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Introduction: L’AMP-activated protein kinase (AMPK), senseur de l’état énergétique des cellules, est activée lorsque le taux d’AMP cellulaire augmente. Cette kinase est également activée lors du traitement du diabète par Metformine. Cette activation diminue la sécrétion d’insuline, et augmente l’apoptose des cellules béta. Le but de ce travail a été d’étudier l’activation d’AMPK dans les cellules INS1E à faible concentration de glucose. Matériels et méthodes: Des cellules INS1E ont été exposées durant de courtes périodes (15min à 2h) à différentes concentrations de glucose dans du RPMI 1640. La production de superoxyde a été évaluée grâce à la sonde fluorescente intracellulaire DHE. Les taux d’ATP, ADP et AMP ont été mesurés par HPLC. L’état de phosphorylation d’AMPK, de ses kinases (CaMKK et LKB1) et de ses cibles (acétyl-CoA carboxylase, ACC et p70S6K, substrat de mTOR) a été étudié par western-blot. Résultats: Les cellules INS1E produisent du superoxyde dès le premier quart d’heure d’incubation à bas glucose (1mM), et ce durant au moins 1 heure. Cette production de superoxyde est réduite par un inhibiteur du Complexe I de la chaine respiratoire mitochondriale (roténone), mais pas par l’inhibition du complexe III ou des NADPH oxydases. Les rapports ATP/ADP et ATP/AMP ne sont modifiés qu’après 90minutes à bas glucose alors que la phosphorylation d’AMPK, comme celle de sa cible directe, ACC, double après 15minutes, et augmente parallèlement à la production de superoxyde. La phosphorylation de p70S6K est inverse de celle d’AMPK. De plus, la phosphorylation d’AMPK est diminuée par un antioxydant (MnTBAP), qui n’altère pas les taux d’ATP, ADP ou AMP, et est reproduite par de faibles concentrations d‘H2O2 L’inhibition de CaMKK, ne modifie pas la phosphorylation d’AMPK. La phosphorylation de LKB1 (Ser307 ou Ser428) ne semble ni suivre ni précéder celle d’AMPK, et reste inchangée par un antioxydant. Conclusion: Dans les cellules béta, l’AMPK peut être régulée par le superoxyde d’origine mitochondriale, de manière indépendante de l’AMP, et cette régulation ne passe ni par LKB1, ni par la CaMKK. La voie d’activation d’AMPK par le superoxyde reste donc à déterminer. [Copyright &y& Elsevier]

Introduction: Les radicaux d’oxygène et d’azote (ROS et RNS) produits en réponse aux cytokines sont impliqués dans la mort des cellules β des îlots de Langerhans lors du diabète de type 1 et de type 2. Cependant, la nature et les sources de ces radicaux ne sont pas clairement identifiées. Les protéines découplantes UCP2 pourraient jouer un rôle dans la production radicalaire par les cellules β et dans l’apoptose. Le but de ce travail était donc de déterminer la provenance des radicaux produits par les cellules β en réponse aux cytokines, ainsi que l’effet d’une surexpression d’UCP2 sur cette production. Matériels et méthodes: Des cellules INS ont été incubées durant 5 h ou 24 h en présence de cytokines. La production de ROS/RNS a été déterminée grâce à des sondes intracellulaires sensibles à H2O2 et ONOO- (CM-DCFHDA 5 μm) ou au NO(DAF-FM 5 μm). Les sites de production des radicaux ont été identifiés par l’utilisation de différents inhibiteurs. Des cellules surexprimant de manière inductible UCP2 ont également été utilisées afin de déterminer le rôle de cette protéine dans la production radicalaire et dans la viabilité cellulaire en réponse aux cytokines. Résultats: La production de ROS/RNS mesurée par CM-DCFHDA des cellules exposées aux cytokines durant 5 h et 24 h était 3,3±0,5 et 4,4±0,7 fois plus élevée, respectivement, que celle des cellules contrôles (±SEM, n=7 et 11). Cette production radicalaire était réduite par l’inhibition des NOSynthases (–60 %) et du complexe III de la chaîne respiratoire mitochondriale (– 24 %). L’inhibition de la NAD (P) H-oxydase et du complexe I n’avaient pas d’effet. L’augmentation de la production du NO induite par les cytokines était confirmée par une sonde spécifique. La surexpression d’UCP2 diminuait la production de ROS/RNS induite par les cytokines. Cette diminution était confirmée par une moindre induction de iNOS, et une augmentation de la viabilité cellulaire. Conclusion: Dans les cellules β, les cytokines induisent essentiellement une production de NO et de peroxyde d’hydrogène produit par le complexe III de la chaîne respiratoire mitochondriale. La surexpression d’UCP2 réduit cette production radicalaire par un mécanisme qui reste à déterminer. [Copyright &y& Elsevier]

This year we present three papers on recent advances in paediatrics from the fields of neonatology, adolescent medicine and Duchenne muscular dystrophy. 1. Recent studies question the application of pure oxygen for neonatal reanimation and suggest that lower concentrations or even air may be more adequate for the reanimation of most newborns. 2. Bullying is an aggressive, repetitive and intentionally blessing behaviour. It is observed mainly at school and the victims are usually children with a weak personality or children suffering from chronic diseases. The doctor's role is to detect this behaviour and to help protect the victims. 3. The respiratory surveillance of patients with Duchenne muscular dystrophy is the corner-stone of their management. An algorithm allows to time correctly the initiation of non-invasive ventilation and to insure as long as possible a good life quality.

This article summarizes the medical progress achieved in 2 frequent and 2 rare pathologies: 1. Cryptorchidism should be operated around 12 months of age and hormonal treatment abandoned in order to maintain fertility and avoid development of testicular tumors. 2. For the treatment of streptococcal pharyngitis oral cephalosporins for 4 to 5 days are equivalent to a Penicillin treatment of 10 days. 3. Thanks to carvedilol (a beta-blocker agent), levosimendan (a calcium sensibiliser) and nesiritide (an analog to the natriuretic peptide) a new hormonal approach to cardiac failure is possible. 4. Corticosteroids allow to improve quality of live and life expectancy in Duchenne muscular dystrophy, provided treatment starts early and a multidisciplinary approach is assured.