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Periodontal disease results from the interaction between pathogenic bacteria that colonize supragingival and subgingival biofilms and the host, triggering an inflammatory response, with systemic effects leading to immune-mediated destruction of the attachment apparatus and loss of supporting alveolar bone. Immunological pathways and predisposing genetic factors common to periodontal disease and rheumatic diseases, including systemic lupus erythematosus, have been described. Case reports have suggested greater severity of periodontal disease in patients with systemic lupus erythematosus. However, studies evaluating the influence of the treatment of one disease on the clinical and laboratory manifestations of the other have yielded conflicting results. Resumo A doença periodontal resulta da interação entre bactérias patogênicas que colonizam os filmes supra e subgengival e o hospedeiro e deflagram uma resposta inflamatória local, com efeitos sistêmicos, que leva à destruição imunomediada dos tecidos de sustentação dos dentes e do osso alveolar. Vias imunológicas e fatores genéticos predisponentes comuns à doença periodontal e às doenças reumáticas, entre elas o lúpus eritematoso sistêmico, vêm sendo descritos. Relatos de caso sugeriram maior gravidade da doença periodontal em pacientes com lúpus eritematoso sistêmico. No entanto, estudos que avaliaram as influências do tratamento de uma sobre as manifestações da outra apresentaram resultados conflitantes.

Intravenous immunoglobulin (IVIG) is used in the treatment of neuropathy. This case report presents, for the first time, a patient with severe periodontal destruction after chronic therapy with IVIG. The patient reported having extracted his maxillary anterior teeth himself due to high mobility. Clinical examination and radiographic images show a generalized and severe periodontitis. No significant alterations in genetic or microbiological features were observed. The present case suggests that periodontal disease aggravation could be considered a new adverse effect of IVIG therapy. Postulated mechanisms are immune complexes formation, complement activation, and a direct effect in osteoclasts. In conclusion, it is important that patients that will receive IVIG treatment underwent dental evaluation.

Aims: Tumor-associated tissue eosinophilia (TATE) has been correlated with prognosis in oral squamous cell carcinoma (OSCC). This study aimed to investigate whether eosinophils depletion affects experimental oral carcinogenesis. Methods and Results: BALB/c (wild type - WT) and eosinophil-deficient (Δdb/GATA-1) mice were treated with the carcinogen 4-nitroquinoline-1-oxide (4NQO) in drinking water for 28 weeks. Tongues were collected for histopathological and immunohistochemical analysis, as well as for the evaluation of cytokines/chemokines by ELISA. The tongue SCC induced by 4NQO was associated with a rise in eosinophil numbers. WT-treated group showed a significantly increased incidence of SCC, with higher cytological atypia, in comparison with Δdb/GATA-1 mice. Consistently, the proliferative index was higher in WT compared to the Δdb/GATA-1/GATA1-treated group. No significant changes in the concentration of CCL3, CCL11 and TNF-α were detected for both groups after 4NQO treatment. Conclusions: These results suggest that eosinophils might be responsible for the deleterious outcome of experimental tongue carcinogenesis, given that their ablation protects mice from OSCC.

Some studies have linked the presence of chemokines to the early stages of Alzheimer's disease (AD). Then, the identification of these mediators may contribute to diagnosis. Our objective was to evaluate the levels of beta-amyloid (BA), tau, phospho-tau (p-tau) and chemokines (CCL2, CXCL8 and CXCL10) in the cerebrospinal fluid (CSF) of patients with AD and healthy controls. The correlation of these markers with clinical parameters was also evaluated. The levels of p-tau were higher in AD compared to controls, while the tau/p-tau ratio was decreased. The expression of CCL2 was increased in AD. A positive correlation was observed between BA levels and all chemokines studied, and between CCL2 and p-tau levels. Our results suggest that levels of CCL2 in CSF are involved in the pathogenesis of AD and it may be an additional useful biomarker for monitoring disease progression. Alguns estudos têm relacionado a presença de quimiocinas com estágios iniciais da doença de Alzheimer (ALZ). A identificação desses mediadores pode contribuir para um diagnóstico precoce. O objetivo deste estudo foi avaliar os níveis de beta-amiloide (BA), tau, fosfo-tau (p-tau) e quimiocinas (CCL2, CXCL8 e CXCL10) no líquido cefalorraquidiano dos pacientes com ALZ e controles saudáveis e a correlação destes marcadores com parâmetros clínicos. Os níveis de p-tau foram maiores nos pacientes com ALZ em relação aos controles, enquanto a razão tau/p-tau foi menor. Houve um aumento significativo de CCL2. Uma correlação positiva foi encontrada entre os níveis de BA e todas as quimiocinas estudadas e também entre os níveis de CCL2 e p-tau. Nossos resultados sugerem que a presença de CCL2 está envolvida na patogênese da ALZ e que esta quimiocina pode ser um marcador adicional para monitorar a progressão da doença.

Periapical lesions are inflammatory conditions of tooth periapical tissues, triggered by dental pulp infection and characterized by exudation of immune cells to the affected tissues and production of inflammatory mediators such as cytokines. The inflammatory periapical reaction is mainly driven by Th1, Th2, and Th17 responses, and such polarization may modulate progression of the disease and expression of bone proresorptive cytokines. IL-12 is a potent inducer of IFN-γ production, which stimulates Th1 effector cells. Many evidences have shown a positive correlation between the bone resorptive cytokine IL-1β and the production of IL-12 and IFN-γ. Furthermore, IL-12 may have a potential role in the release of bone resorptive mediators and blockade of Th2 cytokines, affecting the progression of periapical bone loss. Nevertheless, IL-12 and IFN-γ have also been described as suppressors of osteoclast differentiation and activation, favoring bone maintenance. This paper focuses on the controversial roles of IL-12 in periapical lesions.

Made available in DSpace on 2016-10-10T03:51:34Z (GMT). No. of bitstreams: 11 Alloxan_induced diabetes delays repair in a rat model of closed tibial fracture.pdf: 792674 bytes, checksum: e14909ca630d8bd840e20599ccf929cf (MD5) license_url: 52 bytes, checksum: 2f32edb9c19a57e928372a33fd08dba5 (MD5) license_text: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) 1_license_url: 52 bytes, checksum: 2f32edb9c19a57e928372a33fd08dba5 (MD5) 1_license_text: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) 1_license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) 2_license_url: 52 bytes, checksum: 2f32edb9c19a57e928372a33fd08dba5 (MD5) 2_license_text: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) 2_license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) license.txt: 1818 bytes, checksum: 46de3043f08e87659ae535ef74b8ce9d (MD5) Previous issue date: 2008 A closed fracture was performed on the left tibia of 3-month-old Wistar rats weighing 250 to 350 g that were either healthy (N = 24) or made diabetic with alloxan (N = 24) to investigate the effect of alloxan-induced diabetes on the course of bone fracture healing. Histomorphometric analysis of the fracture site was performed at 7, 14, 25, and 35 days. After 7 days, diabetic rats had significantly less cartilage (P = 0.045) and greater fibrous connective (P = 0.006) tissue formation at the fracture site compared to controls. In contrast, marked callus formation was seen in diabetic rats with significant osteogenesis (P = 0.011, P = 0.010, P = 0.010, respectively, for 14, 25, and 35 days) and chondrogenesis (P = 0.028, P = 0.033, P = 0.019) compared to controls. Radiographic analysis revealed a displaced fracture with poor bone fragment alignment and delayed consolidation at these times in the diabetic group. The levels of alkaline phosphatase were significantly higher in diabetic rats at 25 days (P = 0.009). These results suggest that the initial excessive formation of fibrous connective tissue associated with delay in chondrogenesis and osteogenesis may not provide suitable stability of the fractured site, contributing to the inappropriate alignment of fragments and an increase in the volume of callus in later stages of repair. The resulting displaced fracture in diabetic rats requires long periods for remodeling and complete bone consolidation Sim Publicado

Chromoblastomycosis (CR) is a subcutaneous chronic mycosis characterized by a granulomatous inflammatory response. However, little is known regarding the pattern of leukocyte subsets in CR and the pathways involved in their recruitment. The objective of this study was to assess the cellular subsets, chemokine, chemokine receptors and enzymes in CR. The inflammatory infiltrate was characterized by immunohistochemistry using antibodies against macrophages (CD68), Langerhans'cells (S100), lymphocytes (CD3, CD4, CD8, CD45RO, CD20 and CD56) and neutrophils (CD15). The expression of MIP-1alpha (Macrophage inflammatory protein-1alpha), chemokine receptors (CXCR3 and CCR1) and enzymes (superoxide dismutase-SOD and nitric oxide synthase-iNOS) was also evaluated by the same method. We observed an increase in all populations evaluated when compared with the controls. Numbers of CD15+ and CD56+ were significantly lower than CD3+, CD4+, CD20+ and CD68+ cells. Statistical analysis revealed an association of fungi numbers with CD3, CD45RO and iNOS-positive cells. Furthermore, MIP-1alpha expression was associated with CD45RO, CD68, iNOS and CXCR3. Our results suggest a possible role of MIP-1alpha and fungi persistence in the cell infiltration in CR sites. A cromomicose é micose subcutânea crônica sistêmica caracterizada por resposta inflamatória crônica granulomatosa. No entanto, existem poucos dados a respeito do padrão de subtipos de leucócitos na cromomicose e sobre as vias envolvidas no recrutamento destas células. O objetivo deste trabalho foi avaliar os tipos celulares, bem como a expressão de quimiocinas, receptores de quimiocinas e enzimas em lesões de cromomicose. O infiltrado inflamatório foi caracterizado por meio de técnica imuno-histoquímica utilizando os seguintes marcadores CD68 (macrófagos), S100 (células de Langerhans), CD3, CD4, CD8, CD45RO, CD20 e CD56 (linfócitos) e CD15 (neutrófilos). A expressão de MIP-1alfa (Proteína Inflamatória do Macrófago-1alfa), receptores de quimiocinas (CXCR3 e CCR1) e enzimas (superóxido dismutase-SOD e óxido nítrico sintase induzida-iNOS) foi avaliada pelo mesmo método. Observou-se um aumento de todas as populações celulares avaliadas em relação às amostras controle. As populações de células CD15+ e CD56+ foram significativamente menores que células CD3+, CD4+, CD20+ e CD68+. A análise estatística revelou uma correlação positiva entre o número de fungos com as células CD3, CD45RO e iNOS-positivas. A expressão de MIP-1alfa foi também associada às populações de células CD45RO, CD68, iNOS e CXCR3 positivas. Nossos resultados apontam para um possível papel de MIP-1alfa e da persistência fúngica na infiltração de células inflamatórias nos sítios de cromomicose.

Orientador: Marco Aurélio Ramirez Vinolo Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: Os ácidos graxos de cadeia curta (AGCCs), acetato, propionato e butirato, são produtos finais oriundos do metabolismo bacteriano. Além de serem um importante substrato energético às células epiteliais intestinais, estes metabólitos são capazes de modular a ativação do sistema imune e, com isso, parecem exercer um papel importante na manutenção da homeostase do hospedeiro. Um dos principais mecanismos associados aos efeitos dos AGCCs é a ativação de receptores acoplados à proteína G, incluindo o FFAR2, receptor de membrana altamente expresso em neutrófilos. Embora se saiba que as bactérias anaeróbias são capazes de produzir altas quantidades de AGCCs em locais de infecção, os efeitos ocasionados por esta produção local e a ativação de FFAR2 ainda são incertos. Dessa maneira, este trabalho se propôs a investigar os efeitos dos AGCCs, produzidos localmente nos sítios de infecção, na resposta imunológica contra a bactéria patogênica Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Aa). Para isso, utilizamos modelo de câmara subcutânea em camundongos C57BL/6 para iniciar e manter uma monoinfecção isolada de Aa no interior do organismo dos animais. Os AGCCs inoculados juntamente com a bactéria na câmara não alteraram o padrão de migração leucocitária ao local da infecção, mas reduziram a capacidade das células em fagocitar e destruir as bactérias ali presentes, além de terem modulado negativamente a produção de citocinas e quimiocinas (TNF-?, IL-10 e Cxcl2) essenciais para orquestrar toda a resposta imune subsequente. Tais efeitos não decorreram de ações diretas dos AGCCs sobre o crescimento bacteriano ou de efeito citotóxico dos AGCCs sobre os leucócitos. In vitro, observamos que a incubação com AGCCs reduziu a capacidade de fagocitose e produção de TNF-? por neutrófilos humanos. Por fim, demonstramos ainda que o receptor FFAR2 é importante na resposta à infecção por Aa, uma vez que na sua ausência, houve uma redução na capacidade de eliminação dessa bactéria. Em suma, estes resultados indicam que a produção de AGCCs no local da infecção interfere com a ação dos neutrófilos e com isso pode contribuir para o início ou progressão do quadro infeccioso Abstract: Short chain fatty acid (SCFAs), acetate, propionate and butyrate, are end products derived from bacterial metabolism. They are not only an important energetic substrate to the intestinal epithelial cells, but they are also capable of modulating the activation of the immune system, thereby helping to maintain the host homeostasis. One of the main mechanisms associated with the effects of the SCFAs is the activation of G protein-coupled receptors, including the FFAR2, a surface receptor highly expressed on neutrophils. Although it is already known that anaerobic bacteria are capable of producing high amounts of SCFAs at their infectious sites, the effects of this local production are still unclear. Thus, this study aimed to investigate the effects of these SCFAs, locally produced at the infectious sites, in the immune response against the pathogenic bacteria Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Aa). For that, we have used a subcutaneous chamber model in C57BL/6 mice to initiate and maintain a monoinfection of Aa inside the organism of the animals. The SCFAs, inoculated together with the bacteria inside of the chamber, did not alter the pattern of leukocytes migration to the infectious site, but they reduced the capacity of the migrating cells to phagocytose and to destroy the bacteria, decreasing, as well, the production of certain cytokynes and chemokynes (TNF-?, IL-10 and Cxcl2) that are essential to orchestrate the subsequent immune response. These effects were not caused by direct actions of the SCFAs in the bacterial growth or their cytotoxic effects on leukocytes. In vitro, we have seen that incubation with SCFAs reduced the phagocytic capacity and the production of TNF-? by human neuthophils. Lastly, we have also demonstrated that the FFAR2 receptor is important for the response to Aa infection, since that in its absence, there was a reduction in the capacity to eliminate this bacterium. Altogether, these results indicate that the production of the SCFAs in the infectious site interferes with neutrophils actions and with that, it can contribute to the start and progression of the infectious disease Mestrado Imunologia Mestre em Genética e Biologia Molecular FAPESP 2014/02560-6, 2012/10653-9

Orientador: Helder Antonio Rebêlo Pontes Dissertação (mestrado) – Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba Resumo: O objetivo desse trabalho foi investigar as características clínicopatológicas da doença relacionada ao IgG4 (IgG4-RD) envolvendo a região oral e maxilofacial. Casos de IgG4-RD manifestando-se na região oral e maxilofacial foram recuperados de três instituições brasileiras. Os dados clínicos e sorológicos foram obtidos nos prontuários dos pacientes, enquanto os achados microscópicos e imunohistoquímicos foram revisados por patologistas orais. Os casos foram diagnósticos seguindo os critérios do American College of Rheumatology / European League Against Reumatismo. Foram encontrados sete casos, todos acometendo mulheres, com média de idade de 55,4 anos. A glândula submandibular foi acometida em quatro casos, a língua e a glândula parótida em dois casos cada e o palato em um caso. Em dois casos, a biópsia do lábio inferior foi utilizada como auxílio diagnóstico. O valor sérico de IgG4 variou de 185 a 5.930 mg / dL. Foi comum um infiltrado linfóide moderado a grave contendo plasmócitos e linfócitos, com aumento da razão IgG4 / IgG. O tratamento variou e corticóides foram a medicação mais utilizada (57,4%). Seis pacientes permaneceram vivos (quatro sem doença e dois com doença estável), enquanto um morreu de causa desconhecida. Embora as glândulas salivares maiores sejam comumente afetadas na IgG4-RD, a cavidade oral também pode estar envolvida, e a biópsia do lábio inferior pode ser uma ferramenta diagnóstica auxiliar Abstract: The aim of this study was to investigate the clinicopathological features of IgG4- related disease (IgG4-RD) involving the oral and maxillofacial region. Cases of IgG4-RD manifesting in the oral and maxillofacial region were retrieved from three Brazilian institutions. Clinical and serological data were obtained from the patients’ medical charts, while microscopic and immunohistochemical findings were revised by oral pathologists. Diagnoses followed the American College of Rheumatology/European League against Rheumatism criteria. Seven cases were found, all affecting women, with a mean age of 55.4 years. The submandibular gland was affected in four cases, the tongue and the parotid gland in two cases each, and the palate in one case. In two cases, lower lip biopsy was used as diagnostic approach. Serum IgG4 value ranged from 185 to 5,930 mg/dL. A moderate to severe lymphoid infiltrate containing plasma cells and lymphocytes, with an increased IgG4/IgG ratio was common. Treatment varied and steroids were the most frequently used (57.4%). Six patients remained alive (four free of disease and two with stable disease), while one died due to unknown cause. Although major glands are commonly affected by IgG4-RD, the oral cavity can also be involved, and the lower lip biopsy may be an auxiliary diagnostic tool Mestrado Estomatologia Mestra em Estomatopatologia FAPESP 2017/148803

Justificativa do estudo: O Carcinoma adenoide cístico (CAC) é um dos tumores de glândulas salivares mais comuns na região de cabeça e pescoço. Caracteriza-se por possuir evolução lenta, curso clínico prolongado, ser altamente infiltrativo, com altas taxas de recidivas, ocorrência de metástase regional e à distância. Para evitar a ocorrência de metástases, as células neoplásicas devem ser combatidas pelo sitema imunológico. Os mediadores que estão expressos em células neoplásicas e linfócitos, podem propiciar a imunossupressão e o escape das células tumorais favorecendo a ocorrência de metástase local e a distância. Objetivos: O objetivo deste estudo foi avaliar a expressão das proteínas HLA-G, PD-L1, PD-L2, CD8, GrB, CD1a, CD83, CTLA-4 e PD- 1 em amostras de CAC e a associação destas com os parâmetros clinicopatológicos da doença. Material e métodos: Foram selecionadas 36 amostras de CAC e a identificação da expressão das proteínas foi realizada pela técnica da imunoistoquímica. As células neoplásicas do CAC, positivas para as proteínas HLA-G, PD-L1, PD-L2, foram avaliadas semi-quantitativamente em porcentagem de células positivas (0 – 100%) e do infiltrado inflamatório positivas para CD8, GB, CD1a, CD83, CTLA-4 e PD-1 foram quantificadas e convertidas em densidade (células/mm2). Amostras de trofoblastos, líquens plano e linfonodos foram utilizados como controle positivos das reações. Resultados: O CAC apresentou baixa expressão de TIL CD8+, GrB+, CD1a+ e CD83+, assim como, escassa positividade para CTLA-4 e PD-1. De forma contrária, observou-se expressão de PD-L2 e HLA-G, enquanto PD-L1 foi negativo em todas as amostras avaliadas. Interessantemente, casos que tinham baixa densidade de TIL CD8+, apresentaram maiores taxas de recidivas. Conclusão: Nossos achados sugerem que o microambiente do CAC apresenta uma baixa imunogenicidade, representada pela baixa densidade de TIL e células dendríticas. Além disso, parece haver ativação das proteínas inibitórias imunes PD-L2 e HLA-G, o que sugere um cenário que pode favorecer o escape tumoral do sistema imunológico e contribui para o prognóstico desfavorável dessas neoplasias. Justificativa do estudo: O Carcinoma adenoide cístico (CAC) é um dos tumores de glândulas salivares mais comuns na região de cabeça e pescoço. Caracteriza-se por possuir evolução lenta, curso clínico prolongado, ser altamente infiltrativo, com altas taxas de recidivas, ocorrência de metástase regional e à distância. Para evitar a ocorrência de metástases, as células neoplásicas devem ser combatidas pelo sitema imunológico. Os mediadores que estão expressos em células neoplásicas e linfócitos, podem propiciar a imunossupressão e o escape das células tumorais favorecendo a ocorrência de metástase local e a distância. Objetivos: O objetivo deste estudo foi avaliar a expressão das proteínas HLA-G, PD-L1, PD-L2, CD8, GrB, CD1a, CD83, CTLA-4 e PD- 1 em amostras de CAC e a associação destas com os parâmetros clinicopatológicos da doença. Material e métodos: Foram selecionadas 36 amostras de CAC e a identificação da expressão das proteínas foi realizada pela técnica da imunoistoquímica. As células neoplásicas do CAC, positivas para as proteínas HLA-G, PD-L1, PD-L2, foram avaliadas semi-quantitativamente em porcentagem de células positivas (0 – 100%) e do infiltrado inflamatório positivas para CD8, GB, CD1a, CD83, CTLA-4 e PD-1 foram quantificadas e convertidas em densidade (células/mm2). Amostras de trofoblastos, líquens plano e linfonodos foram utilizados como controle positivos das reações. Resultados: O CAC apresentou baixa expressão de TIL CD8+, GrB+, CD1a+ e CD83+, assim como, escassa positividade para CTLA-4 e PD-1. De forma contrária, observou-se expressão de PD-L2 e HLA-G, enquanto PD-L1 foi negativo em todas as amostras avaliadas. Interessantemente, casos que tinham baixa densidade de TIL CD8+, apresentaram maiores taxas de recidivas. Conclusão: Nossos achados sugerem que o microambiente do CAC apresenta uma baixa imunogenicidade, representada pela baixa densidade de TIL e células dendríticas. Além disso, parece haver ativação das proteínas inibitórias imunes PD-L2 e HLA-G, o que sugere um cenário que pode favorecer o escape tumoral do sistema imunológico e contribui para o prognóstico desfavorável dessas neoplasias. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

O tratamento odontopediátrico pode causar estresse em crianças e em seus acompanhantes prejudicando o comportamento infantil e a ansiedade odontológica materna. A compreensão dessas alterações fisiológicas e comportamentais é de suma importância a fim de auxiliar no uso de técnicas sedativas adequadas durante o atendimento odontológico infantil. O objetivo deste estudo foi avaliar o estresse de crianças e de suas respectivas mães durante o tratamento odontopediátrico sob diferentes protocolos de sedação. Além disso, objetivou-se avaliar a ansiedade odontológica materna e o comportamento infantil, bem como a associação destas características. Este estudo observacional é uma análise de dados de dois ensaios clínicos randomizados e controlados. Crianças de 2 a 6 anos de idade receberam tratamento odontológico restaurador padronizado sob sedação moderada de acordo com os grupos: [A] 18 crianças receberam midazolam oral 1,0 mg/kg e [B] 18 crianças receberam placebo, em um desenho cruzado [Clinical Trials database (NCT01795222)]; [C] 14 crianças receberam midazolam oral 0,5 mg/kg e cetamina oral 3,0 mg/kg mais inalação de sevoflurano (0,3% - 0,4%) e [D] 13 crianças tiveram midazolam oral 0,5 mg/kg e cetamina oral 3,0 mg/kg mais inalação de oxigênio, em um desenho paralelo (NCT02284204). As sessões foram filmadas para posterior avaliação do comportamento infantil usando a escala OSUBRS (Ohio State University Behavioural Rating Scale) e as mães responderam a versão Brasileira da Dental Anxiety Scale (DAS). As coletas de saliva foram realizadas concomitantemente nas crianças e mães em 4 momentos: ao acordar (T0), na chegada na clínica (T1), 25 minutos após a aplicação da anestesia local na criança (T2) e 25 minutos após o término do procedimento (T3). O cortisol salivar foi mensurado por meio de ensaio imunoenzimático (ELISA). Como os dados apresentaram distribuição não normal (Shapiro Wilk, p>0,05), o teste de KruskalWallis seguido de Mann-Whitney foram utilizados para comparações não pareadas e MannWhitney para associação entre as variáveis. Para análises pareadas, o teste de Friedman seguido de Wilcoxon foi utilizado adotando-se como nível de significância um valor de 5% (p0,05), Kruskal-Wallis and Mann-Whitney tests were used for non paired comparisons and Mann-Whitney for associations among the variables. For paired comparisons, Friedman and Wilcoxon tests were used (p

Dissertação (mestrado) - Pontifícia Universidade Católica de Minas Gerais, Programa de Pós-Graduação em Odontologia. Bibliografia: f.49-53 Resumo: A movimentação dentária ortodôntica (MDO) é alcançada pela remodelação do osso alveolar em resposta às forças mecânicas. A diabetes tipo 1 altera a remodelação óssea, o que sugere que esta doença também afete a MDO. O presente estudo investigou as mudanças nos mecanismos celulares e moleculares relacionados ao recrutamento e atividade osteoclástica durante a MDO em camundongos diabéticos. Foram colocados dispositivos ortodônticos em camundongos C57BL6/J normoglicêmicos (NG) e diabéticos (DB) por indução através de estreptozotocina. Foi realizada análise histomorfométrica e bioquímica através do Real Time PCR após 6 e 12; e 12 horas e 72 horas, respectivamente. Os resultados mostraram que os DB apresentaram maior MDO e maior número de células TRAP-positivas após 12 dias. Entretanto, foram observados níveis maiores de RANKL, CCL2, CCL5 e TNF- e menores de RUNX2, COL-1 e ALP após 72 horas nos DB. Analisados em conjunto, os resultados sugerem que a diabetes aumenta a migração e atividade dos osteoclastos, e diminui a diferenciação dos osteoblastos, levando a uma maior MDO. Abstract: Orthodontic tooth movement (OTM) is achieved by remodeling of alveolar bone in response to mechanical loading (ML). Type 1 diabetes alters bone remodeling, suggesting that this disease might affect OTM. This study investigated the changes in the cellular and molecular mechanisms related to osteoclast recruitment and activity during OTM in diabetic (DB) mice. An orthodontic appliance was placed in normoglycemic (NG) and made DB by streptozotocin C57BL6/J mice. Histomorphometric analysis and Real Time PCR of periodontium was performed after 6 and 12 days, and 12 hours and 3 days of ML, respectively. The results showed that DB exhibited greater OTM and increased number of TRAP-positive osteoclasts after 12 days. Meanwhile, higher levels of RANKL, CCL2, CCL5 and TNF-, and lower levels of RUNX2, COL-1 and ALP was observed after 3 days in DB. Altogether, the data suggested that diabetes upregulated osteoclast migration and activity and downregulated osteoblast differentiation, leading to a greater OTM.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, 2007. Com o objetivo de investigar o efeito do Diabetes induzido pela aloxana na consolidação de fratura óssea, produziu-se uma fratura fechada na tíbia esquerda de ratos Wistar, os quais foram divididos em dois grupos controle e diabético. A análise histomorfométrica do sítio de fratura foi realizada nos períodos de 7, 14, 25 e 35 dias. Após 7 dias, os ratos diabéticos (GD) apresentaram menor formação de tecido ósseo (P=0,068) e cartilaginoso (P=0,045) e maior formação de tecido conjuntivo fibroso (P=0,006) no local da fratura, em comparação ao grupo de controle (GC). Por outro lado, nos períodos de 14, 25 e 35 dias, observou-se no GD maior osteogênese (P=0,011, P=0,010; P=0,010, respectivamente para os períodos de 14, 25 e 35 dias), e condrogênese (P=0,028; P=0,033; P=0,019) em relação ao GC. A análise radiográfica revelou fratura deslocada com alinhamento precário de fragmentos ósseos e atraso na consolidação das fraturas no GD. Os níveis séricos de fosfatase alcalina foram significativamente maiores no GD nos 14° (P=0,06) e 25° (P=0,009) dias em relação ao GC. Nossos resultados sugerem que a formação excessiva inicial de tecido conjuntivo fibroso nos animais diabéticos, associada ao atraso na condrogênese e osteogênese, pode não fornecer a estabilidade apropriada no local da fratura, contribuindo para um maior desvio dos fragmentos e aumento de volume do calo ósseo nos estágios finais de consolidação. Esse processo está possivelmente relacionado à necessidade de períodos maiores para remodelação e completa consolidação da fratura em indivíduos diabéticos. ___________________________________________________________________________________ ABSTRACT To investigate the effect of alloxan on the course of bone fracture healing, a closed fracture was performed on the anatomical left tibia of rats that were either healthy or made diabetic by alloxan. Histomorphometric analysis of the fracture site was performed at 7, 14, 25 and 35 days. After 7 days, diabetic rats (db) had significantly less bone (P=0.068) and cartilage (P=0.045) and greater connective (P=0.006) tissue formation at the fracture site compared to controls. In contrast, marked callus formation was seen in db with a greater osteogenesis (P=0.011, P=0.010; P=0.010, respectively for 14, 25 and 35 days) and chondrogenesis (P=0.028; P=0.033; P=0.019) than controls. Radiographic analysis revealed displaced fracture with poor alignment of bone fragments and delayed consolidation at these periods in the db group. The levels of alkaline phosphatase (ALP) were significantly higher in db at 14 (P=0.06) and 25 (P=0.009) days. Results suggest that the initial excessive formation of fibrous connective tissue associated with delay in chondrogenesis and osteogenesis may not provide suitable stability of the fractured site, contributing to the inappropriate alignment of fragments and an increase in the volume of callus in the later stages. The resulting displaced fracture in diabetic rats requires long periods for remodeling and complete bone consolidation.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, 2007. Os mecanismos envolvidos na modificação do reparo ósseo em diabéticos ainda permanece pouco elucidado. Assim, esse estudo investigou a expressão de reguladores do metabolismo ósseo receptor ativador de NFkB (RANK), RANK ligante (RANKL) e osteoprotegerina (OPG), através da imunohistoquímica e RT-PCR, em sítios de fratura óssea de ratos diabéticos. Foram realizadas fraturas ósseas fechadas em tíbias esquerdas de ratos controle e com diabetes induzido pelo aloxano. A análise histomorfométrica dos sítios de fratura após 7 dias revelaram que os ratos diabéticos (db) apresentaram menor formação óssea e de cartilagem em comparação com o grupo controle. Paralelamente, o número de células RANK e RANKL positivas foi reduzido no grupo diabético. Além disso, células OPG positivas apresentaram-se significantemente diminuídas no grupo diabético comparado ao grupo controle (p=0,05). Entretanto, a razão RANKL/OPG foi similar no grupo controle (0,074) e diabético (0,099) nesse período. Após 14 dias, o número de células RANKL e OPG positivas e a expressão de RNAm desses marcadores foi maior no grupo controle (p=0.008). Apesar de menores níveis, a razão RANKL/OPG no grupo diabético (1,29) foi maior do que no grupo controle (0,90), o que sugere o favorecimento dos mecanismos de reabsorção óssea. Os resultados obtidos demonstram a expressão de marcadores da atividade de formação/remodelação de tecidos duros em sítios de fratura. Modificações no balanço da expressão de RANKL/OPG pode contribuir para o retardo do reparo de fraturas associado ao estado diabético. ____________________________________________________________________________________ ABSTRACT To clarify the mechanisms of altered bone reapair in diabetic state, we investigate the RANK, RANKL and OPG expression by immunohistochemistry and RT-PCR in the fracture sites of diabetic rats. A closed fracture was performed on the anatomical left tibia in rats either healthy or made diabetic by alloxan. Histomorphometric analysis of fracture site at 7 days after fracture revealed that diabetic rats (db) have significantly lesser bone and cartilage formation at fracture site in comparison with controls. Parallel with this, the number of RANK and RANKL positive cells were slighly decreased in db group. Furthermore, OPG+ cells were significantly lower in db than control (p=0.05). However, the RANKL/OPG ratio was similar in control (0.074) and db (0.099) at this time. At day 14, the numbers of RANKL and OPG positive cells and the mRNA expression for these markers were increased in control group (P=0.008). Despite lower levels, the RANKL/OPG ratio in db group (1.29) was greater than in controls (0.90) what suggets a favoring of pro-resorptive pathways. Our results demonstrate the expression of consistent markers of hard tissue formation/remodeling activities in sites of fractures. The imbalance of RANKL/OPG expression may contribute to the delay of fracture repair during diabetes course.