Search

Çalışmada, besin alımını baskılayan nesfatin-1 ve nöronostatin nöronlarının stresin neden olduğu sinyalleri algılama mekanizmaları, stresin söz konusu nöronlardaki olası aktive edici etkisi ve bu aktivasyonda glutamaterjik sistemin rolü araştırılmıştır. Strese bağlı sinyallerin algılanmasının gösterilmesi amacıyla, ilgili nöronlarda glukokortikoid (GR), mineralokortikoid (MR) ile kortikotropin-salıverici faktör reseptör (CRFR) proteinleri ve nöronlar üzerindeki sinir sonlanmalarında kortikotropin-salıverici faktör ekspresyonları değerlendirilmiştir. Nesfatin-1 nöronlarının periferik stres sinyallerini algılayacak GR, MR ve CRFR proteinlerini, nöronostatin nöronlarının ise sadece GR proteinini eksprese ettiği belirlenmiştir. Bu veriler, periferik stres sinyallerinin direkt olarak bu nöronlara ulaşabildiğini göstermektedir. Farklı tipte stres uygulamalarının (hareketsizlik, yüzme ve akut enflamatuvar stres) nesfatin-1 ve nöronostatin nöronlarındaki aktive edici etkisinin araştırıldığı ikili immünohistokimyal boyamalarla, immobilizasyon ve yüzme stresi sonrasında özellikle paraventriküler ve arkuat çekirdeklerdeki nesfatin-1 nöronlarında aktivasyonunun anlamlı olarak arttırdığı; ancak, nöronostatin nöronlarında değişiklik olmadığı gösterilmiştir. Akut enflamatuvar stresin ise sadece supraoptik çekirdekteki nesfatin-1 nöronlarını aktive ettiği belirlenmiştir. Strese bağlı oluşan aktivasyonda glutamaterjik sistemin etkinliği, stres öncesi glutamat reseptör antagonistleri uygulanan deneklerde incelenmiş ve aktivasyonu anlamlı bir şekilde baskılandığını göstermiştir. Bu sonuç, nesfatin-1 nöronlarının strese bağlı aktivasyonunda, glutamatı nörotransmitter olarak kullanan üst merkezlerin de rol oynayabileceğini düşündürmüştür. Sonuç olarak tez çalışmalarımızda, besin alımının baskılanmasında rol alan nöronların periferik stres sinyallerini algılayabilecek reseptör proteinlerini sentezlediği, akut stres durumlarında besin alımının azalmasına nesfatin-1 nöronlarının aracılık edebileceği ve bu nöronların strese yanıtında glutamaterjik sistemin önemli rol oynadığı belirlenmiştir. Bu verilerin, strese bağlı beslenme bozukluklarının moleküler mekanizmasının ortaya konmasında ve bu bozuklukların tedavisine yönelik deneysel ve klinik çalışmaların planlanmasında yol gösterici olabileceği düşünülmektedir. In this study, the perception mechanisms of the nesfatin-1 and neuronostatin neurons that suppress nutrient intake for stress signals, the possible activating effect of stress on these neurons and the role of the glutamatergic system in this activation were investigated.In order to demonstrate the perception of stress-related signals, glucocotricoid (GR), mineralocorticoid (MR) and corticotrophin-releasing factor receptor (CRFR) proteins were evaluated and corticotropin-releasing factor expressions were evaluated in nerve endings on neurons. The results of these studies showed that the nesfatin-1 neurons express GR and MR proteins in order to receive peripheral stress signals. It was also demonstrated that the nesfatin-1 neurons possess CRF receptors. Neuronostatin neurons express only GR protein.The effect of different types of stress applications (immobilization, swimming forced stress, acute inflammatory stres) on nesfatin-1 and neuronostatin neurons was investigated by dual immunohistochemical staining, it was found that after immobilization and swimming stress, activation of nesfatin-1 neurons in paraventricular and arcuate nuclei increased significantly but there was no change in neuronostatin neurons. In addition, inflammatory stress effected the activation of the nesfatin-1 neurons only localized in the supraoptic nuclei.The effectiveness of the glutamatergic system in stress-induced activation was examined in subjects treated with pre-stress glutamate receptor antagonists and showed that its activation was significantly suppressed. It is suggested that the glutamatergic system and the glutamate receptors play a role in the activation of nesfatin-1 neurons after receiving stress signals and that the higher centers in the brain which use the glutamate as a neurotransmitter participate in this regulatory mechanism.In conclusion in this study we were able to determine that, the neurons which suppress the food intake synthesize the receptor proteins in order to receive the peripheral stress signals, nesfatin-1 neurons can participate in the attenuation of food intake during stress and the glutamatergic system plays an important role in the activation of nesfatin-1 neurons following acute stress. It is suggested that these new findings will shed light on planning clinical studies in order to understand the molecular mechanisms of the eating disorders during stress as well as the treatment of such disorders. 156

Embryo implantation process following fertilization contains complex mechanisms as the most important stage for healthy pregnancy in humans. “Implantation window” is defined in humans as the 6-10th days after fertilization, whereas in rats it is defined as the 4.5-6.5th days by considering the similarities with human cycle. Implantation process have an important role in studies investigating the mechanisms that cause infertility. In this study, we aimed to create a new resource for new studies using histological evaluation in regard to the compilation of the recent literature. Female rats (n=21) divided into 3 groups as embryonic days of 4.5th, 5.5th and 6.5th according to the vaginal smear examinations which determined the estrous after fertilization. Uterus samples of defined groups of pregnant female rats were obtained. The samples fixed in 10% formaline solution and prepared according the routine paraffin tissue protocol and embedded in paraffin. Five-mikrometer-thick paraffin-embedded sections were stained with Hematoxylin-Eosin and Periodic acid Schiff. The basic structures were evaluated in the process of implantation in the stained uterus sections. Basic structures in implantation process as endometrium, myometrium, perimetrium, surface epithelium, primary and secondary decidual areas, GMG cells, trophoblast and embryoblast cells that have seen in sections were compatible within the groups. The results were compared between the stages of the implantation process. In this study, as one of the most important stage for healthy pregnancy, the embryo implantation process which contains a comlex mechanism was histologically evaluated in rats that were used as a model organism., İnsanlarda embriyo implantasyon süreci karmaşık fizyolojik mekanizmalar içermekte olup, sağlıklı gebeliğin elde edilmesi için fertilizasyo-nun ardından gerçekleşen en önemli aşamadır. İnsanlarda fertilizasyonun ardından 6-10. günler, insanlara benzer döngüleri nedeni ile model organizma olarak kullanılan sıçanlarda ise 4.5-6.5. günler “implantasyon penceresi” adı verilen süreci kapsamaktadır. İnfertiliteye neden olan mekanizmaların araştırıldığı çalışmalarda implantasyon süreci önemli rol oynamaktadır. Bu çalışmada sıçan implantasyon dönemi ile ilgili histolojik değerlendirmeler ve elde edilen son literatür bilgilerinin derlenmesi ile yeni çalışmalar için kaynak oluşturulması amaçlanmıştır. Vaginal yayma ile östrus evresinde belirlenen dişi sıçanlar, fertilizasyonun ardından; embriyonik gelişimin 4.5, 5.5. ve 6.5. günü olmak üzere 3 gruba ayrıldı ve grupları belirlenen dişi sıçanlardan (n:21) uterus örnekleri elde edildi. Dokular %10'luk formalinde tespit edilerek, rutin parafin doku takibi ile parafine gömüldü. Beş μm.'lik parafin kesitler alınarak Hematoksilen-Eozin ile boyandı ve Periyodik asit Shiff reak-siyonu ile değerlendirildi. Boyanmış kesitlerde implantasyon sürecinde uterustaki temel yapılar değerlendirildi. Kesitlerde implantasyon sürecinde görülen temel yapılar olan endometriyum, miyometriyum, perimetriyum, yüzey epiteli, primer ve sekonder desidual alanlar, GMB hücreleri, trofoblast ve embriyoblast hücreleri gösterilmiştir. Sonuçlar implantasyon dönemi evreleri boyunca karşılaştırılmıştır. Sağlıklı gebeliğin elde edilmesi için en önemli evrelerden biri olan implantasyon süreci model organizma olarak yaygın olarak kullanılan sıçanlarda evrelere göre değerlendirilmiştir.

Studies examining the female reproductive system in the rat model can be completed in a short time due to the 4-5-day-long estrous cycle, which is an advantage when compared to 28 days of menstrual cycle in humans. The present study aimed to create new insights for cytologi-cal and histological studies evaluating the rat estrous cycle with the compilation of the recent literature. Female rats were divided into 4 groups according to the vaginal smear examinations, as proestrous, estrous, metestrous and diestrous groups and ovaries as well as uterus samples were obtained. The samples were fixed in 10% formaline solution and prepared according the routine paraffin tissue processing protocol and embedded in paraffin. Five-micrometer-thick paraffin-embedded sections were stained with H-E and PAS. By microscopical analyzing the stained sections, primary structures in the ovary and uterus were assessed and the results were statistically compared between groups. Numbers of primary structures observed in the sections were compatible with the respective groups. While increased numbers of primary and secondary follicles in the groups of proestrous and estrous were detected, in metestrous group increased number of corpus luteum was obtained. The data obtained from different stages of rat estrous cycle were in agreement with the reports in the literature. It is suggested that the results of this study can be used as a source to plan advanced histological studies., İnsanlarda 28 günde izlenen menstrüel döngünün, sıçanlarda 4-5 günde gerçekleşmesinden dolayı, kadın üreme sisteminin incelendiği çalış-malarda model organizma olarak kullanılan sıçanlar ile yapılan birçok çalışma kısa sürede tamamlanabilmektedir. Bu da sıçan modelinin bir avantajı olarak görülmektedir. Bu çalışmada sıçan östrus döngüsü ile ilgili sitolojik ve histolojik değerlendirmeler ve elde edilen son literatür bilgilerinin derlenmesi ile yeni çalışmalar için kaynak oluşturulması amaçlanmıştır. Vaginal yayma ile dişi sıçanlar proöstrus, östrus, metöst-rus, diöstrus dönemlerinde olmak üzere 4 gruba ayrıldı ve grupları belirlenen dişi sıçanlardan (n=28) ovaryum ve uterus örnekleri elde edildi. Dokular formalinde tespit edilerek, rutin parafin doku takibi ile parafine gömüldü. Parafine gömülmüş dokulardan 5 μm.'lik kesitler alınarak Hematoksilen-Eozin (H-E) ve Periyodik Asit Shiff (PAS) ile boyandı. Boyanmış kesitlerde ovaryum ve uterustaki temel yapılar değerlendi-rildi ve istatistiksel olarak karşılaştırıldı. Kesitlerde görülen temel yapıların sayıları gruplar ile uyumlu olarak bulunmuş olup, proöstrus ve östrus gruplarında artmış primer ve sekonder folliküller izlenirken, metöstrus grubunda korpus luteum yapılarının istatistiksel anlamlı olarak arttığı gözlendi. Çalışmada sıçan östrus döngüsü evrelerinde elde edilen ovaryum ve uteruslara ait histokimyasal ve sayısal veriler geçmiş literatür ile uyumlu bulundu. Buradaki değerlendirmelerin bundan sonraki çalışmalar için kaynak niteliği taşıyacağı düşünülmektedir.

İnsanlarda embriyo implantasyon süreci karmaşık fizyolojik mekanizmalar içermekte olup, sağlıklı gebeliğin elde edilmesi için fertilizasyonun ardından gerçekleşen en önemli aşamadır. İnsanlarda fertilizasyonun ardından 6-10. günler, insanlara benzer döngüleri nedeni ile model organizma olarak kullanılan sıçanlarda ise 4.5-6.5. günler "implantasyon penceresi" adı verilen süreci kapsamaktadır. İnfertiliteye neden olan mekanizmaların araştırıldığı çalışmalarda implantasyon süreci önemli rol oynamaktadır. Bu çalışmada sıçan implantasyon dönemi ile ilgili histolojik değerlendirmeler ve elde edilen son literatür bilgilerinin derlenmesi ile yeni çalışmalar için kaynak oluşturulması amaçlanmıştır. Vaginal yayma ile östrus evresinde belirlenen dişi sıçanlar, fertilizasyonun ardından; embriyonik gelişimin 4.5, 5.5. ve 6.5. günü olmak üzere 3 gruba ayrıldı ve grupları belirlenen dişi sıçanlardan (n:21) uterus örnekleri elde edildi. Dokular %10'luk formalinde tespit edilerek, rutin parafin doku takibi ile parafine gömüldü. Beş µm.'lik parafin kesitler alınarak Hematoksilen-Eozin ile boyandı ve Periyodik asit Shiff reaksiyonu ile değerlendirildi. Boyanmış kesitlerde implantasyon sürecinde uterustaki temel yapılar değerlendirildi. Kesitlerde implantasyon sürecinde görülen temel yapılar olan endometriyum, miyometriyum, perimetriyum, yüzey epiteli, primer ve sekonder desidual alanlar, GMB hücreleri, trofoblast ve embriyoblast hücreleri gösterilmiştir. Sonuçlar implantasyon dönemi evreleri boyunca karşılaştırılmıştır. Sağlıklı gebeliğin elde edilmesi için en önemli evrelerden biri olan implantasyon süreci model organizma olarak yaygın olarak kullanılan sıçanlarda evrelere göre değerlendirilmiştir., Embryo implantation process following fertilization contains complex mechanisms as the most important stage for healthy pregnancy in humans. "Implantation window" is defined in humans as the 6-10th days after fertilization, whereas in rats it is defined as the 4.5-6.5th days by considering the similarities with human cycle. Implantation process have an important role in studies investigating the mechanisms that cause infertility. in this study, we aimed to create a new resource for new studies using histological evaluation in regard to the compilation of the recent literature. Female rats (n=21) divided into 3 groups as embryonic days of 4.5th, 5.5th and 6.5th according to the vaginal smear examinations which determined the estrous after fertilization. Uterus samples of defined groups of pregnant female rats were obtained. the samples fixed in 10% formaline solution and prepared according the routine paraffin tissue protocol and embedded in paraffin. Fivemikrometer-thick paraffin-embedded sections were stained with Hematoxylin-Eosin and Periodic acid Schiff. the basic structures were evaluated in the process of implantation in the stained uterus sections. Basic structures in implantation process as endometrium, myometrium, perimetrium, surface epithelium, primary and secondary decidual areas, GMG cells, trophoblast and embryoblast cells that have seen in sections were compatible within the groups. the results were compared between the stages of the implantation process. in this study, as one of the most important stage for healthy pregnancy, the embryo implantation process which contains a comlex mechanism was histologically evaluated in rats that were used as a model organism.

Objective: The aim of the study to show the relation of T cells in placental villous fragments with FOXP3,JAK1 and STAT5 receptors in different conditions such as GDM, PE and IUGR placental tissues. Methods: Specimens of ten(10) diabetic placentas, ten(10) preeclamptic, ten(10) intrauterine growth restricted placentas and ten(10) control placentas were collected by systematic uniform random sampling. Immunohistochemical detections of FOXP3, JAK1 and STAT5 were performed in histological sections for each group’s placental tissue. The H-score value was derived for each specimen by calculating the sum of the percentage of syncytiotrophoblast and syncytial nodes in placenta and intervillus area. They were categorized by intensity of staining, multiplied by its respective score. Results: FOXP3, JAK1 and STAT5 immunoreactivity comparisons are shown in four groups of placentas. FOXP3 immunoreactions significantly increase in GDM group. JAK1 and STAT5 immunoreactions significantly decrease in PE group. STAT5 immunoreactivity was detected crucially increase in GDM group. Discussion: The results showed that in different conditions such as PE,GDM and IUGR, T cells in placental villous fragments have relation with FOXP3,JAK1 and STAT5 receptors and that FOXP3 can inactivate the PE and IUGR in the placental tissue. We have also confirmed as other studies that JAK-STAT pathway plays important role in PE,IUGR and GDM placental tissue.

Mammalian target of rapamycin (mTOR) is a member of the PI3K/Akt/mTOR signaling pathway that participates in cell growth, proliferation, protein synthesis, transcription, angiogenesis, apoptosis and autophagy. We investigated the role of mTOR and other signaling molecules in the rat uterus during implantation. Female pregnant rats were divided into three groups: embryonic days (ED) 4.5, 5.5 and 6.5 according to vaginal smears. Immunohistochemical staining of mTORC1, mTORC2, IGF1, PI3K, pAkt1/2/3, ERK1 and pERK1/2 was performed on formalin fixed, paraffin embedded uterine tissue samples. pAkt1/2/3 and ERK1 also were analyzed using western blotting. We found that PI3K/Akt/mTOR and ERK/pERK were increased during the implantation period. Different amounts of mTORC1, mTORC2, IGF1, PI3K, pAKT1/2/3, ERK1 and pERK1/2 were expressed in luminal epithelium, decidual cells, embryoblast and trophoblast cells during implantation. We suggest that mTOR and associated signaling molecules may participate in implantation. Celal Bayar Üniversitesi Bilimsel Araştırma Proje Komitesi - 2011/038

İnsanlarda embriyo implantasyon süreci karmaşık fizyolojik mekanizmalar içermekte olup, sağlıklı gebeliğin elde edilmesi için fertilizasyonun ardından gerçekleşen en önemli aşamadır. İnsanlarda fertilizasyonun ardından 6-10. günler, insanlara benzer döngüleri nedeni ile model organizma olarak kullanılan sıçanlarda ise 4.5-6.5. günler “implantasyon penceresi” adı verilen süreci kapsamaktadır. İnfertiliteye neden olan mekanizmaların araştırıldığı çalışmalarda implantasyon süreci önemli rol oynamaktadır. Bu çalışmada sıçan implantasyon dönemi ile ilgili histolojik değerlendirmeler ve elde edilen son literatür bilgilerinin derlenmesi ile yeni çalışmalar için kaynak oluşturulması amaçlanmıştır. Vaginal yayma ile östrus evresinde belirlenen dişi sıçanlar, fertilizasyonun ardından; embriyonik gelişimin 4.5, 5.5. ve 6.5. günü olmak üzere 3 gruba ayrıldı ve grupları belirlenen dişi sıçanlardan (n:21) uterus örnekleri elde edildi. Dokular %10’luk formalinde tespit edilerek, rutin parafin doku takibi ile parafine gömüldü. Beş µm.’lik parafin kesitler alınarak Hematoksilen-Eozin ile boyandı ve Periyodik asit Shiff reaksiyonu ile değerlendirildi. Boyanmış kesitlerde implantasyon sürecinde uterustaki temel yapılar değerlendirildi. Kesitlerde implantasyon sürecinde görülen temel yapılar olan endometriyum, miyometriyum, perimetriyum, yüzey epiteli, primer ve sekonder desidual alanlar, GMB hücreleri, trofoblast ve embriyoblast hücreleri gösterilmiştir. Sonuçlar implantasyon dönemi evreleri boyunca karşılaştırılmıştır. Sağlıklı gebeliğin elde edilmesi için en önemli evrelerden biri olan implantasyon süreci model organizma olarak yaygın olarak kullanılan sıçanlarda evrelere göre değerlendirilmiştir. Embryo implantation process following fertilization contains complex mechanisms as the most important stage for healthy pregnancy in humans. “Implantation window” is defined in humans as the 6-10th days after fertilization, whereas in rats it is defined as the 4.5-6.5th days by considering the similarities with human cycle. Implantation process have an important role in studies investigating the mechanisms that cause infertility. In this study, we aimed to create a new resource for new studies using histological evaluation in regard to the compilation of the recent literature. Female rats (n=21) divided into 3 groups as embryonic days of 4.5th, 5.5th and 6.5th according to the vaginal smear examinations which determined the estrous after fertilization. Uterus samples of defined groups of pregnant female rats were obtained. The samples fixed in 10% formaline solution and prepared according the routine paraffin tissue protocol and embedded in paraffin. Fivemikrometer-thick paraffin-embedded sections were stained with Hematoxylin-Eosin and Periodic acid Schiff. The basic structures were evaluated in the process of implantation in the stained uterus sections. Basic structures in implantation process as endometrium, myometrium, perimetrium, surface epithelium, primary and secondary decidual areas, GMG cells, trophoblast and embryoblast cells that have seen in sections were compatible within the groups. The results were compared between the stages of the implantation process. In this study, as one of the most important stage for healthy pregnancy, the embryo implantation process which contains a comlex mechanism was histologically evaluated in rats that were used as a model organism.

II. Sağlık Bilimleri Enstitüleri Lisansüstü Öğrenci Kongresi ve Kök Hücre Sempozyumu’nda (Kuşadası 2014) sözlü bildiri olarak sunulmuştur. İnsanlarda 28 günde izlenen menstrüel döngünün, sıçanlarda 4-5 günde gerçekleşmesinden dolayı, kadın üreme sisteminin incelendiği çalışmalarda model organizma olarak kullanılan sıçanlar ile yapılan birçok çalışma kısa sürede tamamlanabilmektedir. Bu da sıçan modelinin bir avantajı olarak görülmektedir. Bu çalışmada sıçan östrus döngüsü ile ilgili sitolojik ve histolojik değerlendirmeler ve elde edilen son literatür bilgilerinin derlenmesi ile yeni çalışmalar için kaynak oluşturulması amaçlanmıştır. Vaginal yayma ile dişi sıçanlar proöstrus, östrus, metöstrus, diöstrus dönemlerinde olmak üzere 4 gruba ayrıldı ve grupları belirlenen dişi sıçanlardan (n=28) ovaryum ve uterus örnekleri elde edildi. Dokular formalinde tespit edilerek, rutin parafin doku takibi ile parafine gömüldü. Parafine gömülmüş dokulardan 5 µm.’lik kesitler alınarak Hematoksilen-Eozin (H-E) ve Periyodik Asit Shiff (PAS) ile boyandı. Boyanmış kesitlerde ovaryum ve uterustaki temel yapılar değerlendirildi ve istatistiksel olarak karşılaştırıldı. Kesitlerde görülen temel yapıların sayıları gruplar ile uyumlu olarak bulunmuş olup, proöstrus ve östrus gruplarında artmış primer ve sekonder folliküller izlenirken, metöstrus grubunda korpus luteum yapılarının istatistiksel anlamlı olarak arttığı gözlendi. Çalışmada sıçan östrus döngüsü evrelerinde elde edilen ovaryum ve uteruslara ait histokimyasal ve sayısal veriler geçmiş literatür ile uyumlu bulundu. Buradaki değerlendirmelerin bundan sonraki çalışmalar için kaynak niteliği taşıyacağı düşünülmektedi. Studies examining the female reproductive system in the rat model can be completed in a short time due to the 4-5-day-long estrous cycle, which is an advantage when compared to 28 days of menstrual cycle in humans. The present study aimed to create new insights for cytological and histological studies evaluating the rat estrous cycle with the compilation of the recent literature. Female rats were divided into 4 groups according to the vaginal smear examinations, as proestrous, estrous, metestrous and diestrous groups and ovaries as well as uterus samples were obtained. The samples were fixed in 10% formaline solution and prepared according the routine paraffin tissue processing protocol and embedded in paraffin. Five-micrometer-thick paraffin-embedded sections were stained with H-E and PAS. By microscopical analyzing the stained sections, primary structures in the ovary and uterus were assessed and the results were statistically compared between groups. Numbers of primary structures observed in the sections were compatible with the respective groups. While increased numbers of primary and secondary follicles in the groups of proestrous and estrous were detected, in metestrous group increased number of corpus luteum was obtained. The data obtained from different stages of rat estrous cycle were in agreement with the reports in the literature. It is suggested that the results of this study can be used as a source to plan advanced histological studies.