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Le Plasma riche en plaquettes (PRP) est une biothérapie autologue aujourd’hui largement utilisée en médecine régénérative pour ses propriétés prolifératives et cicatrisantes. Son action découle de la libération locale au-dessus des doses physiologiques de plusieurs facteurs de croissance et de protéines bioactives contenues dans les granules α des plaquettes.D’abord extrêmement populaire en chirurgie maxillo-faciale et parodontologie, le PRP a vu ses indications s’étendre à toute sorte de chirurgie. L’engouement grandissant autour de cette thérapie, des industriels se sont intéressés au marché et se sont mis à produire de nombreux dispositifs médicaux permettant de préparer du PRP. Combiné à l’absence de législation autour de sa pratique, une utilisation massive est apparue malgré le manque de preuves d’efficacité clinique, l’absence de recommandations et l’hétérogénéité des protocoles de préparation disponibles.Quelles sont aujourd’hui les principales indications cliniques reconnues du PRP ? Des recommandations d’usage ont-elles été formulées ?L’absence de réglementation initiale a-t-elle évolué ? Quelle est la législation en France concernant son utilisation ? En est-il de même chez nos voisins européens ? Comment la facturation de cette thérapie est-elle effectuée et pourrait-elle être amenée à évoluer ?Ce mémoire s’attache à répondre à ces différentes questions à la fois par une approche bibliographique faisant état de l’art actuel du PRP, par une étude de sa législation en France ainsi que dans plusieurs pays européens, et enfin par une réflexion au sujet de sa facturation actuelle sur le territoire Français et les perspectives d’évolution de prise en charge.

Stretch marks or Striae Distensae (SD) appear clinically as parallel streaks, perpendicular tothe lines of tension in the skin. SD evolves into two clinical phases, an initial inflammatoryphase or striae rubrae (SR) and a chronic phase or striae albae (SA). Fibroblasts appear toplay a key role in the pathogenesis of stretch marks. The results of studies explaining theetiology of SD are discordant, which is why we have tried to analyze the phenotype andfunction of fibroblasts in initial and old lesions and compare them with those in healthy skin(NS) of the same patient. Currently, there is no cure for SA. The non-ablative fractional lasercan achieve satisfactory results, but only on the initial lesions (SRs). The goals of this studywere: to describe and analyze fibroblasts from stretch marks and the differences between SRFand SAF compared to fibroblasts from healthy tissue from the same donor (NSF); to testinnovative treatments (sodium ascorbate and PrP) on cell cultures of fibroblasts from SA(SAF) in vitro; performing an in vivo study using PRP + nanofat combined treatment.Material and methodsIn order to characterize the SMF, the expression of alpha smooth muscle actin (alpha SMA)was investigated. Type I collagen expression was measured in SAF, before and after addingdifferent PrP concentrations and sodium ascorbate in the culture medium. The products testedwere: Standard PrP 1% and 5%, PrP concentrated 1% and 5%, sodium ascorbate (100μg / M),PrP standard 1% and 5% + sodium ascorbate (100μg / M), PrP concentrated 1% and 5% +sodium ascorbate (100μg / M), no treatment (control). For the in vivo study, the productstested were: PRP, PRP 20% + nanofat 80%, nanofat. Results were processed throughstatistical analysis models using the Student’s t-test.ResultsA significant increase in alpha SMA (P, Les Vergetures ou Striae distensae (SD) se manifestent cliniquement sous forme de stries parallèles, perpendiculaires aux lignes de tension de la peau. Les SD évoluent en deux phases cliniques, une phase inflammatoire initiale ou striae rubrae (SR) et une phase chronique ou striae albae (SA). Les fibroblastes semblent jouer un rôle clé dans la pathogenèse des vergetures. Les résultats des études expliquant l’étiologie des SD sont discordants, c’est pourquoi nous avons essayé d’analyser le phénotype et la fonction des fibroblastes dans des lésions initiales et anciennes, et les comparer à ceux de la peau saine (PS) du même patient. Actuellement, il n'y a pas de traitement curatif pour les SA. Le laser fractionné non ablatif permet d’obtenir des résultats satisfaisants, mais seulement sur les lésions initiales (les SR). Les buts de cette étude étaient : décrire et analyser les fibroblastes des vergetures et les différences entre les fibroblastes issues des SR et des SA en comparaison aux fibroblastes de tissus sain du même donneur ; tester des traitements innovants (ascorbate de sodium et PrP) sur des cultures cellulaires de fibroblastes issues des SA in vitro ; la réalisation d’une étude in vivo utilisant la combinaison de PRP + nanofat.

Stretch marks or Striae Distensae (SD) appear clinically as parallel streaks, perpendicular tothe lines of tension in the skin. SD evolves into two clinical phases, an initial inflammatoryphase or striae rubrae (SR) and a chronic phase or striae albae (SA). Fibroblasts appear toplay a key role in the pathogenesis of stretch marks. The results of studies explaining theetiology of SD are discordant, which is why we have tried to analyze the phenotype andfunction of fibroblasts in initial and old lesions and compare them with those in healthy skin(NS) of the same patient. Currently, there is no cure for SA. The non-ablative fractional lasercan achieve satisfactory results, but only on the initial lesions (SRs). The goals of this studywere: to describe and analyze fibroblasts from stretch marks and the differences between SRFand SAF compared to fibroblasts from healthy tissue from the same donor (NSF); to testinnovative treatments (sodium ascorbate and PrP) on cell cultures of fibroblasts from SA(SAF) in vitro; performing an in vivo study using PRP + nanofat combined treatment.Material and methodsIn order to characterize the SMF, the expression of alpha smooth muscle actin (alpha SMA)was investigated. Type I collagen expression was measured in SAF, before and after addingdifferent PrP concentrations and sodium ascorbate in the culture medium. The products testedwere: Standard PrP 1% and 5%, PrP concentrated 1% and 5%, sodium ascorbate (100μg / M),PrP standard 1% and 5% + sodium ascorbate (100μg / M), PrP concentrated 1% and 5% +sodium ascorbate (100μg / M), no treatment (control). For the in vivo study, the productstested were: PRP, PRP 20% + nanofat 80%, nanofat. Results were processed throughstatistical analysis models using the Student’s t-test.ResultsA significant increase in alpha SMA (P, Les Vergetures ou Striae distensae (SD) se manifestent cliniquement sous forme de stries parallèles, perpendiculaires aux lignes de tension de la peau. Les SD évoluent en deux phases cliniques, une phase inflammatoire initiale ou striae rubrae (SR) et une phase chronique ou striae albae (SA). Les fibroblastes semblent jouer un rôle clé dans la pathogenèse des vergetures. Les résultats des études expliquant l’étiologie des SD sont discordants, c’est pourquoi nous avons essayé d’analyser le phénotype et la fonction des fibroblastes dans des lésions initiales et anciennes, et les comparer à ceux de la peau saine (PS) du même patient. Actuellement, il n'y a pas de traitement curatif pour les SA. Le laser fractionné non ablatif permet d’obtenir des résultats satisfaisants, mais seulement sur les lésions initiales (les SR). Les buts de cette étude étaient : décrire et analyser les fibroblastes des vergetures et les différences entre les fibroblastes issues des SR et des SA en comparaison aux fibroblastes de tissus sain du même donneur ; tester des traitements innovants (ascorbate de sodium et PrP) sur des cultures cellulaires de fibroblastes issues des SA in vitro ; la réalisation d’une étude in vivo utilisant la combinaison de PRP + nanofat.

Different fields in plastic and aesthetic surgery have evolved in recent years including the transfer and injection of autologous adipose tissue. The first clinical data was presented without any real scientific support. The purpose of this thesis is to improve this technic by adding scientific evidence. There are two questions to consider: 1) Do adipose tissues have different characteristics according to their anatomical origin, and should certain regions be preferred for autografting? 2) Are there autologous growth factors to stimulate engraftment, proliferation and differentiation of grafted cells? The first part of this work consisted in analyzing the adipose tissue according to the fat depot. For this purpose, we analyzed the adipose tissues from 2 anatomical sites: the knee and the chin. The rational of this choice comes from a technical reason and a theoretical reason. Our results suggest that the two sites studied have different embryonic origins, and show that these two sites have a different molecular signature and functionality. The second part of the work deals with the in vitro effect of autologous human growth factors. on the proliferation and differentiation of human adipose stem cells (ASCs). For this purpose, we used platelet concentrates from blood samples, which can therefore be used in human therapeutic practice. It is the PRF (fibrin-rich platelet) and the PRP (platelet-rich plasma). The results of the study show that the presence of PRF or PRP in the culture medium allows a drastic increase in ASC proliferation of about 4 to 5 times. In contrast, the results show a partial inhibition of adipocyte differentiation, whatever the period and the time of contact. We analyzed the composition of different PRP sources and we identified the involvement of the TGFB pathway in the anti adipogenic effects of PRP. In contrast, the antiadipogenic effect was concomitant with the differentiation of ASCs towards myofibroblasts-like cells. In conclusion, this work allows us immediate clinical transposition using PRP during lipofilling. This work also makes it possible to highlight the probable difference in function of the adipocytes taken according to their original anatomical site. This likely has a consequence on the long term evolution of these adipose tissue grafts in case of a weight change., Différents domaines en Chirurgie Plastique et Esthétique ont évolué au cours de ces dernières années et notamment le transfert et injection de Tissu Adipeux autologue. Les premières données cliniques ont été présentées sans véritable appui scientifique. Cette thèse a pour objet de confirmer les données cliniques retrouvées et de permettre d’améliorer cette technique par des preuves scientifiques. Deux questions sont à considérer : 1) Le tissu adipeux a t-il selon son origine anatomique des caractéristiques différentes et certaines régions seraient-elles à privilégier lors d’une autogreffe ? 2) Existe t-il des facteurs de croissances autologues permettant de stimuler la prise de greffe, la prolifération et la différenciation des cellules greffées ? La première partie de ce travail a consisté à analyser le tissu adipeux en fonction du site de prélèvement. A cet effet, nous avons analysé le tissu adipeux provenant de 2 sites anatomiques : le genou et le menton. Le choix topographie découle d’une raison technique et d’une raison théorique. Nos résultats suggèrent que les deux sites étudiés ont des origines embryonnaires différentes, et montrent que ces deux sites présentent une signature moléculaire et une fonctionnalité différentes. La seconde partie porte sur l’effet in vitro de facteurs de croissances autologues humains. Nous avons analysé la prolifération et la différenciation de cellules souches adipogéniques (ASCs) humaines. Nous avons pour cela utilisé des concentrés plaquettaires issus de prélèvements sanguins autologues, et donc utilisables en pratique thérapeutique humaine. Il s’agit du PRF (plaquette riche en fibrine) et du PRP (plaquette riche en plasma). Les résultats de l’étude montrent que la présence de PRF ou de PRP dans le milieu de culture permet une augmentation drastique de la prolifération cellulaire d’environs 4 à 5 fois. A contrario, les résultats obtenus montrent un blocage partiel de la différenciation adipocytaire, quelque soit le moment et le temps de mise en contact. Nous avons alors étudié par quelle voie de blocage la différenciation était induit et avons montré l’implication de la voie du TGFB qui dans ces conditions de culture induit un blocage partiel de la différenciation des ASCs vers un adipocyte mature. Notre étude montre qu’en parallèle à l’effet antiadipogénique, la différenciation s’oriente vers des cellules myofibroblastes-like. Nous avons alors testé l’effet de l’ajout d’un inhibiteur du TGFB (SB431542) dans le milieu de culture et avons observé une relance de la différenciation cellulaire vers la voie adipogénique confirmant que le PRP a un effet antiadipogénique et promyofibroblastique. Par ailleurs, nous avons analysé la composition du PRP utilisé en dosant les taux de facteurs de croissance présents. En conclusion, ce travail permet de confirmer l’augmentation de la prolifération cellulaire des ASCs en présence de PRP autologue. Ceci nous permet donc une transposition clinique immédiate en utilisant en peropératoire l’association PRP et prélèvement de tissu adipeux lors d’un lipofilling. Ce travail permet également de mettre en lumière la probable différence de fonction des adipocytes prélevés en fonction de leur site anatomique d’origine. Ceci a probablement une conséquence sur l’évolution long terme de ces greffes de tissu adipeux en fonction d’une modification pondérale.

Introduction : la prise en charge de l’arthrose du poignet résistante au traitement médical fait appel à des chirurgies enraidissantes et non conservatrices. La recherche d’une alternative thérapeutique peu invasive représente un challenge médico-chirurgical dans la prise en charge de cette pathologie. L’injection intra-articulaire de micrograisse autologue associée à du plasma autologue enrichi en plaquettes (PRP) pourrait être une alternative prometteuse. Nous présentons les résultats préliminaires de l’injection intra-articulaire d’un mélange de « Micrograisse et PRP » autologues dans le poignet arthrosique.Matériel et Méthodes : l’étude AMIPREP, actuellement en cours, est un essai de phase I-IIa, prospectif, monocentrique, non comparatif, réalisé en ouvert. Il est prévu d’inclure 12 patients souffrant d’arthrose du poignet, de stade 3 ou 4 selon la classification de Kellgren et Lawrence, résistante au traitement médical et responsable de douleurs > 4 selon l’Échelle Visuelle Analogique (EVA). Quatre millilitres d’un mélange de « Micrograisse et PRP » sont injectés dans l’articulation radio-carpienne sous anesthésie locale au bloc opératoire. La tolérance évaluée par la survenue d’évènements indésirables jusqu’à un mois post-injection est le critère de jugement principal. L’EVA, les scores fonctionnels DASH et PRWE, la force et les amplitudes articulaires sont également évalués à chaque visite de contrôle jusqu’à 12 mois de recul. La régénération cartilagineuse est évaluée à 12 mois par la variation de la surface de section du cartilage mesurée sur une IRM 3T haute résolution.Résultats : les 3 premiers patients ont été inclus et traités. Aucun effet indésirable grave et/ou inattendu n’a été recensé à 1 mois de l’injection. Une diminution des douleurs et une amélioration des scores fonctionnels DASH et PRWE ont été observées à 3 mois de recul chez les deux premiers patients injectés. Conclusion : l’injection intra-articulaire d’un mélange de « Micro graisse et PRP » autologues est une procédure innovante, simple, peu invasive, et nécessitant une courte période de convalescence. Les résultats préliminaires des premiers patients sont favorables.Les résultats de tolérance et d’efficacité de ce traitement devront être complétés à l’issue de l’injection des 12 patients prévus et jusqu’à un an de suivi post-injection.

La perte de cheveux, ou alopécie, est une pathologie qui touche plusieurs millions d’individus. A l’officine, les étiologies les plus fréquentes sont les alopécies d’origine androgéniques (touchant 80% des hommes et 40% des femmes), les formes réactionnelles et iatrogènes. Cette pathologie peut provoquer d’importantes répercussions psychologiques et sociales et est souvent vécue comme une perte d’identité avec un sentiment de honte et dans les cas les plus extrêmes, un motif de discrimination professionnelle. La place du pharmacien d’officine est indispensable. Il est le professionnel de santé le plus accessible, grâce au service de proximité, sans rendez-vous et gratuit. Il est alors quotidiennement confronté à ce problème et le patient n’hésite pas à venir demander conseils et les possibles soins qui peuvent s’offrir à lui. La complexité de cette pathologie repose sur le fait qu’il n’existe pas de réponse thérapeutique satisfaisante : les traitements médicamenteux, bien qu’actifs lors de l’utilisation, s’accompagnent, pour la plupart, d’un effet rebond à l’arrêt et d’effets indésirables importants ; et les traitements chirurgicaux permettent de traiter l’alopécie de manière définitive, mais cette méthode invasive et onéreuse n’est souvent pas une solution accessible. Pour les patients ayant tout tenté et se sentant dans l’impasse thérapeutique, il existe peut-être un nouveau traitement : l’injection autologue de concentrés plaquettaires ou Plasma Riche en Plaquettes (PRP). C’est un procédé de médecine régénérative qui consiste à réinjecter les plaquettes capables de libérer un grand nombre de facteurs de croissance qui favorisent la prolifération, la différenciation et l’angiogenèse. Ces injections pourraient stimuler la croissance des cheveux et ainsi agir favorablement sur la densité, la chute et la repousse. A travers ce manuscrit, nous allons explorer, dans une première partie, la physiopathologie des différentes alopécies ainsi que les différentes techniques disponibles pour leurs prises en charge. La deuxième partie du document est consacrée au PRP et son intérêt dans cette indication à travers un travail de méta analyse d’essais cliniques contrôlés.

Dans cet article, l’auteur élabore et met en relief les mécanismes d’une migration forcée des Juifs polonais par le gouvernement polonais en Israël entre 1968 et 1971. L’auteur a interviewé plus d’une douzaine de Juifs polonais nés avant et après la Shoah. Les interviews ont été faits devant et derrière la caméra. Quelques-uns d’entre eux ont été intégrés dans le documentaire « There is no return to Egypt » (45 minutes) ainsi que des scènes de la vie quotidienne des migrants. Les analyses et les évaluations tirées des résultats des interviews par l’auteur se basent sur l’œuvre de Salman Akhtar, un psychologue spécialiste de la migration.L’analyse a révélé d’une part, que le chagrin et la rancœur liés à la perte de la patrie et la confrontation avec un processus douloureux d’intégration dominent jusqu’à aujourd’hui chez les « soixante-huitards », d’autre part, que le statut privilégié des migrants juifs européens en Israël, la période favorable d’immigration et le niveau d’éducation du plus grand nombre contribuent à une image de soi positive et à une bonne intégration de ce groupe de migrants dans le projet sioniste. In this paper the author works out and illustrates the mechanisms of a forced migration of the Polish-Jewish migration cohort into the State of Israel between the years 1968 and 1971. The author interviewed over a dozen Polish Jews, born before and after the Shoah, in front and behind the camera. Some of the statements, together with scenes from everyday life of the migrants, were used in his 45-minute documentary film "There is no return to Egypt". The findings from the interviews were analysed and evaluated on the basis of the work of Salman Akhtar, a psychological researcher in the field of migration. The analysis reveals that, on the one hand, grief and anger about the loss of the Polish homeland and having to face a painful process of integration are prevailing among the ’1968ers’ up to date. On the other hand, the previliged status as European Jewish migrants in Israel, the favorable period of immigration and the educational background of the cohort all contribute to the positive self-perception and the sociological success as migrant group in the Zionist project.

Exosomes are microvesicles secreted by many cells upon fusion of multivesicular endosomes with plasma membrane. They allow the intercellular transfer of proteins, lipids and RNA. They are especially well described in the immune system, where they induce an anti-tumoral response by the exchange of MHC molecules between dendritic cells. We are interested in the role exosomes could play in the nervous system. We first described that primary neurons do secrete exosomes as they differenciate. Then we showed that mature neurones also secrete exosomes. Neuronal exosomes contain sub-units of glutamate receptors (GluR1 and 2), and the endogenous prion protein (PrPc). We also showed that the C-terminal part of the tetanus toxin can be released in association with neuronal exosomes. Finally, we demonstrated that neuronal exosomal release is regulated by synaptic glutamatergic activity, and by a Ca2+ influx. Using a cell line as a model, we studied the exosomal release of APP (amyloid precursor protein) and its derivates according to mutations found in familial forms of Alzheimer disease. We showed that exosomes contain the amyloidogenic fragment of APP C99. It has also been shown that exosomes from a cell line overexpressing APP contain a fraction of the secreted Aβ, involved in Alzheimer disease. Neuronal exosomes could play a crucial role in the normal physiology of synapses, by allowing the exchange of neurotransmitter receptors between neurons. They could also propagate pathogenic proteins involved in neurodegenerative disorders such as Alzheimer and Creutzfeldt-Jacob diseases.; Les exosomes sont des microvésicules sécrétées par les cellules après la fusion des endosomes multivésiculaires avec la membrane plasmique. Ils permettent le transfert intercellulaire de protéines, mais aussi de lipides et d'ARN. Ils sont particulièrement étudiés dans le système immunitaire, car ils permettent la mise en route d'une réponse anti-tumorale par l'échange de molécules du CMH entre cellules dendritiques. Nous nous sommes intéressés au rôle que les exosomes pourraient jouer dans le système nerveux. Au cours de ma thèse, nous avons d'abord fait la démonstration que les neurones en cours de différentiation sécrètent des exosomes. Nous avons ensuite montré que les neurones matures en sécrètent également. Les exosomes neuronaux contiennent certaines sous-unités des récepteurs au glutamate (GluR1 et 2), et la protéine endogène du prion (PrPc). Nous avons également découvert que la partie C-terminale de la toxine du tétanos peut être sécrétée par voie exosomale. Enfin, nous avons mis en évidence que la sécrétion des exosomes par les neurones est directement reliée à l'activité synaptique glutamatergique, et à une entrée de Ca2+. A partir d'une lignée cellulaire, nous avons étudié la sécrétion des fragments de clivage de l'APP (amyloid precursor protein) en fonction de deux mutations retrouvées dans des cas familiaux de la maladie d'Alzheimer. Nous avons montré que les exosomes contiennent le fragment amyloïdogénique C99, et une autre étude a révélé qu'ils contiennent une partie du peptide Aβ sécrété. Les exosomes neuronaux pourraient donc jouer un rôle dans la physiologie normale de la synapse, en permettant l'échange de récepteurs aux neurotransmetteurs entre neurones. Ils pourraient également être impliqués dans la propagation de protéines pathogènes dont certaines sont mises en cause dans des maladies neurodégénératives comme Alzheimer et Creutzfeldt-Jacob.

Prion diseases or transmissible subacute spongiform encephalopathies (TSSE) are fatal neurodegenerative conditions, for which there is so far no known treatment or prevention. Promising results achieved in the field of Alzheimer disease give however some reasons to hope that individuals with the disease or individuals at risk might benefit from similar immunoprophylactic or immunotherapeutic approaches. This article reviews current knowledge on the immunology of prion diseases. In the first section we describe the known routes of prion lymphoinvasion from the periphery to the sites of neuroinvasion. The second section focuses on the mediators of innate immunity mobilized within the central nervous system and on their ambivalent role in the pathogenesis of the disease. The final section describes the vaccine approaches aimed at stimulating adaptive immunity and at creating, in association with the mediators of the innate immune system, a defence barrier against prions., Les maladies à prions ou encéphalopathies spongiformes subaiguës transmissibles (ESST) sont des affections neurodégénératives fatales, contre lesquelles il n’existe à ce jour aucun traitement ou prophylaxie connu. Des résultats encourageants obtenus dans la maladie d’Alzheimer, laissent toutefois espérer que des approches immunoprophylactiques ou immunothérapeutiques puissent un jour être mises en oeuvre chez des sujets atteints d’ESST ou chez des sujets à risque. Ce mémoire vise à faire le point dans ce domaine. Dans une première partie, nous décrivons les voies connues de la lymphoinvasion dans les formes acquises de maladie, voies à travers lesquelles les prions progressent au sein même du système lymphoïde, depuis la périphérie jusqu’au sytème nerveux central. Dans une deuxième partie, nous mettons l’accent sur les agents de l’immunité innée mobilisés dans le système nerveux central et sur leur rôle ambivalent dans la pathogénie des ESST. Enfin, la dernière partie est consacrée aux approches vaccinales destinées à stimuler l’immunité adaptative et à construire, en collaboration avec le système immunitaire inné, une barrière défensive contre l’agent pathogène., Carnaud Claude, Bachy Véronique. Perspectives immunoprophylactiques et immunothérapeutiques contre les maladies à prions. In: Bulletin de l'Académie Vétérinaire de France tome 159 n°1, 2006. pp. 15-29.

Les Encéphalites Spongiformes Subaiguës Transmissibles telles la maladie de Creutzfeldt-Jakob ou l'Encéphalopathie Spongiforme Bovine sont des pathologies fatales et transmissibles, en particulier à l'homme. Son agent infectieux nommé " prion " par Stanley B. Prusiner dès 1982 est longtemps passé au travers des différents moyens d'exploration classiques. Dans ce travail, nous nous attachons à montrer les différentes avancées que l'utilisation des souris transgéniques ont apporté à l'étude du prion et des différentes E.S.S.T.