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Hintergrund und Ziele Das Mammakarzinom ist die häufigste zum Tode führende Karzinomdiagnose bei Frauen weltweit, mit einem Lebenszeitrisiko von bis zu 10% mit steigenden Inzidenzraten besonderes bei jüngeren Frauen unter 60 Jahren. Risikofaktoren, die zur Entstehung einer Mammakarzinomerkrankung führen können, sind vielfältig. Neben epidemiologischen Faktoren konnten genetische Risikofaktoren wie die Hochpenetranz-Gene BRCA1 und BRCA2 identifiziert werden. Diese machen jedoch nur 25% der familiär bedingten Mammakarzinome aus. Niedrigpenetrante Gene, sogenannte risk-modifier, lassen sich häufig an Schaltstellen der Karzinogenese finden und scheinen einen modulierenden Einfluss auf die Entstehung einer Mammakarzinomerkrankung zu haben. Veränderungen von Genen, die eine Funktionsänderung im Östrogenmetabolismus bewirken, könnten so mit einer Mammakarzinomerkrankung assoziiert sein. Single Nucleotid Polymorphismen (SNP) im Aromatase-Gen (CYP19A1), welches die Biosynthese des Östrogens katalysiert, von denen bekannt ist, dass sie bei postmenopausalen Frauen mit unterschiedlichen Östrogenspiegeln im Serum assoziiert sind, könnten somit Suszeptibilitätsmarker des Mammakarzinoms sein. Ziel dieser Arbeit war es, zwei SNPs im Aromatase-Gen (dbSNP refID: rs10046 und rs700519), in einer Fall-Kontroll-Studie als Risikomarker für die Entstehung einer Mammakarzinomerkrankung zu untersuchen. Methoden Insgesamt 1.250 an einem Mammakarzinom erkrankte Frauen wurden in der Frauenklinik des Universitätsfrauenklinikums Erlangen rekrutiert. Des Weiteren konnten 900 gesunde Frauen, die nicht an einem Karzinom erkrankt waren, durch eine Zeitungsanzeige für die vorliegende Studie gewonnen werden. Allgemeine Risikofaktoren wurden anhand eines Fragebogens in einem Interview erhoben und die Desoxyribonukleinsäure (DNA) der Teilnehmerinnen aus peripherem venösem Blut isoliert. Die Genotypisierung der oben genannten SNPs, erfolgte mittels Echtzeit-Polymerase-Kettenreaktion (real time PCR). Ergebnisse und Beobachtungen In unserer Kohorte konnte beim Vergleich der Fälle mit den Kontrollen mittels Pearson’s Chi-Quadrat Test oder Mantel Haenzel Test keine Assoziation der Variationen SNP rs10046 und SNP rs700519 im Aromatase-Gen nachgewiesen werden. Jedoch konnten wir bei Vorhandensein beider Variationen im Genotyp eine Tendenz zur erhöhten mammographischen Dichte feststellen. Schlussfolgerungen Eine erhöhte Östrogenexposition ist als Risikofaktor für die Entstehung eines Mammakarzinoms bekannt. Obwohl es durch veränderte Promotoren am Aromatasegen zu einer gesteigerten Genexpression und somit zur Erhöhung der Östrogenproduktion kommt, konnte in unserer Untersuchung der SNPs rs10046 und rs700519 keine Assoziation mit einer erhöhten Mammakarzinomsuszeptibilität festgestellt werden. Höhere Fallzahlen und andere SNPs in der Nähe unserer untersuchten Genloci sind notwendig, um Risikomarker für das Mammakarzinom zu etablieren. Background Breast cancer is one of the main cancers in females leading to death worldwide. The lifetime risk is up to 10% with increasing incidence rates, especially for women under the age of 60. The risk factors to develop breast cancer are manifold. Besides epidemiologic factors, genetic variants such as high-penetrance-genes BRCA1 and BRCA2 have been identified. In fact, these genes explain only 25% of the family related breast cancer cases. Low-penetrance-genes, also known as risk modifiers, which are responsible for check point enzymes in the carcinogenesis, are established to play a modulating role in the development of breast cancer. Variations such as Single Nucleotide Polymorphisms (SNP) in the aromatase-enzyme (CYP19), with its function in the biosynthesis of estrogens, are established to be associated with an increased risk to develop breast cancer. Aim of this study was to analyze the genotype frequency of the two SNPs (SNP rs10046 and SNP rs700519), and to examine the association between risk of breast cancer and genetic variants in our cohort. Material and methods Therefore, 1,250 women with breast cancer, at our breast cancer clinic at the Universitätsfrauenklinik Erlangen, have been examined and the results have been analyzed and compared with 900 healthy women without any cancer in their medical history. These controls have been recruited from advertisings in the local press around Nuremberg. Each woman had to fill out a questionnaire, and had to sign the consent form. Venous EDTA-blood samples were taken to extract deoxyribonucleic acid (DNA). To analyze the genotype frequencies of two variants in the Aromatase gene, we used real-time PCR. Results We could not verify the earlier findings to consider a positive association with an increased breast cancer risk and variants of SNP rs10046 and SNP rs700519 in our cohort using Pearson’s Chi-Quadrat Test or Mantel–Haenszel test for linear association for our case-control-study. Nevertheless, women with both variants as genotype do have a tendency to develop a higher mammographic density. Conclusion While high Estrogen levels caused by increased gene expression by changes in the promoter-region in the Aromatase-gene, SNP rs10046 and rs700519 did not show any association with an increased susceptibility for developing breast cancer. Higher numbers of cases and other SNPs close to the gene loci we examined are inevitable to establish risk markers for breast cancer

Ziel war es, den Effekt von T auf die lokale Östrogensynthese zu messen. Es wurde die Sulfatase (STS) Expression und Aktivität in hormonabhängigen Brustkrebszellen (BT 474, MCF-7, HBL 100) ermittelt. Die Zellen wurden jeweils mit T inkubiert, und es erfolgte die direkte Messung oder nach 24 Stunden. Zusätzlich erfolgte die Inkubation der Zellen mit dem Aromataseinhibitor (A) alleine und in Kombination mit T. Die STS-Proteinexpression (dot-blot Analyse der Zelllysate), die STS mRNA Level (quantitative real time PCR) und die STS-Aktivität (Dünnschichtchromatographie mit radioaktivem markiertem Östronsulfat ([3H] E1S) wurden erfasst. Die STS Proteinexpression war signifikant höher war in den hochmalignen Zellen im Vergleich zu den anderen Zellen. Innerhalb der Zellreihen gab es keine Unterschiede. Unabhängig von der Zelllinie zeigte sich ein Absinken der STS Aktivität nach direkter und eine Steigerung nach 24 stündiger Inkubation, was zum Teil durch A abgemildert bzw. umgekehrt wurde.

With respect to the relationship between hormones and hair growth, the role of androgens for androgenetic alopecia (AGA) and hirsutism is best acknowledged. Accordingly, therapeutic strategies that intervene in androgen metabolism have been successfully developed for treatment of these conditions. Clinical observations of hair conditions involving hormones beyond the androgen horizon have determined their role in regulation of hair growth: estrogens, prolactin, thyroid hormone, cortisone, growth hormone (GH), and melatonin. Primary GH resistance is characterized by thin hair, while acromegaly may cause hypertrichosis. Hyperprolactinemia may cause hair loss and hirsutism. Partial synchronization of the hair cycle in anagen during late pregnancy points to an estrogen effect, while aromatase inhibitors cause hair loss. Hair loss in a causal relationship to thyroid disorders is well documented. In contrast to AGA, senescent alopecia affects the hair in a diffuse manner. The question arises, whether the hypothesis that a causal relationship exists between the age-related reduction of circulating hormones and organ function also applies to hair and the aging of hair.

The medical treatment of endometriosis needs to be optimized. Therapeutic management strategies of endometriosis-associated pain or recurrent disease is primarily aimed at downregulating the ovarian function or at antagonizing the effect of estrogen in ectopic endometrial implants. In this context, basic research is delivering powerful tools for the possible development of new, specific treatment modalities. Recently, aromatase overexpression has been detected in endometriotic tissue. Aromatase (p450arom) is responsible for conversion of C19 androgens to estrogen in several human tissues. Aromatase activity gives rise to local estrogen biosynthesis, which, in turn, stimulates prostaglandin E(2) production by upregulation of cyclooxygenase-2 (COX-2), thus establishing a positive feedback cycle. Another abnormality in endometriosis, i. e. the deficiency in 17 beta-hydroxysteroiddehydrogenase type-II (17 beta-HSD-Type-II) expression, impairs the inactivation of estradiol to estrone. In contrast to the eutopic endometrium, these molecular aberrations collectively favour accumulation of increasing amounts of local estradiol and prostaglandin E(2) in endometriosis. In several human cell lines, prostaglandin and estrogen concentrations are associated with proliferation, migration, angiogenesis, apoptosis resistance, and even invasiveness. Consequently, aromatase and COX-2 are promising new therapeutic targets. In summary, specific aromatase inhibitors (such as Letrozole, Anastrozol or Exemestan) or selective COX-2 inhibitors (e.g. Celecoxib, Rofecoxib) are of great interest to be studied in clinical trials in premenopausal woman with endometriosis to extend the spectrum of currently available treatment options.

The characterisation of mutations and polymorphisms has been improved within the last decade. In this respect, the possibilities to define genetic susceptibility to a number of diseases have been established in various populations. As to the field of obstetrics and gynecology, the analysis of polymorphisms may be useful to characterise populations of women carrying a significantly elevated risk of developing specific obstetric complications, e.g. thrombosis, preeclampsia, fetal growth restriction, and abortion. Also, specific aspects of hormone replacement therapy (HRT) in peri- and postmenopausal women may be addressed by the analysis of polymorphisms. Genetic susceptibility for thrombosis, myocardial infarction, changes in blood lipid homeostasis, breast cancer, and osteoporosis have been described in various association and intervention studies in the literature. At this time, however, the analysis of polymorphisms in the field of obstetrics and gynecology has to be considered experimental.

Im Rahmen dieser Arbeit sollte ein in vivo Kurzzeittest entwickelt werden, welcher hormonell wirksame Substanzen und ihre Auswirkungen auf Fische mit Hilfe von verschiedenen Endpunkten detektieren kann.Hierzu wurden juvenile Fettkopfbrassen (Pimephales promelas) über 21 Tage drei bereits bekannten endokrin aktiven Substanzen ausgesetzt. Bei diesen Substanzen handelte es sich um Ethinylestradiol (EE2), ein synthetisches Estrogen; um Methyltestosteron (MT), ein synthetisches Androgen und um Fadrozol (F), einen Aromatase-Inhibitor. Die Substanzen wurden in jeweils drei verschiedenen Konzentrationen direkt in Wasser gelöst und die Jungfische in dieser Testlösung exponiert.Bei den Endpunkten, handelte es sich um Vitellogenin (VTG)-Level im Ganzkörperhomogenat, ein Dotterprotein, das estrogen-abhängig synthetisiert wird und die VTG und Estrogen Rezeptor mRNA Expression. Zusätzlich wurden die exponierten Fische auf makroskopische Veränderungen untersucht.Bei der Exposition mit EE2 zeigte sich, dass die VTG-Konzentrationen im Homogenat signifikant anstiegen, allerdings konnte keine de novo Synthese der mRNA nachgewiesen werden. Eine Fadrozol Exposition hatte nach 21 Tagen keine deutliche Auswirkung auf die VTG Synthese in den Jungfischen. Bei den Versuchen mit MT konnte eine VTG de novo Synthese gezeigt werden. Dieser Befund ließ sich auf eine Aromatisierung des MTs in ein Estrogen, durch die endogene Aromatase in den Jungfischen zurückführen, was durch einen Kombinationsversuch mit F und MT bewiesen werden konnte. Bei dieser Prüfung konnte durch eine gemeinsame Exposition von F und MT ein vermännlichender Effekt des Androgens auf die Jungfische gezeigt werden.Zusammenfassend war es möglich estrogene Effekte anhand der VTG-Level aufzuzeigen, androgene Effekte konnten durch eine phänotypische Vermännlichung der Jungfische nachgewiesen werden. Insgesamt ist es durch diesen in vivo Kurzzeittest möglich Estrogene sicher zu detektieren.

In patients with metastatic breast cancer, cure is almost always an exception, irrespective of the therapy given. Thus the preservation of the quality of life or palliation in case of symptoms must be the principal goal. Only a small group of patients with their tumour showing a highly aggressive behaviour should be considered for primary chemotherapy. Aggressive tumour growth is then characterized by negative hormonal receptors, short disease-free interval and predominant visceral tumour growth. For all other patients there is not enough advantage to justify the clearly higher toxicity of a primary chemotherapy. This majority of patients with metastatic breast cancer can profit to a higher degree from hormonal treatment. Irrespective of the type of the hormonal therapy, the response rate is positively correlated with postmenopausal status, high hormonal receptor expression, al long disease-free interval, no previous adjuvant therapy and higher age. Advantages and problems of the various forms of hormonal manipulations are discussed. The recommended sequence of therapy represents only a handrail that needs to be adjusted carefully, according to the individual situation, the needs and expectations of the patient and in due knowledge of the toxicity of each hormonal substance. Combinations of different hormonal agents do not yield an additional benefit and should therefore be dropped for a sequential approach.

(10E,12Z)-9-Hydroxy-10,12-octadecadienoic Acid, an Aromatase Inhibitor from Roots of Urtica dioica Aqueous-methanolic extracts from roots of Urtica dioica were fractionated and tested for aromatase-inhibition activity. After derivatization the most active fraction was separated by GC/ MS. Besides common fatty acids (10E,12Z)-9-hydroxy-10,12-octadecadienoic acid (1) was identified as a main component and confirmed to be the active principle. Lipoxygenase from tomatoes was used for synthesis of (9S)-1, which caused also inhibition of aromatase. Stereo models of the compound showed some structural similarity to steroidal natural substrates of aromatase. For that reason (10E,12Z)-9-oxo-10,12-octadecadienoic acid (2) was also synthesized. It showed an about tenfold higher activity compared to 1.

In vitro incubations with slices of two normal human ovaries and 4-14C-pregnenolone as precursor were carried out to study the possibility of a direct influence of chlormadinone acetate on the metabolism of pregnenolone. In agreement with our previous studies the incubations of the ovary from the follicle phase of the cycle yields a profile of steroids different from that of the ovary from the corpus luteum phase of the cycle. Under the experimental condition chosen, the presence of enzymes of the steroidogenic pathway responsible for the synthesis of 17alpha-hydroxy-pregnenolone, DHA, androstenediol (basic metabolites) and androstenedione represents a characteristic profile of steroids of the ovaries from the follicle phase. After the addition of chlormadinone acetate to the incubation medium, the formation of androstenedione was inhibited, whereas the basic metabolites increased. The biosynthesis of progesterone, 17alpha-hydroxyprogesterone, estrone and estradiol represents a characteristic profile of steroids of the ovaries from the corpus luteum phase. After a addition of chlormadinone acetate to the incubation medium, the formation of this characteristic profile of steroids was inhibited. The influence of chlormadinone acetate on the two different profiles of steroids indicated, that chlormadinone acetate exerts an inhibitory effect on the 3beta-hydroxysteroid-dehydrogenase-delta5-4-isome