possono contaminare il campione; 2) evidenziare come questo tipo di approccio permetta di conoscere meglio, rispetto agli strisci di sangue, la reale circolazione dei piroplasmi negli animali selvatici; 3) chiarire, grazie al sequenziamento e all’analisi filogenetica, la grande variabilità di specie circolanti nella popolazione; 4) evidenziare la difficoltà di utilizzo della restrizione enzimatica per la tipizzazione dei piroplasmi diffusi negli animali selvatici.

infezione da HBV, definita epatite B, rappresenta uno dei principali problemi sanitari a livello mondiale. Il virus responsabile di questa infezione si trasmette infatti in modo efficace attraverso il sangue e altri fluidi corporei, ragione per cui, fino a pochi decenni fa, le vie principali di diffusione del virus erano le pratiche ospedaliere e la trasmissione in ambito familiare. Nel decennio 1970-1980, l’Italia era un paese a media endemia, con ampie variazioni geografiche nella prevalenza dei portatori cronici della malattia (la prevalenza media era pari al 2-8% con i livelli più elevati nelle aree meridionali e insulari).