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RESUMO – Os isomalto-oligossacarideos (IMOs) promovem o crescimento de bacterias beneficas no intestino grosso, e por isso, sao reconhecidos como prebioticos. Este trabalho teve como objetivo maximizar a producao de isomalto-oligossacarideos de cadeia longa por meio de alimentacao de maltose e sacarose em reator semi-continuo. A sintese foi realizada durante 36 horas adicionando-se 1UI/mL da enzima dextrana-sacarase ao reator contendo sacarose e maltose (substrato). Na primeira estrategia, houve a alimentacao a cada hora da mistura contendo sacarose e maltose (10g/L), seguida da adicao de sacarose somente (10g/L) a partir da setima hora. Na segunda estrategia, houve a alimentacao alternada a cada hora da mistura contendo sacarose e maltose e sacarose somente (10g/L). A segunda estrategia de alimentacao com duracao de dezesseis horas foi a melhor condicao de producao dos isomalto-oligossacarideos. Foram produzidos isomaltooligossacarideos em maiores concentracoes (87,19 g/L) e dextrana em menor concentracao (25,38 g/L). Em ambas as estrategias, a concentracao de isomaltooligossacarideos decresceu a partir de 16 horas de sintese, o que foi atribuido a uma inibicao da atividade da enzima devido a um excesso de frutose no meio.