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Introduction Le pronostic du melanome metastatique a beaucoup evolue ces dernieres annees avec le developpement des therapies ciblees et des inhibiteurs de check-points. Nous rapportons une reponse clinique remarquable aux anti-MEK chez une patiente presentant une fusion RAF1. Observations Il s’agit d’une patiente de 65 ans presentant un melanome metastatique avec des localisations secondaires ganglionnaires, sous-cutanees et ileales. Les mutations BRAF, NRAS et KIT etaient negatives et un essai therapeutique ouvert de phase 3 associant un anti-PD-L1 (atezoluzimab 840 mg j1–j15) et un anti-MEK (cobimetinib, 60 mg par jour j1–j21) chez les patients non mutes BRAF etait propose en premiere ligne. A j10 du debut du traitement, une regression quasi complete des nodules sous-cutanes etait constatee. A j15, la patiente etait hospitalisee pour une pneumopathie interstitielle de grade 4 attribuee a l’atezoluzimab d’evolution favorable mais entrainant la sortie de l’essai therapeutique. Elle etait ensuite traitee en 2e et 3e ligne par anti-PD1 et par chimiotherapie avec une progression clinique notable. Devant l’absence d’alternative therapeutique, un screening moleculaire large FoundationOne etait realise. Une fusion de RAF1 etait mise en evidence. Un traitement par anti-MEK (trametinib) a demi-dose etait debute sous surveillance stricte notamment sur le plan pulmonaire. La reponse clinique et scanographique apres deux mois de traitement etait spectaculaire avec une remission partielle (−35 % selon les criteres RECIST) de sa maladie avec un recul de 3 mois. La tolerance du traitement etait excellente sans recidive de la pneumopathie interstitielle. Discussion La reponse clinique rapide des cibles sous-cutanees sous l’association anti-PD-L1 et anti-MEK nous faisait deja suspecter une sensibilite aux anti-MEK. Le programme Experience FoundationOne® (partenariat CHU-Roche®) propose une analyse par sequencage nouvelle generation (NGS) grâce a un panel de 315 genes et de 28 introns, ceci afin d’etablir un profil genomique de la tumeur. Ce large panel peut etre d’un grand interet pour la recherche de nouvelles cibles therapeutiques notamment en cas d’echec des traitements standards. La fusion du gene RAF1 (ou CRAF) est un evenement rare aboutissant a une hyperactivite de la proteine kinase Raf1. Il en resulte une activation constitutionnelle de la voie des MAP-kinases. Sur le plan moleculaire, les fusions impliquant le gene BRAF comme celles impliquant le gene CRAF aboutissent a une activation de la voie des MAP-kinases et constituent donc des cibles therapeutiques. Conclusion Nous decrivons le troisieme cas de fusion du gene RAF1 permettant une efficacite surprenante des anti-MEK sur le melanome metastatique. La voie des MAP-kinases est une cible therapeutique de predilection dans le traitement des melanomes. Le developpement de panels larges de screening moleculaire permet d’augmenter l’arsenal therapeutique et la survie des patients atteints de melanome metastatique.

Introduction Le syndrome de Sezary (SS) est un lymphome T cutane caracterise par un clone T dominant circulant et une infiltration cutanee associee a une erythrodermie et un prurit. Les mecanismes controlant la migration entre les compartiments sanguin et cutane sont mal connus, expliquant le manque de traitements efficaces. Des etudes anterieures nous ont amenees a etudier l’expression et la fonction du chimiorecepteur CXCR4 dans le SS. Materiel et methodes Sur une cohorte de 21 patients atteints de SS, nous avons quantifie l’expression de CXCR4 a la surface des cellules de Sezary circulantes par cytometrie multicouleur, et compare ces resultats aux donnees cliniques des patients. Les proprietes migratoires des cellules en reponse au chimioattractant de CXCR4 (SDF-1) ont ete etudiees in vitro, en presence d’un antagoniste de CXCR4 (AMD3100) ou d’un anticorps (Ac) anti-CXCR4. Le role de CXCR4 dans la survie des cellules de Sezary a ete explore par test d’apoptose-necrose apres traitement des cellules par AMD3100 ou Ac anti-CXCR4. Enfin, nous avons construit un shARN inhibant l’expression de CXCR4 afin de transduire des cellules de Sezary de patients et de confirmer son role fonctionnel in vivo apres injection chez la souris. Resultats La majorite des cellules de Sezary des 21 patients exprimaient fortement CXCR4 (pourcentage median de cellules CXCR4+ = 96,9 ± 9,6 %), et ce de facon homogene entre les patients. Le niveau d’expression de CXCR4 etait independant des principaux facteurs pronostiques de la maladie. L’AMD3100 et l’Ac anti-CXCR4 bloquaient significativement la migration des cellules de Sezary en reponse a SDF-1 (taux d’inhibition respectifs = 90,6 ± 5,6 % et 60,8 ± 16,4 %, p Discussion Le role fonctionnel de CXCR4 que nous decrivons sur les cellules de patients n’a pas ete valide avec la lignee HUT78 (SS). Ceci suggere que CXCR4 pourrait avoir des conformations differentes selon les cellules ce qui affecterait sa fonction. La validation de ces resultats dans un modele de xenogreffe de cellules de Sezary modifiees avec un shARN inhibant l’expression de CXCR4 permettra de determiner si son inhibition est une strategie therapeutique impactant la survie et/ou la dissemination des cellules tumorales. Conclusion La forte proportion de cellules CXCR4+ dans le SS et la preuve fonctionnelle de son implication dans la migration cellulaire et la survie des cellules in vitro font de CXCR4 une cible therapeutique potentielle.

Introduction L’immunotherapie est une avancee majeure dans le traitement du melanome metastatique mais la recherche de biomarqueurs predictifs de son efficacite est necessaire. Une charge mutationnelle elevee serait un marqueur de bonne reponse aux anti-PD-1. Le programme Experience FoundationOne® (partenariat CHU-Roche®) propose un sequencage de nouvelle generation par NGS avec un panel de 315 genes et de 28 introns, afin de determiner le profil genomique de la tumeur. Nous rapportons l’analyse de la charge mutationnelle (tumor mutational burden [TMB], exprimee en nombre de mutations par megabase d’ADN sequence) et la reponse a l’immunotherapie de patients inclus dans 2 services hospitalo-universitaires. Materiel et methodes Etude prospective de la TMB et de la reponse aux immunotherapies dans 32 cas de melanomes sequences par NGS avec le test FoundationOne® a partir d’un prelevement inclus en paraffine. La TMB etait consideree comme basse entre 1 et 5 mutations par megabase (Muts/Mb), intermediaire entre 6 et 19 et eleve a partir de 20 Muts/Mb. Les cas selectionnes etaient prioritairement ceux non mutes pour les cibles theranostiques habituelles (BRAF, NRAS et KIT), afin d’identifier de nouvelles possibilites therapeutiques. Resultats Les melanomes de 32 patients âges de 24 a 85 ans ont ete inclus dans le programme d’octobre 2017 a mai 2018. Trois sequencages (9 %) etaient non contributifs du fait de la mauvaise qualite de l’ADN extrait. Parmi les 8 patients avec une TMB elevee (28 % de la cohorte analysable), 5 recevaient un traitement par anti-PD-1 avec une reponse partielle ou complete pour 4 (80 %) (TMB [25–60]) et une stabilite pour un (TMB = 20 Muts/Mb). Tous les melanomes choroidiens (n = 3) avaient une TMB basse et n’ont repondu ni aux anti-PD-1 ni a l’anti-CTLA-4. Un patient avec une TMB basse (melanome acrolentigineux ; 2 Muts/Mb) a eu une reponse spectaculaire et immediate a l’ipilimumab apres avoir progresse sous anti-PD-1 et radiotherapie ( Tableau 1 ). Discussion Nos donnees confirment que la TMB est tres variable dans le melanome et sont en accord avec Goodman et al. qui ont analyse retrospectivement la TMB de 1638 patients et montre une association etroite et independante entre reponse a l’immunotherapie et TMB elevee versus intermediaire et basse (58 % vs 20 %, p = 0,0001). Dans notre cohorte un seul patient avec une TMB basse a presente une reponse spectaculaire a l’ipilimumab. Il avait recu prealablement une radiotherapie sur une masse ganglionnaire axillaire qui pourrait avoir favorise de cette reponse. Conclusion L’analyse de la TMB a permis de mettre en evidence des profils differents chez nos patients avec des reponses differentes a l’immunotherapie. Dans le contexte actuel ou le choix therapeutique de la 1re ligne est primordial en particulier chez les patients BRAF sauvage, l’analyse de la TMB pourrait etre un indicateur dans la decision du clinicien, a developper en pratique courante.

Introduction La mutation activatrice du gene MYD88 L265P est un evenement frequent dans le lymphome cutane B diffus a grandes cellules de type jambe (LCBDGC-TJ), rapporte jusque dans 69 % des cas. Les particularites cliniques et evolutives associees a cette mutation n’ont pas ete etudiees notamment sa valeur pronostique, ce qui fait l’objet de ce travail. Patients et methodes Soixante et un patients de la cohorte SURVIELEG avec du materiel biologique exploitable pour l’analyse moleculaire ont ete identifies, provenant de 19 centres francais du Groupe francais d’Etude des lymphomes cutanes, diagnostiques entre 1988 et 2010. La recherche de la mutation MYD88 L265P etait effectuee sur l’ADN tumoral extrait a partir des biopsies cutanees par une technique de PCR en temps reel, avec detection allele specifique par sondes type TaqMan®. Les donnees cliniques au diagnostic, le traitement realise et l’evolution etaient recueillies. Les caracteristiques des patients au diagnostic et l’evolution etaient comparees selon le statut du gene MYD88. L’analyse statistique multivariee etait ajustee sur l’âge. Resultats Les resultats moleculaires etaient interpretables pour 58 patients (95 %). Il s’agissait de 34 femmes et 24 hommes, d’âge median 79 ans. Il existait une localisation a la jambe dans 44 (76 %) des cas. Vingt (34 %) etait classes T1, 26 (45 %) T2 et 12 (21 %) T3. Cinquante-neuf pour cent avaient recu un traitement comprenant du rituximab associe a une polychimiotherapie. La mutation MYD88 L265P etait presente dans 34 cas (59 %), plus frequemment chez des sujets âges (p = 0,006) et etait associee a une atteinte du membre inferieur (p = 0,008). Il n’y avait pas de difference significative en terme de traitement recu entre les 2 groupes. La presence de la mutation MYD88 etait associee a une survie specifique plus courte en analyse univariee (p = 0,03). L’analyse multivariee ajustee sur l’âge identifiait la mutation MYD88 (p = 0,04) et l’existence de tumeurs multiples (p = 0,03) comme facteurs pronostiques independants. Discussion Cette etude confirme la forte prevalence de la mutation MYD88 L265P au sein de ce lymphome, et montre son association avec des facteurs cliniques lies a cette maladie que sont la localisation a la jambe et un âge avance. De plus, cette etude identifie pour la premiere fois cette mutation comme un facteur pronostique pejoratif. Conclusion L’impact clinique demontre ici de la mutation MYD88, activatrice de la voie NF-kB, pousse a explorer la biologie de ces lymphomes en vue de proposer des therapies ciblees et personnalisees en cas de rechute ou de resistance apres un traitement conventionnel.