Search

Indutseeritud pluripotentsed tüvirakud (iPS) on pluripotentsete tüvirakkude tüüp, mis on reprogrammeeritud tüvirakkude sarnaseks täiskasvanud somaatilistest rakkudest. iPS rakud sarnanevad küll embrüonaalsetele tüvirakkudele, kuid nende kasutamisel ei teki eetilisi probleeme. Käesolevas bakalaureusetöös antakse ülevaade rakkude reprogrammeerimisest indutseeritud pluripotentseteks rakkudeks, reprogrammeerimiseks kasutatavatest meetoditest ja iPS rakkude kasutamisvõimalustest meditsiinis. Antud lõputöö on osa suuremast cGEM projektist, mille üheks eesmärgiks on arendada välja integratsioonivaba iPS rakuliini loomise võimekus. Eksperimentaalses osas testitakse Epstein-Barr viirusega immortaliseeritud lümfoblastoidse B-raku liini (LCL) reprogrammeerimist iPS rakkudeks varem publitseeritud protokolli järgi, kasutades OCT4, MYC, KLF4 ja SOX2 transkriptsioonifaktoreid.

Inimese embrüonaalsed tüvirakud on pluripotentsed, mis tähendab, et neist on võimalik saada kõigi kolme lootelehe rakke. Lisaks on võimalik neid tänapäeval indutseerida diferentseeruma spetsiifiliste kemikaalide ja kommertsiaalsete söötmetega. Arüülsüsivesinike retseptor (AHR) on transkriptsioonifaktor, mis on enim tuntud kui keskkonnakemikaalide kahjutustaja, kuid üha enam näib sel olevat ka regulatoorne roll erinevates füsioloogilistes protsessides. Hiire puhul on näidatud, et embrüonaalsete tüvirakkude varajasel diferentseerumisel Ahr-i ekspressioon suureneb. Seetõttu püstitati antud bakalaureusetöös eesmärgiks uurida, kas AHR-i ekspressioon muutub ka inimese embrüonaalsete tüvirakkude H9 rakuliini varasel diferentseerumisel. Saadud tulemustest leiti, et vastupidiselt hiire rakkudele langeb AHR-i ekspressioon inimese embrüonaalsete tüvirakkude varasel diferentseerumisel.