1. Development of murine Fab-Multimers for selection and functional characterization of reversibly stained regulatory T cells
- Author
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Nikolaus, Marc Joachim, Busch, Dirk H. (Prof. Dr.), and Gerhard, Markus (Prof. Dr.)
- Subjects
Medizin und Gesundheit ,hemic and immune systems ,chemical and pharmacologic phenomena ,ddc:610 ,regulatorische T-Zellen, Treg, Fab-Multimer, Streptamer ,regulatory T cells, Treg, Fab-Multimer, Streptamer - Abstract
In dieser Arbeit wurden, basierend auf Streptamer-Technologie, erstmals murine Fab-Multimere gegen CD4 und CD25 entwickelt, um regulatorische T-Zellen (Tregs) der Maus reversibel anfärben und anreichern zu können. Die neuen Reagenzien wurden mit konventioneller Antikörperfärbung verglichen und erzielten in durchflusszytometrischen Analysen zu Färbung, Reinheit und Spezifität stets gleichwertige oder bessere Ergebnisse. Zusätzlich lassen Suppressions- und Proliferationsanalysen sowie adoptive Zelltransfers auf eine tendenziell geringere funktionelle Beeinträchtigung reversibel gefärbter Tregs schließen. Diese Daten können dazu beitragen, Tregs zelltherapeutisch besser nutzbar zu machen. In this dissertation, for the first time murine Fab-multimers against CD4 and CD25 were developed using Streptamer-technology to reversibly stain and enrich murine regulatory T cells (Tregs). The new reagents were compared to conventional antibody staining and analyzed by flow cytometry, obtaining equal or better results in staining qualities, purity and specificity. In addition suppression assays, proliferation experiments and adoptive cell transfer suggested a less functional impairment of reversibly stained Tregs. These data might contribute to bringing purified Tregs to clinical application.
- Published
- 2016