Метою роботи було визначення наявності рекомбінантного протеїну ESAT6Ag85B(TMD)-6His із Mycobacterium tuberculosis та вивчення рівнів його накопичення у рослинах ряски ( Lemna minor L.). ESAT6 та Ag85B є секреторними протеїнами M. tuber culosis і запропоновані для створення нових вакцин проти туберкульозу. Отримані раніше шляхом опосередкованої Agrobacterium rhizogenes трансформації рослини ряски містили злиту послідовність генів: esxA-fbpB TMD. Для визначення рівнів накопичення туберкульозних антигенів у рослинах було одержано поліклональні мишачі антитіла шляхом імунізації лабораторних тварин рекомбінантним протеїном ESAT6-Ag85B(TMD)-6His, експресованим в E. coli. Методом вестерн-блот виявлено рекомбінантний туберкульозний антиген ESAT6-Ag85B(TMD)-6His в екстрактах із трансгенних рослин L. minor. Визначено рівень накопичення антигену, який становив 0,4-0,5 мкг протеїну на 1 г сирої маси рослин. Також вивчено можливість зберігання та ступінь деградації туберкульозного антигену в ліофілізованому рослинному матеріалі, що зберігався впродовж 1,5 року без охолодження чи заморожування. Отримані рослини ряски L. minor, які синтезують рекомбінантний антиген, аналог секреторних протеїнів ESAT6 та Ag85B M. tuberculosis, можуть бути об’єктом досліджень під час створення їстівних рослинних вакцин.Целью работы было определение наличия рекомбинантного протеина ESAT6-Ag85B (TMD)-6His из Mycobacterium tuberculosis и изучение уровней его накопления в растениях ряски ( Lemna minor L.). ESAT6 и Ag85B являются секреторными протеинами M. tuberculosis и предлагаются для создания новых вакцин против туберкулеза. Полученные ранее путем опосредованной Agrobacterium rhizogenes трансформации растения ряски содержали слитую последовательность генов: esxA fbpB TMD. Для определения уровней накопления туберкулезных антигенов в растениях были получены поликлональные мышиные антитела путем иммунизации лабораторных животных рекомбинантным протеином ESAT6Ag85B(TMD)-6His, экспрессированном в E. coli. Методом вестерн-блот выявлен рекомбинантный туберкулезный антиген ESAT6Ag85B(TMD)-6His в экстрактах из трансгенных растений L. minor. Определен уровень накопления антигена, соответствующий 0,4-0,5 мкг протеина на 1 г сырой массы растений. Также изучена возможность сохранения и степень деградации туберкулезного антигена в лиофилизированном растительном материале, который хранился в течение 1,5 года без охлаждения или замораживания. Полученные растения ряски, синтезирующие рекомбинантный антиген, аналог секреторных протеинов, ESAT6 и Ag85B M. tuberculosis, могут быть объектом исследований при создании съедобных растительных вакцин.Determination of the presence of the recombinant fusion protein (ESAT6-Ag85B(TMD)-6His) and its accumulation level in duckweed plants ( Lemna minor L.) was the aim of the research. ESAT6 and Ag85B are secretory proteins of Mycobacterium tuberculosis and are considered as potential candidates for development of new vaccine against tuberculosis. Transgenic duckweed plants were obtained previously by Agrobacterium rhizogenes -mediated transformation and possessed fusion gene sequence esxA-fbpB TMD. Specific polyclonal antibodies were produced in immunized mice to identify levels of accumulation of tuberculosis antigens in plants. Recombinant antigen used for mice immunization was obtained in our laboratory by expression in E. coli. Western blot analysis revealed the recombinant tuberculosis antigen ESAT6-Ag85B(TMD)-6His in extracts from transgenic L. minor plants. The level of accumulation of the protein corresponds to 0.4-0.5 μg protein per 1 g of fresh weight of plant. Additionally, the ability to save of recombinant protein was investigated in lyophilized transgenic plants after 1.5 year storage. Constructed duckweed plants accumulating a recombinant analogue of M. tuberculosis secretory proteins can be used for development of plant-based edible vaccines.