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Se conoce bien que diferentes sistemas de uso y manejos de suelos afectan la abundancia, la actividad y la composición de la comunidad microbiana del suelo. En este trabajo se estudió el comportamiento de las poblaciones bacterianas cultivables y, en particular, las bacterias solubilizadoras de P (BSP) en muestras de suelo provenientes de un ensayo de larga duración con diferentes secuencias de cultivo. Los resultados obtenidos ponen en evidencia que el desmonte y el uso agrícola posterior luego de 11 años generó una disminución de la población de bacterias cultivables en general, y de las bacterias solubilizadoras de P en particular, con respecto al suelo prístino. Se obtuvieron aislamientos con una alta eficiencia de solubilización de P de los suelos provenientes de las diferentes rotaciones. Estos aislamientos eficientes se clasificaron taxonómicamente mediante análisis 16S RNA como pertenecientes a los géneros Bacillus, Paenibacillus, Pseudomonas y Xanthomonas. En particular, la caracterización de los sobrenadantes de cultivos de los aislamientos Pseudomonas koreensis y Paenibacillus pabuli mostraron que son productoras de ácidos orgánicos. Los ensayos de inoculación combinada de estas dos cepas sobre plantas de maíz en cámara de cultivo pusieron de manifiesto un efecto sinérgico sobre la promoción del crecimiento de esta especie. Los resultados aquí presentados sugieren que si bien las poblaciones de BSP son más numerosas en suelos prístinos, determinadas rotaciones de cultivos a largo plazo favorecen el incremento de bacterias solubilizadoras más eficientes, un aspecto que debería tenerse en cuenta al diseñar futuras estrategias de búsqueda de potenciales bioinoculantes.

Nitrogen is the second most critical factor for crop production after water. In this study, the beneficial rhizobacterium Pseudomonas protegens Pf-5 was genetically modified to fix nitrogen using the genes encoding the nitrogenase of Pseudomonas stutzeri A1501 via the X940 cosmid. Pf-5 X940 was able to grow in L medium without nitrogen, displayed high nitrogenase activity and released significant quantities of ammonium to the medium. Pf-5 X940 also showed constitutive expression and enzymatic activity of nitrogenase in ammonium medium or in nitrogen-free medium, suggesting a constitutive nitrogen fixation. Similar to Pseudomonas protegens Pf-5, Pseudomonas putida, Pseudomonas veronii and Pseudomonas taetrolens but not Pseudomonas balearica and Pseudomonas stutzeri transformed with cosmid X940 showed constitutive nitrogenase activity and high ammonium production, suggesting that this phenotype depends on the genome context and that this technology to obtain nitrogen-fixing bacteria is not restricted to Pf-5. Interestingly, inoculation of Arabidopsis, alfalfa, tall fescue and maize with Pf-5 X940 increased the ammonium concentration in soil and plant productivity under nitrogen-deficient conditions. In conclusion, these results open the way to the production of effective recombinant inoculants for nitrogen fixation on a wide range of crops.