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Abstract: Carbapenems have generally been considered the pharmacotherapy of last resort for managing infections associated with health services caused by multidrug-resistant gram-negative bacteria. However, it is worrisome that this situation is being threatened worldwide with the appearance of bacterial strains that resist these antibiotics due to the production of novel B-lactamases with direct carbapenem-hydrolyzing activity (carbapenemases). This study was performed to characterize KPC carbapenemase-producing Enterobacteriaceae isolated from a hospital in the Zulia region during 2009-2013. KPC carbapenemase production was detected in 423 strains of carbapenem-resistant Enterobacteriaceae (36.29%). The most affected patients were male adults from the intensive care unit. The most common site of colonization was the respiratory tract, while rectal carrier status was rare. These KPC carbapenemases were detected mainly in K. pneumoniae, K. oxytoca, E. coli and E. cloacae. Most isolates showed multidrug-resistance and an extensively drug-resistant phenotype. The majority of the phenotypic methods were effective for the detection of KPC producers in Enterobacteriaceae isolates and the presence of blaKPC gene confirmed that the Carbapenemase circulating in Enterobacteriaceae strains in this region are the KPC type. Resumen: Los antibióticos carbapenemes representan generalmente los últimos recursos para el tratamiento de infecciones asociadas a los servicios de salud producidas por bacterias Gram negativas multiresistentes. Es preocupante que esta situación esté siendo amenazada en todo el mundo por la aparición de cepas con resistencia a estos antibióticos debido a la producción de Carbapenemasas. Observando este panorama, se caracterizaron tanto fenotípica como genotípicamente las cepas de Enterobacteriaceae productoras de Carbapenemasas tipo KPC aisladas en un Hospital de la región Zuliana, durante 2009 a 2013. Fueron detectadas 423 cepas de Enterobacteriaceae resistentes a los carbapenemes debido a la producción de estas enzimas (36,29%). Los pacientes más afectados fueron adultos de sexo masculino procedentes de la Unidad de Terapia Intensiva. El sitio de colonización más frecuente fue el tracto respiratorio, mientras que el estado de portador rectal fue poco frecuente. Las KPC fueron detectadas principalmente en K. pneumoniae, K. oxytoca, E. coli y E. cloacae, siendo multidrogo-resistentes y extensamente drogo-resistentes. La mayoría de los métodos fenotípicos utilizados permitieron confirmar la presencia de Carbapenemasas y la detección del gen blaKPC confirmó que las carbapenemasas que circulan en cepas de Enterobacteriaceae de nuestra región son del tipo KPC.

Carbapenems have generally been considered the pharmacotherapy of last resort for managing infections associated with health services caused by multidrug-resistant gram-negative bacteria. However, it is worrisome that this situation is being threatened worldwide with the appearance of bacterial strains that resist these antibiotics due to the production of novel B-lactamases with direct carbapenem-hydrolyzing activity (carbapenemases). This study was performed to characterize KPC carbapenemase-producing Enterobacteriaceae isolated from a hospital in the Zulia region during 2009-2013 in terms of their geno- and phenotypes. KPC carbapenemase production was detected in 423 strains of carbapenem-resistant Enterobacteriaceae (36.29%). The most affected patients were male adults from the intensive care unit. The most common site of colonization was the respiratory tract, while rectal carrier status was rare. These KPC carbapenemases were detected mainly in K. pneumoniae, K. oxytoca, E.coli and E. cloacae. Most isolates showed multidrug-resistance and an extensively drug-resistant phenotype. The majority of the phenotypic methods were effective for the detection of KPC producers in Enterobacteriaceae isolates and the presence of blaKPC gene confirmed that the Carbapenemase circulating in Enterobacteriaceae strains in this region are the KPC type.

Abstract: There are no test standarizaded for the antifungal susceptibility of dermatophytes. The aim of this study is to probe the well diffusion technique as antifungal susceptibility test for dermatophites. One hundred species of dermatophytes were isolated and identified (74 Trichophyton rubrum, 18 Trichophyton mentagrophytes, 1 Trichophyton tonsurans, 5 Microsporum canis and 2 Epidermophyton floccosum).in the Medical Micology Departament of TMI. The antifungal sensitivity of the isolates of the dermatophytes to the drugs was carried out using the well diffusion technique. The antifungal agents tested were griseofulvin, terbinafine, itraconazole and fluconazole. Results were interpreted according to NCCLS breakpoints. The inoculum suspension was standardized by weight measurement. Agar Staib was considered the most suitable, because 97% of the isolates grew on it. This is the first time the inoculum suspension of dermatophytes is standardized by weight measurement. Terbinafine was found to be the most effective drug, followed by Griseofulvin and Itraconazole. Fluconazole were not found to be effective. Resumen: No existe hasta los momentos una prueba estandarizada para realizar la susceptibilidad antifúngica de los dermatofitos. El objetivo de este estudio fue implementar la técnica de los pozos de difusión para el estudio de la susceptibilidad de los dermatofitos. Se utilizaron un total de 100 aislados de dermatofitos (74 Trichophyton rubrum, 18 Trichophyton mentagrophytes, 1 Trichophyton tonsurans, 5 Microsporum canis y 2 Epidermophyton floccosum) provenientes de muestras clínicas aisladas e identificadas en la Sección de Micología Médica, IMT. Se empleó la técnica de los pozos de difusión con los siguientes antimicóticos: Griseofulvina, Terbinafina, Fluconazol e Itraconazol. Se aplicaron los criterios de interpretación acordados por la NCCLS. El inóculo, se estandarizó utilizando el peso como unidad. El medio Agar Staib demostró ser el más adecuado, al obtenerse un mejor crecimiento de los aislados en un 97 %. Esta es la primera vez, que se utiliza el peso como medida para cuantificar el inóculo en los dermatofitos. La mayor sensibilidad se evidenció ante Terbinafina seguido de Griseofulvina e Itraconazol. No se demostró sensibilidad alguna ante el Fluconazol. Sin embargo, se requieren más estudios en los cuales se relacione la susceptibilidad “in vitro” con los resultados “in vivo”.

Abstract: Stenotrophomonas maltophilia, previously known as Xanthomonas maltophilia and Pseudomonas maltophilia, is a Gram-negative rod, and a non fermentator of glucose, recognized as a causal agent of diverse hospital infections, it also shows resistance to multiple antimicrobial agents. The objective of the present study was to identify and to characterize phenol-type, clinical isolates of S. maltophilia, as well as to establish an in vitro activity pattern of different antimicrobials. The bacterial strains were isolated in the Bacteriology Laboratory at the General Hospital in Cumaná, and were identified through conventional biochemical tests, as well as using the commercial galleries of API ID32GN. The MIC of the anti-microbes was determined by dilution in Mueller Hutton agar following CLSI norms. Pheno-typically, 24 strains were identified of S. maltophilia. The identification was 100% coincident with both classification techniques. The uniform pattern was maintained for the isolates except for the oxidase test, where 17 (70.83%) were positive and 7 (29.17%) negative. The results of the identification test showed the presence of 5 phenotypes in which the typical pattern of the microorganism (phenotype I, 14 isolates) prevailed. The strains showed 100% resistance to imipenem, cefepime, amikacin and nalidixic acid, 95.83% to cefotaxime, ceftazidime and ampicillin- sulbactam, 91,67% to ceftriaxone and ciprofloxacin, and 75.00% to piperacillin-tazobactam, all of which showed more susceptibility to trimetoprim sulfamethoxazole (91.67%), levofloxacin (75%) and rifampin (95.83%). Resumen: Stenotrophomonas maltophilia, anteriormente conocida como Xanthomonas maltophilia y Pseudomonas maltophilia es un bacilo Gram negativo no fermentador de la glucosa, reconocido como agente causal de diversas infecciones nosocomiales, además de presentar resistencia a múltiples agentes antimicrobianos. El objetivo del presente estudio fue identificar y caracterizar fenotípicamente cepas clínicas de S. maltophilia, así como también establecer un patrón de actividad in vitro a diferentes antimicrobianos. Los aislados bacterianos, fueron suministrados por el laboratorio de Bacteriología del Hospital de Cumaná para ser identificadas a través de pruebas bioquímicas convencionales y de un método comercial empleando las galerías API ID32GN. Se determinó la CMI de los antimicrobianos mediante la técnica de dilución en agar Mueller Hinton siguiendo las normas del CLSI. Se identificaron fenotípicamente 24 cepas de S. maltophilia. La identificación fue 100% coincidente con ambas técnicas. Se mantuvo un patrón uniforme entre las cepas excepto para oxidasa donde 17 (70,83%) fueron positivas y 7 (29,17%) negativas. Los resultados de las pruebas de identificación mostraron la presencia de 5 fenotipos prevaleciendo el patrón típico del microorganismo (fenotipo I, 14 aislados). Las cepas mostraron 100% de resistencia a Imipenem, cefepime, amikacina y ácido nalidixico, 95,83% a cefotaxima, ceftazidima y ampicilina sulbactam, 91,67% a ceftriaxona y ciprofloxacina y 75% a piperacilina tazobactam, siendo más susceptibles a trimetoprim sulfametoxazol (91,67%), levofloxacina (75%) y rifampicina (95,83%).

Abstract: In order to determine the patterns of antimicrobial susceptibility and beta-lactamase production, 60 patients with sexually transmitted diseases were studied from the University Hospital “Dr. Manuel Nuñez Tovar” jurisdiction in Monagas State. Thirty-five N. gonorrhoeae strains (58,30%) were isolated, and they were grouped according to antimicrobial susceptibility and beta-lactamase production. A high resistance rate to penicillin (94.24%) and to tetracycline (97.14%) was detected. Out of the 33 N. gonorrhoeae strains resistant to penicillin, 15 (45.45%) did not produce beta-lactamase. On the other hand, in vitro sensitivity of N. gonorrhoeae to cefepime, cefoxitin and ceftriaxone was 97.14%, 94.29%, and 80.50%, respectively. In relation to the susceptibility to ofloxacin, it was found that 97,14% of the strains of N. gonorrhoeae showed sensitivity to this antimicrobial. treatment. Resumen: Con el propósito de determinar los patrones de susceptibilidad antimicrobiana y producción de beta-lactamasa, se estudiaron 60 pacientes procedentes del área de enfermedades de transmisión sexual del Hospital Universitario “Dr. Manuel Nuñez Tovar”, estado Monagas. Se aislaron 35 cepas (58,30%) de N. gonorrhoeae, las cuales se agruparon de acuerdo a la susceptibilidad antimicrobiana y producción de beta-lactamasa, observándose una elevada tasa de resistencia a la penicilina (94,29%) y a la tetraciclina (97,14%). De las 33 cepas de N. gonorrhoeae resistentes a la penicilina, 15 (45,45%) fueron no productoras de beta-lactamasa. La sensibilidad in vitro de N. gonorrhoeae frente al cefepime, cefoxitin y ceftriaxone fue de 97,14%, 94,29% y 80,50%, respectivamente. Con relación a la susceptibilidad a la ofloxacina, se encontró que el 97,14% de las cepas de N. gonorrhoeae mostraron sensibilidad a este antimicrobiano.

ABSTRACT: Thirty (30) samples coming from 27 HIV infected and non-infected patients were studied to assess antimycotic susceptibility and karyotype of Cryptococcus neoformans clinical isolates obtained in Venezuela. Identification of each sample was performed by standard methods, variety classification was based on growth in CGB agar medium, serotyping was performed by slide agglutination with five specific sera. Antifungal susceptibility was performed for amphotericin B, fluconazole, itraconazole and 5-flucytosine, according to NCCLS recommendations and karyotype study was done through contour clamped homogenous field gel electrophoresis (CHEF). Twenty-seven (27) isolates of C. neoformans var. neoformans were obtained, all being of serotype A, and three (3) isolates of C. neoformans var. gattii, two (2) belonging to serotype B and one (1) to serotype C. Strains of this series were highly susceptible to the antifungal agents tested. Electrophoretic Karyotype (EK) analysis showed 13 profiles, presenting between 7 and 9 chromosomes and the molecular weight variation was 450/565 and 2200 kb. No significant differences were observed between the minimum inhibitory concentrations (MIC), nor was it possible to associate EK profiles among the isolates of HIV and non-HIV patients. Further clinical and laboratorial investigations are mandatory to improve the understanding of C. neoformans in Venezuela. RESUMEN: Para evaluar la susceptibilidad a los antimicóticos y el cariotipo de aislados clínicos de Cryptococcus neoformans obtenidos en Venezuela, fueron estudiadas 30 muestras, procedentes de 27 pacientes con y sin infección por VIH. A cada una se le hizo identificación por métodos clásicos, estudio de la variedad a través del medio CGB, serotipifícación por aglutinación con 5 antisueros, pruebas de susceptibilidad a anfotericina B, fluconazol, itraconzaol y 5-fluorocitosina, según la metodología del NCCLS y estudio del cariotipo por electroforesis de campo pulsado usando el sistema "contour-clamped homogeneous field gel electrophoresis" (CHEF). Se obtuvieron 27 aislados de C. neoformans var. neoformans, siendo todos serotipo A, y 3 C. neoformans var. gattii, perteneciendo 2 al serotipo B y 1 al serotipo C. Las cepas de esta serie fueron altamente susceptibles a las drogas estudiadas. El análisis del cariotipo mostró 13 perfiles, que presentaron entre 7 y 9 cromosomas y variación de peso molecular de 450/565 y 2200 kb. No se observaron diferencias significativas entre las concentraciones inhibitorias mínimas, ni fue posible asociar perfiles de cariotipo de las muestras según la presencia o ausencia de infección por VIH. Se necesita un mayor número de cepas de diferentes áreas geográficas para la mejor caracterización de C. neoformans en Venezuela.