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The objective of the work was to evaluate the production of lignocllulolytic enzymes produced by Trametes polyzona HHM001 during its growth on corn leaf residues. Two particle sizes (PS) (PS8 and PS12), two levels of aeration (1 vvm and 0 vvm), as well as the height of the substrate in the production of lignocellulolytic enzymes were tested. The enzymatic activities of Laccase (Lcc), Lignin peroxidase (LiP), and Manganese peroxidase (MnP) were favored under aerated conditions (1 vvm). The enzymatic activity of Lcc was the most favored, with 80 Activity Units (AU)/mL, compared to the culture without aeration, in which 40 AU/mL was obtained. The production of xylanases (Xyl) and cellulases (Cel) were not influenced by aeration under the tested conditions. The results indicated that the particle size has more effect on enzyme production than the presence or absence of air, with a particle size of 8 where the best levels of enzymatic activity were observed. It was observed that the height of the substrate in the fermentation column strongly affects the activity of ligninolytic enzymes and not of the hydrolytic; at 5 cm, the highest ligninolytic activity was detected, where aeration favors oxidative conditions. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Se determinó el efecto de bocashi (B, compost fermentado) y fertilizantes de liberación lenta (SRFs) sobre la colonización micorrízica (MC), la actividad de invertasa, celulasa, fosfatasa ácida (AcP) y alcalina (AlP) y el rendimiento de maíz en suelos de terraza (TS) y valle (VS) en Oaxaca, México. Se utilizó un diseño completamente al azar con siete tratamientos y cuatro repeticiones: control (C) sin fertilización; fertilización convencional (CF) (90-46-00 NPK); B; SRF1 (Multigro 6®, 21-14- 10 NPK); SRF2 (Multigro 3®, 24-05-14 NPK); B+SRF1; B+SRF2. El porcentaje más alto de colonización micorrízica fue con CF en VS, y con SRF2 en TS. La mayor longitud de micelio extraradical se registró con B, B+SRF1 y CF en VS, y con B+SRF1 en TS. En ambos suelos, B incrementó el número de esporas. La actividad más alta de AcP fue con B y SRF2 en VS, y con B+SRF1 y B+SRF2 en TS. La actividad más alta de AlP se detectó con B+SRF1 y CF en VS y con C en TS. La actividad más alta de invertasa se encontró con B+SRF1, SRF2 y CF en VS y con B en TS. El rendimiento de grano incrementó solamente con B en VS. La interacción significativa tipo de suelo × tratamiento de fertilización, para la mayoría de las propiedades biológicas analizadas, sugiere que la respuesta de la colonización micorrízica y de la actividad enzimática a la fertilización, estuvo determinada por el tipo de suelo. Bocashi sola o combinada con SRFs puede mejorar la fertilidad biológica del suelo en cultivos de maíz.

This study investigated the enzyme activities of two (2) microbial organisms in the fore- and mid- gut regions in the gastrointestinal tract, in Archarchatina marginata, a giant Land snail from the region of West Africa. Microbial analysis was conducted to verify the microbial organisms present in different parts of the snail gut while enzyme assay was performed to determine the type and level of enzyme activities taking place in the mouth and stomach regions. Results revealed the different bacteria inhabiting the regions of the alimentary tract in Archarchatina marginata. Azobacter chroococcum and Pseudomonas syringae, the two bacteria isolate that were further investigated, effectively digested starch, cellulose and casein. However, P. syringae exhibited the highest enzymatic activities for cellulase (8.72µmol/min/ml at 18h) and amylase (9.05 µmol/min/ml at 24h) while Azobacter chroococcum exhibited the highest enzymatic activity for protease (17.18 µmol/min/ml at 24h) during incubation. Consequently, the study validated amylolytic, cellulolytic and proteolytic bacterial activities within the digestive tract of A. marginata. This knowledge is informative for research and an aid to snail farmers in the choice of feeding materials for these land snails. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

El mucílago de nopal contiene polisacáridos que pueden influir en la actividad enzimática del suelo. Se emplearon dos suelos, arenoso (63%) y arcilloso (67%), donde se probaron tres dosis de mucílago de nopal; T80 20, T40-60, T10-90 (porcentaje de mucílago-agua), más el testigo solo con agua. Los tratamientos se colocaron en una cámara de ambiente controlado a 25 ºC y humedad de 40%. Se tomaron muestras a los 7, 14 y 21 días, después de aplicado el mucílago. Se valoró la actividad de las enzimas: amilasa, celulasa, lipasa e invertasa, que participan en el ciclo del carbono para saber como afecta el mucílago de nopal en ellas. A los 21 días en el suelo arcilloso, con el tratamiento T80-20 hubo mayor actividad de: amilasa (91 mg de azúcares reductores 10 g 1 de materia seca 24 h-1), lipasa (133.33 nM de 4 metil umbeliferona g 1 de materia seca 24 h-1) e invertasa (5.53 mg de glucosa 10 g-1 de materia seca 24 h-1), y la celulasa en el T40-60 presentó la mayor actividad (72.66 µg de glucosa g-1 de materia seca 24 h 1). En el suelo arenoso a los 21 días, el T80-20 fue el que presentó mayor actividad lipasa (60.66 nM de 4 metil umbeliferona g-1 de materia seca 24 h-1), el T40 60: invertasa (1.86 mg de glucosa 10 g-1 de materia seca 24 h-1) y celulasa (33.66 µg de glucosa g 1de materia seca 24 h-1), y el T10-90 amilasa (43.66 mg de azúcares reductores 10 g-1 de materia seca 24 h-1). El mucílago de nopal incrementó la actividad enzimática (amilasa, celulasa, lipasa e invertasa) en los dos tipos de suelo.

The Brazilian savanna, known as the Cerrado, is a biome with a high degree of endemism, with the potential to house many microorganisms suitable for biotechnological exploitation, especially fungi. The Cerrado soil, which is usually acidic, is a favorable environment for the growth of fungi capable of degrading lignocellulosic materials. The aim of the present study was to isolate cellulolytic filamentous fungi native to the Cerrado. Samples of soil and leaf litter were collected in three points of Cerrado State Park, located in the South of Brazil, during the rainy season in September 2014. Samples were stored in sterile plastic bags, transported at room temperature and kept at 4 °C for three days. Filamentous fungi were isolated by successive inoculations in PDA (maintained at 30 °C). Cellulase activity was tested in CMC (carboxymethyl cellulose) medium and lipase activity was assessed in medium containing phenol red and tween 20 (incubated at 37 °C), and in medium supplemented with Rhodamine B (kept at 30 °C). We isolated a total of 28 strains, 25 produced cellulase, detected with lugol in strains grown in CMC medium. The isolates were identified morphologically (color, form of growth) and by sequencing of the 18S rRNA region, with both techniques producing congruent results. One strain of Colletotrichum boninense and one strain of Trichoderma sp., both isolated from soil samples, presented the highest cellulolytic activity. All strains exhibited lipolytic activity, with enzyme production and activity influenced by temperature. The present study revealed new strains of known filamentous fungi that can be applied in biomass degradation. These strains are suitable for optimization of culture conditions, which could lead to the economic feasibility of the process. Rev. Biol. Trop. 66(1): 237-245. Epub 2018 March 01. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Como estrategia para alcanzar mayor rendimiento en el procesamiento de pulpa de mora y al mismo tiempo extraer los esteviolglucósidos presentes en hojas deshidratadas de estevia (Stevia rebaudiana Bertoni), fueron evaluados 5 preparados enzimáticos durante la elaboración de un jugo de mora. Se evaluaron dos niveles de las variables consideradas: concentración de enzima (100 y 200ppm) y tiempo de incubación (15 y 30min) en dos medios de extracción: agua y pulpa de mora (a 50 y 35°C, respectivamente). La eficiencia del tratamiento fue analizado a través de la determinación de sólidos insoluasbles en suspensión, sólidos solubles y cuantificación por HPLC de esteviósido y rebaudiósido A. En base al análisis estadístico aplicado se pudo afirmar que no existe ningún efecto, ni en el tiempo de incubación, ni en la concentración del complejo enzimático, sobre los valores resultantes de sólidos solubles totales, pero si en los SIS, del preparado comercial ®Pectinex Ultra AFPL. En relación a la extracción de esteviolglucósidos, tanto en los ensayos de extracción en jugo de mora como en agua, hay diferencias estadísticamente significativas al valorar el binomio enzima*tiempo. Las concentraciones más altas de esteviolglucósidos fueron alcanzadas empleando 200ppm de ®Pectinex Clear durante 30 segundos. A pesar de ello, los valores obtenidos son similares a las concentraciones cuantificadas en la muestra testigo lo que corrobora que la difusión de estos compuestos de las hojas al medio, ocurre principalmente por la solubilidad de los mismos, más que por la hidrólisis originada por las enzimas especificas empleadas en el estudio.

En este artículo describimos un nuevo método enzimático para consolidar la celulosa del papel. Este método consiste en la síntesis de la celulosa con una enzima hidrolítica: la celulasa. Ésta actúa como una sintetasa, consolidando el papel cuando es mezclada en una solución orgánica de solvente/tampón (4:1) en presencia de un sustrato (β-cellobiosyl fluoride). Para mejorar el tratamiento añadimos un gel de agar-agar con todos los reactivos necesarios. Para observar el estado de las fibras antes y después del tratamiento, realizamos test mecánicos y fotografías de microscopía electrónica de barrido. Se observó que el proceso de consolidación casi consigue recuperar el estado físico inicial de las fibras así como su resistencia al desgarre y alargamiento.

Para pitaya amarilla (Acanthocereus pitajaya) se ha encontrado que el ablandamiento excesivo de la cáscara contribuye al deterioro del fruto, al aplicar diferentes técnicas de conservación en fresco. Dado que tanto la celulasa como la xilanasa se han vinculado con el ablandamiento de la cáscara de frutos, este trabajo se basó en la búsqueda de las mejores condiciones de extracción y medida de actividad de celulasa y xilanasa. El mejor sistema de extracción fue buffer fosfato 20 mM, NaCl 0,5 M, pH 7,0. Para la medida de actividad de celulasa es necesario incubar durante 60 min a 37 ºC, con un volumen de extracto enzimático crudo de 30 µL, empleando buffer acetato 100 mM a pH 5,0; los valores de constante aparente de Michaelis Menten (KM aparente) y velocidad máxima (VMÁX) fueron 0,279 mg/mL y 0,00014 nmol glucosa/min, respectivamente. Para determinar la actividad de xilanasa se establecieron 15 min de tiempo de incuba-ción, a 50 ºC, empleando 30 µL de extracto enzimático crudo a pH 4,0 (buffer acetato 100 mM); los valores de KM aparente y VMÁX para xilanasa fueron 0,073 mg/mL y 0,0011 nmol glucosa/min, respectivamente.

Se midió el efecto de la adición de una pectinasa y una celulasa comerciales sobre la digestibilidad in vitro de la materia orgánica de dos variedades de frijol común (Phaseolus vulgaris L.), una negra (Brunca) y una roja (Chirripó). Se mantuvieron condiciones fijas de pH (entre 6,3 y 6,4), tiempo (60 min) y temperatura (40° C) y se ensayaron tres concentraciones de cada enzima: 0,25%, 0,50% y 1,0% m/m. Los incrementos en la digestibilidad in vitro del frijol negro fueron 6,9%; 9,5% y 12,3% (p0,05) en la aceptación general de los frijoles tratados enzimáticamente (negro o rojo) y los frijoles sin tratar.Effect of pectinase and cellulase addition on in vitro digestibility of common bean (Phaseolus vulgaris). Effect of commercial pectinase and cellulase addition on in vitro digestibility of two common bean (Phaseolus vulgaris) varieties, black (Brunca) and red (Chirripó), was measured. Constant conditions of pH (6,3-6,4), time (60 min), and temperature (40°C) were held, and three enzyme concentrations were tested: 0,25%, 0,5% and 1,0% m/m. In vitro digestibility increases for black beans were 6,9%; 9,5% and 12,3% (p0,05) in general acceptance of enzyme treated beans (black or red) or nontreated beans was noted.

The effect of Bokashi (B, a fermented compost), slow-release fertilizers (SRFs) and their combined application on mycorrhizal colonization (MC), soil invertase, cellulase, acid (AcP) and alkaline (AlP) phosphatases activities and maize (Zea mays L.) yield was investigated in terrace (TS) and valley (VS) soils in Oaxaca, Mexico. A complete randomized design, seven fertilizer treatments and four replications were used: unamended control (C); conventional fertilization (90-46-00 NPK) (CF); B; SRF1 (Multigro 6®, 21-14-10 NPK); SRF2 (Multigro 3®, 24-05-14 NPK); B+SRF1; B+SRF2. Highest root colonization percentage: CF in VS, and SRF2 in TS. Highest extraradical mycelium length: B, B+SRF1, CF in VS, and B+SRF1 in TS. In both soils, B increased the spore number. Highest AcP activity: B, SRF2 in VS, and B+SRF1, B+SRF2 in TS. Highest AlP activity: B+SRF1, CF in VS, and C in TS. Highest invertase activity: B+SRF1, SRF2, CF in VS, and B in TS. Grain yield only increased with B in VS. The significant interaction soil type × fertilizer treatment for the majority of the biological soil properties analyzed suggests that MC and soil enzyme activity response to fertilization was influenced by soil type. Bokashi, alone or combined with SRFs improves biological soil fertility in maize fields. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Knowledge regarding the enzymatic machinery of fungi is decisive to understand their ecological role. The species of the genus Geastrum are known to grow extremely slowly in pure culture, which makes it difficult to evaluate physiological parameters such as enzyme activity. Qualitative assays were performed on isolates of four species of this genus, showing evidence of laccase, cellulase, pectinase, amylase and lipase activity and suggesting that a wide range of carbon sources can be exploited by these species. For the first time in this genus, quantitative assays verified manganese peroxidase activity (up to 0.6mU/g) in 30-day old cultures, as well as laccase, β-glycosidase and β-xylosidase activities., (Copyright © 2016 Asociación Argentina de Microbiología. Publicado por Elsevier España, S.L.U. All rights reserved.)