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Cumulative loss of habitat and long-term decline in the populations of the Lesser Prairie-Chicken (Tympanuchus pallidicinctus) have led to concerns for the species' viability throughout its range in the southern Great Plains. For more efficient conservation past and present distributions of genetic variation need to be understood. We examined the distribution of mitochondrial DNA (mtDNA) variation in the Lesser Prairie-Chicken across Kansas, Colorado, Oklahoma, and New Mexico. Throughout the range we found little genetic differentiation except for the population in New Mexico, which was significantly different from most other populations. We did, however, find significant isolation by distance at the rangewide scale (r = 0.698). We found no relationship between haplotype phylogeny and geography, and our analyses provide evidence for a post-glacial population expansion within the species that is consistent with the idea that speciation within Tympanuchus is recent. Conservation actions that increase the likelihood of genetically viable populations in the future should be evaluated for implementation. Key words: DNA, genetic diversity, Lesser Prairie-Chicken, mitochondrial DNA, prairie grouse, Tympanuchus pallidicinctus. La perdida de habitat y la disminucion poblacional de largo plazo sufrida por Tympanuchus pallidicinctus ha conducido a preocupaciones en torno a la viabilidad de la especie a lo largo de su distribucion geografica en la parte sur de las Grandes Planicies. Para que la conservacion sea mas eficiente, es necesario entender la distribucion pasada y presente de la variacion genetica. Examinamos la distribucion de la variacion en el ADN mitocondrial (ADNmt) en T. pallidicinctus a traves de Kansas, Colorado, Oklahoma y Nuevo Mexico. Encontramos poca diferenciacion genetica a lo largo de la distribucion, excepto para la poblacion de Nuevo Mexico que fue significativamente diferente de la mayoria de las otras poblaciones. Sin embargo, encontramos un patron significativo de aislamiento por distancia a la escala de toda la distribucion (r = 0.698). No encontramos relacion entre la filogenia de haplotipos y la geografia. Ademas, nuestros analisis proveen evidencia de una expansion poblacional post-glacial de la especie, lo que concuerda con la idea de que la especiacion en Tympanuchus es reciente. Es necesario evaluar la posible implementacion de acciones de conservacion que incrementen la probabilidad de contar con poblaciones geneticamente viables en el futuro. DOI: 10.1525/cond.2010.090150