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To analyze antibiotic resistance and genetic profile of conjunctival bacteria flora before and after cataract surgery with the focus on coagulase-negative staphylococci (CNS) during cataract surgery and discuss the implications of this colonization as a potential risk of acquiring endophthalmitis.After approval of the institutional review board and informed consent from patients had been obtained, conjunctival swabs for culture from 59 patients undergoing cataract surgery were taken of the fellow eye at baseline (C0) and from the eye to be operated before (T0) and after (T1) irrigation with povine-iodine 5%, and at the end of surgery (T2). Genes responsible for virulence (mecA, ica and atlE) and antibiotic profile were determined; strain clonality of persistent colonizing Staphylococcus epidermidis strains was established by the Multi-locus sequence typing (MLST).The frequency of CNS was significantly reduced in T1 (13.6%) from 81.4% in T0 and 86.4% in C0. The frequency of mecA, ica and atlE genes was 34.4%, 37.5% and 61.4%, respectively; and methicillin phenotypic resistance was 35.4%. S. epidermidis was the most frequent species isolated in every time point. MLST revealed in 7 patients 100% coincidence of the seven alleles of the S. epidermidis isolated previous to povine-iodine 5% disinfection and at the end of the surgery. CNS isolates from T1 or T2 corresponded to the same species, antibiotic and virulence profile as those isolates from C0 or T0.Povidone-iodine 5% prophylaxis before surgery significantly reduced conjunctival contamination; in those that persisted, the source of contamination was mostly the patient's microbiota confirmed by the MLST system.

Purpose: To investigate the association between S. epidermidis virulence and severity of endophthalmitis in an animal model. Methodology: New Zealand albino rabbits were inoculated with 100 colony forming units (CFU) of S. epidermidis strains with different antibiotic-resistance and biofilm-producing profiles (virulent [Group 1] and no-virulent [Group 2] group). The virulent group comprised seven rabbits in total. Four rabbits were inoculated with a multi antibiotic resistant and mec A, ica and atlE genes carriers S. epidermidis isolated from the conjunctiva of patients undergoing cataract surgery, and three rabbits with S. epidermidis ATCC 35984 (biofilm-forming and antibiotic multi-resistance strain). In the non-virulent group (n = 8), five rabbits were inoculated with a strain sensitive to all tested antibiotics and non-carrier of the mec A, ica and atlE genes isolated from a patient, and three with S. epidermidis ATCC 29122 strain (none biofilm producer). Clinical and ultrasound examinations were performed in all animals every three hours until a sign of endophthalmitis was evident. The clinical course was evaluated every 24 hours thereafter. Fifteen days post inoculation the eyes were enucleated for histologic evaluations.Results: Rabbits inoculated with the less virulent strains showed less severe inflammation and damage to intraocular structures compared to those inoculated with more virulent strains by both clinical and ultrasound evaluation. However histopathologic results showed similar degree of inflammation 15 days after inoculation. Conclusions: S. epidermidis was able to induce endophthalmitis in all animals regardless of their virulence profile. While less virulent strains caused less severe inflammation and assessed clinically and by ultrasound examination, long-term effects in histopathologic evaluations were comparable with the more virulent strain.

RESUMEN Candida albicans es la levadura más aislada de la cavidad oral de personas con VIH. Sin embargo, el uso de antifúngicos ha incrementado el aislamiento de especies no C. albicans resistentes o con sensibilidad reducida. El objetivo del estudio fue determinar las especies de Candida y la sensibilidad a los antifúngicos de aislamientos de la cavidad bucal de pacientes con VIH, que acudieron al Instituto de Medicina Tropical entre julio a diciembre de 2019. Las levaduras se sembraron en Agar Cromogénico Candida (CONDA®, España) para la identificación presuntiva. Las colonias verdes se identificaron por PCR dúplex y las de coloración distinta o PCR negativa mediante el sistema comercial VITEK®2. La susceptibilidad antifúngica de C. albicans se determinó por VITEK®2, y las no albicans por el método de difusión de discos. De 278 levaduras, C. albicans se aisló en 70,9 %, seguido de C. tropicalis (8,3 %) y C. krusei (5 %). C. albicans presentó 93 % de sensibilidad y 2 % de sensibilidad dosis dependiente al fluconazol; 87 % sensibles y 3 % con sensibilidad intermedia frente a voriconazol; 97, 98 y 100 % sensibilidad a flucitosina, anfotericina B y equinocandinas, respectivamente. C. parapsilosis y C. tropicalis no registraron resistencias a fluconazol y voriconazol. Todos los aislamientos de C. glabrata fueron sensibles dosis dependientes a fluconazol y todos los aislamientos de C. krusei resultaron sensibles a voriconazol. La portación oral de Candida spp. resistentes a azoles podría llevar a fracasos terapéuticos en pacientes con VIH que desarrollen candidiasis orofaríngea. ABSTRACT Candida albicans is the most isolated yeast from the oral cavity of people with HIV. However, the use of antifungals has increased the isolation of non-C. albicans resistant species or those with reduced sensitivity. The objective of the study was to determine the Candida species and the sensitivity to antifungals of isolates from the oral cavity of patients with HIV who attended the Institute of Tropical Medicine between July and December 2019. The yeasts were plated in Candida Chromogenic Agar (CONDA®, Spain) for presumptive identification. Green colonies were identified by duplex PCR and those with different staining or negative PCR using the commercial VITEK®2 system. The antifungal susceptibility of C. albicans was determined by VITEK®2, and non albicans by the disk diffusion method. Of 278 yeasts, C. albicans was isolated in 70.9 %, followed by C. tropicalis (8.3 %) and C. krusei (5 %). C. albicans presented 93 % sensitivity and 2 % dose-dependent sensitivity to fluconazole; 87 % sensitive and 3 % intermediate sensitivity to voriconazole; 97, 98, and 100 % sensitive to flucytosine, amphotericin B, and echinocandins, respectively. C. parapsilosis and C. tropicalis did not register resistance to fluconazole and voriconazole. All C. glabrata isolates were dose-dependently sensitive to fluconazole and all C. krusei isolates were sensitive to voriconazole. The oral carriage of Candida spp. resistant to azoles may lead to therapeutic failures in HIV patients who develop oropharyngeal candidiasis.

La queratitis amebiana que con frecuencia se presenta en usuarios de lentes de contacto cursa con mucho dolor y comprometen la visión. La sintomatología es inespecífica y el diagnóstico se apoya en estudios laboratoriales basados en métodos de cultivo ymoleculares para identificación específica de Acanthamoeba. Se presentan tres casos de queratitis amebiana en usuarios de lentes de contacto, dos mujeres y un varón con cuadros que varían de lesiones leves a neoplasia, todos usuarios de lentes de contacto y con antecedentes de exposición al agua ya sea en la ducha o por almacenamiento de lentes de contacto con agua de canilla. La lesión se caracteriza por presentar infiltrados multifocales, epiteliopatía, pseudodendritas centrales y peurineritis redial. Los métodos microbiológicos detectaron al parásito en cultivo en una muestra, mientras que el método molecular fue positivo en dos casos. El tratamiento se basó en isetionato de propamidina (Brolene), polihexametilbiguanida 0,02% y clorhexidina 0,02%, inhibidores de la síntesis de ADN y la formación de la pared celular. La evolución de los cuadros fue de total recuperación en dos casos, mientras que en el tercer caso la queratitis fue una infección agregada de una neoplasia que precisó de métodos quirúrgicospara tratamiento. Las queratitis amebianas pueden simular cuadros infecciosos de carácter viral herpético o micótico, y por su baja frecuencia y difícil confirmación por falta de métodos laboratoriales apropiados, no se considera a la Acanthamoeba como agente etiológico, y en consecuencia hay retraso en el diagnóstico ytratamiento.

La endoftalmitis infecciosa es una condicion intraocular grave, aunque poco frecuente, que puede llevar a la perdida de la vision. El diagnostico etiologico precoz y el tratamiento adecuado llevan a una mejor evolucion. Las tecnicas microbiologicas convencionales tienen baja sensibilidad en el diagnostico de la endoftalmitis infecciosa, en cambio la reaccion en cadena de la polimerasa (PCR) es un metodo de mayor sensibilidad que esta siendo utilizado ampliamente. El objetivo fue determinar por cultivo y PCR la etiologia de la endoftalmitis infecciosa en pacientes que consultaron en centros oftalmologicos de Paraguay. Se estudiaron muestras de humor vitreo obtenidas por puncion de 51 pacientes con endoftalmitis. La muestra se dividio en dos alicuotas; una para el estudio microbiologico convencional y la otra para la PCR anidada. Esta ultima utiliza un par de cebadores basado en secuencias conservadas del gen 16S ribosomal y cebadores especificos para bacterias gram positivas. Se estandarizo la PCR logrando una sensibilidad de deteccion de 3.10 -5 ng/µl para S. aureus , 2,5.10 -3 ng/µl para S. pneumoniae y 6.10 -7 ng/µl para E. coli . De las 51 muestras, 12 (23,5%) fueron positivas por metodos microbiologicos convencionales y 26 (51,0%) por la PCR anidada. Por cultivo se identificaron predominantemente bacterias grampositivas 8/11 (73%) y un aislado de hongo filamentoso. La PCR anidada presento muy buena sensibilidad y de gran utilidad en la identificacion del origen bacteriano de la endoftalmitis, mejorando la sensibilidad del cultivo en 27,5%. La discriminacion bacteriana en grampositivos y gramnegativos por la PCR se correlaciono con el cultivo en el 100% de los casos.

Las ulceras corneales de origen infeccioso son una emergencia oftalmologica que amenaza la vision y la integridad estructural del ojo, causando ceguera en 1,5 a 2 millones de casos al ano por lo que requiere tratamiento inmediato. El objetivo fue determinar el patron epidemiologico, factores de riesgo y efectividad del tratamiento en pacientes con ulcera corneal en la Fundacion Vision en el periodo 2015-2017. Estudio de cohorte prospectivo donde se evaluo 53 pacientes con ulcera corneal de causa infecciosa que consultaron en la Fundacion Vision en el periodo 2015-2017, y tuvieron un seguimiento minimo de 4 meses. Se encontro un predominio del sexo masculino (69,8%), edad 45–65 anos (49,1%), casados (54,7%), de condicion socioeconomica baja (56,6%), agricultores (26,4%), con antecedente de traumatismo corneal (69,8%) o uso de lentes de contacto (17%). El agente etiologico fue bacteriano en el 49,1% y micotico en el 37,7%; para los de origen bacteriano el tratamiento mas empleado fueron colirios fortificados de Cefazolina + Gentamicina y Natamicina/Fluconazol en caso de ser micotico. La evolucion fue favorable en 90,9% y 80,0% de los bacterianos y micoticos, respectivamente. Los grupos de riesgo detectados fueron pacientes varones, agricultores, de condicion socioeconomica baja, con antecedente de traumatismo corneal o uso de lentes de contacto. La efectividad del tratamiento utilizado fue mayor al 80%, siendo en su mayoria patogenos bacterianos.

We present a clinical case of keratitis caused by M. abscessus in a 76-year-old female patient, resident in the city of Asunción, without trauma or previous ocular surgery and with a history of herpetic keratouveitis. Because it is a keratitis caused by a rare etiological agent and because of the importance of a correct and timely diagnosis for the establishment of appropriate treatment, the present case is reported, the first of Mycobacteria keratitis in Paraguay.